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1、烟草烟草据据据据WTOWTO调查：调查：调查：调查：20042004年全世年全世年全世年全世界因狂犬病致死人数约界因狂犬病致死人数约界因狂犬病致死人数约界因狂犬病致死人数约5.55.5万万万万人人人人中国卫生部通报：中国卫生部通报：中国卫生部通报：中国卫生部通报：20042004年年年年月，狂犬病列法定报告传染月，狂犬病列法定报告传染月，狂犬病列法定报告传染月，狂犬病列法定报告传染病死亡数之首。病死亡数之首。病死亡数之首。病死亡数之首。发病死亡率近发病死亡率近发病死亡率近发病死亡率近100%100% 能产生狂犬病抗体能产生狂犬病抗体蛋白的转基因蛋白的转基因每每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取
2、猪或牛的胰腺中仅可提取45g。1979年，美国将年，美国将人的胰岛素基因人的胰岛素基因重组到重组到大肠杆菌大肠杆菌内，实现了细菌生产胰岛素，大大降低了生产成本。内，实现了细菌生产胰岛素，大大降低了生产成本。治疗糖尿病特效药治疗糖尿病特效药治疗糖尿病特效药治疗糖尿病特效药 据据WTO调查：调查： 20052005年全世界约有糖尿病患者年全世界约有糖尿病患者年全世界约有糖尿病患者年全世界约有糖尿病患者1.81.8亿亿亿亿人，我国约人，我国约人，我国约人，我国约60006000万。万。胰岛素胰岛素胰岛素胰岛素思考思考：转基因技术转基因技术转基因技术转基因技术实现了实现了实现了实现了一种生物一种生物一
3、种生物一种生物的某些的某些的某些的某些性状性状性状性状在在在在另一种生物另一种生物另一种生物另一种生物中中中中表达表达表达表达。这些性状的表达与我们学这些性状的表达与我们学这些性状的表达与我们学这些性状的表达与我们学过的基因的什么过程有关？过的基因的什么过程有关？过的基因的什么过程有关？过的基因的什么过程有关？密码子在生物界是的！密码子在生物界是的！密码子在生物界是的！密码子在生物界是的！DNA(DNA(基因基因基因基因) )mRNA mRNA 蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质( (性状性状性状性状) )转录转录转录转录翻译翻译翻译翻译通用通用问题探讨：问题探讨：苏苏云金杆菌含有一种可云金杆菌含有一种
4、可云金杆菌含有一种可云金杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。以合成毒蛋白的基因。以合成毒蛋白的基因。以合成毒蛋白的基因。让细让细菌的毒蛋白基因在菌的毒蛋白基因在菌的毒蛋白基因在菌的毒蛋白基因在棉花棉花棉花棉花细细胞中表达，可培育出胞中表达，可培育出胞中表达，可培育出胞中表达，可培育出抵抗棉抵抗棉抵抗棉抵抗棉铃铃虫害的抗虫棉。虫害的抗虫棉。虫害的抗虫棉。虫害的抗虫棉。想一想想一想想一想想一想需要做哪些关需要做哪些关需要做哪些关需要做哪些关键键工作？工作？工作？工作？苏云金杆菌苏云金杆菌毒蛋白毒蛋白毒蛋白毒蛋白普通棉花抗虫棉普通棉花抗虫棉普通棉花抗虫棉普通棉花抗虫棉一一、“分子手术刀分子手术刀”二二
5、、“分子缝合针分子缝合针”三三、“分子运输车分子运输车”转基因转基因思考：思考：自然界是否存在一种生物的自然界是否存在一种生物的自然界是否存在一种生物的自然界是否存在一种生物的DNADNA进进入另一生物的情况？入另一生物的情况？入另一生物的情况？入另一生物的情况？动动物容易物容易物容易物容易让让外来外来外来外来DNADNA侵入自身而得以侵入自身而得以侵入自身而得以侵入自身而得以遗传吗遗传吗？为为什么？植物呢？什么？植物呢？什么？植物呢？什么？植物呢？单细单细胞生物，容易遭到入侵胞生物，容易遭到入侵胞生物，容易遭到入侵胞生物，容易遭到入侵吗吗？单细单细胞生物并没有在胞生物并没有在胞生物并没有在胞
6、生物并没有在进进化中化中化中化中灭绝灭绝，而是，而是，而是，而是产产生了一些特殊生了一些特殊生了一些特殊生了一些特殊的的的的酶酶来防范。来防范。来防范。来防范。这这些些些些酶应该酶应该有什么特点？有什么特点？有什么特点？有什么特点？可能酶能识别外来侵入的可能酶能识别外来侵入的可能酶能识别外来侵入的可能酶能识别外来侵入的DNADNA并将其分解，而并将其分解，而并将其分解，而并将其分解，而对自身的对自身的对自身的对自身的DNADNA不能起作用。不能起作用。不能起作用。不能起作用。“分子手术刀分子手术刀” 限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶一、限制性核酸内切酶一、限制性核酸内切酶“分子手术刀分子手术刀
7、”主要来源：主要来源：主要来源：主要来源：种类与命名：种类与命名：种类与命名：种类与命名：作用特点：作用特点：作用特点：作用特点：作用结果：作用结果：作用结果：作用结果：原核生物原核生物原核生物原核生物一、限制性核酸内切酶一、限制性核酸内切酶“分子手术刀分子手术刀”主要来源：主要来源：主要来源：主要来源：种类与命名：种类与命名：种类与命名：种类与命名：作用特点：作用特点：作用特点：作用特点：作用结果：作用结果：作用结果：作用结果：识别识别识别识别特定核苷酸序列特定核苷酸序列特定核苷酸序列特定核苷酸序列原核生物原核生物原核生物原核生物产生黏性末端或平末端产生黏性末端或平末端产生黏性末端或平末端产
8、生黏性末端或平末端Go onGo on, ,切断切断切断切断磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键几种最常用的限制酶及其识别和作用位点几种最常用的限制酶及其识别和作用位点几种最常用的限制酶及其识别和作用位点几种最常用的限制酶及其识别和作用位点EcoREcoRSamSamHindHindBamHBamHGAATTCGAATTCCTTAAGCTTAAGCCCGGGCCCGGGGGGCCCGGGCCCAAGCTTAAGCTTTTCGAATTCGAAGGATCCGGATCCCCTAGGCCTAGG种类与命名：种类与命名： 现现在已在已在已在已经经从从从从约约300300种微生物中分离出了种微生物中分
9、离出了种微生物中分离出了种微生物中分离出了约约40004000种限制性内切种限制性内切种限制性内切种限制性内切酶酶( (限制限制限制限制酶酶) )。E EcocoR RS Smama粘质沙雷氏杆菌粘质沙雷氏杆菌（Serratia marcesens）大肠杆菌大肠杆菌大肠杆菌大肠杆菌（EscherichiaEscherichia coli coli R R）练习：流感嗜血杆菌的练习：流感嗜血杆菌的d d菌株菌株( ( Haemophilus influenzae d )Haemophilus influenzae d )中先后分离到中先后分离到3 3种限制酶，则分种限制酶，则分别命名为别命名为:
10、 :Hind、Hind和和HindSma平末端平末端平末端平末端平末端平末端平末端平末端EcoR黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端EcoR黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端Go backGo back重复演示重复演示重复演示重复演示GAATTCGAATTCGAATTCGAATTCCTTAAGCTTAAGCTTAAGCTTAAGGAATTCGAATTCGAATTCGAATTCCTTAAGCTTAAGCTTAAGCTTAAGEcoREcoRG G G GAATTCAATTCAATTCAATTCCTTAACTTAACTTAACTTAAG G G GG G G GAATTCAATTCAATTCAATTCC
11、TTAACTTAACTTAACTTAAG G G G不同来源的不同来源的不同来源的不同来源的DNADNA片段混合片段混合片段混合片段混合将不同种来源的将不同种来源的将不同种来源的将不同种来源的DNADNA片段连接起来片段连接起来片段连接起来片段连接起来生物生物生物生物A A基因片段基因片段基因片段基因片段生物生物生物生物B B基因片段基因片段基因片段基因片段G G G GAATTCAATTCAATTCAATTCCTTAACTTAACTTAACTTAAG G G GG G G GAATTCAATTCAATTCAATTCCTTAACTTAACTTAACTTAAG G G G酶切酶切酶切酶切二、二、
12、“分子缝合针分子缝合针” DNA DNA连接酶连接酶分类：分类： E Ecoli DNAcoli DNA连接酶连接酶 T T4 4 DNADNA连接酶连接酶作用：作用：P P5 5 可把黏性末端之间的可把黏性末端之间的缝隙缝隙“缝合缝合”起来，起来，Ecoli DNAEcoli DNA连接酶或连接酶或连接酶或连接酶或T T4 4DNADNA连接酶连接酶连接酶连接酶即即即即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键T4 DNA DNA连接酶连接酶连接酶连接酶还可把
13、还可把平末端之间的缝隙平末端之间的缝隙“缝合缝合”起来，但效率较低起来，但效率较低DNA连接酶与连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？聚合酶是一回事吗？为什么？为什么？ 不是一回事。相同点：形成磷酸二酯键不是一回事。相同点：形成磷酸二酯键但是：但是：1）DNA聚合酶只能将单个核苷酸加聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键；而到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个连接酶是在两个DNA片段之间形成磷片段之间形成磷酸二酯键酸二酯键2） DNA聚合酶需要以一条聚合酶需要以一条DNA链为模板；链为模板；而而DNA连接酶不需要模板。连接酶不需要模板。三、三、“分子运输车分
14、子运输车” 基因进入受体细胞的载基因进入受体细胞的载体体载体需要的条件：载体需要的条件：有有1 1多个限制酶切点多个限制酶切点对受体细胞无害对受体细胞无害导入基因导入基因能在受体细胞中复制、表达能在受体细胞中复制、表达有某些标记基因，便于筛选有某些标记基因，便于筛选常用运载体：常用运载体： 细菌的质粒细菌的质粒 噬菌体或某些动植物病毒噬菌体或某些动植物病毒假如目的基因导入受体细胞后不能复制或不能转假如目的基因导入受体细胞后不能复制或不能转假如目的基因导入受体细胞后不能复制或不能转假如目的基因导入受体细胞后不能复制或不能转录，转基因生物能有预想的效果吗？录，转基因生物能有预想的效果吗？录，转基因
15、生物能有预想的效果吗？录，转基因生物能有预想的效果吗？作为分子运输车作为分子运输车作为分子运输车作为分子运输车载体，如果没有切割位点将载体，如果没有切割位点将载体，如果没有切割位点将载体，如果没有切割位点将会怎样？会怎样？会怎样？会怎样？霍乱菌的质粒多个限制酶切点，你会用它来做分霍乱菌的质粒多个限制酶切点，你会用它来做分霍乱菌的质粒多个限制酶切点，你会用它来做分霍乱菌的质粒多个限制酶切点，你会用它来做分子运输车吗？子运输车吗？子运输车吗？子运输车吗？目的基因有没有进入受体细胞，如何去发现？目的基因有没有进入受体细胞，如何去发现？目的基因有没有进入受体细胞，如何去发现？目的基因有没有进入受体细胞，如何去发现？ 最常用的质粒最常用的质粒大肠杆菌的质粒大肠杆菌的质粒试分析其作为载体的优点？试分析其作为载体的优点？试分析其作为载体的优点？试分析其作为载体的优点？2 27 74 48 83 36 61 15 5同学们同学们来学校和回家的路上要注意安全来学校和回家的路上要注意安全同学们同学们来学校和回家的路上要注意安全来学校和回家的路上要注意安全
