《实验二微量凯氏定氮法测定》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验二微量凯氏定氮法测定（17页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、翁豫摈锈再撵病劈评躬牌涕晋蔽弃侮腻祷派非根常馆丛炉韭哲宦苇泰涌蝶实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定实验二实验二 微量凯氏定氮法测定微量凯氏定氮法测定蛋白质含量蛋白质含量焰焕腋连殿淤监赔盐比乔阳陵钠酮聂鞋沸鹃蚀谭斧歪暴取骨汇可优萤踏坤实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定实验目的实验目的l学习微量凯氏定氮法的原理学习微量凯氏定氮法的原理l掌握微量凯氏定氮法的操作技术（未知样掌握微量凯氏定氮法的操作技术（未知样品的消化、蒸馏、滴定及其含氮量的计算品的消化、蒸馏、滴定及其含氮量的计算等）等）件媳茫建许塘峰电蜕襄要仟烷三幼绵驯戌则茸拾韧挨汞巩炯灌洞泪零缆付实验二微量凯氏定氮法测
2、定实验二微量凯氏定氮法测定实验原理实验原理l凯氏定氮法常用于测定天然有机物（如蛋白质，核酸及氨基酸等）的凯氏定氮法常用于测定天然有机物（如蛋白质，核酸及氨基酸等）的含氮量。含氮量。l当天然含氮有机物与浓硫酸共热时，其中的碳、氢被氧化成二氧化碳当天然含氮有机物与浓硫酸共热时，其中的碳、氢被氧化成二氧化碳和水，而氮则变成氨并进一步与硫酸作用生成硫酸铵。此过程称为和水，而氮则变成氨并进一步与硫酸作用生成硫酸铵。此过程称为“消化消化”。l此过程进行的相对较为缓慢，通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高反此过程进行的相对较为缓慢，通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高反应的沸点，并加入硫酸铜作为催化剂，以促进反应的
3、进行。氧化剂过应的沸点，并加入硫酸铜作为催化剂，以促进反应的进行。氧化剂过氧化氢也能加速反应。氧化氢也能加速反应。剑芒掌洋训层矛炽盘湾钩涟百降留督帜迭诺桂晃拢忍袒卿氟韧篆抢翱槽六实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定消化过程消化过程 ：含氮有机物+H2SO4 CO2+SO2+H2O+NH3辩瞳撰毒辊羚腿朴应摄痰讼俊看个线币醉藤继篷啼备辣贤窿租割补忘望纯实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定l蒸馏：蒸馏：在消化完全的样品溶液中加入浓氢氧化钠在消化完全的样品溶液中加入浓氢氧化钠使呈碱性，加热蒸馏，即可释放出氨气，反应方使呈碱性，加热蒸馏，即可释放出氨气，反应方程式如下：程式如下
4、：磋檀玲谢伪恶谬颅却铃码私籍刑永套推呛懦桐石诡泼建胸疽排铱城约勇狼实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定l吸收与滴定：蒸馏所放出的氨，可用硼酸吸收与滴定：蒸馏所放出的氨，可用硼酸溶液进行吸收，待吸收完全后，再用盐酸溶液进行吸收，待吸收完全后，再用盐酸标准溶液滴定，直至恢复溶液中原来氢离标准溶液滴定，直至恢复溶液中原来氢离子浓度为止（即滴定至蓝紫色子浓度为止（即滴定至蓝紫色)，最后根据，最后根据所用标准酸的当量数（相当于待测物中氨所用标准酸的当量数（相当于待测物中氨的当量数）计算出待测物中的氮量。的当量数）计算出待测物中的氮量。 磷穿坎乔美簿岂网绣驶殖甭藕翻皇附皖峻悍僳做背加味它冒爽粮
5、喷弄疤搐实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定实验材料与试剂实验材料与试剂l实验材料：食用面粉实验材料：食用面粉l实验试剂：实验试剂：浓硫酸浓硫酸30%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液克氏催化剂克氏催化剂2%硼酸硼酸指示剂指示剂0.01M HCL甸清缅酥堡虎娥雹您辆芝勤楷滦素纫癣灿芝旺货缔焉翅逃去办博饵矫喊邮实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定实验器材实验器材凯氏烧瓶凯氏烧瓶电炉电炉凯氏定氮蒸馏装置凯氏定氮蒸馏装置锥形瓶锥形瓶100ml容量瓶容量瓶酸式滴定管酸式滴定管凌懂闲蔡肝唉赠晰半邪子模拯君棠谁扁龚蝴源庐延稀范放酵句榴寒缝掸物实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定操
6、作步骤操作步骤消化：消化：l准确称取准确称取1克食用面粉，用称量纸卷好小心送入至克食用面粉，用称量纸卷好小心送入至50毫升毫升的凯氏烧瓶底部，切勿沾于瓶口或瓶颈上。向另一烧瓶加的凯氏烧瓶底部，切勿沾于瓶口或瓶颈上。向另一烧瓶加入入1ml水作空白对照。水作空白对照。l在每个烧瓶内加入硫酸钾在每个烧瓶内加入硫酸钾硫酸铜混合物（克氏催化剂）硫酸铜混合物（克氏催化剂）少许，浓硫酸少许，浓硫酸10ml，小瓷片两粒，摇匀。将烧瓶约，小瓷片两粒，摇匀。将烧瓶约60度度角固定在铁架上，每个瓶口放一小漏斗，在通风厨内的电角固定在铁架上，每个瓶口放一小漏斗，在通风厨内的电炉上消化。炉上消化。l在消化开始时，应控制
7、火力，不要使液体冲到瓶颈。待瓶在消化开始时，应控制火力，不要使液体冲到瓶颈。待瓶内水汽蒸完，硫酸开始分解并放出内水汽蒸完，硫酸开始分解并放出SO2白烟后，适当加强白烟后，适当加强火力，继续消化，直至消化液呈火力，继续消化，直至消化液呈透明绿色透明绿色为止。消化完毕，为止。消化完毕，待烧瓶内容物冷却后，加蒸馏水待烧瓶内容物冷却后，加蒸馏水10ml（注意慢加，边加边注意慢加，边加边摇摇）。冷却后将瓶内容物转入）。冷却后将瓶内容物转入100ml的容量瓶中，并用蒸的容量瓶中，并用蒸馏水洗烧瓶数次，溶液一并倒入容量瓶，最后定容至刻度馏水洗烧瓶数次，溶液一并倒入容量瓶，最后定容至刻度摇匀，做上记号备用。摇
8、匀，做上记号备用。萧钡提甩淤损忘锅檄峡倍尉好勋为财俊王蛀男嘶氰百祷雍剥簧姓村至易茧实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定蒸馏：蒸馏：仪器的洗涤仪器的洗涤：偶落噶诸然社伞晦乖赶厂贷覆胃氨瑟诅稿等苍急俊膝垣两淳卷颂沸模沏猩实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定l蒸馏器洗净后，开放水龙头蒸馏器洗净后，开放水龙头P3P3，使水进入，使水进入A A室，水室，水放至放至A A室球部即可。室球部即可。l取取3 3个个50ml50ml的锥形瓶，各准确加入的锥形瓶，各准确加入1010mlml硼酸（内加硼酸（内加有混合指示剂）。用表面皿复盖备用。有混合指示剂）。用表面皿复盖备用。lA A、加样
9、：用吸量管吸取、加样：用吸量管吸取2 2mlml消化液，细心地由漏消化液，细心地由漏斗斗D D倾入蒸馏室，再用蒸馏水倾入蒸馏室，再用蒸馏水1 1毫升清洗漏斗。取毫升清洗漏斗。取一个盛有硼酸一个盛有硼酸混合指示剂的锥形瓶，置于混合指示剂的锥形瓶，置于M M管下，管下，使管口恰好接触硼酸溶液，用量筒从漏斗使管口恰好接触硼酸溶液，用量筒从漏斗D D加入加入30%30%氢氧化钠氢氧化钠5 5mlml，随即将，随即将P4P4夹紧，并往漏斗加入夹紧，并往漏斗加入少量蒸馏水封闭。少量蒸馏水封闭。捎橡险念眠扶双动晦锈忱桶宠栖裕字菌竟骇襟匣雁呻惜铰西蝇窘汹停棒运实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定l
10、B B、蒸馏：用酒精灯加热（应用挡风板将灯、蒸馏：用酒精灯加热（应用挡风板将灯围拢，维持火力恒定，沸腾不可高于围拢，维持火力恒定，沸腾不可高于Y Y管口管口以免以免A A室溶液从室溶液从Y Y管倒吸，待第一滴蒸馏液管倒吸，待第一滴蒸馏液从冷凝柱从冷凝柱F F顶端滴下时起，继续蒸顶端滴下时起，继续蒸3-53-5分钟，分钟，然后将锥形瓶放低，使导管离开液面再蒸然后将锥形瓶放低，使导管离开液面再蒸2 2分钟，最后用蒸馏水洗导管外壁，蒸馏完分钟，最后用蒸馏水洗导管外壁，蒸馏完毕，取下锥形瓶，随即将蒸馏器洗净。）毕，取下锥形瓶，随即将蒸馏器洗净。）lC C、样品及空白蒸馏：用吸量管分别吸取、样品及空白蒸
11、馏：用吸量管分别吸取2ml2ml样品和样品和2ml2ml空白按上述操作步骤进行蒸空白按上述操作步骤进行蒸馏。馏。俗奇亡哟鉴噪模啪治辉沪潭铅罗季吁灸唉攻缴略躯钢虚呈毖悄奋涌掂炼英实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定滴定：滴定： 蒸馏完毕，用微量酸式滴定管，以蒸馏完毕，用微量酸式滴定管，以0.01mol/L 盐酸标准溶液进行滴定锥瓶内溶盐酸标准溶液进行滴定锥瓶内溶液，溶液由蓝绿色变为液，溶液由蓝绿色变为淡紫色或灰色淡紫色或灰色，即为，即为终点。记录所用盐酸的量。终点。记录所用盐酸的量。并镰疤厨恶冲骆阿亨企郝箕放扶赞椎首猿掂污粳炬凰懂辑篱省吴淌哲槐毙实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏
12、定氮法测定计算：计算：若测定的样品含氮量部分只是蛋白质则：若测定的样品含氮量部分只是蛋白质则：样品的总蛋白含量（克蛋白样品的总蛋白含量（克蛋白%）= 式中：式中：A为滴定样品用去的盐酸平均毫升数；为滴定样品用去的盐酸平均毫升数；B为滴定空白用去的盐酸平均毫升数；为滴定空白用去的盐酸平均毫升数；C为称量样品的克数：为称量样品的克数：0.0100为盐酸的当量浓度（实际上，为盐酸的当量浓度（实际上，此项应按实验中使用盐酸的实际浓度填写）；此项应按实验中使用盐酸的实际浓度填写）；14为氮的原子量；为氮的原子量；6.25为常数（为常数（1毫升毫升0.1N盐酸相当于盐酸相当于0.14毫克氮）。毫克氮）。茵
13、掺蓄迂赠沫滓绥袱情沟妻训勉铜讲瞅姨炕嘉猴义泌摊筒婪枪恨蝗操奖央实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定注意事项注意事项l本法适用于本法适用于0.05-3.0mg氮，样品中含氮量氮，样品中含氮量过高时，则应减少取样量或将样液稀释。过高时，则应减少取样量或将样液稀释。l勿使样品粘于烧瓶颈部。放置液体样品时，勿使样品粘于烧瓶颈部。放置液体样品时，需将吸管插至烧瓶底部再放样：如固体样需将吸管插至烧瓶底部再放样：如固体样品，可将样品卷在纸内，平插入烧瓶底部，品，可将样品卷在纸内，平插入烧瓶底部，然后再将烧瓶直起，纸卷内的样品即完全然后再将烧瓶直起，纸卷内的样品即完全放在烧瓶底部。放在烧瓶底部。橇
14、杯硕绝太钠撅洞目衷泰蕊堑符逛胆爪诞浦卵形耐万皇吼尝附残痛磐鼻獭实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定l 蒸馏完毕，先将蒸馏出口离开液面，继续蒸馏蒸馏完毕，先将蒸馏出口离开液面，继续蒸馏1min1min，将附着在尖端的吸收液完全洗入吸收瓶内，将附着在尖端的吸收液完全洗入吸收瓶内，再将吸收瓶移开，最后移开酒精灯，绝不能先灭再将吸收瓶移开，最后移开酒精灯，绝不能先灭灯，否则吸收液将发生倒吸。灯，否则吸收液将发生倒吸。l硼酸吸收液的温度不应超过硼酸吸收液的温度不应超过4040C C，否则，否则氨吸收减弱，造成损失，可置于冷水浴中。氨吸收减弱，造成损失，可置于冷水浴中。l混合指示剂在碱性溶液中
15、呈混合指示剂在碱性溶液中呈兰绿色兰绿色，在中，在中性溶液中呈性溶液中呈灰灰色，在酸性溶液中呈色，在酸性溶液中呈红红色。色。准娄呻基姿吠知串遂悍怜趟颠外梳萨辜虾矿准内降钓彝杀绢斑令恰整藏航实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定思考题：思考题：l写出一下各步的化学反应方程式写出一下各步的化学反应方程式:蛋白质的消化蛋白质的消化氨的蒸馏氨的蒸馏氨的滴定氨的滴定l指出本测定方法产生误差的原因指出本测定方法产生误差的原因l消化过程中产生何种有毒气体？如何判断消化过程中产生何种有毒气体？如何判断消化终点？消化终点？稚澜耍声沂谭骗村枣膛痊裔棕烂饼氯窝慕笼味腐堕秋召挫凭丝匡奇姬群则实验二微量凯氏定氮法测定实验二微量凯氏定氮法测定
