《病原生物实验课：2016厌氧、需氧菌》由会员分享，可在线阅读，更多相关《病原生物实验课：2016厌氧、需氧菌（30页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 第十一次实验第十一次实验 厌氧性细菌厌氧性细菌 需氧芽孢杆菌需氧芽孢杆菌 白喉杆菌白喉杆菌 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 学习要求学习要求1、了解厌氧芽孢梭菌的培养特点及常用的厌氧培养、了解厌氧芽孢梭菌的培养特点及常用的厌氧培养方法。熟悉破伤风梭菌、产气荚膜梭菌的形态特方法。熟悉破伤风梭菌、产气荚膜梭菌的形态特点及芽孢的区别。点及芽孢的区别。2、了解致病性和非致病性需氧芽孢杆菌的某些生物、了解致病性和非致病性需氧芽孢杆菌的某些生物学特性。学特性。3、掌握白喉杆菌的、掌握白喉杆菌的镜下形态及镜下形态及培养物。掌握培养物。掌握Neisser染色方法染色方法4、掌握结核杆菌的镜下形态。熟悉结核杆菌的培
2、养、掌握结核杆菌的镜下形态。熟悉结核杆菌的培养物，掌握抗酸染色法物，掌握抗酸染色法. 实验内容实验内容1. 厌氧细菌的培养方法厌氧细菌的培养方法录像录像2.厌氧培养物厌氧培养物示教示教（1）破伤风杆菌、产气荚膜杆菌的庖肉）破伤风杆菌、产气荚膜杆菌的庖肉培养物培养物（2）产气荚膜杆）产气荚膜杆菌的菌的汹涌发酵试验汹涌发酵试验3.厌氧厌氧菌菌(破伤风梭菌破伤风梭菌 产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、肉毒梭菌)形态观察形态观察(发片发片)4.破伤风外毒素毒性作用破伤风外毒素毒性作用 毒性毒性试验试验示教示教5.需氧芽孢杆菌需氧芽孢杆菌(炭疽炭疽杆菌杆菌、枯草杆菌、枯草杆菌)培养物培养物形态（形态（
3、示教示教）6.白喉杆菌白喉杆菌的菌落形态（示教）的菌落形态（示教） 吕氏血清斜面、亚碲酸钾培养基吕氏血清斜面、亚碲酸钾培养基7. Neisser染色法染色法结果结果（每人做）（每人做）8.结核分枝杆菌结核分枝杆菌的的抗酸染色抗酸染色（每人做）录像（每人做）录像1 2 3 破伤风梭菌肉毒梭菌 光镜下炭疽杆菌菌落 炭疽杆菌炭疽杆菌 炭疽杆菌青霉素串珠试验菌体呈现串珠状炭疽杆菌青霉素串珠试验菌体呈现串珠状枯草杆菌镜下形态枯草杆菌菌落庖肉培养基培养法庖肉培养基培养法由于肉渣培养基含不饱和脂肪酸，氧化时能消耗由于肉渣培养基含不饱和脂肪酸，氧化时能消耗由于肉渣培养基含不饱和脂肪酸，氧化时能消耗由于肉渣培养
4、基含不饱和脂肪酸，氧化时能消耗溶解于培养液中的氧气，且组织中所含的还原性溶解于培养液中的氧气，且组织中所含的还原性溶解于培养液中的氧气，且组织中所含的还原性溶解于培养液中的氧气，且组织中所含的还原性化合物为谷胱甘肽（含化合物为谷胱甘肽（含化合物为谷胱甘肽（含化合物为谷胱甘肽（含SHSH基）可使培养基的氧基）可使培养基的氧基）可使培养基的氧基）可使培养基的氧化还原电势下降，造成厌氧环境，故适于培养厌化还原电势下降，造成厌氧环境，故适于培养厌化还原电势下降，造成厌氧环境，故适于培养厌化还原电势下降，造成厌氧环境，故适于培养厌氧菌。氧菌。氧菌。氧菌。焦性没食子酸法焦性没食子酸法将将将将厌氧菌接种血平
5、板。用方形的消毒玻板一块，厌氧菌接种血平板。用方形的消毒玻板一块，厌氧菌接种血平板。用方形的消毒玻板一块，厌氧菌接种血平板。用方形的消毒玻板一块，中央放焦性没食子酸中央放焦性没食子酸中央放焦性没食子酸中央放焦性没食子酸0.2g0.2g，覆盖纱布或棉花一覆盖纱布或棉花一覆盖纱布或棉花一覆盖纱布或棉花一小块，当加小块，当加小块，当加小块，当加10%NaOH 0.5ml10%NaOH 0.5ml后，迅速将培后，迅速将培后，迅速将培后，迅速将培养皿倒置在玻板上，周围用溶化的石蜡密封，养皿倒置在玻板上，周围用溶化的石蜡密封，养皿倒置在玻板上，周围用溶化的石蜡密封，养皿倒置在玻板上，周围用溶化的石蜡密封，置置置置3737培养培养培养培养2448h2448h后，取出观察。后，取出观察。后，取出观察。后，取出观察。庖肉培养基培养法庖肉培养基培养法
