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1、口蹄疫诊断和防控技术口蹄疫诊断和防控技术钟映梅钟映梅钟映梅钟映梅黑龙江省动物卫生监督所黑龙江省动物卫生监督所黑龙江省动物卫生监督所黑龙江省动物卫生监督所二二二二OO一一一一OO年六月年六月年六月年六月1 1口蹄疫概况口蹄疫概况n n口蹄疫口蹄疫口蹄疫口蹄疫(FMD)(FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触传染性和可快速远距离传播的动物性、高度接触传染性和可快速远距离传播的动物性、高度接触传染性和可快速远距离传播的动物性、高度接触传染性和可快速远距离传播的动物疫病。疫病。疫病。疫病。n
2、n侵染对象是猪、牛、羊等主要畜种及其它家养和侵染对象是猪、牛、羊等主要畜种及其它家养和侵染对象是猪、牛、羊等主要畜种及其它家养和侵染对象是猪、牛、羊等主要畜种及其它家养和野生偶蹄动物，易感动物多达野生偶蹄动物，易感动物多达野生偶蹄动物，易感动物多达野生偶蹄动物，易感动物多达7070余种。余种。余种。余种。 n n国际动物卫生组织国际动物卫生组织国际动物卫生组织国际动物卫生组织(OIE)(OIE)将将将将FMDFMD列在列在列在列在1515个个个个A A类动物类动物类动物类动物疫病名单之首。疫病名单之首。疫病名单之首。疫病名单之首。n n我国将我国将我国将我国将FMDFMD排在排在排在排在141
3、4个一类动物传染病的第一位个一类动物传染病的第一位个一类动物传染病的第一位个一类动物传染病的第一位 。2 2当前疫情形势当前疫情形势n n国际：韩国连续发生多起口蹄疫疫情，涉国际：韩国连续发生多起口蹄疫疫情，涉及奶牛、羊、猪。日本宫崎县牛场发生口及奶牛、羊、猪。日本宫崎县牛场发生口蹄疫疫情。越南、台湾、香港、缅甸均有蹄疫疫情。越南、台湾、香港、缅甸均有疫情发生。疫情发生。n n国内：全国多个省区发生口蹄疫疫情（国内：全国多个省区发生口蹄疫疫情（18起为缅甸起为缅甸98谱系谱系O型口蹄疫）。型口蹄疫）。3 3疫情发生的基本原因疫情发生的基本原因n n1、对猪的致病力强，传播速度快，群体发病、对猪
4、的致病力强，传播速度快，群体发病率较高。率较高。n n2、检疫监管不到位，使疫情扩大。、检疫监管不到位，使疫情扩大。n n3、防控工作存在薄弱环节。、防控工作存在薄弱环节。n n4、环境条件差，消毒不到位。、环境条件差，消毒不到位。4 4口蹄疫病毒粒子三维结构口蹄疫病毒粒子三维结构口蹄疫病毒口蹄疫病毒口蹄疫病毒口蹄疫病毒XX射线晶体衍射结构图射线晶体衍射结构图射线晶体衍射结构图射线晶体衍射结构图5 56 6临床症状临床症状n n主要是口、鼻、蹄、乳头等部位出现水泡。主要是口、鼻、蹄、乳头等部位出现水泡。发泡初期，牛有流涎症状，猪、羊表现跛发泡初期，牛有流涎症状，猪、羊表现跛行。行。7 78 8
5、9 91010111112121313 羊羊n n羊的潜伏期为羊的潜伏期为28天。天。n n症状轻微，不易被察觉。症状轻微，不易被察觉。n n口腔粘膜口腔粘膜、舌上时有水泡，但较小，有米、舌上时有水泡，但较小，有米粒至豆粒大小。粒至豆粒大小。n n蹄部病变和牛相似，发生水泡时表现跛行。蹄部病变和牛相似，发生水泡时表现跛行。14141515口蹄疫病料采集运送口蹄疫病料采集运送 检验样品：水泡皮（液）、检验样品：水泡皮（液）、检验样品：水泡皮（液）、检验样品：水泡皮（液）、O/PO/P液、血液样品液、血液样品液、血液样品液、血液样品n n水泡皮采集：选采新鲜、成熟、未破裂或刚破不水泡皮采集：选采新
6、鲜、成熟、未破裂或刚破不水泡皮采集：选采新鲜、成熟、未破裂或刚破不水泡皮采集：选采新鲜、成熟、未破裂或刚破不久的水泡皮，陈旧、结痂或腐败变质的残破水泡久的水泡皮，陈旧、结痂或腐败变质的残破水泡久的水泡皮，陈旧、结痂或腐败变质的残破水泡久的水泡皮，陈旧、结痂或腐败变质的残破水泡皮不好用，甚至不能用。皮不好用，甚至不能用。皮不好用，甚至不能用。皮不好用，甚至不能用。n n牛样应采取舌表面的水泡皮，在水泡尚未破溃或牛样应采取舌表面的水泡皮，在水泡尚未破溃或牛样应采取舌表面的水泡皮，在水泡尚未破溃或牛样应采取舌表面的水泡皮，在水泡尚未破溃或刚破溃时，牛的口中少量流涎或不流涎，这是采刚破溃时，牛的口中少
7、量流涎或不流涎，这是采刚破溃时，牛的口中少量流涎或不流涎，这是采刚破溃时，牛的口中少量流涎或不流涎，这是采集病料的最佳时机。集病料的最佳时机。集病料的最佳时机。集病料的最佳时机。 n n猪样应采取蹄叉部、蹄冠部或鼻镜部的水泡皮，猪样应采取蹄叉部、蹄冠部或鼻镜部的水泡皮，猪样应采取蹄叉部、蹄冠部或鼻镜部的水泡皮，猪样应采取蹄叉部、蹄冠部或鼻镜部的水泡皮，不要采取蹄踵部角质化表皮。不要采取蹄踵部角质化表皮。不要采取蹄踵部角质化表皮。不要采取蹄踵部角质化表皮。n n羊的水泡材料较难采集，水泡通常小而分散，需羊的水泡材料较难采集，水泡通常小而分散，需羊的水泡材料较难采集，水泡通常小而分散，需羊的水泡材
8、料较难采集，水泡通常小而分散，需要仔细寻找。要仔细寻找。要仔细寻找。要仔细寻找。 1616n n采取水泡皮时应尽量保持无菌，用消毒剪子剪下采取水泡皮时应尽量保持无菌，用消毒剪子剪下采取水泡皮时应尽量保持无菌，用消毒剪子剪下采取水泡皮时应尽量保持无菌，用消毒剪子剪下水泡皮后，置入无菌小瓶中，加入由等量甘油和水泡皮后，置入无菌小瓶中，加入由等量甘油和水泡皮后，置入无菌小瓶中，加入由等量甘油和水泡皮后，置入无菌小瓶中，加入由等量甘油和0.04mol0.04molL L磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液(PH7.2(PH7.27.6)7.6)配制成的配制成的配制成的配制成的运输液中，可加
9、入适量抗生素。加盖及用胶带封运输液中，可加入适量抗生素。加盖及用胶带封运输液中，可加入适量抗生素。加盖及用胶带封运输液中，可加入适量抗生素。加盖及用胶带封口，帖上标签，口，帖上标签，口，帖上标签，口，帖上标签，-20-20下保存。水泡皮样品每份下保存。水泡皮样品每份下保存。水泡皮样品每份下保存。水泡皮样品每份至少至少至少至少1-2g1-2g。n n水泡液采集：用消毒过的注射器从未破溃水泡中水泡液采集：用消毒过的注射器从未破溃水泡中水泡液采集：用消毒过的注射器从未破溃水泡中水泡液采集：用消毒过的注射器从未破溃水泡中吸出水泡液，水泡液应清亮透明，装入灭菌瓶中，吸出水泡液，水泡液应清亮透明，装入灭菌
10、瓶中，吸出水泡液，水泡液应清亮透明，装入灭菌瓶中，吸出水泡液，水泡液应清亮透明，装入灭菌瓶中，( (可加入适量的抗生素，如青霉素可加入适量的抗生素，如青霉素可加入适量的抗生素，如青霉素可加入适量的抗生素，如青霉素1000IU1000IUmlml，链霉素链霉素链霉素链霉素1mg1mgm1)m1)，加盖后用胶带封口，贴上标签，加盖后用胶带封口，贴上标签，加盖后用胶带封口，贴上标签，加盖后用胶带封口，贴上标签，冷藏保存。冷藏保存。冷藏保存。冷藏保存。1717O/P液的采集液的采集n nO/P液是动物食道液是动物食道/咽部刮取的粘膜样品咽部刮取的粘膜样品。n n用于查明牛、羊等反刍动物感染用于查明牛、
11、羊等反刍动物感染FMD及持及持续带毒状况。续带毒状况。1818n n注意事项注意事项1. 1.采样前禁食采样前禁食12小时（可饮水）。小时（可饮水）。2. 2.食道探杯使用前用食道探杯使用前用2%NaOH溶液浸泡消毒溶液浸泡消毒3-5分钟，再用清水冲洗后使用。分钟，再用清水冲洗后使用。3. 3.采到的样品应立即冷冻保存。采到的样品应立即冷冻保存。1919样品保存液样品保存液在在0.04mol/LPBS缓冲液缓冲液中按每升加中按每升加1%酚红酚红2ml样品保存液样品保存液PH值一定要值一定要在在7.27.6之间。之间。2020采集过程采集过程21212222232324242525O/P液与样品
12、保存液混合后变色液与样品保存液混合后变色2626 血清样品血清样品n n无菌采取动物血液无菌采取动物血液10-15ml，分离血清，分离血清(每头每头动物不少于动物不少于2m1)，分装入两个灭菌的离心，分装入两个灭菌的离心管里。加盖、封口并贴上标签，编号，置管里。加盖、封口并贴上标签，编号，置于于4保存或冻结保存，但不能反复冻融，保存或冻结保存，但不能反复冻融，否则抗体效价下降。包装：与水泡皮水否则抗体效价下降。包装：与水泡皮水泡液样品的方法相同。泡液样品的方法相同。 2727诊断方法及免疫监测诊断方法及免疫监测n n口蹄疫的实验室诊断主要是病原学诊断和口蹄疫的实验室诊断主要是病原学诊断和抗体检
13、测两个方面。抗体检测两个方面。n n病原学检测方法包括病原学检测方法包括：1、补体结合试验、补体结合试验2、RT-PCR试验试验3、反向间接血凝试验、反向间接血凝试验4、间接夹心、间接夹心ELISA2828n n抗体检测方法包括：抗体检测方法包括：1、病毒中和试验、病毒中和试验2、正向间接血凝试验、正向间接血凝试验3、酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验(ELISA)(1)液相阻断液相阻断LB-ELISA：用于检测动物血：用于检测动物血清的抗体清的抗体(2)非结构蛋白抗体间接非结构蛋白抗体间接ELISA：鉴别诊断：鉴别诊断感染动物与注苗动物感染动物与注苗动物4、VIA抗原琼脂扩散试验抗原琼脂扩散试
14、验5、免疫胶体金试验、免疫胶体金试验2929应急响应应急响应n n临时处置临时处置n n在疑似疫情报告同时，对发病场（户）实施隔离、在疑似疫情报告同时，对发病场（户）实施隔离、监控，禁止家畜及畜产品、饲料及有关物品移动，监控，禁止家畜及畜产品、饲料及有关物品移动，进行严格消毒。进行严格消毒。n n对可能存在的传染源，以及在疫情潜伏期和发病对可能存在的传染源，以及在疫情潜伏期和发病期间售出的动物及其产品、对被污染或可疑污染期间售出的动物及其产品、对被污染或可疑污染物物( (包括粪便、垫料、饲料包括粪便、垫料、饲料) )，立即开展追踪调查，立即开展追踪调查，并按规定进行彻底消毒等无害化处理。并按规
15、定进行彻底消毒等无害化处理。n n必要时采取封锁、扑杀等措施。必要时采取封锁、扑杀等措施。3030由疫区边缘向外延伸由疫区边缘向外延伸由疫区边缘向外延伸由疫区边缘向外延伸10101010公里公里公里公里疫区疫区疫区疫区受威胁区受威胁区受威胁区受威胁区疫点向外延伸疫点向外延伸疫点向外延伸疫点向外延伸3 3公里公里公里公里应考虑：天然屏障应考虑：天然屏障（如河流、山脉等）、（如河流、山脉等）、人工屏障（道路、围人工屏障（道路、围栏等）、野生动物栖栏等）、野生动物栖息地存在情况，以及息地存在情况，以及疫情溯源及跟踪调查疫情溯源及跟踪调查结果。结果。欧盟：疫区3公里、受威胁区10公里 危险危险接触场接
16、触场31311.1.扑杀并销毁所有染疫动物，无害化处理；扑杀并销毁所有染疫动物，无害化处理；扑杀并销毁所有染疫动物，无害化处理；扑杀并销毁所有染疫动物，无害化处理；2.2.对排泄物、被污染或可能污染饲料和垫料、污水等按规定进对排泄物、被污染或可能污染饲料和垫料、污水等按规定进对排泄物、被污染或可能污染饲料和垫料、污水等按规定进对排泄物、被污染或可能污染饲料和垫料、污水等按规定进行无害化处理；行无害化处理；行无害化处理；行无害化处理；3.3.被污染的物品、交通工具、用具、圈舍、场地进行严格彻底被污染的物品、交通工具、用具、圈舍、场地进行严格彻底被污染的物品、交通工具、用具、圈舍、场地进行严格彻底
17、被污染的物品、交通工具、用具、圈舍、场地进行严格彻底消毒。出入人员、车辆和相关设施要按规定进行消毒。消毒。出入人员、车辆和相关设施要按规定进行消毒。消毒。出入人员、车辆和相关设施要按规定进行消毒。消毒。出入人员、车辆和相关设施要按规定进行消毒。4.4.禁止易感动物及其产品出入。禁止易感动物及其产品出入。禁止易感动物及其产品出入。禁止易感动物及其产品出入。疫点内应采取的措施疫点内应采取的措施3232疫区内应采取的措施1.1.在疫区周围设立警示标志，在出入疫区的交通路在疫区周围设立警示标志，在出入疫区的交通路在疫区周围设立警示标志，在出入疫区的交通路在疫区周围设立警示标志，在出入疫区的交通路口设置
18、临时动物检疫消毒站，执行监督检查任务，口设置临时动物检疫消毒站，执行监督检查任务，口设置临时动物检疫消毒站，执行监督检查任务，口设置临时动物检疫消毒站，执行监督检查任务，对出入的人员和车辆进行消毒。对出入的人员和车辆进行消毒。对出入的人员和车辆进行消毒。对出入的人员和车辆进行消毒。2.2.扑杀疫区内所有易感动物，并按国家规定标准进扑杀疫区内所有易感动物，并按国家规定标准进扑杀疫区内所有易感动物，并按国家规定标准进扑杀疫区内所有易感动物，并按国家规定标准进行无害化处理。采取措施禁止易感动物及其产品行无害化处理。采取措施禁止易感动物及其产品行无害化处理。采取措施禁止易感动物及其产品行无害化处理。采
19、取措施禁止易感动物及其产品出入。出入。出入。出入。3.3.关闭动物交易市场。关闭动物交易市场。关闭动物交易市场。关闭动物交易市场。4.4.对圈舍、用具及场地消毒。对圈舍、用具及场地消毒。对圈舍、用具及场地消毒。对圈舍、用具及场地消毒。3333受威胁区应采取的措施1.加强检疫监管，禁止易感动物出入，相关加强检疫监管，禁止易感动物出入，相关加强检疫监管，禁止易感动物出入，相关加强检疫监管，禁止易感动物出入，相关制品调运必须进行严格检疫。制品调运必须进行严格检疫。制品调运必须进行严格检疫。制品调运必须进行严格检疫。2.加强对养殖场、屠宰场、交易市场的监测，加强对养殖场、屠宰场、交易市场的监测，加强对
20、养殖场、屠宰场、交易市场的监测，加强对养殖场、屠宰场、交易市场的监测，及时掌握疫情动态。及时掌握疫情动态。及时掌握疫情动态。及时掌握疫情动态。3.3.及时接种疫苗：及时接种疫苗：及时接种疫苗：及时接种疫苗： 牛羊注射口蹄疫牛羊注射口蹄疫牛羊注射口蹄疫牛羊注射口蹄疫OO型型型型- -亚亚亚亚I I型双价疫苗，型双价疫苗，型双价疫苗，型双价疫苗， 奶牛还需注射口蹄疫奶牛还需注射口蹄疫奶牛还需注射口蹄疫奶牛还需注射口蹄疫A A型疫苗，型疫苗，型疫苗，型疫苗， 猪注射猪乙型（型）口蹄疫疫苗。猪注射猪乙型（型）口蹄疫疫苗。猪注射猪乙型（型）口蹄疫疫苗。猪注射猪乙型（型）口蹄疫疫苗。3434口蹄疫防控措施和策略口蹄疫防控措施和策略n n5种措施：种措施：n n免疫接种；免疫接种；疫情监测报告；疫情监测报告；应急处应急处置置流通环节的检疫监管；流通环节的检疫监管；严格和强化严格和强化动物卫生措施动物卫生措施n n3个策略：个策略：n n扑灭根除策略扑灭根除策略；n n免疫控制策略免疫控制策略；n n预防策略预防策略。35353636
