常见植物的脱毒与快速繁殖技术

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1、第第9 9章章 常见植物的脱毒与快常见植物的脱毒与快速繁殖技术速繁殖技术 植物组织培养植物组织培养 大大 家家 好好 ！本章主要内容本章主要内容(4学时学时)l蔬菜的脱毒与快繁l果树的脱毒与快繁l花卉植物的脱毒与快繁l农作物的脱毒与快繁l药用植物的试管快繁l树木的脱毒与快繁第第9 9章章 常见植物的脱毒常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 (1)(1)掌握马铃薯的生物学习性，掌握马铃薯脱毒培养的过程以掌握马铃薯的生物学习性，掌握马铃薯脱毒培养的过程以及马铃薯脱毒苗的鉴定方法；掌握番茄的生物学特性及快速及马铃薯脱毒苗的鉴定方法；掌握番茄的生物学特性及快速繁殖方法；繁殖方法；(2)(2)掌

2、握苹果的脱掌握苹果的脱 毒方法与快繁技术；掌握葡萄的脱毒与快技毒方法与快繁技术；掌握葡萄的脱毒与快技术；掌握草莓的脱术；掌握草莓的脱 毒与快繁技术；毒与快繁技术；(3)(3)掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉的生物学特性，组培快速繁殖方法及自然繁殖法；的生物学特性，组培快速繁殖方法及自然繁殖法；(4)(4)掌握甘薯的生物学特性，脱毒与快繁的方法及技术；掌握甘薯的生物学特性，脱毒与快繁的方法及技术；(5)(5)掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术；掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术； (6)(6)掌握毛白杨、河北杨等绿化苗木的快繁技

3、术。掌握毛白杨、河北杨等绿化苗木的快繁技术。第第9 9章章 常见植物的脱毒常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 本章教学目的与要求第一节第一节 蔬菜的脱毒与快繁蔬菜的脱毒与快繁 第第9 9章常见植物的脱毒章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 马铃薯马铃薯 蕃茄蕃茄一、马铃薯的组织培养一、马铃薯的组织培养第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁微型薯第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁 马铃薯是一种全球性的重要经济马铃薯是一种全球性的重要经济作物。适应性广，营养价值高，耐贮藏适作物。适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输，既是一种重要的粮食作物也是一种运输，既是一种重要的粮

4、食作物也是一种调节市场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于调节市场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美洲，当被发现可以食用后，很快传拉丁美洲，当被发现可以食用后，很快传到世界各地，成为栽培很广的一种作物。到世界各地，成为栽培很广的一种作物。第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁 危害有危害有1717种之多，如种之多，如X X病毒、病毒、S S病毒、病毒、Y Y病毒、病毒、M M病毒、病毒、A A病毒、花叶病毒、纺锤形病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。块茎病毒等。 马铃薯病毒可使块茎产量减少马铃薯病毒可使块茎产量减少50%80%50%80%。 马铃薯病毒的种类马铃薯病毒的种类第一节第一节 蔬菜脱毒与快

5、繁蔬菜脱毒与快繁1 1、形态特性、形态特性(1)(1)根根 根系由出生根和匍匐根组成。根系由出生根和匍匐根组成。(2)(2)茎茎 分地上部分和地下部分。分地上部分和地下部分。(3)(3)叶叶 全缘，心脏形。全缘，心脏形。(4)(4)花花 为聚伞花序。为聚伞花序。(5)(5)果实果实 浆果。浆果。（一）、马铃薯特性和生物学习性（一）、马铃薯特性和生物学习性第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻。马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻。发芽适温为发芽适温为12181218。地上茎叶生长温度为地上茎叶生长温度为17172121。块茎形成要求昼温块茎形成要求昼温14241

6、424，夜温，夜温12121414。结薯期要求结薯期要求1212h h左右的短日照和疏松、湿润、肥左右的短日照和疏松、湿润、肥沃以及通气良好的土壤条件。土壤板结，薯块表沃以及通气良好的土壤条件。土壤板结，薯块表面粗糙和薯形不整。面粗糙和薯形不整。2 2、 生物学习性生物学习性第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除内脱除PLRVPLRV、PVYPVY、PVAPVA、PAFPAF、PVGPVG、PVMPVM、PSWPSW等病毒。等病毒。（二）、马铃薯脱毒技术（二）、马铃薯脱毒技术第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁

7、全国现有马铃薯播种面积全国现有马铃薯播种面积300300多万公顷，每多万公顷，每年需合格种薯年需合格种薯4545亿公斤，脱毒原种亿公斤，脱毒原种4 4亿公斤，亿公斤，脱毒小薯或微型薯脱毒小薯或微型薯4545亿粒。亿粒。我国的马铃薯平均单产仅为公顷，是世界我国的马铃薯平均单产仅为公顷，是世界单产最高国这瑞士（公顷）的单产最高国这瑞士（公顷）的1/41/4。最主要。最主要的因素就是种薯质量差，品种布局不合理。的因素就是种薯质量差，品种布局不合理。我国马铃薯栽培现状我国马铃薯栽培现状第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁 微茎尖组织培养微茎尖组织培养-诱导出苗诱导出苗- -联免疫吸附试验法或指示

8、植物方法鉴定联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定-脱毒试管基础苗。脱毒试管基础苗。 固体、液体培养基相结合固体、液体培养基相结合-扩扩繁基础苗繁基础苗-在防虫网室栽植或封闭温室在防虫网室栽植或封闭温室扦插扦插-原原种（或称脱毒小薯）。原原原原种（或称脱毒小薯）。原原种种-原种原种1 1代代-原种原种2 2代代-良种良种1 1代代-良种良种2 2代。代。1 1脱毒种薯生产程序脱毒种薯生产程序第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁（1）茎尖消毒一般在室内发芽，芽经热处理（一般在室内发芽，芽经热处理（3838）2 2周。周。然后取然后取1 1厘米的茎尖，水洗干净，无菌条件厘米的茎尖，水洗干净，无菌

9、条件下先用下先用7070的酒精浸组织的酒精浸组织15-2015-20秒，再用秒，再用2 2次氯酸钠溶液浸泡次氯酸钠溶液浸泡4-5min4-5min，然后用无菌，然后用无菌水冲洗水冲洗3 3次。次。 2 2茎尖培养脱毒茎尖培养脱毒第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁 把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶，把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，留露出圆滑的生长点，留1-21-2个叶原基，毫个叶原基，毫米，随即接种于米，随即接种于MSMS液体培养基上，每升加液体培养基上，每升加mgNAA mgNAA 、 0.2mgGA3 0.2mgGA3、0.5BA0.5BA，2%2%蔗糖，蔗糖，p p

10、 H H。取材和接种取材和接种第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁温度：温度：21252125光照度：光照度：2000-3000 lx2000-3000 lx光照时间：光照时间：12h/d12h/d 2-3 2-3周长愈伤，周长愈伤，4-54-5周长绿点，周长绿点，3-3-_月长成月长成2-32-3厘米小芽，越慢越好，厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。出芽很快的扔掉。培养条件：培养条件：第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁 培养成功的马铃薯脱毒苗，经培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISAELISA（试（试剂盒）鉴定后（试管苗应每剂盒）鉴定后（试管苗应每_月检测一次，每月检测一次，每

11、年年4 4次）采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。次）采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。 取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培养基上，每瓶可插培养基上，每瓶可插2020个左右茎段，经个左右茎段，经20d20d左右左右发育成发育成510cm510cm高小植株，继续进行切段繁殖，此高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，每月可繁殖法速度快，每月可繁殖5858倍，试管苗多节接种倍，试管苗多节接种在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。（2 2） 继代和生根继代和生根第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁MS+NAA0.2

12、-0.5+D-MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙泛酸钙1010，3%3%蔗糖；蔗糖；20-2520-25，3000-4000LX3000-4000LX，14-16hr14-16hr光照；光照；每每3 3周继代一次，单芽茎段约周继代一次，单芽茎段约1 1厘米；厘米；原则试管苗用原则试管苗用2 2年年33年。年。 马铃薯继代培养基：马铃薯继代培养基：第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁马铃薯试管苗马铃薯试管苗第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁炼苗室温度：炼苗室温度：白天白天23272327，夜间不低于，夜间不低于1414。炼苗具体方法炼苗具体方法：移植前：移植前7d7d左右，将长

13、有左右，将长有3535片叶、片叶、高高23cm23cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管苗，室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。 (3) (3) 驯化驯化第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁 1 1、指示植物鉴定、指示植物鉴定在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常用的方法，病毒、病毒和纺锤块状病毒用的方法，病毒、病毒和纺锤块状病毒很容易通过汁液来接种。很容易通过汁液来接种。 2 2、鉴定寄主的准备、鉴定寄主的准

14、备马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫网室中培养。应在无虫网室中培养。（三）、马铃薯无病毒苗的鉴定材料（三）、马铃薯无病毒苗的鉴定材料第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁 叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状，用叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状，用纱布滤出汁液，再用蒸馏水稀释倍作为接种纱布滤出汁液，再用蒸馏水稀释倍作为接种物物( (混入目的金刚砂混入目的金刚砂) )。 用左手心紧靠在鉴定寄主植物的背面，用左手心紧靠在鉴定寄主植物的背面，以右手指蘸取接种液，均匀的在叶背面

15、擦过，以以右手指蘸取接种液，均匀的在叶背面擦过，以不造成叶片产生伤痕为度，最后把叶面上多余的不造成叶片产生伤痕为度，最后把叶面上多余的接种物用清水洗净，放置在的防虫室接种物用清水洗净，放置在的防虫室中，一般天可发病。中，一般天可发病。 第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁（）（） 直接块茎繁殖直接块茎繁殖（）（） 扦插繁殖扦插繁殖（）（） 组织培养切段繁殖组织培养切段繁殖 A A：继代培养：继代培养 B B：低温保存：低温保存（四）、马铃薯无病毒株的繁殖（四）、马铃薯无病毒株的繁殖第一节蔬菜脱毒与快繁第一节蔬菜脱毒与快繁二、番茄的组织培养二、番茄的组织培养（一）、形态特征和生物学习性（一

16、）、形态特征和生物学习性 番茄的叶片为长羽番茄的叶片为长羽状，在叶轴上生有裂片，状，在叶轴上生有裂片，顶生裂片，小裂片，间裂顶生裂片，小裂片，间裂片，这些裂片是叶的深裂，片，这些裂片是叶的深裂，缺刻的变化。两性花，聚缺刻的变化。两性花，聚伞花序，浆果。伞花序，浆果。蕃茄耐低温，喜光照，对蕃茄耐低温，喜光照，对水分需求量极大，喜肥，水分需求量极大，喜肥，适于微酸性或中性土壤。适于微酸性或中性土壤。 第一节蔬菜脱毒与快繁第一节蔬菜脱毒与快繁（二）、番茄的组织培养（二）、番茄的组织培养1 1、外植体、外植体：幼嫩叶片：幼嫩叶片 。2 2、消毒、消毒：用：用0.1%0.1%升汞浸泡升汞浸泡4min4m

17、in，再用无菌水冲洗，再用无菌水冲洗3-43-4次次 。3 3、愈伤组织培养条件、愈伤组织培养条件：MS + BA2mg/L + IAA1mg/L MS + BA2mg/L + IAA1mg/L ，温度，温度2525，每天光照，每天光照10h10h，光照度，光照度2000lx 2000lx 。4 4、分化培养、分化培养：分化培养基：分化培养基MS+BA4MS+BA4中。中。5 5、生根培养、生根培养：MS+IAA2 mg/LMS+IAA2 mg/L。6 6、炼苗栽植、炼苗栽植：将培养有根试管苗的瓶口打开。煅炼：将培养有根试管苗的瓶口打开。煅炼3d3d后取后取出，洗去根上带有的培养基，移栽到营养

18、土中，浇透水，出，洗去根上带有的培养基，移栽到营养土中，浇透水，并罩上塑料薄膜，以保温保湿，并罩上塑料薄膜，以保温保湿，4-5d4-5d后去掉薄膜，新叶长后去掉薄膜，新叶长出时即定植田间。出时即定植田间。 第一节蔬菜脱毒与快繁第一节蔬菜脱毒与快繁（三）、番茄的胚培养（三）、番茄的胚培养1 1、外植体制备、外植体制备：授粉后：授粉后30-40d30-40d收获果皮完整的果实，果收获果皮完整的果实，果实放入实放入95%95%乙醇中表面消毒，浸在乙醇中表面消毒，浸在5%NaCI5%NaCI中中5min5min，用无菌，用无菌蒸馏水充分淋洗。果实放在无菌吸水纸上，除去种子上的蒸馏水充分淋洗。果实放在无

19、菌吸水纸上，除去种子上的胶状复被。胶状复被。 2 2、培养基、培养基：启动：启动：MS+mg/L+2,4-D2mg/L+MS+mg/L+2,4-D2mg/L+椰乳椰乳100ml/L100ml/L，pH6.0pH6.0；继代：；继代： MS+ 2,4-D2mg/L MS+ 2,4-D2mg/L；分化：；分化：MS+BA1.5mg/LMS+BA1.5mg/L；生根：生根：MS+NAA2mg/LMS+NAA2mg/L。 3 3、培养条件、培养条件：愈伤组织启动和继代，用暗培养，：愈伤组织启动和继代，用暗培养，2727。芽再生和生根在室温芽再生和生根在室温20-30.16h/d 20-30.16h/d

20、 的光照，的光照，2000lx2000lx。 第一节蔬菜脱毒与快繁第一节蔬菜脱毒与快繁第二节第二节 果树的脱毒与快繁果树的脱毒与快繁 葡萄葡萄苹果苹果第第9 9章常见植物的脱毒章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 草莓草莓一、苹果的脱毒与快繁一、苹果的脱毒与快繁（一）、苹果的形态特性和生物学特性（一）、苹果的形态特性和生物学特性 苹果（苹果（Malus pumilaMalus pumila）属落叶乔木，树木高大。果实为）属落叶乔木，树木高大。果实为假果。假果。 苹果喜凉；喜光；适合在微酸性到中性土壤中栽种。苹果喜凉；喜光；适合在微酸性到中性土壤中栽种。 第二节果树脱毒与快繁第二节果树

21、脱毒与快繁（二）、脱毒技术（二）、脱毒技术1 1、病毒种类、病毒种类：苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒：苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和苹果茎沟病毒等和苹果茎沟病毒等 。2 2、微尖嫁接脱毒、微尖嫁接脱毒：砧木：去顶的离体培养幼苗，：砧木：去顶的离体培养幼苗，接穗：试管培养的无毒新稍；嫁接后培养生叶，接穗：试管培养的无毒新稍；嫁接后培养生叶，移栽即可。移栽即可。3 3、热处理脱毒、热处理脱毒：把植株置于：把植株置于38 38 下下25-5025-50天。天。4 4、茎尖培养脱毒、茎尖培养脱毒mmmm的茎尖离体培养。的茎尖离体培养。5 5、脱毒苗的鉴定、脱毒苗的鉴定：抗血清法，电子：抗血清法，电子

22、 显微镜法，显微镜法，ELISAELISA法、指示植物法。法、指示植物法。 第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁（三）、苹果茎尖脱毒快繁技术（三）、苹果茎尖脱毒快繁技术 1 1、材料与消毒、材料与消毒mmmm。 2 2、芽的诱导、芽的诱导：MSMS或或LS+BA2+300LS+BA2+300500CH500CH或或LH+3%LH+3%蔗糖的培养基上，诱导芽的分化。蔗糖的培养基上，诱导芽的分化。3 3、继代增殖培养、继代增殖培养：MS+BA0.5MS+BA0.51+CH300 1+CH300 培养基培养基上增殖。上增殖。4 4、生根培养、生根培养：1/2MS1/2MS或或 White Whi

23、te，NitshNitsh附加和附加和GA33 GA33 等。等。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁（四）苹果花粉培养（四）苹果花粉培养1 1、选材与预处理、选材与预处理：选取中心花蕾吐红，周围花：选取中心花蕾吐红，周围花蕾明显增大，但花序尚未分离的花蕾，置于冰蕾明显增大，但花序尚未分离的花蕾，置于冰箱中箱中1-31-3预处理。预处理。2 2、消毒、消毒minmin，再在，再在10%10%漂白粉上清夜中浸漂白粉上清夜中浸151520min20min。3 3、胚状体诱导、胚状体诱导：接种到：接种到MS+2,4-D0.4 + KT0.2 + MS+2,4-D0.4 + KT0.2 + IAA

24、4 + 3IAA4 + 38%8%蔗糖培养基上，蔗糖培养基上，25253030下培养。下培养。 4 4、生根、生根：同茎尖脱毒中所用方法。：同茎尖脱毒中所用方法。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁（五）胚培养（五）胚培养1 1、取材消毒、取材消毒：取授粉取授粉303050d50d内的幼果，用内的幼果，用70%70%酒精擦拭。取出种子，剥出幼胚或成熟胚。酒精擦拭。取出种子，剥出幼胚或成熟胚。 2 2、启动培养、启动培养：接种在的接种在的1/2MS1/2MS培养基上。培养条培养基上。培养条件为件为25253030和和150015002000lx2000lx光照光照14h14h。 3 3、分化

25、增殖、分化增殖：移植到加有和移植到加有和CH300CH300的的1/2MS1/2MS培养培养基上基上 ，在光下培养条件同上。，在光下培养条件同上。4 4、生根培养、生根培养：同茎尖培养。同茎尖培养。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁二、葡萄的脱毒与快繁二、葡萄的脱毒与快繁 （一）、形态特征和生物学习性（一）、形态特征和生物学习性 葡萄属落叶木质藤本植物，葡葡萄属落叶木质藤本植物，葡萄地上部分的茎细。节上具有卷萄地上部分的茎细。节上具有卷须，可向上攀援。叶近圆型或卵须，可向上攀援。叶近圆型或卵型，型，3 35 5裂。裂。 葡萄原产于温带地区，不太抗葡萄原产于温带地区，不太抗寒。葡萄的根系抗

26、寒力很弱，在寒。葡萄的根系抗寒力很弱，在5 577时即受冻。时即受冻。 第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁（二）、葡萄的组织培养（二）、葡萄的组织培养 1 1、选材接种、选材接种：从生长旺盛的葡萄新梢顶端取：从生长旺盛的葡萄新梢顶端取1 12 2的茎的茎尖。消毒。分离出约尖。消毒。分离出约2 2长的茎尖，接种到培养基上。长的茎尖，接种到培养基上。2 2、培养基、培养基：MSMS培养基（无机盐减半为好），再添加培养基（无机盐减半为好），再添加BA1BA12 2，NAA0.01NAA0.01，LH100LH100，蔗糖，蔗糖2%2%，琼脂，琼脂0.6%0.6%，而，而B5B5培养培养基愈伤组

27、织化严重，茎尖生长不好。基愈伤组织化严重，茎尖生长不好。3 3、苗分化、苗分化：BA0.5BA0.5，同时添加，同时添加GA30.2GA30.2，黑暗处理可促进，黑暗处理可促进幼茎的伸成，提高成苗率。幼茎的伸成，提高成苗率。 4 4、根分化、根分化：将苗转入培养基中进行生根。：将苗转入培养基中进行生根。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁（三）、葡萄无病毒苗的培养（三）、葡萄无病毒苗的培养 葡萄受到葡萄受到2626种病毒的危害。由于种病毒的危害。由于病毒的危害，葡萄的长势减弱，产量病毒的危害，葡萄的长势减弱，产量降低，果实的糖分含量减少，风味变降低，果实的糖分含量减少，风味变劣。葡萄卷叶病

28、是危害最大的病毒病劣。葡萄卷叶病是危害最大的病毒病。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁（三）、葡萄无病毒苗的培养（三）、葡萄无病毒苗的培养 1 1、热处理脱毒：、热处理脱毒：（1 1）葡萄无性系处理：材料置于）葡萄无性系处理：材料置于3838，COCO2 2120010-6120010-6的的人工空气侯箱内。经人工空气侯箱内。经30min30min处理，较易从枝条尖端或休眠处理，较易从枝条尖端或休眠芽中除去扇叶病毒。芽中除去扇叶病毒。（2 2）将感染材料的修面芽插入健康指示植物的蔓中，然）将感染材料的修面芽插入健康指示植物的蔓中，然后在后在3838的环境中保持的环境中保持2 2个月，以后

29、取出枝条和接种芽继个月，以后取出枝条和接种芽继续生长。续生长。（3 3） 直接将葡萄蔓浸泡在直接将葡萄蔓浸泡在5050的的 温水中温水中101020min20min，可，可以治疗皮尔斯病，但不能治疗黄点病及卷叶病。以治疗皮尔斯病，但不能治疗黄点病及卷叶病。 第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁2 2、组织培养脱毒技术、组织培养脱毒技术 （1 1）、茎尖接种后变绿、增大期的培养）、茎尖接种后变绿、增大期的培养：在：在2525，相对，相对湿度湿度80%80%，16hmm 16hmm 茎尖接种于茎尖接种于 1/2MS1/2MS，添加，添加NAA0.1NAA0.1，BA1.0BA1.0，Kt0.5

30、Kt0.5，腺嘌呤，腺嘌呤4.04.0，蔗糖，蔗糖30g/L30g/L，琼脂，琼脂6.06.0，培养基上，培养基上。（2 2） 从畸形叶和茎叶伸长期从畸形叶和茎叶伸长期：采用：采用1/2MS1/2MS，添加，添加IAA0.2IAA0.2，BA0.1BA0.1，KT0.5KT0.5，腺嘌呤，腺嘌呤4.04.0，蔗糖，蔗糖30g/L30g/L的培养基。的培养基。（3 3）地上部和地下部的伸长期）地上部和地下部的伸长期：GalzyGalzy（19641964）培养基，）培养基，添加添加NAA0.1NAA0.1。（三）、葡萄无病毒苗的培养（三）、葡萄无病毒苗的培养 第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与

31、快繁三、草莓的脱毒与快繁三、草莓的脱毒与快繁 （一）、形态特征和生物习性（一）、形态特征和生物习性草莓（草莓（FragariaFragaria）属多年生草本）属多年生草本植物，植株矮小，呈半平卧丛植物，植株矮小，呈半平卧丛状生长，基生三出复叶。果实状生长，基生三出复叶。果实为聚合瘦果生于花托上。为聚合瘦果生于花托上。 草莓喜光但又较耐阴，要求肥沃、草莓喜光但又较耐阴，要求肥沃、疏松、透水、通气的中性微酸疏松、透水、通气的中性微酸性或微碱性土壤。性或微碱性土壤。 第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁（二）、草莓脱毒苗的培养（二）、草莓脱毒苗的培养 1 1、热处理脱毒、热处理脱毒 将草莓植株在

32、将草莓植株在40404141温度下处理温度下处理4 46 6周。周。 2 2、微茎尖脱毒、微茎尖脱毒（1 1）、初代培养）、初代培养 ：取草莓顶芽，用自来水流水：取草莓顶芽，用自来水流水冲洗冲洗2 24h4h，然后剥去外层叶片，消毒，然后剥去外层叶片，消毒， mm mm的的茎尖。接入培养基中。培养条件为茎尖。接入培养基中。培养条件为22222525，日照日照161618h18h光强光强3000lx3000lx。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁 （二）、草莓脱毒苗的培养（二）、草莓脱毒苗的培养(2) (2) 继代培养继代培养：把芽丛割成芽丛小块，转入：把芽丛割成芽丛小块，转入MSMS培养

33、基中，令其长大培养基中，令其长大 。并进行分株，扩大繁殖。并进行分株，扩大繁殖。(3) (3) 生根培养生根培养：在培养基中加入：在培养基中加入NAA1NAA1或或IBA1IBA1。 第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第三节第三节 花卉植物的脱毒与快繁花卉植物的脱毒与快繁 第第9 9章常见植物的脱毒章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 一、一、兰花的脱毒与快繁兰花的脱毒与快繁 兰花系兰科兰花系兰科(Orchidaceae)(Orchidaceae)植植物，在自然条件下主要靠分株繁殖，繁物，在自然条件下主要靠分株繁殖，繁殖率一年只有几倍，所以无法大量繁殖殖率一年只有几倍，所以无法

34、大量繁殖生产，而且由于长期进行无性繁殖，带生产，而且由于长期进行无性繁殖，带病毒株增多，逐渐使种性降低，影响生病毒株增多，逐渐使种性降低，影响生长。长。 第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （一）蝴蝶兰属的培养（一）蝴蝶兰属的培养 1 1、茎尖的培养、茎尖的培养 (1) (1) 取材消毒取材消毒：将芽除去叶后，用水冲洗，再用：将芽除去叶后，用水冲洗，再用1010的漂白粉表面灭菌的漂白粉表面灭菌15min15min。除去叶原基后，用。除去叶原基后，用5 5的漂的漂白粉中灭菌白粉中灭菌l0minl0min，以后用无菌水冲洗，以后用无菌水冲洗3 35 5次。切取茎次。切取茎尖和

35、腋芽，约尖和腋芽，约2 23mm3mm，接种到培养基中。，接种到培养基中。 (2)(2)培养基：培养基：采用采用VacinVacin和和WentWent培养基，添加培养基，添加1515CMCM进行液体培养，或加进行液体培养，或加9g9gL L的琼脂进行固体培养。的琼脂进行固体培养。 (3)(3)培养条件：培养条件：为温度为温度2525，光照强度，光照强度2000Lx2000Lx，照，照明明161624h24h。液体培养基用。液体培养基用60r60rminmin的速度进行振荡培的速度进行振荡培养。培养养。培养1 1个月即可形成原球茎球状体，即可进行继代个月即可形成原球茎球状体，即可进行继代增殖。

36、增殖。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （一）蝴蝶兰属的培养（一）蝴蝶兰属的培养 (1)(1)采芽采芽：将带腋芽的花梗进行冲洗，用：将带腋芽的花梗进行冲洗，用1010的漂白粉溶的漂白粉溶液表面灭菌液表面灭菌20min20min，除去腋芽的苞叶，再在，除去腋芽的苞叶，再在5 5的漂白粉溶的漂白粉溶液中表面灭菌液中表面灭菌3min3min，无菌水冲洗净。仅取腋芽，接种到培，无菌水冲洗净。仅取腋芽，接种到培养基上。养基上。 (2)(2)培养基和培养条件培养基和培养条件：用德兰属：用德兰属1 1号培养基培养原球状体，号培养基培养原球状体，育苗用卡德兰属育苗用卡德兰属1 1号加号

37、加1010香蕉汁；培养条件是光照强度香蕉汁；培养条件是光照强度2000Lx2000Lx，光照时间每天，光照时间每天13h13h，保持恒温，保持恒温2525。(3)(3)继代培养继代培养：用原球茎球状体繁殖。：用原球茎球状体繁殖。 (4)(4)育苗育苗：不切块继续培养即可分化产生叶片，移到育苗：不切块继续培养即可分化产生叶片，移到育苗的培养基，的培养基，3 36 6个月可得到能栽植的苗。个月可得到能栽植的苗。 第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （一）蝴蝶兰属的培养（一）蝴蝶兰属的培养3.3.叶片的培养：叶片的培养：(1)(1)取材取材：叶片是从试管内培养的材料上切取。取展

38、开叶最上：叶片是从试管内培养的材料上切取。取展开叶最上部先端、中央或基部约部先端、中央或基部约6 68mm8mm2 2 。(2)(2)培养基和培养条件培养基和培养条件：用：用 Kyotog KyotogL L、肌醇、肌醇10001000、烟酸、烟酸1 1、维、维生素生素B11B11、NAAlNAAl、腺嘌呤、腺嘌呤1010、BAl0BAl0、蔗糖、蔗糖2 2、琼脂、琼脂1.01.0。 2525恒温，光照恒温，光照500Lx,500Lx,日照日照16h16h。 (3) (3)继代培养继代培养：用改良的：用改良的KyotoKyoto培养基进行继代培养，或在培养基进行继代培养，或在VacinVaci

39、n和和WentWent培养基中去掉蔗糖和琼脂，加培养基中去掉蔗糖和琼脂，加2020的的CMCM的液体培的液体培养基进行振荡培养。养基进行振荡培养。 (4)(4)育苗育苗：原球茎球状体：原球茎球状体2 23 3个月即可萌芽，形成细苗，以后个月即可萌芽，形成细苗，以后转移到转移到KyotoKyoto培养基，加培养基，加1010的香蕉汁，经数月后可得到能移的香蕉汁，经数月后可得到能移f f栽的大苗。栽的大苗。 第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （二）、卡特兰的培养（二）、卡特兰的培养 ：选择：选择5 510cm10cm长的嫩茎，从基部采芽。先用流水冲洗，长的嫩茎，从基部采芽。

40、先用流水冲洗，切去叶片酒精，漂白粉等消毒。切去叶片酒精，漂白粉等消毒。：MSMS基本培养基，附加维生素，氨基酸，基本培养基，附加维生素，氨基酸，NAA0.186mgNAA0.186mgL L，Kt0.02mgKt0.02mgL L，GA30.173mgGA30.173mgL L，蔗糖，蔗糖30g30gL L，琼脂，琼脂6g6gL L，不加，不加CMCM。启动培养温度。启动培养温度15152020，成活以后，成活以后，则保持在则保持在2525。光照强度。光照强度500-2000Lx500-2000Lx，照明，照明161622h22h。3.3.防止培养材料变褐方法：防止培养材料变褐方法：(1)(1

41、)采芽后，用无菌水冲洗采芽后，用无菌水冲洗再接种再接种 (2) (2) 在培养基中加在培养基中加(50(50100)10-6100)10-6芸香甙。芸香甙。 (2) (2) 开始培养到成活，保持温度开始培养到成活，保持温度15152020。 (4) (4) 调调pHpH值至值至5.55.5，减轻褐化，提高成活率。，减轻褐化，提高成活率。 (5) (5)避免避免6 6_月采芽（由于多酚类物质的积累，褐化较严重）。月采芽（由于多酚类物质的积累，褐化较严重）。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 二、香石竹的组织培养二、香石竹的组织培养 香石竹为石竹科石竹属草本植物，原产南欧香石

42、竹为石竹科石竹属草本植物，原产南欧地中海北岸。须根系，茎直立，多分枝，株高地中海北岸。须根系，茎直立，多分枝，株高7070100cm100cm，茎部半木质化。叶线状披针形，全缘，叶质，茎部半木质化。叶线状披针形，全缘，叶质较厚，上半部向外弯曲，对生，基部抱茎。花通常单较厚，上半部向外弯曲，对生，基部抱茎。花通常单生或生或2 23 3朵聚伞状排列。朵聚伞状排列。 石石竹竹是是一一种种中中日日性性花花卉卉。喜喜干干燥燥、通通风风，喜喜冷冷凉凉，最最适适宜宜的的生生长长温温度度为为19192121，忌忌高高温温多多湿湿。喜喜保保肥肥、通通气气、排排水水良良好好的的腐腐殖殖质质或或砂砂质质壤壤土土，最

43、最适适宜的土壤宜的土壤pHpH值为值为6 66.56.5。（一）形态特性和生物学习性第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （二）、组织培养育苗（二）、组织培养育苗 1 1、取材灭菌、取材灭菌mmmm的茎尖。的茎尖。2 2、培养基、培养基：选用：选用MSMS或或WhiteWhite培养基。附加培养基。附加BABA或或KT 0KT 05 52mg2mgL(L(单位下同单位下同) )；NAANAA、IAAIAA浓度为浓度为0 02 22 2，2,4-D2,4-D为为0.10.11 1。3 3、分化增殖、分化增殖： 于于MSMS附加进行分化；于附加进行分化；于MSMS附加附加BA0

44、.5BA0.52 2、IAA0. 5IAA0. 5进行丛生芽诱导。进行丛生芽诱导。4 4、生根、生根：于：于1/2MS1/2MS上，温度上，温度20202525，光照强度，光照强度20001x20001x光照光照101012h/d12h/d。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 三、菊花的组织培养三、菊花的组织培养 菊花系多年生植物，株高菊花系多年生植物，株高60-180cm60-180cm，茎直立，茎直立粗壮，多分枝。叶形大，互生，叶片有深缺刻。花序粗壮，多分枝。叶形大，互生，叶片有深缺刻。花序单生或聚生，边缘为舌状花，中部为筒状花，也有全单生或聚生，边缘为舌状花，中部为

45、筒状花，也有全为舌状或筒状花的，形状各异，种子为细小的瘦果，为舌状或筒状花的，形状各异，种子为细小的瘦果，中间膨大，两端突出。中间膨大，两端突出。 适适宜宜的的生生育育温温度度为为15-2515-25，喜喜阳阳光光充充足足，通通风风良良好好，在在光光照照条条件件下下生生长长健健壮壮。比比较较耐耐旱旱，不不耐耐潮潮湿湿，忌忌低低洼洼积积水水。秋秋菊菊、冬冬菊菊为为典典型型的的短短日日照照植植物物，只有光照长度在只有光照长度在12h12h以下时才能开花以下时才能开花 （一）形态特性和生物学习性第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （二）、菊花的组织培养快速繁殖（二）、菊花的组织

46、培养快速繁殖 1 1、取材、取材：外植体很多，如茎段、侧芽、叶、：外植体很多，如茎段、侧芽、叶、花序梗、花序轴等，但最好采用茎尖或侧芽，花序梗、花序轴等，但最好采用茎尖或侧芽，其次是花序轴。经一般其次是花序轴。经一般 灭菌过程后即可接种。灭菌过程后即可接种。 2 2、培养基与培养条件、培养基与培养条件：MSMS、B5B5、N6N6、White White 均可，多用均可，多用MSMS。附加。附加BA2BA23mg3mgL L，NAA0NAA002020 02mg2mgL L。 于于22222828（24242626最佳）。最佳）。光照光照121216h/d16h/d，光强，光强10001000

47、4000Lx4000Lx。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （二）、菊花的组织培养快速繁殖（二）、菊花的组织培养快速繁殖 3 3、继代培养、继代培养 ：可通过茎尖直接分化出新芽，：可通过茎尖直接分化出新芽，或经愈伤组织分化出新芽；也可用茎切段作或经愈伤组织分化出新芽；也可用茎切段作微型扦插繁殖（微型扦插繁殖（MSMS或或MS+NAA0.1MS+NAA0.1） 。 4 4、生根和移栽、生根和移栽 ：将无根幼苗转入：将无根幼苗转入1 12 2 MS+NAA(MS+NAA(或的培养基中，经两周即可生根或的培养基中，经两周即可生根（培养条件同上）（培养条件同上） 。第三节第三节

48、 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （三）、菊花花瓣的培养（三）、菊花花瓣的培养 1 1、取材、取材：在菊花开花前：在菊花开花前2 23d3d将整个花蕾剪下，将整个花蕾剪下，冲洗十几分钟，用冲洗十几分钟，用7575的酒精浸泡的酒精浸泡101015min15min进进行表面灭菌，后用无菌水冲洗两次，再用行表面灭菌，后用无菌水冲洗两次，再用1010的漂白粉澄清液浸泡的漂白粉澄清液浸泡20min20min后。切取舌状花约后。切取舌状花约5mm5mm见方大小见方大小 。 2 2、培养基与培养条件、培养基与培养条件：MSMS培养基，添加培养基，添加BAlBAl3mg/L3mg/L，NAA0.5

49、NAA0.52mg2mgL L。置于温度。置于温度2525左右，左右，光照强度光照强度2000Lx2000Lx，每天照光，每天照光12h12h的条件下培养，的条件下培养，或获得愈伤组织。或获得愈伤组织。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （四）、菊花的脱毒（四）、菊花的脱毒 危害菊花的病毒有：危害菊花的病毒有：菊花斑纹病毒；菊花斑纹病毒；菊菊花矮缩类病毒；花矮缩类病毒；菊花轻斑驳病毒；菊花轻斑驳病毒；番茄不孕番茄不孕病毒。此外还有畸花病毒、绿花病毒、褪绿斑驳病毒。此外还有畸花病毒、绿花病毒、褪绿斑驳病毒、花叶病毒等。病毒、花叶病毒等。 第三节第三节 花卉植物的花卉植物的

50、脱毒与快繁脱毒与快繁 mmmm以下茎尖进行培养脱毒。以下茎尖进行培养脱毒。 2 2、热处理脱毒：在、热处理脱毒：在35353636的条件下栽培的条件下栽培2 2个月，个月，可以达到脱毒的效果（但是热处理只能除去菊花矮可以达到脱毒的效果（但是热处理只能除去菊花矮缩类病毒和番茄不孕病毒）。缩类病毒和番茄不孕病毒）。 四、非洲菊的组织培养四、非洲菊的组织培养 非洲菊非洲菊(Gerbera hybrida)(Gerbera hybrida)属菊科大丁草属，多年属菊科大丁草属，多年生宿根草本花卉。全株具细毛，叶片基生，椭圆至长生宿根草本花卉。全株具细毛，叶片基生，椭圆至长椭圆形。花序顶生，舌状花较大，排

51、列成一轮或数轮。椭圆形。花序顶生，舌状花较大，排列成一轮或数轮。 非洲菊性喜冬季温和，夏季凉爽的气候条件。最非洲菊性喜冬季温和，夏季凉爽的气候条件。最适生长温度为适生长温度为20202525。4 4_月和月和8 8_月为盛花月为盛花期。喜阳光充足的环境。土壤要求有机质丰富、排水期。喜阳光充足的环境。土壤要求有机质丰富、排水良好、良好、pHpH值为值为6 66.56.5的微酸性壤土。的微酸性壤土。（一）、形态特性和生物学习性（一）、形态特性和生物学习性 第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （二）、非洲菊组织培养育苗（二）、非洲菊组织培养育苗 1 1、取材消毒、取材消毒：常用

52、花托作为外植体，用：常用花托作为外植体，用0.10.1的吐的吐温浸泡温浸泡101015min15min，取出洗净后再放入，取出洗净后再放入0.10.1氯化汞氯化汞中消毒中消毒20min20min。将花托切成。将花托切成2-3mm2-3mm见方的小块。见方的小块。 2 2、培养基与培养条件、培养基与培养条件：初代培养基为：初代培养基为MS+BA2mgMS+BA2mgL(L(单位下同单位下同) )十十NAA0.2 + IAA0.2NAA0.2 + IAA0.2。培养条件为。培养条件为2424土土22，光照强度为，光照强度为2000200030001x30001x，每天光照，每天光照121216h1

53、6h。3 3、分化生根、分化生根：转入培养基进行分化培养。待苗高：转入培养基进行分化培养。待苗高2cm2cm时，转移到时，转移到I I2 MS 2 MS 十十 生根培养基中生根。生根培养基中生根。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 五、矮牵牛的组织培养五、矮牵牛的组织培养 矮牵牛矮牵牛( (Petunia bybridaPetunia bybrida) )，又名碧冬茄，茄科，矮，又名碧冬茄，茄科，矮牵牛属。多年生草本植物，株高牵牛属。多年生草本植物，株高404060cm60cm，茎直立，茎直立或卧倒，全身被短毛。上部叶片对生，中下部叶片或卧倒，全身被短毛。上部叶片对生，中

54、下部叶片互生，卵圆形。花单生于枝顶或叶腋间，花冠喇叭互生，卵圆形。花单生于枝顶或叶腋间，花冠喇叭状，花色丰富，朔果卵形。状，花色丰富，朔果卵形。矮牵牛原产南美洲。喜温暖，向阳和通风良好的环矮牵牛原产南美洲。喜温暖，向阳和通风良好的环境条件，不耐寒，耐暑热，在炎热的夏季仍能正常境条件，不耐寒，耐暑热，在炎热的夏季仍能正常开花，要求排水良好疏松的酸性沙质土地。开花，要求排水良好疏松的酸性沙质土地。 （一）、形态特性和生物学习性（一）、形态特性和生物学习性 第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （二）、矮牵牛组织培养育苗（二）、矮牵牛组织培养育苗 1 1、叶片培养、叶片培养 ：选

55、择嫩叶作为外植体，进行常规：选择嫩叶作为外植体，进行常规消毒后将其切成消毒后将其切成5mm5mm见方，接种到的培养基上诱导见方，接种到的培养基上诱导愈伤组织及丛生芽。所得芽丛接种于的继代培养愈伤组织及丛生芽。所得芽丛接种于的继代培养基上。基上。 第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 2 2、茎尖茎段接种、茎尖茎段接种cmcm或带腋芽茎段或带腋芽茎段lcmlcm接种到的诱接种到的诱导培养基上。导培养基上。1 1周后，芽开始萌动，逐渐长大成新周后，芽开始萌动，逐渐长大成新梢。继代可用切割茎段法进行。梢。继代可用切割茎段法进行。 六、百合的组织培养六、百合的组织培养 百合是百合科

56、百合是百合科(Liliaceae)(Liliaceae)百合属植物的统称，为百合属植物的统称，为多年生的草本植物。鳞茎无皮，广卵形，白色或多年生的草本植物。鳞茎无皮，广卵形，白色或黄白色，茎高黄白色，茎高303090cm90cm，直立，上叶多而散生，直立，上叶多而散生，披针形。花单生或数花横向着生茎顶，花朵呈喇披针形。花单生或数花横向着生茎顶，花朵呈喇叭状、筒状，有清香。叭状、筒状，有清香。百合属于球根花卉，要求肥沃、疏松和排水良好百合属于球根花卉，要求肥沃、疏松和排水良好的沙壤土，以利于鳞茎发育。百合喜微酸性土壤，的沙壤土，以利于鳞茎发育。百合喜微酸性土壤，土壤土壤pHpH值在值在5.55.

57、56.56.5最为适宜。最为适宜。（一）、形态特性和生物学习性（一）、形态特性和生物学习性 第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （二）、繁殖方法（二）、繁殖方法 1 1、分球、分球：使用百合老鳞茎：使用百合老鳞茎( (母球母球) )生长过程中于生长过程中于茎轴上逐渐形成小鳞茎茎轴上逐渐形成小鳞茎 进行繁殖。进行繁殖。2 2、鳞片扦插、鳞片扦插：使用成熟鳞叶进行扦插。：使用成熟鳞叶进行扦插。3 3、叶插及分珠芽、叶插及分珠芽：使用地上茎进行扦插，或使：使用地上茎进行扦插，或使用腋生珠芽进行繁殖。用腋生珠芽进行繁殖。 4 4、播种、播种。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱

58、毒与快繁脱毒与快繁 1 1、花器的组织培养、花器的组织培养(1)(1)、取材和灭菌、取材和灭菌：采取开花前数日的花蕾。花：采取开花前数日的花蕾。花蕾的表面用酒精灭菌，再在酒精灯上灼烧数秒钟，蕾的表面用酒精灭菌，再在酒精灯上灼烧数秒钟，在无菌培养皿内剥开花蕾，花丝，子房，花柱等分在无菌培养皿内剥开花蕾，花丝，子房，花柱等分别切取别切取3 35mm5mm长，接种到培养基上。也可用花瓣和长，接种到培养基上。也可用花瓣和萼片培养。萼片培养。(2)(2)、培养基及培养条件、培养基及培养条件：采用：采用MSMS，KCKC等培养基，等培养基，蔗糖浓度以蔗糖浓度以7.07.0为适，发芽和子球形成率可达为适，发

59、芽和子球形成率可达9090左右。光照度左右。光照度2000Lx2000Lx，每天照用，每天照用15h15h，保温，保温2020。（三）、百合组织培养育苗（三）、百合组织培养育苗 第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 2 2、鳞片组织培养、鳞片组织培养 初代培养初代培养cmcm见方鳞片小块接人培养基中，置于见方鳞片小块接人培养基中，置于2020土土22，照光，照光9-10h9-10hd d，光强，光强1200Lx1200Lx条件下培养。条件下培养。 诱导愈伤组织及不定芽。诱导愈伤组织及不定芽。（三）、百合组织培养育苗（三）、百合组织培养育苗 第三节第三节 花卉植物的花卉植物的

60、 脱毒与快繁脱毒与快繁 继代培养继代培养：将愈伤组织转移到分化培养基（：将愈伤组织转移到分化培养基（MS + MS + NAA2 + IBAO.4 + Kt0.05NAA2 + IBAO.4 + Kt0.05）上，）上，1010周后，可分化周后，可分化出许多大小不等的鳞茎，并在小鳞茎的基部长出出许多大小不等的鳞茎，并在小鳞茎的基部长出许多粗壮的根。许多粗壮的根。第四节第四节 农作物的脱毒与快繁农作物的脱毒与快繁 第第9 9章常见植物的脱毒章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 一、甘薯的脱毒与快繁一、甘薯的脱毒与快繁 甘薯（甘薯（Ipomoea batatasIpomoea batat

61、as L. Lam L. Lam）属于旋花科，是）属于旋花科，是一年生植物。我国近年来甘薯种植面积达到一年生植物。我国近年来甘薯种植面积达到666.7666.7万公万公顷，占世界的顷，占世界的80%80%以上。病毒病成为我国甘薯生产的最以上。病毒病成为我国甘薯生产的最大障碍之一。大障碍之一。 如：甘薯花椰菜花叶病毒（如：甘薯花椰菜花叶病毒（SPCLVSPCLV），甘薯羽状），甘薯羽状斑驳病毒（斑驳病毒（SPFMVSPFMV），甘薯潜隐病毒（），甘薯潜隐病毒（SPLVSPLV），甘薯脉），甘薯脉花叶病毒（花叶病毒（SPVMVSPVMV），甘薯轻斑驳病毒（），甘薯轻斑驳病毒（SPMMVSPMMV）

62、，甘薯），甘薯黄矮病毒（黄矮病毒（SPYDVSPYDV），烟草花叶病毒（），烟草花叶病毒（TMVTMV），烟草条纹），烟草条纹病毒（病毒（TSVTSV），黄瓜花叶病毒（），黄瓜花叶病毒（CMVCMV）等。）等。 第四节第四节 农作物的农作物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （一）、甘薯脱毒（一）、甘薯脱毒 1 1、取材、取材：取枝条，去叶切成数段。每段带一个腋芽。：取枝条，去叶切成数段。每段带一个腋芽。2 2、消毒、消毒：常规消毒。：常规消毒。3 3、剥离茎尖、剥离茎尖：剥去顶芽和腋芽上较大的幼叶，切取：剥去顶芽和腋芽上较大的幼叶，切取0.3-0.3-0.50.5毫米含毫米含1-21-2个叶原基的茎尖

63、组织，接种在培养基上。个叶原基的茎尖组织，接种在培养基上。4 4、茎尖培养培养基与培养条件、茎尖培养培养基与培养条件：培养基为：培养基为MS+0.1-0.2mg/L MS+0.1-0.2mg/L IAA+0.1-0.2mg/L BA IAA+0.1-0.2mg/L BA ；培养于温度；培养于温度25-2825-28，光照度，光照度1500-1500-2000lx2000lx，光照，光照14h/d14h/d的条件下。的条件下。5 5、茎尖苗的初级快繁、茎尖苗的初级快繁：将小植株切段进行短枝扦插。切段：将小植株切段进行短枝扦插。切段直插于直插于MSMS培养基中，培养条件同茎尖培养。培养基中，培养条

64、件同茎尖培养。 6 6、脱毒鉴定、脱毒鉴定：病毒病症状学诊断法、指示植物检定法、电：病毒病症状学诊断法、指示植物检定法、电子显微镜检定法、血清学检测法子显微镜检定法、血清学检测法第四节第四节 农作物的农作物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （二）、甘薯的快繁（二）、甘薯的快繁1 1、脱毒苗的快繁、脱毒苗的快繁：可使用：可使用1/21/2或或1/4MS1/4MS（大量元素）培（大量元素）培养基进行增殖。养基进行增殖。 2 2、原原种的繁育、原原种的繁育 ：在无病毒土壤上种脱毒苗，让其结：在无病毒土壤上种脱毒苗，让其结薯，即为原原种薯薯，即为原原种薯 。3 3、原种的繁育、原种的繁育 ：以原原种为种植材料

65、在无病毒土壤中：以原原种为种植材料在无病毒土壤中栽种，结薯即为原种。栽种，结薯即为原种。4 4、种薯的繁育、种薯的繁育 ：种薯可分为不同的等级，一级种薯的：种薯可分为不同的等级，一级种薯的生产要求：在隔离地块上栽培原种，地块四周生产要求：在隔离地块上栽培原种，地块四周500500米以米以内的范围内不栽甘薯，种薯每种一年降一级。内的范围内不栽甘薯，种薯每种一年降一级。 第四节第四节 农作物的农作物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 （三）、脱毒试管苗的大规（三）、脱毒试管苗的大规模移栽技术及管理方法模移栽技术及管理方法 1 1培育壮苗培育壮苗 2 2适当炼苗适当炼苗 3 3精心移栽精心移栽 4 4控制湿、

66、温、光等条件控制湿、温、光等条件 5 5适时定植适时定植 6 6严防病虫害严防病虫害 第四节第四节 农作物的农作物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 第五节第五节 药用植物的试管快繁药用植物的试管快繁 第第9 9章常见植物的脱毒章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 一、芦荟的试管快繁一、芦荟的试管快繁 百合科芦荟属植物共有百合科芦荟属植物共有300300多种，多种，为多年生常绿植物，分布于热带和来为多年生常绿植物，分布于热带和来热带地区。由于芦荟具有多种药用功效热带地区。由于芦荟具有多种药用功效和保健美容作用，近年来，芦荟产业已经在国内和保健美容作用，近年来，芦荟产业已经在国内外成为新的开发热

67、点。外成为新的开发热点。 芦荟植株生长数年后才开花结实，种子一芦荟植株生长数年后才开花结实，种子一般也很少，而且种子细小，又不耐保存，存放一般也很少，而且种子细小，又不耐保存，存放一年后发芽率就很低。年后发芽率就很低。 生产上常用的扦插和分株法都不能在短时生产上常用的扦插和分株法都不能在短时间内提供大量种苗。因此，只有通过组织培养快间内提供大量种苗。因此，只有通过组织培养快繁方法，才能生产出大小一致、性状稳定的优良繁方法，才能生产出大小一致、性状稳定的优良种苗。种苗。 第五节第五节 药用植物的药用植物的 试管快繁试管快繁 一、芦荟的试管快繁一、芦荟的试管快繁 1 1初代培养物的建立初代培养物的

68、建立：采用茎段和腋芽作为外植体：采用茎段和腋芽作为外植体 ，以以MSMS为基本培养基，为基本培养基，NAAmg/LNAAmg/L，BA3-5mg/L BA3-5mg/L 2 2取材与消毒取材与消毒 ：截取上端嫩芽或侧芽，将生长点切成：截取上端嫩芽或侧芽，将生长点切成1-2cm1-2cm的小块，冲洗干净，然后用的小块，冲洗干净，然后用2%2%洗洁精或饱和洗衣粉洗洁精或饱和洗衣粉摇动摇动5 5分钟。然后用分钟。然后用70%70%的酒精灭菌的酒精灭菌1 1分钟，立即用分钟，立即用0.15%0.15%升汞溶液再灭菌升汞溶液再灭菌1010分钟。最后用无菌水冲洗分钟。最后用无菌水冲洗4-54-5次。次。

69、3 3培养条件培养条件：温度：温度263263，光照，光照10-12h/d10-12h/d，照度为，照度为1000-1500lx1000-1500lx，空气湿度大，有利芦荟生长。，空气湿度大，有利芦荟生长。第五节第五节 药用植物的药用植物的 试管快繁试管快繁 二、桔梗的组织培养二、桔梗的组织培养 桔梗为桔梗科属多年生草本植物。株高桔梗为桔梗科属多年生草本植物。株高303090cm90cm。根肥大肉质，圆锥形，茎直立，叶片。根肥大肉质，圆锥形，茎直立，叶片卵状至卵状披针形，先端尖，基部楔形或近圆形，卵状至卵状披针形，先端尖，基部楔形或近圆形，边缘有不规则锯齿，花单生或数朵成疏生的总状边缘有不规则

70、锯齿，花单生或数朵成疏生的总状花序；花冠呈状，蓝紫色或白色，大型，直径花序；花冠呈状，蓝紫色或白色，大型，直径3 35cm5cm。蒴果倒卵圆形，成熟时先端裂开。蒴果倒卵圆形，成熟时先端裂开。 桔梗喜欢生长在阳光充足，温暖湿润，桔梗喜欢生长在阳光充足，温暖湿润，雨量充沛的丘陵地区。雨量充沛的丘陵地区。 （一）、形态特性和生物学习性（一）、形态特性和生物学习性 第五节第五节 药用植物的药用植物的 试管快繁试管快繁 （二）、桔梗的快繁（二）、桔梗的快繁 、 播种播种：用种量：用种量0.5-10.5-1公斤公斤/ /亩，播后畦面盖稻草亩，播后畦面盖稻草保湿。播后半月左右即可发芽出苗。保湿。播后半月左右

71、即可发芽出苗。 、 组织培养组织培养：一般用茎尖和茎段作为外植体，接：一般用茎尖和茎段作为外植体，接种和培养方法参照其他作物的方法。种和培养方法参照其他作物的方法。 、 移栽移栽：桔梗喜肥，生长期间宜多施追肥，一般：桔梗喜肥，生长期间宜多施追肥，一般结合中耕除草时追肥。第一次亩施稀淡人畜粪废水结合中耕除草时追肥。第一次亩施稀淡人畜粪废水1000100015001500公斤，第二次亩施猪烘水公斤，第二次亩施猪烘水1500150020002000公公斤，促进根部生长肥大，注意雨季排水。斤，促进根部生长肥大，注意雨季排水。第五节第五节 药用植物的药用植物的 试管快繁试管快繁 第六节第六节 树木的脱毒

72、与快繁树木的脱毒与快繁 第第9 9章常见植物的脱毒章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 一、毛白杨的快繁一、毛白杨的快繁 1 1、无菌苗的建立、无菌苗的建立 采用休眠芽作外植体，经消毒后，采用休眠芽作外植体，经消毒后，削取削取2mm2mm长，带有长，带有2323个幼叶的茎尖个幼叶的茎尖 ，接种于，接种于MS + MS + 0.5mg/LBA + 0.5mg/LBA + 水解乳蛋白水解乳蛋白100mg/L100mg/L的预培养基上，经的预培养基上，经56d56d后，选择未污染的茎尖转后，选择未污染的茎尖转MS + 0.5mg/LBA + MS + 0.5mg/LBA + 0.02mg/

73、LNAA + 0.02mg/LNAA + 赖氨酸赖氨酸100mg/L100mg/L上。上。 培养室温度培养室温度2527,2527,日光灯连续照光，光照度为日光灯连续照光，光照度为1000lx1000lx左右。经左右。经2323个月培养，部分茎尖即可分化出芽。个月培养，部分茎尖即可分化出芽。第六节第六节 树木的脱毒与快繁树木的脱毒与快繁 一、毛白杨的快繁一、毛白杨的快繁 2 2、扩大繁殖、扩大繁殖 （1 1）茎切段生芽扩大繁殖法：）茎切段生芽扩大繁殖法：取诱导出的幼芽，从基取诱导出的幼芽，从基部切下，转接到新的生根培养基上。（部切下，转接到新的生根培养基上。（MS + 0.25mg/L MS

74、+ 0.25mg/L IBA + IBA + 盐酸硫胺素盐酸硫胺素10mg/L + 10mg/L + 蔗糖浓度为蔗糖浓度为1.5%1.5%）。）。 （2 2）叶切块生芽扩大繁殖法）叶切块生芽扩大繁殖法cmcmcmcm长叶柄的叶切块，长叶柄的叶切块，转接到诱导培养基上（转接到诱导培养基上（MS+0.25mg/L IAA+3%MS+0.25mg/L IAA+3%蔗糖蔗糖+7%+7%琼琼脂）。约经脂）。约经10d10d培养，即可从叶柄的切口处观察到有芽培养，即可从叶柄的切口处观察到有芽出现，之后逐渐增多成簇。出现，之后逐渐增多成簇。第六节第六节 树木的脱毒与快繁树木的脱毒与快繁 一、毛白杨的快繁一、

75、毛白杨的快繁 3 3、移栽与管理：、移栽与管理：打开瓶口炼苗，逐渐降低湿度，打开瓶口炼苗，逐渐降低湿度，并逐渐增强光度，进行驯化，使新叶逐渐形成蜡并逐渐增强光度，进行驯化，使新叶逐渐形成蜡质，产生表皮毛，逐渐恢复气孔功能，减少水分质，产生表皮毛，逐渐恢复气孔功能，减少水分散失。初始光照应为日光的散失。初始光照应为日光的1/10,1/10,每每3d3d增加增加10%10%，经过经过101030d30d炼苗即可移入大田，避免中午强光。炼苗即可移入大田，避免中午强光。湿度，开始湿度，开始3d3d饱和湿度，其后每饱和湿度，其后每2 23d3d降低降低5%5%8%8%，直到与大气相同。，直到与大气相同。

76、 第六节第六节 树木的脱毒与快繁树木的脱毒与快繁 二、河北杨的快繁二、河北杨的快繁 1 1、无菌苗的建立、无菌苗的建立 （1 1）取材取材 以春季萌发的新梢或由根部萌发的新枝条以春季萌发的新梢或由根部萌发的新枝条作为外植体来源。截取嫩枝上部作为外植体来源。截取嫩枝上部45cm45cm作为接种材料。作为接种材料。（2 2）消毒、接种及培养条件）消毒、接种及培养条件 以以70%70%的酒精消毒数秒，的酒精消毒数秒，再用再用0.1%0.2%0.1%0.2%的氯化汞消毒的氯化汞消毒510min510min，然后用无菌水，然后用无菌水冲洗冲洗3434次。材料接种后置于次。材料接种后置于252252培养室

77、内进行培培养室内进行培养，每天用日光灯照明养，每天用日光灯照明13h13h，光照度为，光照度为20003000lx20003000lx。（3 3）芽的分化）芽的分化 培养基是培养基是1/2MS1/2MS大量元素大量元素+MSmg/L +MSmg/L BA+0.05mg/L NAA+2.5%BA+0.05mg/L NAA+2.5%蔗糖蔗糖+0.5%+0.5%琼脂，琼脂，pH5.8pH5.8。第六节第六节 树木的脱毒与快繁树木的脱毒与快繁 二、河北杨的快繁二、河北杨的快繁 采用分割带芽愈伤组织进行继代培养，培养基为采用分割带芽愈伤组织进行继代培养，培养基为1/2MS1/2MS大大量元素量元素+MS

78、+MS微量元素微量元素+MSmg/L BA+2%+MSmg/L BA+2%蔗糖蔗糖+0.6%+0.6%琼脂。琼脂。 当不定芽长至当不定芽长至23cm23cm高时，将其转接到生根培养基上高时，将其转接到生根培养基上（1/2MS1/2MS大量元素大量元素+MS+MS微量元素微量元素+MSmg/L NAA+1.5%+MSmg/L NAA+1.5%蔗糖蔗糖+0.06%+0.06%琼脂）。琼脂）。第六节第六节 树木的脱毒与快繁树木的脱毒与快繁 (1)(1)马铃薯茎尖培养脱毒程序：马铃薯茎尖培养脱毒程序：取材；取材；消毒；消毒；接种；接种；培养基；培养基；病毒鉴定。病毒鉴定方法主要有指示植物法、病毒鉴定。

79、病毒鉴定方法主要有指示植物法、症状鉴定法。症状鉴定法。 (2)(2)苹果花粉培养阶段组成：苹果花粉培养阶段组成：选取适期花蕾；选取适期花蕾；花蕾预处理花蕾预处理和消毒；和消毒；诱导胚状体形成；诱导胚状体形成；诱导生根；诱导生根；移栽。移栽。(3)(3)苹果的栽培管理要注意几个问题：苹果的栽培管理要注意几个问题：育苗技术；育苗技术；土壤改土壤改良；良；施肥方法；施肥方法；灌溉时期；灌溉时期；整形和修剪技术。整形和修剪技术。(4)(4)葡萄茎尖培养经过下列变化：茎尖接种后变绿，增大期；葡萄茎尖培养经过下列变化：茎尖接种后变绿，增大期；形成畸形叶期；芽形成和伸长期；形成小叶和叶伸长期；形成畸形叶期；

80、芽形成和伸长期；形成小叶和叶伸长期；生根期；地上部和地下部伸长期；上盆期生根期；地上部和地下部伸长期；上盆期. .(5)(5)在葡萄栽培棚架是应用最广泛的类型。在葡萄栽培棚架是应用最广泛的类型。本章小结：第第9 9章章 常见植物的脱毒常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 (6)(6)草莓脱毒苗的培养主要有微茎尖培养和花粉培养两种。草莓脱毒苗的培养主要有微茎尖培养和花粉培养两种。一般用嫁接法进行病毒鉴定。无毒苗的繁殖程序分为一般用嫁接法进行病毒鉴定。无毒苗的繁殖程序分为五步：鉴定出无毒苗、原种种苗培养、原种种苗繁殖、五步：鉴定出无毒苗、原种种苗培养、原种种苗繁殖、良种种苗繁殖和生产用苗繁

81、殖。良种种苗繁殖和生产用苗繁殖。(7)(7)蝴蝶兰脱毒：茎尖培养蝴蝶兰脱毒：茎尖培养原球茎原球茎继代培养继代培养增殖增殖生根炼苗。通过原球茎增殖的方法，可大大生根炼苗。通过原球茎增殖的方法，可大大提高繁殖速度，实现蝴蝶兰生产的工厂化育苗。提高繁殖速度，实现蝴蝶兰生产的工厂化育苗。(8)(8)香石竹的茎尖脱毒培养一般结合热处理：将带毒植株香石竹的茎尖脱毒培养一般结合热处理：将带毒植株进行盆栽，放入人工控制箱内，采用进行盆栽，放入人工控制箱内，采用38-4038-40高温处理高温处理6-86-8周，再切周，再切1mm1mm大小的茎尖培养。大小的茎尖培养。本章小结：第第9 9章章 常见植物的脱毒常见

82、植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 (9) (9) 菊花的继代增殖，多数是诱导愈伤组织产生丛生芽菊花的继代增殖，多数是诱导愈伤组织产生丛生芽而获得大量的试管苗。菊花生根有两种方法：嫩茎试而获得大量的试管苗。菊花生根有两种方法：嫩茎试管生根；无根嫩茎的扦插。管生根；无根嫩茎的扦插。(10)(10)百合经茎尖培养脱毒、鉴定合格后，可通过两种增百合经茎尖培养脱毒、鉴定合格后，可通过两种增殖方式：殖方式：经愈伤组织增殖；经愈伤组织增殖；是诱导分化不定芽。是诱导分化不定芽。 (11) (11) 侵染甘薯的病毒有十几种，甘薯脱毒快繁工艺流程：侵染甘薯的病毒有十几种，甘薯脱毒快繁工艺流程：脱毒；脱毒；快繁。脱毒试管苗栽培管理注意：培育壮快繁。脱毒试管苗栽培管理注意：培育壮苗；适当炼苗；精心移栽；控制湿、温、光等条件；苗；适当炼苗；精心移栽；控制湿、温、光等条件；适时定植；严防病虫害。适时定植；严防病虫害。(12)(12)桔梗的栽培管理注意：桔梗的栽培管理注意：播种播种;移栽移栽; ; 桔梗喜桔梗喜肥，生长期间宜多施追肥。肥，生长期间宜多施追肥。 本章小结：第第9 9章章 常见植物的脱毒常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 第第9 9章章 常见植物的脱毒常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术