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1、浅谈肿瘤标志物浅谈肿瘤标志物黄慧瑾2016年5月19日肿瘤标志物（肿瘤标志物（tumor markers，TM) 肿瘤标志物是指在肿瘤发生和增殖的过程中，由肿瘤细胞合成、释放或者是机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质，这些物质在血液、体液及组织中可检测到，达到一定的水平时能提示某些肿瘤的存在。 肿瘤标志物高与查到癌细胞是两回事，也不一定肿瘤标志物高与查到癌细胞是两回事，也不一定是代表患有肿瘤！是代表患有肿瘤！血清肿瘤标志物分类血清肿瘤标志物分类 一、为什么要查肿瘤标记物？一、为什么要查肿瘤标记物？我们知道，早期诊断是治愈肿瘤的关键；而有些肿瘤标记物的升高往往早于临床症状的出现，因此肿瘤标记物有助
2、于早期发现肿瘤迹象，早诊断、早治疗，从而提高疗效。比如，我们国家70年代以后在上海等地，通过对大量人群的甲胎蛋白普查，曾检出不少肝癌特别是小肝癌患者，使很多病人得到了及时手术切除的机会。二、肿瘤标记物还能用于以下方面二、肿瘤标记物还能用于以下方面出现肿瘤症状或可疑肿物后的鉴别诊断肿瘤生物特点和疾病阶段的判断肿瘤治疗后的疗效观察和判断预后提示肿瘤的复发、转移肿瘤指标升高是不是肯定就有肿瘤了？肿瘤指标升高是不是肯定就有肿瘤了？答案是不一定。肿瘤标志物不仅存在于恶性肿瘤中，也存在于良性肿瘤、胚胎组织、甚至正常组织中；肿瘤的诊断不能单独依靠肿瘤标志物的检查，需要由临床检查、影像检查、内镜检查或手术探查
3、等综合判断，而病理诊断是肿瘤诊断的“金标准”肿瘤标记物筛查结果判读肿瘤标记物筛查结果判读肿瘤标记物检查肿瘤标记物检查阴性阴性：患相关恶性肿瘤的概率相对较低；如有家族史、癌前病变或有症状，仍需定期复查,结合其他检查；肿瘤标记物检查肿瘤标记物检查阳性阳性：检测可能有假阳性或患良性疾病；优先考虑复检,复检仍阳性者进一步检查；指标轻度升高，不要轻下结论，持续观察肿瘤标志物的动态变化，如进行性升高，患恶性肿瘤的概率比较高；中重度升高或多项指标持续升高，提示肿瘤发生的可能性很高，必须尽快做医学影像学和细胞病理学等检查；不同医院检验科仪器、试剂各不相同，参考值不一定一样，因此，不能随意比较不同医院测量值的高
4、低。除了恶性肿瘤，引起肿瘤标记物升除了恶性肿瘤，引起肿瘤标记物升高的其他因素包括：高的其他因素包括：良性疾病良性疾病，如炎症性疾病：肝脏良性疾病时，AFP、CA19-9、CEA会升高；肾功能衰竭时2-微球蛋白及CA15-3、CA19-9、CEA和PSA会升高；风湿病时CA19-9浓度可增高；生理变化生理变化：妊娠时AFP、CA125、HCG会升高；不良习惯不良习惯：吸烟、酗酒；检查引起检查引起：屡次进行直肠指检后，PSA值可升高；服用某些药物服用某些药物；饲养宠物饲养宠物；此外，抽血过程中的污染、抽血引起的红细胞破裂、标本保存不当、试剂差异及检测欠规范等因素也会干扰检查结果。肿瘤标志物升高了，
5、可不可以明确肿瘤标志物升高了，可不可以明确是哪个部位的肿瘤？是哪个部位的肿瘤？有时可以，但多数不能单凭借肿瘤标记物来明确，还需要有时可以，但多数不能单凭借肿瘤标记物来明确，还需要结合其他检查。结合其他检查。一种肿瘤标记物往往与多种恶性肿瘤有关，以下是一些常见的肿瘤标记物及其所提示可能有肿瘤发生的脏器：CA19-9 胰腺、胃肠道和肝胆CA15-3 乳腺、肺、卵巢、肝CA242 结直肠、胰腺、卵巢CA72-4 胃、卵巢、胰腺、乳腺CA125 卵巢、子宫、胰腺、肝、肺CA50 胰腺、乳腺、肺、胃肠道和肝胆常见肿瘤的标志物检测常见肿瘤的标志物检测 ADVIA Centaur XP全自动化学发光分析系统
6、检测原理全自动化学发光分析系统检测原理经典直接化学发光方法经典直接化学发光方法吖啶酯(AE)为放光剂采用微磁颗粒分离两种结合模式：竞争法夹心法免疫测定免疫测定抗体抗原示踪/发光剂：吖啶酯分离方法：微磁颗粒分离检测装置抗原抗体特意专一结合是检测的抗原抗体特意专一结合是检测的基础基础抗原抗原抗体抗体结合位点结合位点发光剂是检测的技术核心发光剂是检测的技术核心AE抗原抗原抗体抗体结合位点结合位点吖啶酯简介吖啶酯简介提升扩散速率最大程度避免结合位点的遮蔽提高分析灵敏度碱性磷酸酶哎啶酯一秒钟高强度的光释放使报告结果更快光释放光释放(RLUs)时间时间 (妙妙)12吖啶酯简介吖啶酯简介哎啶酯直接化学发光法
7、的优点哎啶酯直接化学发光法的优点无需额外的信号放大或底物无需额外的信号放大或底物光的释放快速光的释放快速对温度和对温度和pH值的影响不敏感值的影响不敏感背景干扰最小背景干扰最小微磁颗粒微磁颗粒分离技术分离技术氧化铁颗粒被吸引至磁场区与抗原或抗体发生共价结合微磁颗粒(PMP)抗体用于分离结合与未结合的反应物磁场未结合的AE微磁颗粒分离技术微磁颗粒分离技术检测原理的反应模式检测原理的反应模式夹心法竞争法标记抗原检测方法标记抗原检测方法标记抗原检测方法标记抗原检测方法标记抗体检测方法标记抗体检测方法标记抗体检测方法标记抗体检测方法抗体捕获模式夹心法夹心法 步骤步骤 1AE-标记抗体加入样品中，与样品
8、抗原结合标记抗体加入样品中，与样品抗原结合哎啶酯哎啶酯 (AE)抗体抗体样品中的分析样品中的分析物特异性抗原物特异性抗原其它颗粒其它颗粒PMP-抗体抗体-抗原抗原-抗体抗体AE复合物复合物加入与特异性抗体结合的微磁颗粒PMP，孵育，结合抗原的PMP再与AE-标记抗体结合夹心法夹心法 步骤步骤 2MagnetPMP-抗体抗体-抗原抗原-抗体抗体AE复合物复合物比色杯比色杯将未结合的将未结合的AE分离并去除分离并去除夹心法夹心法 步骤步骤 3样品浓度样品浓度光释放光释放(RLUs)加入酸碱试剂启动化学发光反应计算浓度夹心法夹心法 步骤步骤 4采用标记抗原的竞争法采用标记抗原的竞争法 步骤步骤 1微
9、磁颗粒微磁颗粒(PMP)抗体抗体样品抗原样品抗原AE- 标记抗原标记抗原AE-标记抗原与样品抗原竞争结合与PMP共价结合的有限的抗体结合位点 磁场磁场PMP- 抗体抗体- 抗原抗原复合物复合物PMP- 抗体抗体- 抗原抗原 AE复合物复合物孵育后将反应混合物置于磁场下，分离并除去未结合的AE采用标记抗原的竞争法采用标记抗原的竞争法 步骤步骤 2样品浓度样品浓度光释放光释放(RLUs)加入酸碱启动化学发光反应计算浓度采用标记抗原的竞争法采用标记抗原的竞争法 步骤步骤 3采用标记抗体的竞争法采用标记抗体的竞争法 步骤步骤 1AE-标记抗体标记抗体PMP- 标记抗原标记抗原样品中的分析样品中的分析物特异性抗原物特异性抗原结合抗原的PMP与样品抗原竞争AE-标记抗体上有限的抗原结合位点 磁场磁场PMP-抗原抗原-抗体抗体AE复合物复合物孵育后将反应混合物置于磁场下，分离并除去未结合的AE采用标记抗体的竞争法采用标记抗体的竞争法 步骤步骤 2样品浓度样品浓度光释放光释放(RLUs)加入酸碱试剂启动化学发光反应计算浓度采用标记抗体的竞争法采用标记抗体的竞争法 步骤步骤 3夹心法与竞争法反应原理小结夹心法与竞争法反应原理小结竞争法竞争法夹心法夹心法样品浓度样品浓度样品浓度样品浓度光释放光释放(RLUs)光释放光释放(RLUs)谢谢大家谢谢大家
