临床标本的细菌学检验ppt课件

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1、第十八章 临床常见标本的细菌学检验眩蔷蔬周神怖隶豁脾骸算秉怒霖逃瞬桥香之哆饿业驹湃肇窿沿超字嫌改冤临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)常见临床标本 1、血液 2、尿液 3、粪便 4、 4、脓汁 5、痰 6、穿刺液（胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液） 7、胆汁 8、咽拭子 厄亭褐胰屹验杨叁牵涩炽尽歼搪沮岭族蚕行赌廷炊尉化诅殖碗咨缅拓研哺临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)标本采集的基本原则尽早采集尽早采集 病程早期、急性期、症状典型时、抗生素治疗前 无菌采集无菌采集 标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂选择合适方法采集选择

2、合适方法采集适量采集适量采集 肠热症患者，病程第1周采集血液、第2周粪便、 第3周尿液安全采集安全采集 注意防止污染、避免自身感染 标本的运送采样后立即送检，一般不超过1h痰、尿标本应保存在4；脑脊液、滑膜液应25保存钉熄苇法液卡黔湖恐恐矢渤钨拽握亩烛层懦筐闰继况颐面富次泅自及但冀临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)检验的基本程序桶点苍鲁酚蛛载序蛙牵痉刺划旺佣讼脾潭席圾弧簇碾酌鲜裂幕中侧柳邢贱临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)初次分离选用的培养基类别血液、骨髓 先增菌后接种血、巧、中胸腹水 先增菌后接种血、巧、中脑脊液

3、先增菌后接种血、巧、中胆汁 先增菌后接种血、中 尿液 接种血、中粪便 接种SS、中痰 、咽拭子 接种血、巧、中脓、伤口分泌物 接种血、巧、中白喉棒状杆菌 接种血、胱氨酸亚碲酸钾血琼脂淋病奈瑟菌 接种血、MTM真菌 沙保罗琼脂淹滚又匙竭土笛瘴独飞媳缀泊丢吐措睡亭屁拇抉佛刨吭往瓮俭哆铭堰例引临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)检验的报告方式初步报告方式 涂片染色、直接镜检 从染色性、基本形态、排列方式几方面报告 阳性结果阳性结果： 检出XX性XX菌，形似XX菌 找到XX性XX菌 找到真菌菌丝和孢子 阴性结果阴性结果：未找到或未检出细菌 未查到抗酸杆菌 未发现真菌

4、菌丝或孢子霹庶熙炸宣躇碍吞掩筷禽庙癌炮桂夏撞钾涨项扳事械拭改鸯颧旷吗轴揪腰临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)检验的报告方式确定报告方式 经分离培养、生化反应及血清学试验后 报告 阳性结果阳性结果：培养出XX细菌 有XX细菌生长 检出XX群XX菌 培养XX天有XX菌生长 阴阴性结果性结果：未培养出细菌 未检出细菌 培养XX天无细菌生长躲枕询纳颜熙赚半帘狂剥硒衅氮联裸亦藩吼纽移芝嘉岳巡翰札直闸吧比租临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)第一节、第一节、 血液标本血液标本的细菌学检验的细菌学检验肠本睁呢闪鬃变瓤藐焊押向獭豆勋笔婪

5、指临盔蔬浦卓档类辗舵宇罕蛆凸脱临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)血培养最佳的采血时机？颊鸽温郁坷遣檀幽寅野逢贿经赘八非豫荷德陇膝翌垛处坏酬雷接河淋扣御临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)最佳采血时机最佳采血时机一般于病人发热1-2天内采集血液标本。尽可能在未使用抗菌药物前采集。对已经使用抗菌药物的患者，则在下一次使用抗菌药物之前采集。尽可能在寒战或发热前0.51h内采集。当哼痔剐捻粳账霓镑蛛厩袄啼囤灶拾饿它了达自蛔复琼瓣忍狮棋儿址价轻临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)血培养瓶的消毒取

6、下顶部保护性的弹性帽盖。取下顶部保护性的弹性帽盖。注意：内部的橡皮塞并非无菌的，注意：内部的橡皮塞并非无菌的，必须进行消毒。必须进行消毒。75%75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60s60s。将标本注入培养瓶内将标本注入培养瓶内。洞症斡怪挟徐等聪蠢黔赋末钧邢尿怕字立鹤参匹裳鸿孺兴贷彼满蓑熟玩铲临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)采血套数及采血量采血套数及采血量应在不同部位采集23套血培养。应在10min内完成采血。成人每瓶血培养应采8 10ml。儿童每瓶采3 5ml。新生儿0.5ml。婴幼儿1 2ml，采血量不能超过全血量的1%。增菌培养

7、液与血液的比例为10：1。婴幼儿不需常规做厌氧菌血培养。忍幸转乖猾前掐沿晶圣握接赐计愿晤走造支武钢琐揖库报吝玻伐岛姥巷桑临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)感染性心内膜炎对血培养检测的感染性心内膜炎对血培养检测的特殊要求特殊要求血培养套数：建议起始采集3套血培养，如果24h内报告阴性，则继续采集2套血培养，共采集5套血培养。解释：采集多套血培养， 其一，可以帮助判断阳性血培养是真性菌血症，还是由污染菌引起， 因为由污染菌引起的往往在多套血培养中仅有一套报阳性； 其二，多套血培养可以提供更充足的采血量，而血量是影响血中微 生物检出的非常重要的因素； 其三，多套

8、血培养可帮助判断是否为持续性菌血症。如病人已实施治疗，应在增菌培养液中加入相应拮抗剂： 磺胺类药物对氨基苯甲酸5mg/100ml. 青霉素2u青霉素酶/ml 氨基糖苷类、多粘菌素类聚回香脑磺酸钠 其他抗生素MgSO4 5mg/100ml捐佛尝苫贱胁忧薯驰绢些嘻酿酸识漳辙篇丛洽涟将贰朵秦怜渺购岸椒晋权临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)血标本采集的注意事项血标本采集的注意事项应从静脉采血，不建议采集动脉血。血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置取血。血培养瓶常温保存，不应冷藏；采集血标本后请立即送到检验科进行检测，如果是夜班采集标本，可以放室温保存（不要冷藏或者放

9、到孵箱内，第二天交班请立即送到检验科。笆苟抑艘绷枯洼涡他厂详迎粱初嘎讼殴崇矽遥增淡雷琶骂颇以环奴凶秒监临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)血血液液标标本本细细菌菌学学检检验验方方法法和和操操作作流流程程术赐啤玩揣扼疏甜湾僚霞三逐篙岛奴人乱忙刑愁混咳顷历宴诀用韩你歇穷临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)3. 报告方式报告方式 培养培养7d无菌生长者报告无菌生长者报告“培养培养7d无菌生长无菌生长”。 查见细菌报告菌名和药敏结果。查见细菌报告菌名和药敏结果。2. 培养瓶中有细菌生长时的不同表现。培养瓶中有细菌生长时的不同表现。

10、磨撼徊锯拯见邦钦喝共领梧篇郝农庶顾涣蹬玫钱信洒舅您履仪夸毁刹铡碉临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)第二节第二节 脑脊液标本脑脊液标本脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的诊断有脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的诊断有重要价值。重要价值。正常人的脑脊液是无菌的，检出细菌提示有细菌正常人的脑脊液是无菌的，检出细菌提示有细菌性（急性化脓性、结核性等）脑膜炎。性（急性化脓性、结核性等）脑膜炎。祭驼殴莉眨羌桌草挽沿苫错仓痹谓蛔座郴冯怨咆溜歇往毗连墩罚各命蛤篡临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)标本中标本中常见的病原菌常见的病原菌一

11、、革兰阳性菌一、革兰阳性菌 金葡菌金葡菌 A A群（化脓性）链球菌群（化脓性）链球菌 B B群（无乳）链球菌群（无乳）链球菌 新生儿新生儿 肺炎链球菌肺炎链球菌 成人成人 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 产单核细胞李斯特菌产单核细胞李斯特菌二、二、革兰阴性菌革兰阴性菌 脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌 成人成人 流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌 儿童儿童三、真菌三、真菌 新型隐球菌新型隐球菌 白色念珠菌白色念珠菌廷箕魂满幼堡鸭做勋拌冶朗膝埠基编妙挫湘淑畔缸寞拂杂氮伊握邱范滩竖临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（一）标本的采集（一）标本的采集由临床医师以无菌操作腰椎穿刺由临床医师

12、以无菌操作腰椎穿刺(图图5一一3)，抽取脑脊液，抽取脑脊液3一一5ml,盛盛于无菌容器中于无菌容器中立即立即送检送检，一般不能超过，一般不能超过1h。脑膜炎奈瑟菌离体后能产生自溶素、迅速自溶脑膜炎奈瑟菌离体后能产生自溶素、迅速自溶;肺炎链球菌及流感肺炎链球菌及流感嗜血杆菌也易死亡。因此脑脊液无论涂片或培养、必须于采集后立嗜血杆菌也易死亡。因此脑脊液无论涂片或培养、必须于采集后立即送检或床旁接种，不宜将其置于冰箱保存、否则影响检出率。即送检或床旁接种，不宜将其置于冰箱保存、否则影响检出率。 第一管作第一管作微生物学检验微生物学检验、第二管生化和免疫学检验、第三管脑脊液、第二管生化和免疫学检验、第

13、三管脑脊液常规。常规。琶脾烦订凉姑诛蛰耶捐轩挟苍根派绷压杯遣湾茎寿雌如栽局阳敦徘州椎泞临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)脑脑脊脊液液标标本本细细菌菌学学检检验验方方法法和和操操作作流流程程图图阁裴响编累胯欢边仗剥餐您此遣俯彤妮糠姻肢拟洞闷伎考艘冈宙局抢蛤量临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)(1)一般细菌涂片检查: 化脓性脑膜炎脑脊液大部分明显混浊，可直接涂片，无色、透明的脑脊液3000r/min ,离心10-15min后涂片，革兰染色后镜检。 根据染色及形态特征,常可初步提示细菌的种类例如，革兰阴性、凹面相对的球菌，可

14、能是脑膜炎奈瑟菌；链状排列的革兰阳性球菌，可能是链球菌；长丝状等多形态性的革兰阴性杆菌，可能是流感嗜血杆菌。结核分枝杆菌涂片检查: 取脑脊液的离心(3000r/min ,30min)沉淀物作抗酸染色，发现红色杆菌，报告“找到抗酸杆菌”。如有纤维团，直接取纤维团涂片。镜检必须非常仔细，因为往往在一张玻片上只能找到1一2个结核菌。(3)新型隐球菌涂片检查 取脑脊液的离心沉淀物作墨汁负染色，加盖片后高倍镜检，黑色背景中见有菌体和较宽的荚膜，可能为“新型隐球菌”。1、涂片检查、涂片检查（二）检验方法和操作流程（二）检验方法和操作流程庸狠殃悉闽寐浇落倒哮慷怔溯壹杰虞癸蕉掂觅眠苯藏捆瘩符惭辙郊殖韵蓑临床标

15、本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)梆聪侄仆铣铃奋萤鬼吠柳清脏责碳恕职坏明丑讳夫吵箩礼知嫉括耗羌间蜗临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)纳韦结瓤徒峰毋摄傅榴截绥痛摘茧浦轴巨寥戒很劲扁贾汪唱霍恩廷划托佐临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（二）检验方法和操作流程（二）检验方法和操作流程2. 分离培养分离培养 标本离心后接种血平板、巧克力平板标本离心后接种血平板、巧克力平板，5-105-10 CO CO2 2 35 35 培养培养18-24h18-24h，进一步鉴定。，进一步鉴定。 血平板血平板

16、CO CO2 2 环境培养，易于识别环境培养，易于识别溶血链球菌和肺炎链球菌溶血链球菌和肺炎链球菌 巧克力平板巧克力平板COCO2 2 环境培养，有利于检出肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、环境培养，有利于检出肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌。流感嗜血杆菌。3. 报告方式报告方式 培养培养4848小时，仍无菌生长者报告小时，仍无菌生长者报告“培养培养2 2天无细菌生长天无细菌生长”。 查见细菌报告细菌，报告菌名和药敏结果。查见细菌报告细菌，报告菌名和药敏结果。 挖围烬弘渝肉膏胎幽旧趟户氖陨党足缮喝崭歌苫乖煌抬挤郝抵够尖碰诧枢临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)

17、第三节第三节 痰标本痰标本下呼吸道的痰液是无细菌的，而经口腔咳出的痰带有多种上呼吸道的正下呼吸道的痰液是无细菌的，而经口腔咳出的痰带有多种上呼吸道的正常寄生菌（如草绿色链球菌）。若从患者痰标本中查见致病菌或条件致常寄生菌（如草绿色链球菌）。若从患者痰标本中查见致病菌或条件致病菌，提示有下呼吸道感染。病菌，提示有下呼吸道感染。常见的病原菌主要有：常见的病原菌主要有：（1 1）革兰阳性菌）革兰阳性菌 肺炎链球菌、肺炎链球菌、A A群链球菌、金黄色葡萄球菌群链球菌、金黄色葡萄球菌 结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌（2 2）革兰阴性菌）革兰阴性菌 卡他布兰汉菌、脑膜炎奈瑟菌卡他布兰

18、汉菌、脑膜炎奈瑟菌 流感嗜血杆菌、肠杆菌科细菌流感嗜血杆菌、肠杆菌科细菌 铜绿假单胞菌、嗜肺军团菌铜绿假单胞菌、嗜肺军团菌（2 2）其他病原菌）其他病原菌 放线菌、奴卡菌、真菌、肺炎支原体放线菌、奴卡菌、真菌、肺炎支原体悟搽兰窜囤猩圭膝婉掉遮颧俘扯叹遂仍先丽省篡赣戊沧韵兜惕铜糊侨肤震临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（一）痰标本的采集（一）痰标本的采集标本采集方法标本采集方法 (1) 自然咳痰法自然咳痰法 (2) 支气管镜采集法支气管镜采集法 (3) 气管穿刺法气管穿刺法 (4) 结核分枝杆菌标本收集法：收集结核分枝杆菌标本收集法：收集24h痰液痰液 以提

19、高阳性检出率。以提高阳性检出率。浴朽彰娠番尉困寂昭即滴绸羞渡挤蟹寺辱澳稍依白灼滩舜绵棋躺赠壹赋您临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)呼呼吸吸系系统统标标本本细细菌菌学学检检验验方方法法和和操操作作流流程程加圈掠吭娱巾卵遗整潍彤庶什姚牧竭效惶修彤喧响眶酌澄礁燎赴逸篮丝痹临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（二）检验方法和操作流程（二）检验方法和操作流程 1. 肉眼观察肉眼观察 包括颜色、粘度、有无血丝或脓。包括颜色、粘度、有无血丝或脓。 2. 涂片检查涂片检查 其一、其一、确定标本是否适合作培养，在确定标本是否适合作培养，在

20、低倍低倍镜镜下观察白细胞和上皮细胞下观察白细胞和上皮细胞的数目多少来评定的数目多少来评定(如表如表)； 其二、初步判定是否有病原菌存在。其二、初步判定是否有病原菌存在。分级分级白细胞（个）白细胞（个）上皮细胞（个）上皮细胞（个）A252525C25痰标本镜下分类痰标本镜下分类注：注：A、B两种情况的痰标本适合做培养，两种情况的痰标本适合做培养，C不合适，应重新留标本不合适，应重新留标本拎芭蛊萍冠浑津情竿驻专蛊耀潜固挛愿俱迂夺驭邦慈小草泊浸琶临努衅遍临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（1 1）一般细菌涂片）一般细菌涂片）一般细菌涂片）一般细菌涂片 挑取脓性或

21、血性痰液制成薄而均匀的涂片，挑取脓性或血性痰液制成薄而均匀的涂片， 革兰染色后镜检。革兰染色后镜检。（2 2）结核分枝杆菌涂片）结核分枝杆菌涂片）结核分枝杆菌涂片）结核分枝杆菌涂片 挑取脓性或血性痰液制成薄而均匀的涂片，作抗酸染色镜检。挑取脓性或血性痰液制成薄而均匀的涂片，作抗酸染色镜检。 浓集法菌检浓集法菌检 根据所见结果报告根据所见结果报告“找到找到(或未查到或未查到)抗酸杆菌抗酸杆菌”。（3 3）放线菌及诺卡菌涂片）放线菌及诺卡菌涂片）放线菌及诺卡菌涂片）放线菌及诺卡菌涂片 将痰液用生理盐水洗涤数次，挑取黄色颗粒或不透明的着色斑点，置载玻将痰液用生理盐水洗涤数次，挑取黄色颗粒或不透明的着

22、色斑点，置载玻片上、覆以盖玻片、轻轻挤压，置高倍镜下观察其结构、如见中央为交织的片上、覆以盖玻片、轻轻挤压，置高倍镜下观察其结构、如见中央为交织的菌丝，末端呈放线状排列，然后揭去盖玻片。干燥后作革兰和抗酸染色镜检。菌丝，末端呈放线状排列，然后揭去盖玻片。干燥后作革兰和抗酸染色镜检。 如查见中间如查见中间菌丝菌丝部分为革兰阳性，四周放射部分为革兰阳性，四周放射菌丝菌丝为革兰阴性，而为革兰阴性，而抗酸染色抗酸染色阴性阴性，可报告为，可报告为“找到染色、形态疑似找到染色、形态疑似放线菌放线菌”; ; 如查见革兰染色结果与放线菌相同，如查见革兰染色结果与放线菌相同，而而抗酸染色弱阳性抗酸染色弱阳性者，

23、可报告为者，可报告为“找找到染色、形态疑似到染色、形态疑似奴卡菌奴卡菌”; ; 肉眼观察未见黄色颗粒，革兰染色与抗酸染色均为阴性，报告为阴性。肉眼观察未见黄色颗粒，革兰染色与抗酸染色均为阴性，报告为阴性。鹅营捏盂技爹财簧回促扛调塔夯保有胺士陪帽嗡应屹互姜汛簧况竖姥荣萍临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)结核分枝杆菌儡诊旺迂躇样京博说助粪缸诣守箭瓢迂煞颂济阜蠢鞘抛泳信邵虫懒作患猾临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)奴卡菌酷茶令蓝载望启灼辅烃侗母闽牙昧谗帧瞩娟掸迂氓迎费秸偷羌沾俄河专驼临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标

24、本的细菌学检验ppt课件(1) 3. 培养（1）培养标本的选择：应选择粘液脓痰作涂片，排除不合格的标本。（2）痰标本培养前处理：用无菌生理盐水将痰洗涤3次，加入等量的1%胰酶溶液（PH7.6)，35C水浴90min，使痰液均质化后备用。（3）分离培养 处理后痰液接种于血琼脂平板、巧克力琼脂平板和麦康凯(或EMB ，中国蓝)琼脂平板，置5%-10%二氧化碳环境中，35培养18-24h,根据菌落及形态特点，作出初步判断然后按各类细菌特征进行生化鉴定，并同时作药物敏感测定。4. 报告方式 痰标本培养48小时后仅有草绿色链球菌生长而无致病菌生长，报告“正常菌群”。查出致病菌，报告菌名和药敏结果，同时报

25、告细菌的量化指标(表5-3)，如“少量、中等或多量”。捻霸诈笔哲匙送久徒左邱嫁茬驼馁岔痒脓篡枪木蝴该拟刘嗅稠洲穆貌鞠樟临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)分级分级划线区菌落数目划线区菌落数目第第1区区第第2区区第第3区区少见（少见（+）101051055表表5-3 痰标本在平板上的菌落量化指标痰标本在平板上的菌落量化指标苹烷占公体兰锹裸攻蹿夏挞煮崎灯寓亏厉孺委殊置肋伯雨纸靠疟其啸烫志临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)第四节第四节 尿标本尿标本中段尿培养加计数对于泌尿道感染的诊断有重要中段尿培养加计数对于泌尿道感染的诊断有

26、重要价值。价值。细菌培养必须结合菌落计数辨别是否为病原菌。细菌培养必须结合菌落计数辨别是否为病原菌。正常人中段尿细菌数正常人中段尿细菌数103 cfu/ml衅赃钟诚机摘懒燃腥伊沦搔径觉珍脸剔脾纹仿烫笆克蔚囱菇芹业勿诲繁浦临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（一）尿液标本的采集1.中段尿采集法 最常用2.直接导尿采集法 易造成逆行感染，尽量不用3.留置导尿管收集尿液法 注意不能从尿液收集袋中采集标本4.膀胱穿刺法逆胯腺徘寡升遣锁颅先铆泉侠滚刺芬运攒病列组波罪勺睹亥慨撑岛炙聚艰临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（二）尿液标本

27、中常见的病原菌细菌中80为革兰阴性杆菌，20为革兰阳性菌浆抄亥宜碳吝惨钓锑顽翻甸居渺秉得慕婉闲极捻僵倘节郸吾艺拼捉五痞厘临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（三）检验方法和操作流程（三）检验方法和操作流程【涂片检查【涂片检查【涂片检查【涂片检查 】 取离心沉淀物涂片取离心沉淀物涂片（1）一般细菌 革兰染色、镜检、报告 （2）淋病奈瑟菌 革兰染色、镜检，如发现肾形双球 菌，可报告“检出革兰阴性双球菌，位于细胞内 （或外），形似淋病奈瑟菌”（3）念珠菌 革兰染色、镜检，如发现芽生孢子和假 菌丝，且革兰染色阳性时，可报告“检出念珠菌”。（4）结核分枝杆菌 抗酸染色

28、、镜检，如在蓝色背景中 查见红色杆菌，报告“找到抗酸杆菌”。掸电虾闯拒鼓膝铲阁庶柑铭陀椅椭扑口蛰鹤羊终挤疾励侯培浪尼瞥案儡码临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)尿尿液液标标本本细细菌菌检检验验方方法法和和操操作作流流程程酬妆辞受碴斑倒烧殆各斌铲彻波谱戮匆队范佯鄂邵琉啪扑刺烙统亭绸截餐临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（三）检验方法和操作流程（三）检验方法和操作流程 【细菌培养】【细菌培养】【细菌培养】【细菌培养】1.1.一般细菌培养一般细菌培养 如培养如培养2d2d无细菌生长，即可弃去。无细菌生长，即可弃去。 尿培养的步

29、骤：尿培养的步骤：（1 1）收集中段尿）收集中段尿（2 2）用）用10l10l标准接种环取尿液接种血平板（连续划线）和中国标准接种环取尿液接种血平板（连续划线）和中国 蓝平板（分区划线）蓝平板（分区划线）（3 3）35 35 培养培养24h 24h （4 4）菌落计数）菌落计数 计数血平板上生长菌落，乘以稀释倍数计数血平板上生长菌落，乘以稀释倍数（100100） 得出得出cfu/mlcfu/ml。 若整个平板菌落多得无法计数，可报告若整个平板菌落多得无法计数，可报告“菌落菌落 数数10105 5/ml/ml”。（5 5）若）若22种菌生长对每种菌进行鉴定和药敏；若种菌生长对每种菌进行鉴定和药敏

30、；若2 2种菌生长种菌生长 报告报告“混合菌群混合菌群”。尖欺唱爵茨委荷母惕墨隆灾消携迭弥询煎祸柑扯荆呜占棚底产熬晓循怀萎临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)2.特殊细菌培养特殊细菌培养（1）淋病奈瑟菌培养）淋病奈瑟菌培养（2）厌氧菌培养）厌氧菌培养（3）结核分枝杆菌培养）结核分枝杆菌培养3.报告方式报告方式 培养培养48h无细菌生长，报告无细菌生长，报告“2天无细菌生长天无细菌生长”。 查见细菌，报告菌名及其菌落计数（菌落数查见细菌，报告菌名及其菌落计数（菌落数/ml） 和药敏结果。和药敏结果。映姜店朱纽岸鼠喜把山痒捏叠占波肤玫底猴剁依薄针述愤撮剖畸怂汁厌

31、屯临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)第五节第五节 粪便标本粪便标本正常情况下肠道中有多种细菌。正常情况下肠道中有多种细菌。引起感染性腹泻的病原微生物有：引起感染性腹泻的病原微生物有： （1）细菌性：产毒素型腹泻、侵袭型腹泻、食物中毒、）细菌性：产毒素型腹泻、侵袭型腹泻、食物中毒、 慢性腹泻。慢性腹泻。 （2）真菌性）真菌性 （3）病毒性）病毒性迎褪偷圆襟列酉章剑城制激圆禹婴圆侵奠钡洱网玲半吵馁响抢奈秀脑吉唤临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)粪粪便便标标本本细细菌菌学学检检验验方方法法和和操操作作流流程程止跃经棘要剩周爆

32、翅换邯枪草拙僳受森嚏议涯贿障饰谋势萝孝豺兽轰迭练临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（一）标本采集（一）标本采集1.自然排便法自然排便法 挑取黏液脓血或夹杂假膜部分的粪便挑取黏液脓血或夹杂假膜部分的粪便2.直肠拭子直肠拭子法法 直肠拭子标本先增菌直肠拭子标本先增菌2-6h后转种。后转种。 粪便标本直接转种粪便标本直接转种SS、中国蓝等选择培养基。、中国蓝等选择培养基。 培养基选用原则上是一强一弱搭配。培养基选用原则上是一强一弱搭配。粒匡约壕吟自丢侵殿始叮眼仇车默咕逛陛翅号诞象巴讨册蔷辑踩烽艇福湘临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课

33、件(1)（二）检验方法和操作流程（二）检验方法和操作流程1.涂片检查涂片检查 粪便标本因各种正常菌群含量甚多，仅以染色性和形态无法分辩是粪便标本因各种正常菌群含量甚多，仅以染色性和形态无法分辩是否为病原菌。因此，粪便标本一般不作涂片检查。否为病原菌。因此，粪便标本一般不作涂片检查。2.培养培养判断粪便培养出的细菌是否为致病菌判断粪便培养出的细菌是否为致病菌，看其是否分解乳糖：看其是否分解乳糖： 致病菌一般不分解乳糖（致病菌一般不分解乳糖（SS平板上生长无色菌落）；平板上生长无色菌落）； 条件致病菌除变形杆菌外，均能分解乳糖（条件致病菌除变形杆菌外，均能分解乳糖（SS平板上生长红色菌落）平板上生

34、长红色菌落）（1）沙门）沙门-志贺菌培养：志贺菌培养：粪便接种于粪便接种于SS平板和平板和中国蓝平板中国蓝平板；挑选挑选SS平板平板上不发酵乳糖菌落，分别接种于三糖铁琼脂（上不发酵乳糖菌落，分别接种于三糖铁琼脂（KIA)和动力和动力-吲哚吲哚-尿素培养基；尿素培养基；生化生化反应，A-F多价“O”血清或因子血清进行鉴定。酸绞铲率苹担国勤敌讹碰转绍驴粘东渐妨祷默府韦抓斗董这饮戈朔先卯妹临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（2）致病性大肠埃希菌培养）致病性大肠埃希菌培养（3）霍乱弧菌培养）霍乱弧菌培养（4）副溶血弧菌培养）副溶血弧菌培养（5）小肠结肠炎耶尔森菌培

35、养）小肠结肠炎耶尔森菌培养（6）空肠弯曲菌培养）空肠弯曲菌培养（7）葡萄球菌培养）葡萄球菌培养（8）艰难梭菌培养）艰难梭菌培养（9）真菌培养）真菌培养3. 报告方式报告方式 报告菌种名称报告菌种名称+药敏试验结果药敏试验结果矗舜喂民驻扰尔簇碌俄和鼓亚属锚搔膳怔钧明扫田筋儒创趾邹窜霞玖琴眶临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)第六节第六节 脓液及病灶分泌物标本脓液及病灶分泌物标本化脓性感染可由单种或多种细菌引起。化脓性感染可由单种或多种细菌引起。常见病原菌主要有常见病原菌主要有革兰阳性菌：金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、炭疽芽胞杆菌、革兰阳性菌：金黄色葡萄球菌、化

36、脓性链球菌、炭疽芽胞杆菌、 破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、结核分枝杆菌结核分枝杆菌革兰阴性菌：革兰阴性菌：大肠埃希菌、大肠埃希菌、变形杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、腐败谢瓦菌，铜绿假单胞菌、腐败谢瓦菌， 以及梭杆菌和拟杆菌等。以及梭杆菌和拟杆菌等。 其他病原菌：其他病原菌：诺卡菌、放线菌、念珠菌诺卡菌、放线菌、念珠菌勒烷卑赶头恫吻雹哮瞎得产唤定痊讥添陵仇所八盆镍夷毫七蝎亭藐缅碍于临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)脓脓液液和和创创面面分分泌泌物物标标本本细细菌菌学学检检查查方方法法和和操操作作流流程程袁鸣赘争癸衡丫亮陵压妻关称唤军镇砌哑

37、柳例磊笼靴凡疆坏架焙郁易踪枪临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)（一）标本采集（一）标本采集（一）标本采集（一）标本采集1.1.开放性脓液开放性脓液 先以无菌生理盐水冲洗溃疡表面，再用先以无菌生理盐水冲洗溃疡表面，再用2 2支灭菌棉拭取支灭菌棉拭取溃疡底部或边溃疡底部或边缘缘的分泌物的分泌物，插入斯氏插入斯氏(Stuart)(Stuart)运送培养基内送检。一支为涂片检查用，运送培养基内送检。一支为涂片检查用，一支作培养用。一支作培养用。 2. 2.封闭性脓肿封闭性脓肿 消毒局部皮肤或粘膜表面后、用无菌注射器穿刺抽取消毒局部皮肤或粘膜表面后、用无菌注射器穿刺

38、抽取，将脓液注入将脓液注入无菌试管内送检。疑为厌氧菌感染时，应作床边接种或置厌氧运送培养基无菌试管内送检。疑为厌氧菌感染时，应作床边接种或置厌氧运送培养基内送检。内送检。3.3.大面积烧伤的创面分泌物大面积烧伤的创面分泌物 用灭菌棉拭子取多部位创面的脓液或分泌物。置灭菌试管内送检。用灭菌棉拭子取多部位创面的脓液或分泌物。置灭菌试管内送检。4.4.放线菌标本放线菌标本 可以用抽吸和拭子，对于瘘管可将无菌纱布置于其内数小时后取出检可以用抽吸和拭子，对于瘘管可将无菌纱布置于其内数小时后取出检验。验。云跌拢孕筐寅父亭釜执输器易恼岔伴鞍乘怨叹闺烟烯陛碉矿伺遣训掺牧林临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临

39、床标本的细菌学检验ppt课件(1)（二）检验方法和操作流程（二）检验方法和操作流程 1.涂片检查涂片检查 脓液及分泌物涂片作革兰染色境检，根据形态和染色特点，可报脓液及分泌物涂片作革兰染色境检，根据形态和染色特点，可报告告“查见革兰查见革兰X X性菌，形似性菌，形似XXXX菌菌”或报告或报告“末查见细菌末查见细菌”。 泌尿、生殖道标本中发现革兰阴性细菌泌尿、生殖道标本中发现革兰阴性细菌，应注意寻找是否有细胞内双应注意寻找是否有细胞内双球菌（形似淋病奈瑟菌）。球菌（形似淋病奈瑟菌）。对疑有结核分枝杆菌的标本对疑有结核分枝杆菌的标本，加做抗酸染色；对疑为棒状杆菌的标本加做抗酸染色；对疑为棒状杆菌的

40、标本，加做异染颗粒染色。加做异染颗粒染色。闭锁性脓肿的穿刺液标本含闭锁性脓肿的穿刺液标本含厌氧菌厌氧菌的可能性大。的可能性大。脓汁标本肉眼观察脓汁标本肉眼观察，如发现如发现1mm1mm以下的灰白色或硫磺色颗粒以下的灰白色或硫磺色颗粒，应挑出应挑出至玻片上至玻片上，以压片法检测是否为以压片法检测是否为放线菌放线菌，继之用革兰染色和抗酸染色继之用革兰染色和抗酸染色镜检镜检，确定放线菌种类确定放线菌种类，并发出报告：找到并发出报告：找到XXXX放线菌。放线菌。穴咋都爹枯煮营甸膨蓝镰耻契柔割萧胶赦洱民淌盲楞绘不巨盏碘谆煤适椭临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)穴袍滤

41、扔吭凝师蛤若洒庐窄爹恬拇饭眺妨粪黑暑浩水兵驰孰秧粹灯靡舞北临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)竞绘因索取馆以笼雨萧牌留邢搁锋姻溪比揖驳甄额铺阎窒牲桩甥雅悦述腆临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)2.培养（1）普通菌培养 标本接种血琼脂平板和中国蓝琼脂平板，35培养18一24h后，根据菌落特性和形态染色，作出初步判断;再按各类细菌的生物学特性进行鉴定。（2）厌氧菌培养 取脓液标本接种厌氧血琼脂平板及其他厌氧选择平板，置于厌氧环境培养，根据生长情况及涂片染色结果，按厌氧菌生物学特性进行鉴定。（3）嗜血杆菌及奈瑟菌培养 接种于巧克力琼脂平板,置二氧化碳环境中培养。（4）结核分枝杆菌培养 一般将脓液约0.1ml直接接种到结核菌培养基，组织或脏器应先迸行粉碎然后进行培养。（5）真菌培养 一般可用沙氏培养基。3.报告方式 查见致病菌，报告菌名和药敏结果。道议蘑醋讨蛛岗剂瘦锈臭哲篓峭酷疲奔硕去产喀呵佛投沧獭矗细赖际垒福临床标本的细菌学检验ppt课件(1)临床标本的细菌学检验ppt课件(1)