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1、ACTH & Cortisol临床应用及其样本的收集处理临床应用及其样本的收集处理促肾上腺皮质激素&Denny Dong; Apr 29, 20101Insulin 胰岛素胰岛素C-peptide C肽肽Cortisol 皮质醇皮质醇ACTH 促肾上腺皮质激素促肾上腺皮质激素HCG 人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素FSH 促卵泡生成激素促卵泡生成激素LH 促黄体生成激素促黄体生成激素Estradiol 雌二醇雌二醇 Progesterone 孕酮孕酮Prolactin 泌乳素泌乳素Testosterone 睾酮睾酮DHEA-S 硫酸脱氢雄甾酮硫酸脱氢雄甾酮SHBG 性激素结合球蛋白性激素结
2、合球蛋白Elecsys可测的部分激素类项目可测的部分激素类项目2下丘脑下丘脑肾上腺肾上腺+束状束状带分带分泌泌糖皮糖皮质激质激素素网状带网状带分泌分泌性激素性激素球状带球状带分泌分泌盐皮质盐皮质激素激素ACTH的生理分泌图解的生理分泌图解腺垂体腺垂体+ACTHACTH促肾上腺皮质激素促肾上腺皮质激素CRHCRH促肾上腺皮质激素促肾上腺皮质激素释放激素释放激素3促肾上腺皮质激素（促肾上腺皮质激素（ACTH）简介）简介q下丘脑分泌下丘脑分泌CRHCRH（促肾上腺皮质激素释放激素）作用于垂体前叶的腺垂体（促肾上腺皮质激素释放激素）作用于垂体前叶的腺垂体q 垂体分泌垂体分泌ACTHACTH（促肾上腺皮
3、质激素）作用于肾上腺皮质促肾上腺皮质激素）作用于肾上腺皮质q 肾上腺皮质由球状带，束状带和网状带构成肾上腺皮质由球状带，束状带和网状带构成球状带分泌盐皮质激素醛固酮和脱氧皮质酮球状带分泌盐皮质激素醛固酮和脱氧皮质酮束状带分泌糖皮质激素皮质醇（束状带分泌糖皮质激素皮质醇（Cortisol）和皮质酮）和皮质酮网状带分泌性激素网状带分泌性激素DHEA和雄烯二酮（和雄烯二酮（Andro） 以上三类激素都是胆固醇的衍生物以上三类激素都是胆固醇的衍生物4肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素 主要是糖皮质激素主要是糖皮质激素q 糖皮质激素（糖皮质激素（GCGC）调节糖、蛋白质、脂肪代谢。）调节糖、蛋白质、脂肪代谢。
4、GCGC是体内主要的应急激素之一，是体内主要的应急激素之一，任何应急状态都可使任何应急状态都可使GCGC大量释放。大量释放。 主要的主要的GCGC皮质醇的分泌能皮质醇的分泌能释放氨基酸释放氨基酸（来自肌肉来自肌肉）、）、葡萄糖葡萄糖（来自肝脏来自肝脏）以及）以及脂脂肪酸肪酸（来自脂肪组织来自脂肪组织），这些被输送到血液里充当能量使用），这些被输送到血液里充当能量使用 q盐皮质激素促进肾脏保钠排钾，维持机体水和电解质平衡。盐皮质激素促进肾脏保钠排钾，维持机体水和电解质平衡。q 性激素肾上腺可少量合成。性激素肾上腺可少量合成。肾上腺皮质激素（肾上腺皮质激素（ ACH）简介）简介5ACTH的临床应用
5、的临床应用qACTH增高见于增高见于原发性肾上腺功能不全（原发性肾上腺功能不全（Addison病）、病）、ACTH不敏感综合征及不敏感综合征及ACTH受体异常。受体异常。垂体瘤引起的继发性库欣病（垂体瘤引起的继发性库欣病（Cushing病）。病）。双侧肾上腺皮质增生（双侧肾上腺皮质增生（Nelson综合征）、脑垂体原发或继发性综合征）、脑垂体原发或继发性ACTH腺瘤。腺瘤。异位异位ACTH分泌综合征、肺癌、神经性畏食、妊娠、应激状态。分泌综合征、肺癌、神经性畏食、妊娠、应激状态。qACTH降低见于降低见于下丘脑垂体功能减退、垂体卒中。下丘脑垂体功能减退、垂体卒中。手术切除垂体、垂体柄切除术、垂
6、体手术切除垂体、垂体柄切除术、垂体ACTH肿瘤。肿瘤。原发性库欣病、肾上腺皮质肿瘤，应用大剂量皮质激素。原发性库欣病、肾上腺皮质肿瘤，应用大剂量皮质激素。继发于垂体功能减低的肾上腺皮质功能减退症（继发于垂体功能减低的肾上腺皮质功能减退症（Simmonds-Sheehan综合征）。综合征）。 肾上腺皮质功能紊乱诊断的首选项目是血浆(清)总皮质醇、唾液及尿游离皮质醇测定。若能同肘检测血浆ACTH及进行必要的动态功能试验，则有助于病变部位及性质判断 6昼夜节律昼夜节律昼夜节律昼夜节律 环境环境环境环境 中枢神经系统（中枢神经系统（中枢神经系统（中枢神经系统（CNSCNSCNSCNS） 下下下下丘脑丘
7、脑丘脑丘脑 垂体垂体垂体垂体 靶腺：激素的血浓度存在靶腺：激素的血浓度存在靶腺：激素的血浓度存在靶腺：激素的血浓度存在昼夜节律性波动昼夜节律性波动昼夜节律性波动昼夜节律性波动皮质醇和皮质醇和ACTH在血中的含量呈昼夜周期性变化：在血中的含量呈昼夜周期性变化：在清晨含量达到最高峰，随后逐渐下降，到夜间降到最低点。在清晨含量达到最高峰，随后逐渐下降，到夜间降到最低点。因此，在分析结果时应了解采血时间。因此，在分析结果时应了解采血时间。一般选择早上一般选择早上8点、下午点、下午4点、凌晨点、凌晨12点点3个采血时间个采血时间ACTH&Cortisol激素分泌的节律性激素分泌的节律性7ATCHATCH
8、的分泌会影响到肾上腺皮质分泌的糖皮质激素（皮质醇）的分泌。同时皮的分泌会影响到肾上腺皮质分泌的糖皮质激素（皮质醇）的分泌。同时皮质醇的分泌也会反过来调节下丘脑和腺垂体的功能，而负反馈的调节质醇的分泌也会反过来调节下丘脑和腺垂体的功能，而负反馈的调节ACTHACTH的分的分泌。泌。临床上可以通过检测皮质醇与临床上可以通过检测皮质醇与ATCHATCH的变化，并将两者结合起来进行相关疾病的的变化，并将两者结合起来进行相关疾病的鉴别诊断。鉴别诊断。 疾病疾病皮质醇皮质醇ACTH继发性库欣氏病（垂体瘤）继发性库欣氏病（垂体瘤）高高高高肾上腺瘤肾上腺瘤高高低低异位异位ACTH（垂体以外的肿瘤引起，通常是肺
9、（垂体以外的肿瘤引起，通常是肺部肿瘤）部肿瘤）高高高高阿狄森病（阿狄森病（慢性肾上腺皮质机能减退症）慢性肾上腺皮质机能减退症）低低高高垂体机能减退垂体机能减退低低低低肾上腺增生肾上腺增生高高低低Cortisol与与ATCH的联合检测的联合检测8肾上腺皮质功能亢进和减退症的鉴别肾上腺皮质功能亢进和减退症的鉴别疾疾 病病血浆血浆皮质醇皮质醇血浆血浆ACTHACTHACTHACTH兴奋试验兴奋试验肾上腺皮质功能亢进症肾上腺皮质功能亢进症下丘脑垂体性下丘脑垂体性肾上腺皮质腺瘤肾上腺皮质腺瘤肾上腺皮质腺癌肾上腺皮质腺癌异源异源ACTHACTH综合征综合征肾上腺皮质功能减退症肾上腺皮质功能减退症原发性原发
10、性继发性继发性强反应强反应无或弱反应无或弱反应无反应无反应多无反应多无反应无反应无反应延迟反应延迟反应9肾上腺皮质功能亢进的临床表现肾上腺皮质功能亢进的临床表现临床表现包括满月脸，多血质。有向心性肥胖，突出的锁骨上窝和背颈部脂肪垫(水牛背)；肢体远端和手指常常甚细长，肌肉消瘦无力。皮肤菲薄，萎缩，伤口不易愈合，易擦伤。腹部可见紫纹。高血压，肾结石，骨质疏松，糖耐量减退，对感染抵抗力差和精神障碍常见。停止线性生长是儿童特征。女性常有月经不规则。肾上腺肿瘤，除皮质醇外，雄激素产生增加可导致多毛，颞部脱发和女性其他雄性化体征。肾上腺皮质功能减退的临床表现肾上腺皮质功能减退的临床表现A、全身症状。乏力
11、是本病早期出现的重要症状。 B、胃肠功能紊乱。C、电解质紊乱。D、心血管症状。 E、糖代谢紊乱。G、其他。可有头晕、嗜睡、表情淡漠、精神不振、记忆力减退等神经系统症状。10ACTH样本采集注意事项样本采集注意事项ACTH极不稳定，放置室温易受蛋白酶降解易受蛋白酶降解只能使用K3-EDTA 抗凝的血浆样本管需要预冷处理。.样本准备好后，需要立即将样本放入冰块中冷藏运送。使用冷冻离心机离心样本。使用冷冻离心机离心样本。样本需要及时检测，样本需要及时检测，室温下可稳定2小时；或者或者20度冷冻保存，可保存度冷冻保存，可保存4周，冻融一周，冻融一次。次。不要加热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。E
12、DTA抗凝，立即分离血浆，全程冷藏，及时检测11Cortisol血清样本采集注意事项血清样本采集注意事项血清：按标准常规方法采集。血浆：肝素、EDTA或枸橼酸钠抗凝均可。其中用枸橼酸钠抗凝的血浆，测定结果需+10%。标本在28度可稳定5天，20度可稳定3个月。只能冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。不要加热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。注意：由于皮质醇在血中的含量呈现昼夜的周期性变化，应注明采血时间注明采血时间。1224小时尿液皮质醇标本预处理小时尿液皮质醇标本预处理具体步骤如下：1.将24小时尿液放置于清洁容器（禁用防腐剂），记录总尿量。如需要须离心处理。2.取600l尿液和3ml二
13、氯甲烷(CH2Cl2)放入清洁试管充分混匀7分钟。 （注：二氯甲烷具有广谱的溶解力、低沸点以及相对而言最低的毒性和相对而言最好的反应惰性，是有机合成中使用频率最高的有机溶剂。作为溶剂其地位几乎跟无机盐化学中水相当。）3.2500g（RCF）离心5分钟，提取二氯甲烷层。吸取1.5ml二氯甲烷层至清洁试管，在缓慢的氮气流（使用氮气吹扫仪）中将其风干。4.在试管中加入300l通用稀释液置于15 25度温育30分钟，需偶尔搅拌。5.将处理后标本当做血清，血浆标本进行分析.计算： 24小时尿液游离皮质醇nmol/24h仪器检测结果2尿液总量(L)用有机溶剂溶解用有机溶剂溶解Cortisol,氮气流风干，
14、加入稀释液检测氮气流风干，加入稀释液检测13Cotisol唾液标本的收集和处理唾液标本的收集和处理使用唾液收集管来收集唾液样本.，不要使用有枸橼酸的样本管被采集者需先咀嚼2min，将棉拭子放入口腔并让唾液完全浸润，然后将棉拭子放到唾液收集管中。1000g（RCF）离心唾液收集管2min，将唾液从收集管的外管中分离出来。. Use取内管中的上清液进行实验检测将处理后标本当做血清，血浆标本进行分析.离心后的唾液标本2-8 C可稳定5天，20 C可稳定3个月.只能冻融一次14ACTH&Cotrisol的参考范围的参考范围Cortisol（血清/血浆） （换算系数nmol/L x 0.3625 = g
15、/L）上午时间 7-10 a.m. : 171-536 nmol/l (6.2-19.4g/dl) 下午时间 4-8 p.m. : 64-340 nmol/l (2.3-12.3g/dl)24小时尿液100-379 nmol/24 h (36-137 g/24 h)唾液上午时间8-10 a.m.: 19.1 nmol/L ( 0.69 g/dL)下午时间 2:30-3:30 p.m.: 11.9 nmol/L ( 0.43 g/dL)ACTH（血浆） （换算系数pg/mL x 0.22020 = pmol/L）上午时间 7-10 a.m. ： 5-60 pg/mL (1.10-13.2 pmol/L)15Elecsys ACTH&Cortisol基本参数基本参数ACTHCortisol样本量50uL20 l检测时间18min18min检测原理夹心法夹心法检测用样本K3-EDTA 抗凝的血浆血清；唾液；24小时尿液肝素Li-,Na-,NH4+, EDTAK2,K3; 抗凝血浆测定范围12000 pg/mL（0.22440 pmol/L）0.5 1750 nmol/L(0.018-630.4 ug/L）检测灵敏度1pg/mL0.5nmol/L试剂盒稳定期28度稳定期；12周28度稳定期；12周16
