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1、细细菌药菌药物的敏感物的敏感试验方法及进展试验方法及进展郑州大学一附院徐 岷 概念：概念：细菌对抗菌药物的敏感试验细菌对抗菌药物的敏感试验（简称药敏试验）是测定某一菌株对（简称药敏试验）是测定某一菌株对某种抗菌药物是敏感还是耐药的一种某种抗菌药物是敏感还是耐药的一种体外监测试体外监测试验。验。而细菌对抗菌药物的敏感试验，就是对抗菌药物进行实验室监测的主要手段之一。目的：目的：1、为临床上治疗感染病人选择最佳抗菌药物，帮助临床用药，避免由于用药不当，导致耐药菌株产生或造成人体伤害.2、进行流行病学调查，了解致病菌的耐药变迁情况，为医疗行政主管部门的决策提供依据.3、用于某些细菌的鉴别和鉴定4、评
2、价新抗菌药物的抗菌谱及抗菌活性等药效学特性。临床实验室做药敏试验时应注意1，仅仅检测有可能导致感染的细菌2，用一个标准化的检验方法3，报告对生物体和感染部位合适的抗生素4，为保证药敏实验的正常的运行，执行常规质量控制5，及时将重要的检测发现（如多重耐药菌株）与相关部门沟通。什么是CLSI临床和实验室标准化研究所国际的，多学科的，非盈利性标准发展和教育机构为许多实验室操作提供标准和指南药敏试验的CLSI标准全球广泛使用每年更新有临床医师，微生物学专家，药学家和企业通过一致同意的程序来更新标准M02-A10阐述如何进行纸片扩散法药敏试验M07-A8阐述如何进行MIC法药敏试验（参考肉汤稀释法和琼脂
3、稀释法）M100-S19 Tables表格M02，M07 每三年更新M100 每年更新CLSI药敏表格列表用于检测/报告的药敏解释标准（“折点”）质控范围做药敏试验时检测什么菌？使用什么方法？检测哪些抗生素？如何报告结果？常规情况下我们需要检测哪些菌株药敏试验？一个培养中可疑病原菌不会多于2种菌株的药敏谱不可预知.药敏试验时应考虑特殊菌株/感染部位为什么我们不对每一个分离的潜在病原菌做药敏试验?报告单上药敏试验结果表示该细菌是导致病人感染的原因当不需要是报告药敏结果可能导致: -不必要或不适当的治疗 -耐药菌株的选择 -增加病人二重感染的概率 -妨碍进一步查找导致病人疾病的真正原因做药敏试验时
4、检测什么菌？使用什么方法？检测哪些抗生素？如何报告结果？不同的实验室可以参考CLSI纸片扩散法MIC（肉汤稀释或琼脂稀释法）或商业化药敏系统E-test试验 细菌药敏试验自动化自动化的优点节省劳动力快速药敏结果药敏试验的结果解释实验室计算机系统界面软件保持当前的检测/报告规则自动化的缺点实验室花费大药敏试验的灵活性（相对纸片扩散法）耐药性变迁的发现实验室的空间何时使用E-test？使用自动化仪器或CLSI推荐方法均不能生长的菌株菌株/药物的测试不能纸片扩散法进行（葡萄球菌对万古霉素）如果需要测试MIC和/或较宽的药物浓度范围苛氧菌，如肺炎链球菌，厌氧菌等为什么分子试验方法在检测细菌对抗生素耐药
5、上没有的倒很好发展？有很多基因介导抗生素耐药目前还难以确定一个耐药基因的检出是否与药物的体外或体内耐药相关做药敏试验时检测什么菌？使用什么方法？检测哪些抗生素？如何报告结果？M100表1提示选择测试/报告药物确定一种药物的结果可否用于预测另一种药物确认报告“危险”药物报告中增加“注释”“有选择性的报告”意味着什么？先报告窄抗菌谱，最低毒性，最小花费（一线）药物报告其他药物，如果一线耐药来自特定身体部位对药物耐受或不敏感的病人67976918多种微生物感染多个部位感染CLSI的“警告”注解某些药物/菌株组合在体外显示有活性（测试“敏感”）但是临床无效不要将其报告为“敏感”CLSI中的“Rx”注解
6、建议将CLSI的注解（或CLSI注释的修改）加到报告中，增加临床医生的理解如：在抗感染治疗中利福平不应该单独使用什么是MIC？最小抑菌浓度 -在一定实验环境下，以ug/ml为单位报告的能抑制病原菌生长的最低抗菌药物浓度总结（1）CLSI为许多实验室程序，包括药敏试验，提供标准和指南CLSIM100药敏表格每年更新对一份标本常规不对两种以上病原菌进行药敏试验对不可能引起感染的病原菌不做药敏试验总结（2）对于纸片扩散法药敏试验，在抑菌圈的菌落提示为污染或抗药物亚群；不应该忽视在所有肉汤MIC试验接种后，要做纯度检测，以证实抗生素药敏试验的结果不是有污染菌所致。总结（3）自动化药敏系统和药敏快速报告
7、相比手工药敏系统有更大优势纸片扩散法试验不适用于某些抗菌药物/菌株的组合；需要进行MIC测试抗菌药物的选择性报告可以帮助临床选择窄谱抗菌药物用一种药物的结果推测另一种药物的结果是“错误”的，除非在CLSI表格中有“或”连接总结（4）一些“药物/菌株”的联合对病人是无效的，即使体外实验是敏感一些抗菌药物对治疗特定部位感染是无效的一些抗菌药物只能用于测试尿路感染非“敏感”的结果在报告前需确证药敏试验质量控制的职责培养基/试剂的正确保存实验室人员的胜任药敏试验按照标准方法操作 测试药敏“质控菌株”应该多长时间做一次常规药敏质控每日或.在检测病人菌株的日子每周（2030天的合格日质控后）如何确证周质控在实验室是否接受进行20-30日的每日质控转入周质控假如不多于. -20次日质控中有1次或-30次日质控中有3次总之.当用新批号的材料时进行质量控制（培养基，药敏纸片如新人员操作试验时进行质量控制
