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1、DNADNA的粗提取的粗提取(tq)(tq)与鉴定与鉴定 1 1原理、方法原理、方法(fngf)(fngf)和目的和目的基本原理基本原理基本原理基本原理方法方法方法方法目的目的目的目的DNADNADNADNA在不同在不同在不同在不同浓浓浓浓度的度的度的度的NaClNaClNaClNaCl溶液中的溶解度不同，溶液中的溶解度不同，溶液中的溶解度不同，溶液中的溶解度不同，在在在在0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L的的的的NaClNaClNaClNaCl溶液中的溶解度最低溶液中的溶解度最低溶液中的溶解度最低溶液中的溶解度最低溶于溶于溶于溶于NaClNaCl
2、NaClNaCl溶液中并溶液中并溶液中并溶液中并稀稀稀稀释释释释NaClNaClNaClNaCl溶液溶液溶液溶液为为为为2 mol/L2 mol/L2 mol/L2 mol/L时时时时，DNADNADNADNA溶解，而部分溶解，而部分溶解，而部分溶解，而部分蛋白蛋白蛋白蛋白质发质发质发质发生生生生盐盐盐盐析生成沉淀，通析生成沉淀，通析生成沉淀，通析生成沉淀，通过过滤过过滤过过滤过过滤可除去可除去可除去可除去部分蛋白部分蛋白部分蛋白部分蛋白质质质质及不溶于及不溶于及不溶于及不溶于NaClNaClNaClNaCl溶液的溶液的溶液的溶液的杂质杂质杂质杂质当当当当NaClNaClNaClNaCl溶液稀
3、溶液稀溶液稀溶液稀释释释释至至至至0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L时时时时，DNADNADNADNA析析析析出，出，出，出，过滤过滤过滤过滤可除去溶于可除去溶于可除去溶于可除去溶于NaClNaClNaClNaCl溶液的部分蛋白溶液的部分蛋白溶液的部分蛋白溶液的部分蛋白质质质质和其他和其他和其他和其他杂质杂质杂质杂质DNADNADNADNA不被蛋白不被蛋白不被蛋白不被蛋白酶酶酶酶所水解所水解所水解所水解加入嫩肉粉加入嫩肉粉加入嫩肉粉加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白嫩肉粉中含木瓜蛋白嫩肉粉中含木瓜蛋白嫩肉粉中含木瓜蛋白酶酶酶酶，水解蛋白，水解蛋白，水解蛋
4、白，水解蛋白质质质质（酶的专一性）酶的专一性）DNADNADNADNA不溶于酒精溶液不溶于酒精溶液不溶于酒精溶液不溶于酒精溶液加入冷却酒加入冷却酒加入冷却酒加入冷却酒精精精精(95%)(95%)(95%)(95%)DNADNADNADNA析出，除去溶于酒精的蛋白析出，除去溶于酒精的蛋白析出，除去溶于酒精的蛋白析出，除去溶于酒精的蛋白质质质质DNADNADNADNA可被二苯胺染成可被二苯胺染成可被二苯胺染成可被二苯胺染成蓝蓝蓝蓝色色色色加入二苯胺，加入二苯胺，加入二苯胺，加入二苯胺，并沸水浴并沸水浴并沸水浴并沸水浴鉴鉴鉴鉴定定定定DNADNADNADNA高温高温(gown)(gown)DNADN
5、A耐高温耐高温DNADNA和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、DNADNA热热稳定性不同。大多数蛋白质不能忍受稳定性不同。大多数蛋白质不能忍受60608080的高的高温，而温，而DNADNA在在8080以上才会变性。以上才会变性。DNADNA对洗涤剂耐受性对洗涤剂耐受性 洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNADNA没有影响。没有影响。加入加入洗涤剂1第1页/共30页第一页，共31页。第2页/共30页第二页，共31页。1 1）不同浓度）不同浓度NaClNaCl中中DNADNA溶解度不同。溶解度不同。 2 2）DNADNA与其他细胞与其他细胞(x
6、bo)(xbo)成分在酒精中溶解度不同，成分在酒精中溶解度不同，DNADNA不溶于酒精，细胞不溶于酒精，细胞(xbo)(xbo)中某些蛋白质则溶于酒精。中某些蛋白质则溶于酒精。3 3）DNADNA和蛋白质对酶耐受性不同：酶的专一性和蛋白质对酶耐受性不同：酶的专一性蛋白蛋白酶水解蛋白质。但是对酶水解蛋白质。但是对DNADNA没有影响。没有影响。4 4）DNADNA和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、DNADNA热稳定热稳定性不同。大多数蛋白质不能忍受性不同。大多数蛋白质不能忍受60608080的高温，而的高温，而DNADNA在在8080以上才会变性。以上才会变性。
7、5 5）DNADNA和蛋白质对洗涤剂耐受性不同：洗涤剂能够瓦解和蛋白质对洗涤剂耐受性不同：洗涤剂能够瓦解细胞细胞(xbo)(xbo)膜，但对膜，但对DNADNA没有影响。没有影响。提取提取(tq)DNA的原理包括的原理包括DNA的的 两个方面两个方面 溶解性和耐受性1.DNA的粗提取(tq)实验原理3第3页/共30页第三页，共31页。2.2.2.2.实验实验实验实验(shyn)(shyn)(shyn)(shyn)材料材料材料材料动物动物动物动物鸡血细胞液的优点鸡血细胞液的优点鸡血细胞液的优点鸡血细胞液的优点提醒：人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有提醒：人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细
8、胞核，也没有提醒：人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有提醒：人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNADNADNADNA，不适于作为不适于作为不适于作为不适于作为DNADNADNADNA提取的材料提取的材料提取的材料提取的材料(cilio)(cilio)(cilio)(cilio)，但却是提取血红蛋白的理，但却是提取血红蛋白的理，但却是提取血红蛋白的理，但却是提取血红蛋白的理想材料想材料想材料想材料(cilio)(cilio)(cilio)(cilio)。鸡血红细胞、白细胞中都有细胞鸡血红细胞、白细胞中都有细胞核，含大量核，含大量(dling)(dling)的的DNA,DNA,
9、既经既经济又易取济又易取 植物：新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。植物：新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。4第4页/共30页第四页，共31页。3 3、方法(fngf)(fngf)与过程 1).1).制鸡血细胞液0.1g/mL柠檬酸钠柠檬酸钠100mL活活鸡鲜血鸡鲜血180mL500mL烧杯中，玻棒搅拌烧杯中，玻棒搅拌(jiobn)，离心或静置沉淀。，离心或静置沉淀。离心(lxn)或静置后去掉上清液血浆血浆血细胞血细胞5第5页/共30页第五页，共31页。提取细胞核物质：提取细胞核物质：溶解核内DNA：在滤液中加2mol/Lmol/L的NaClNaCl溶液并搅拌，使染色质中DNADNA 与蛋白质分离，DNADNA充分
10、溶解，过滤过滤( (除杂质除杂质) )得到得到DNADNA滤液滤液析出析出DNA：DNA黏稠物再溶解：黏稠物再溶解：在烧杯中用在烧杯中用2mol/Lmol/L的的NaClNaCl溶液溶解溶液溶解DNADNA。提取较纯净的提取较纯净的DNA：DNA的鉴定：的鉴定：取取两试管两试管各加各加2mol/L的的NaClNaCl溶液，溶液，将将DNA充分溶解于其充分溶解于其 中一试管，然后向两试管中一试管，然后向两试管加入加入二苯胺试剂二苯胺试剂，混匀沸水中加热，混匀沸水中加热 5min5min后后冷却冷却，可发现，可发现DNADNA与试剂反应使溶液呈与试剂反应使溶液呈现蓝色现蓝色。滤取滤取DNA黏稠物：
11、黏稠物：过滤含过滤含DNA的的NaClNaCl溶液溶液：用两层纱布过滤。用两层纱布过滤。2)实验方法实验方法(fngf)步骤：步骤： 在上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并沿一个方在上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并沿一个方向轻轻搅拌，出现丝状物；当丝状物不在增加向轻轻搅拌，出现丝状物；当丝状物不在增加时，停止加水（此时时，停止加水（此时(c sh)NaCl溶液的浓度溶液的浓度相当于相当于0.14mol/L）。）。 用多层纱布用多层纱布(shb)过滤，含过滤，含DNA的粘稠物留在纱的粘稠物留在纱布布(shb)上。上。 滤液DNA所得的滤液体积分数为所得的滤液体积分数为95%的冷却酒精的冷却酒精50mL，用玻
12、棒沿一个，用玻棒沿一个方向方向轻缓搅拌轻缓搅拌，溶液中（，溶液中（析出析出）出现乳白色丝状物，用）出现乳白色丝状物，用玻棒玻棒将将丝状物丝状物卷起，并用滤纸吸取上面的水分。卷起，并用滤纸吸取上面的水分。利用细胞吸水破裂，细胞核内物质释放出来，后用纱布过滤取其滤液。血细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和核膜的破裂，据此可得出含核DNADNA的溶液。6第6页/共30页第六页，共31页。关于关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验结果的比较，粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验结果的比较，最终选择鸡血做实验材料的原因是什么最终选择鸡血做实验材料的原因是什么(shn me)？请回答下列问题
13、：？请回答下列问题：（1）鸡血中红细胞）鸡血中红细胞 ，家鸡属于鸟类，新，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中陈代谢旺盛，因而血液中 细胞数目较多，可以提供丰富的细胞数目较多，可以提供丰富的 （2）实验前由老师制备鸡血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全）实验前由老师制备鸡血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全血，主要原因是血，主要原因是（3）生活在牧区的人们，采集羊、牛和马血比较方便，若他们按实验）生活在牧区的人们，采集羊、牛和马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后，结果是要求完成实验步骤后，结果是 ，这是因为这是因为 ， 但若改用动物肝脏做实验材料，实验可以顺利进行，这是因为但若改
14、用动物肝脏做实验材料，实验可以顺利进行，这是因为 。（4）若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加）若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 程序，程序，使组织细胞更易分离。使组织细胞更易分离。含有完整(wnzhng)的、成形的细胞核红DNA量，所以(suy)一般采用鸡血 鸡的全血包括血浆和血细胞，血浆中无DNA，全血中除掉血浆后就是浓缩的血细胞液，DNA的相对含量提高了。在实验中很难提取到DNA哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，反靠白细胞和淋巴细胞中的少量DNA，在实验中很难提取到肝细胞中含有细胞核，并且肝组织容易被破坏，有利于肝细胞中含有细胞核，并且肝组织容易被破坏，有利于DNA
15、DNA的提取的提取若使肝组织易分离，将肝细胞剪碎、研磨是一种简便易行的方法。7第7页/共30页第七页，共31页。 鉴定鉴定鉴定鉴定(jindng)(jindng)(jindng)(jindng)不变蓝不变蓝对照组对照组溶液逐渐溶液逐渐变蓝变蓝丝状丝状物物 (DNA)(DNA)实验组实验组图示图示结果结果加入物质加入物质比较比较均加入：均加入：4 mL4 mL二苯胺二苯胺(bn n)(bn n)试剂试剂2mol/LNaCl2mol/LNaCl溶液溶液5 mL5 mL鉴定时蓝色的深浅与溶液(rngy)中DNA的含量多少有关。自变量你能采用其他方法对你能采用其他方法对DNADNA进行鉴定吗？进行鉴定
16、吗？洋葱的鳞片叶表皮细胞洋葱的鳞片叶表皮细胞取少许丝状物，置玻片中央，取少许丝状物，置玻片中央，加加加加1 1 1 1滴滴甲基绿甲基绿甲基绿甲基绿溶液，丝状物变成溶液，丝状物变成溶液，丝状物变成溶液，丝状物变成绿色。绿色。鉴定所用的试剂是鉴定所用的试剂是二苯胺二苯胺或或甲基绿甲基绿。用用二苯胺二苯胺须加热。用须加热。用甲基绿不用水浴甲基绿不用水浴加热。加热。9第9页/共30页第九页，共31页。10第10页/共30页第十页，共31页。 注注注注 意意意意 事事事事 项项项项制备鸡血细胞液时，要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠，静置后上制备鸡血细胞液时，要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠，静置后上制备鸡血细胞
17、液时，要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠，静置后上制备鸡血细胞液时，要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠，静置后上层是血清，下层为所需要的血细胞。层是血清，下层为所需要的血细胞。层是血清，下层为所需要的血细胞。层是血清，下层为所需要的血细胞。整个实验中加入整个实验中加入整个实验中加入整个实验中加入“两次蒸馏水，三次两次蒸馏水，三次两次蒸馏水，三次两次蒸馏水，三次NaClNaClNaClNaCl溶液，一次酒精溶液，一次酒精溶液，一次酒精溶液，一次酒精(jijng)”(jijng)”(jijng)”(jijng)”两次加蒸馏水的目的不同，一是涨破细胞，二是稀释溶液。两次加蒸馏水的目的不同，一是涨破细胞，二是稀释
18、溶液。两次加蒸馏水的目的不同，一是涨破细胞，二是稀释溶液。两次加蒸馏水的目的不同，一是涨破细胞，二是稀释溶液。酒精酒精酒精酒精(jijng)(jijng)(jijng)(jijng)最好用最好用最好用最好用95%95%95%95%的冷酒精的冷酒精的冷酒精的冷酒精(jijng);(jijng);(jijng);(jijng);加蒸馏水或加入酒精加蒸馏水或加入酒精加蒸馏水或加入酒精加蒸馏水或加入酒精(jijng)(jijng)(jijng)(jijng)用玻棒搅拌时用玻棒搅拌时用玻棒搅拌时用玻棒搅拌时, , , ,动作要轻缓且朝一动作要轻缓且朝一动作要轻缓且朝一动作要轻缓且朝一个方向。保证个方向。
19、保证个方向。保证个方向。保证DNADNADNADNA分子的完整性。使用时注意玻璃棒不要碰到烧杯分子的完整性。使用时注意玻璃棒不要碰到烧杯分子的完整性。使用时注意玻璃棒不要碰到烧杯分子的完整性。使用时注意玻璃棒不要碰到烧杯底。底。底。底。鉴定鉴定鉴定鉴定DNADNADNADNA时需沸水浴加热。时需沸水浴加热。时需沸水浴加热。时需沸水浴加热。二苯胺试剂要现配现用二苯胺试剂要现配现用二苯胺试剂要现配现用二苯胺试剂要现配现用, , , ,否则会影响鉴定的效果否则会影响鉴定的效果否则会影响鉴定的效果否则会影响鉴定的效果. . . .二苯胺是一种有二苯胺是一种有二苯胺是一种有二苯胺是一种有毒性的试剂毒性的
20、试剂毒性的试剂毒性的试剂, , , ,使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位. . . . 盛放鸡血细胞的容器最好是塑料容器（鸡血细胞破碎后释放的盛放鸡血细胞的容器最好是塑料容器（鸡血细胞破碎后释放的盛放鸡血细胞的容器最好是塑料容器（鸡血细胞破碎后释放的盛放鸡血细胞的容器最好是塑料容器（鸡血细胞破碎后释放的DNADNADNADNA，容易被玻璃容器吸附，造成提取过程中，容易被玻璃容器吸附，造成提取过程中，容易被玻璃容器吸附，造成提取过程中，容易被玻璃容
21、器吸附，造成提取过程中DNADNADNADNA的损失）的损失）的损失）的损失） 11第11页/共30页第十一页，共31页。 DNA DNA的直径约为的直径约为2010-10 m2010-10 m，实验中出现的丝状物的，实验中出现的丝状物的粗细是否粗细是否(sh fu)(sh fu)表示表示1 1个个DNADNA分子直径的大小？分子直径的大小？答：答： DNA DNA分子直径只有分子直径只有2 nm2 nm。丝状物是多个。丝状物是多个(du )DNA(du )DNA聚在一起形成的。聚在一起形成的。 12第12页/共30页第十二页，共31页。小结(xioji):生物体内有机物与化学试剂的特定颜色反
22、应试剂名称试剂名称鉴定物质鉴定物质颜色反应颜色反应温度条件温度条件还原性糖还原性糖如葡萄糖如葡萄糖脂脂 肪肪蛋白质蛋白质DNADNA淀淀 粉粉 砖红色砖红色(hngs)沉沉淀淀蓝色蓝色橘黄色橘黄色红色红色(hngs)紫色紫色蓝紫色蓝紫色加热加热加热加热斐林试剂斐林试剂班氏试剂班氏试剂苏丹苏丹IIIIII苏丹苏丹IVIV双缩脲试剂双缩脲试剂二苯胺试剂二苯胺试剂碘液碘液13第13页/共30页第十三页，共31页。植物细胞植物细胞(xbo)(xbo)需要先用洗涤剂（洗发香波、沐浴需要先用洗涤剂（洗发香波、沐浴液、洗洁精等）溶解细胞液、洗洁精等）溶解细胞(xbo)(xbo)膜。膜。洗涤剂可以瓦解洗涤剂可
23、以瓦解(wji)(wji)细胞膜的细胞膜的原因是：洗涤液中含有十二烷基原因是：洗涤液中含有十二烷基硫酸钠和碱，它们可使细胞膜破硫酸钠和碱，它们可使细胞膜破裂，蛋白质变性，使蛋白质与裂，蛋白质变性，使蛋白质与DNADNA分离开来。利于分离开来。利于DNADNA的释放。的释放。动物细胞膜是不用试剂动物细胞膜是不用试剂(shj)(shj)（洗涤剂）破坏的，因为动物细（洗涤剂）破坏的，因为动物细胞膜外面没有细胞壁的保护，放胞膜外面没有细胞壁的保护，放在清水中自然的就会吸水而胀破，在清水中自然的就会吸水而胀破，释放出其中的释放出其中的DNADNA等物质。等物质。 4 4、植物：新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。植
24、物：新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。14第14页/共30页第十四页，共31页。方法方法(fngf)(fngf)步骤步骤1 1、将、将30g30g香蕉或菜花香蕉或菜花(cihu)(cihu)切碎，放入研钵中。切碎，放入研钵中。向研钵中加入向研钵中加入2g2g氯化钠，研磨直至成半流体状。氯化钠，研磨直至成半流体状。3 3、将混合液用两层纱布过滤，向滤液中加入、将混合液用两层纱布过滤，向滤液中加入(jir)(jir)预冷的预冷的10ml10ml乙醇溶液，静置，可产生絮乙醇溶液，静置，可产生絮状的状的DNADNA。4 4、取两支试管，分别加入、取两支试管，分别加入5ml5ml生理生理盐水，将盐水，将DNADN
25、A挑至其中一支试管中，挑至其中一支试管中，轻轻搅拌使其溶解。轻轻搅拌使其溶解。有利于DNADNA的溶解2 2、向研钵中加入、向研钵中加入10ml10ml蒸馏水或凉开水，搅拌。蒸馏水或凉开水，搅拌。然后加入然后加入10ml10ml洗涤剂洗涤剂，轻轻搅拌。，轻轻搅拌。能溶解细胞膜，有利于能溶解细胞膜，有利于DNADNA的释放；DNADNADNADNA析出，除去溶于酒精的蛋白质析出，除去溶于酒精的蛋白质析出，除去溶于酒精的蛋白质析出，除去溶于酒精的蛋白质15第15页/共30页第十五页，共31页。20072007年高考生物试题年高考生物试题: : 在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因，该对提高农作物的抗寒
26、能力有较好的应用价值，在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因，该对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值，该基因可以从这些鱼的该基因可以从这些鱼的DNADNA中扩增得到。试述在提取和纯化中扩增得到。试述在提取和纯化(chn hu)DNA(chn hu)DNA时影响提纯时影响提纯效果的因素及其依据。（列举两点）效果的因素及其依据。（列举两点） 选择选择NaCl溶液的合适浓度，利用溶液的合适浓度，利用DNA和其它杂质在不同和其它杂质在不同NaCl溶液中溶解溶液中溶解 度不同的特性，达到分离目的；度不同的特性，达到分离目的；加人一定量酒精，使部分加人一定量酒精，使部分(b fen)蛋白质杂质溶解于酒精，蛋白
27、质杂质溶解于酒精， 与与DNA分离；分离；加人蛋白酶，除去蛋白质杂质的干扰；加人蛋白酶，除去蛋白质杂质的干扰；控制控制DNA提取的温度，使大多数蛋白质杂质变性。提取的温度，使大多数蛋白质杂质变性。16第16页/共30页第十六页，共31页。1.如果用棉花植株作为实验材料做DNA的粗提取与鉴定实验，请你说出可能用到的二种化学试剂名称(mngchng)，并说出这种试剂在该实验中的用途。（4分） 氯化钠溶液：不同浓度的氯化钠溶液：不同浓度的NaCl溶液，能使溶液，能使DNA溶解或析溶解或析 出，从而起到提取出，从而起到提取DNA的作用；的作用； 95%乙醇：乙醇：DNA不溶于酒精，可以用于提取出含杂质
28、较少的不溶于酒精，可以用于提取出含杂质较少的DNA；二苯胺：作为鉴定二苯胺：作为鉴定(jindng)DNA的试剂；的试剂；洗涤剂：能溶解细胞膜，有利于细胞内洗涤剂：能溶解细胞膜，有利于细胞内DNA的释放（答出每种的释放（答出每种试剂的名称和用途得试剂的名称和用途得2分）。分）。17第17页/共30页第十七页，共31页。2 2：下列图示中能反映：下列图示中能反映(fnyng)DNA(fnyng)DNA溶解度与溶解度与NaClNaCl溶液浓度溶液浓度(mol/L)(mol/L)之间的关系的是（之间的关系的是（ ）C C0.140.14DNADNA溶溶解解度度0.140.140.140.140.14
29、0.14DNADNA溶溶解解度度DNADNA溶溶解解度度DNADNA溶溶解解度度A AB BC CD DNaClNaCl浓度浓度NaClNaCl浓度浓度NaClNaCl浓度浓度NaClNaCl浓度浓度18第18页/共30页第十八页，共31页。C0.14DNA析析出出量量0.140.140.14DNA析析出出量量DNA析析出出量量DNA析析出出量量ABDNaCl浓度浓度NaCl浓度浓度NaCl浓度浓度NaCl浓度浓度3：下列图示中能反映：下列图示中能反映DNA析出量与析出量与NaCl溶液浓度溶液浓度(mol/L)之间的关系的是之间的关系的是 （ ）B溶解度与析出量的关系(gun x)是相反19第
30、19页/共30页第十九页，共31页。4.4.江苏有一道凉菜江苏有一道凉菜白斩鸡，鸡肉嫩而不韧、味美鲜香。白斩鸡，鸡肉嫩而不韧、味美鲜香。其加工过程中添加了从木瓜中提取的酶制成的其加工过程中添加了从木瓜中提取的酶制成的“嫩肉粉。嫩肉粉。”下列有关嫩肉粉的叙述中，正确的是下列有关嫩肉粉的叙述中，正确的是( () )A A“嫩肉粉嫩肉粉”可能是通过催化细胞间的纤维素水解而实现可能是通过催化细胞间的纤维素水解而实现“嫩肉嫩肉”的的B B与高温蒸煮相比，与高温蒸煮相比，“嫩肉粉嫩肉粉”是通过降低是通过降低(jingd)(jingd)反应反应活化能而实现活化能而实现“嫩肉嫩肉”的的C C“嫩肉粉嫩肉粉”应
31、在蒸煮鸡肉时加入，才能实现应在蒸煮鸡肉时加入，才能实现“嫩肉嫩肉”D D“嫩肉粉嫩肉粉”是一种化工产品，不利于人体健康，实际应是一种化工产品，不利于人体健康，实际应用中能少则少、能无则无用中能少则少、能无则无B20第20页/共30页第二十页，共31页。5.5.（0909江苏四市）下列江苏四市）下列(xili)(xili)操作可以达到目的的选项是操作可以达到目的的选项是选项选项 操作操作 目的目的A A溶解海藻酸钠时用大火加热溶解海藻酸钠时用大火加热 海藻酸钠可以快速溶解海藻酸钠可以快速溶解 B B将装有蛋白质粗制品的透析袋将装有蛋白质粗制品的透析袋（玻璃纸制成）放入透析液中（玻璃纸制成）放入透
32、析液中 蛋白质与其他小分子化蛋白质与其他小分子化合物分离合物分离 C C在在DNADNA粗提取实验中，鸡血中加粗提取实验中，鸡血中加入蒸馏水入蒸馏水 稀释血液，防止凝固稀释血液，防止凝固 D D洋葱根尖解离后漂洗洋葱根尖解离后漂洗 使细胞分散，利于观察使细胞分散，利于观察 B微火加热并不断搅拌，其目的微火加热并不断搅拌，其目的(md)是防止海藻酸钠焦煳是防止海藻酸钠焦煳促使促使(csh)血细胞破裂血细胞破裂防止根尖过分解离，对染色造成影响。防止根尖过分解离，对染色造成影响。因玻璃纸是半透膜，所以将装有蛋白质粗制品的透析袋（玻璃纸制成）因玻璃纸是半透膜，所以将装有蛋白质粗制品的透析袋（玻璃纸制成
33、）放入透析液中，可以将蛋白质与其他小分子化合物分离。放入透析液中，可以将蛋白质与其他小分子化合物分离。21第21页/共30页第二十一页，共31页。6.6.在在“DNA“DNA粗提取与鉴定粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的实验中，将含有一定杂质的DNADNA丝状物丝状物分别放入体积为分别放入体积为2mL2mL的四种溶液的四种溶液(rngy)(rngy)中，经搅拌后过滤，获中，经搅拌后过滤，获得得4 4种滤液，含种滤液，含DNADNA较少的是较少的是A A滤液滤液E BE B滤液滤液F F C C滤液滤液G DG D滤液滤液H H 1 蒸馏水中蒸馏水中搅拌后过滤搅拌后过滤滤液滤液E 2 2mo
34、lL的的NaCl溶液溶液搅拌后过滤搅拌后过滤滤液滤液F 3 O.14molL的的NaCl溶液中溶液中搅拌后过滤搅拌后过滤滤液滤液G 4 冷却的冷却的95的酒精溶液中的酒精溶液中搅拌后过滤搅拌后过滤滤液滤液HCD7 7、欲使溶有、欲使溶有DNADNA的的2mol/L2mol/L的的NaClNaCl溶液中的溶液中的DNADNA析出，最有效的办析出，最有效的办法法(bnf)(bnf)是是A A 加蒸馏水加蒸馏水 B B 加矿泉水加矿泉水 C C 加清水加清水 D D 加生理盐水加生理盐水22第22页/共30页第二十二页，共31页。8、与析出、与析出DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是（多选）粘稠物有关
35、的叙述，不正确的是（多选）A 操作时缓慢滴加蒸馏水，降低操作时缓慢滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度的溶解度B 操作时用玻棒轻缓搅拌以保证操作时用玻棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整分子的完整C 加蒸馏水可以同时降低加蒸馏水可以同时降低DNA和蛋白质的溶解度和蛋白质的溶解度D 当丝状粘稠物不再当丝状粘稠物不再(b zi)增加时，增加时，NaCl溶液的浓度可以认为溶液的浓度可以认为是是0.14mol/LE.改变改变NaCl溶液的浓度只能使溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出溶解而不能使其析出9、下列与DNA粗提取有关描述正确的是 （ ） A、 DNA能够溶解在一定浓度的NaCl溶液中 B、 DNA
36、能够溶解在质量分数95%冷酒精(jijng)中C、 DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最高 D、 DNA只能溶解在2mol/L的NaCl溶液中A23第23页/共30页第二十三页，共31页。10.10.下列操作中，对下列操作中，对DNADNA的提取量影响较小的是的提取量影响较小的是 A.A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNADNA等核物质等核物质B.B.搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C.C.在析出在析出DNADNA黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中黏黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中黏稠物不再增多
37、稠物不再增多D.D.在用酒精沉淀在用酒精沉淀DNADNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱放入冰箱(bngxing)(bngxing)中冷却中冷却解析：在B所述的操作中，可以保证DNA分子的完整性，但不影响提取量。除了A、C、D 及在DNA的溶解(rngji)和再溶解(rngji)时，要充分搅拌影响DNA的提取量外，使用塑料器皿也可以减少DNA在操作中的损失。因为塑料制品的性质相对比较温和,所以比金属等其他的制品好一些.对DNA的损伤也就小一些因为DNA容易与玻璃制品粘连 答案(d n)：B 24第24页/共30页第二十四页，共31页。11.11.（多选）
38、下表是关于（多选）下表是关于DNADNA粗提取与鉴定实验中所使用粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作的材料、操作(cozu)(cozu)及其作用的表述。正确的是（及其作用的表述。正确的是（ ）试剂试剂操作操作作用作用A A柠檬酸钠溶液柠檬酸钠溶液与鸡血混合与鸡血混合防止血液凝固防止血液凝固B B蒸馏水蒸馏水与鸡血细胞混合与鸡血细胞混合保持细胞形状保持细胞形状C C蒸馏水蒸馏水加入到溶解有加入到溶解有DNADNA的的NaClNaCl中中析出析出DNADNA丝状物丝状物D D冷却的酒精冷却的酒精加入到过滤后加入到过滤后DNADNA的的NaClNaCl中中产生特定的颜色反应产生特定的颜色反应AC25
39、第25页/共30页第二十五页，共31页。12.12.下列关于下列关于DNADNA粗提取与鉴定的说法正确的是粗提取与鉴定的说法正确的是( ) ( ) A A、氯化钠的浓度、氯化钠的浓度(nngd)(nngd)越低，对越低，对DNADNA的溶解度越大的溶解度越大B B、人血也可代替鸡血进行实验、人血也可代替鸡血进行实验C C、柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂、柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂D D、 DNA DNA不能溶于酒精尤其是冷酒精不能溶于酒精尤其是冷酒精D防止(fngzh)凝血13.蛙的红细胞、鸡的红细胞都有细胞核和各种( zhn)细胞器，哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和各种( zhn
40、)细胞器，它们的呼吸方式是什么?蛙的红细胞、鸡的红细胞都是正常的细胞蛙的红细胞、鸡的红细胞都是正常的细胞, ,进行进行的是的是有氧呼吸有氧呼吸. .哺乳动物成熟的红细胞哺乳动物成熟的红细胞是进行无氧呼吸的。是进行无氧呼吸的。26第26页/共30页第二十六页，共31页。16.16.实验中实验中NaClNaCl的物质的物质(wzh)(wzh)的量浓度为的量浓度为2 mol2 molL L和和0.14 mol0.14 molL L对对DNADNA有何影响有何影响? ?15.15.在在DNADNA的粗提取实验过程中，两次向烧杯中加的粗提取实验过程中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是入蒸馏水的作用是( )
41、( )。A.A.稀释血液、冲洗样品稀释血液、冲洗样品B.B.使血细胞破裂、降低使血细胞破裂、降低NaClNaCl浓度使浓度使DNADNA析出析出C.C.使血细胞破裂、增大使血细胞破裂、增大DNADNA溶解溶解(rngji)(rngji)量量 D.D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNADNAB答：前者是溶解答：前者是溶解(rngji)DNA(rngji)DNA，后者是使，后者是使DNADNA析出析出17.DNA17.DNA遇二苯胺遇二苯胺( (沸水浴沸水浴) )会染成会染成( ) ( ) A. A.砖红色砖红色 B.B.橘黄色橘黄色 C.C.紫色紫色 D.D.蓝色
42、蓝色D27第27页/共30页第二十七页，共31页。 18.DNA18.DNA在在 NaClNaCl溶溶液液中中的的溶溶解解度度有有两两重重性性，随随着着 NaClNaCl溶液浓度的变化而变化。溶液浓度的变化而变化。(1)(1)请请在在下下列列浓浓度度的的 NaClNaCl溶溶液液中中，选选出出能能使使DNADNA析析出出最最彻彻底底的的一一种种(y (y zhn)zhn)和和溶溶解解度度最最高高的的一一种种(y (y zhn)_zhn)_。 A A0.14 mol/L0.14 mol/LB B2 mol/L2 mol/L C C0.15 mol/L 0.15 mol/L D D0.3 mol/
43、L0.3 mol/L(2) (2) DNADNA不不溶溶于于酒酒精精，但但细细胞胞中中的的某某些些物物质质却却可可以以溶溶于于酒酒精精溶溶液液，利利用用这这一一原原理理可可以以_，可可以以推推测测溶溶于于酒酒精精中中的的可可能能有有_ _ 。 A A、B B去除去除(q ch)(q ch)杂质杂质某些盐类、蛋白质、糖类或其某些盐类、蛋白质、糖类或其他他(qt)(qt)大分子物质大分子物质28第28页/共30页第二十八页，共31页。1919(2011(2011江苏卷，江苏卷，19)19)在利用鸡血进行在利用鸡血进行“DNA“DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定” 的实验中，相关叙述正确的是的实验中
44、，相关叙述正确的是 ( () )A A用蒸馏水将用蒸馏水将NaClNaCl溶液浓度调至溶液浓度调至0.14 mol/L0.14 mol/L，滤去析出物，滤去析出物B B调节调节NaClNaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除(q ch)(q ch)部分杂质部分杂质C C将丝状物溶解在将丝状物溶解在2 mol/L NaCl2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D D用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同解析用蒸馏水将解析用蒸馏水将解析用蒸馏水将解析用蒸馏水将
45、NaClNaClNaClNaCl溶液浓度调至溶液浓度调至溶液浓度调至溶液浓度调至0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L时，滤取析出时，滤取析出时，滤取析出时，滤取析出物；将丝状物溶解在物；将丝状物溶解在物；将丝状物溶解在物；将丝状物溶解在2 mol/L2 mol/L2 mol/L2 mol/L的的的的NaClNaClNaClNaCl溶液中，加入二苯胺试剂，溶液中，加入二苯胺试剂，溶液中，加入二苯胺试剂，溶液中，加入二苯胺试剂，需沸水浴加热几分钟，才呈蓝色；用菜花替代鸡血为实验材料，需沸水浴加热几分钟，才呈蓝色；用菜花替代鸡血为实验材料，需沸水浴加热几分
46、钟，才呈蓝色；用菜花替代鸡血为实验材料，需沸水浴加热几分钟，才呈蓝色；用菜花替代鸡血为实验材料，需要对材料的细胞壁进行处理。调节需要对材料的细胞壁进行处理。调节需要对材料的细胞壁进行处理。调节需要对材料的细胞壁进行处理。调节NaClNaClNaClNaCl溶液浓度改变不同物溶液浓度改变不同物溶液浓度改变不同物溶液浓度改变不同物质质质质(wzh)(wzh)(wzh)(wzh)在其中的溶解度，加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可在其中的溶解度，加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可在其中的溶解度，加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可在其中的溶解度，加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可以去除部分杂质，故以去除部分杂质，故以去除部分杂
47、质，故以去除部分杂质，故B B B B正确。正确。正确。正确。B B29第29页/共30页第二十九页，共31页。感谢您的欣赏(xnshng)！第30页/共30页第三十页，共31页。内容(nirng)总结DNA的粗提取与鉴定。大多数蛋白质不能忍受6080的高温，而DNA在80以上才会变性。用多层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布上。B、将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴一滴EB溶液染色。4.江苏有一道凉菜白斩鸡，鸡肉嫩而不韧、味美鲜香。E.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解(rngji)而不能使其析出。D、 DNA不能溶于酒精尤其是冷酒精。B.使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出。感谢您的欣赏第三十一页，共31页。
