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1、细胞因子和细胞因子受体细胞因子和细胞因子受体Cytokine and Cytokine Receptor 王 露北京大学人类疾病基因研究中心 1北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体概述概述概念：概念：研究历史：研究历史：来源：正常细胞、癌细胞、基因工程来源：正常细胞、癌细胞、基因工程2北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体 1957年发现第一个细胞因子-干扰素，细胞因子以其独特的生物学活性和潜在的临床应用价值，一直受到生命领域的高度关注并成为研究热点。 已经发现200余种细胞因子3北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体第一阶段：1957-1970，发现活性，结构不清第二阶段：1970-1985，借助分子
2、生物学技术第三阶段：1985-2000，发现细胞因子系统，生物药开始研发；第四阶段：2003-，发现更多，更深入，以细胞因子及受体为药物靶点取得产业化重大成果。4北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子研究历史细胞因子研究历史淋巴因子IFNIL-2IL命名IFN克隆成功LI-1IL3/4/16命名细胞因子19571968197219741975197619791981/2198519861988TNFsIL-2RIL-8IFNa2a/b上市199219941995199619972000200220032004200520072012趋化因子IL-15/TPO细胞因子信号转导抑制蛋白CISI
3、L-17CXCR4/CCR5-HIVIL-18IL-19IL-20/21/22IL-23/24/25/26/27IL-28/29/IL-30/31IL-32-IL385北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子最新事件细胞因子最新事件 本世纪初，呼吸窘迫综合征（SARS)、禽流感、甲流等突发传染病给人类健康造成严重危害，上述疾病的相关病毒使部分感染者病重及死亡的关键机理涉及被称为细胞因子风暴的免疫过程，即：感染引起体液中多种细胞因子大量产生，引起急性呼吸窘迫综合征甚至多器官衰竭。6北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体按照结构特征和命名分类按照结构特征和命名分类1 1、白细胞介素、白细胞介素(In
4、terleukin, IL)(Interleukin, IL)2 2、集落刺激因子、集落刺激因子(Colony-Stimulating Factor, CSF)(Colony-Stimulating Factor, CSF)3 3、干扰素、干扰素(Interferon, IFN)(Interferon, IFN)4 4、肿瘤坏死因子、肿瘤坏死因子(Tumor-Necrosis Factor, TNF)(Tumor-Necrosis Factor, TNF)5 5、趋化因子、趋化因子(Chemokine, CK)(Chemokine, CK)6 6、生长因子、生长因子(Growth Factor
5、, GF)(Growth Factor, GF)7北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体按照功能分类按照功能分类促炎促炎CK: CK: IL1IL1，TNF,IL6TNF,IL6，IL12IL12，IL17IL17，IL18IL18，IL 23IL 23，IL27IL27，IL32IL32，IL33IL33，MIFMIF抗炎抗炎CK:CK: IL4 IL4，IL10IL10，IL13IL13，TGF,IL21TGF,IL21，IL25IL25，IL35IL35，IL37IL37，IL1RIL1R固有免疫固有免疫CKCK：TNF TNF ，IFN/,IL1IFN/,IL1，IL6IL6，IL10IL
6、10，IL12IL12，IL15IL15，IL18IL18，IL23IL23，IL27IL27适应免疫适应免疫CKCK：IFNIFN，IL2IL2，IL4IL4，IL5IL5，IL10IL10，IL12IL12，IL13IL13，IL17IL17，TGFTGF抗病毒：抗病毒： IFN/, IFN IFN/, IFN 促促T T生长：生长： IL2IL2，IL4IL4，IL7IL7，IL9IL9，IL12IL12，IL15IL15，IL21IL21促促B B生长：生长： IL2IL2，IL4IL4，IL5IL5，IL6IL6，IL7IL7，IL10IL10，IL13IL13，IL14IL14，I
7、L21 IL21 造血因子：造血因子： IL3IL3，IL7IL7，IL9IL9，IL11IL11，GM-CSF,M-CSF,G-CSF,SCFGM-CSF,M-CSF,G-CSF,SCF生长因子：生长因子： VEGF,FGF,TGF/,EGF,PDGF,SSF VEGF,FGF,TGF/,EGF,PDGF,SSF 8北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体1.1.白细胞介素白细胞介素(Interleukin, IL)(Interleukin, IL) 19791979年第二届国际淋巴因子专题讨论会上命名的，将年第二届国际淋巴因子专题讨论会上命名的，将由白细胞产生的又在白细胞之间发挥作用的细胞因子统
8、一由白细胞产生的又在白细胞之间发挥作用的细胞因子统一命名为白细胞介素，正式命名的有命名为白细胞介素，正式命名的有IL-1-IL-3IL-1-IL-38 8。 Interleukin Interleukin 来自来自inter-leukininter-leukin，意指白细胞之间信，意指白细胞之间信使分子，中文译为白细胞介素使分子，中文译为白细胞介素。9北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体白细胞介素的分类白细胞介素的分类IL-1 IL-1 家族：家族：IL-1IL-1/ /、IL-IL-1R1R、 18 18、3333IL-2 IL-2 家族：家族：IL-2IL-2、4 4、7 7、9 9、151
9、5、21 (21 (共用共用受体链受体链) )IL-6 IL-6 家族家族IL-6 IL-6 、1111、2727、3030、31 (31 (共用共用gp130gp130受体链受体链) )IL-10 IL-10 家族家族IL-10IL-10、1919、2020、2222、2424、2626、28A/B28A/B、29 (29 (结构相似结构相似) )IL-12 IL-12 家族家族 IL-12 IL-12、2323、 27 27、3535、3737( (均为异源二聚体结构均为异源二聚体结构) )IL-17IL-17家族：家族：IL-17AIL-17A、B B、C C、D D、E E和和F F集
10、落刺激因子集落刺激因子 IL-3 IL-3、 1 1、 5 5 、 6 6、 1111IL-8IL-8（趋化因子）（趋化因子）其它其它ILIL： IL- 13 IL- 13、1414、1616、 32 32、343410北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体 IL-2 IL-219761976发现发现,1979,1979年命名年命名, 1983, 1983年从年从ConAConA刺激的刺激的JurkatJurkat白血病白血病T T细胞中克隆成功细胞中克隆成功19791979年统一命名为白细胞介素年统一命名为白细胞介素2 2（interleukin 2interleukin 2，IL-2IL-2）
11、, , IL-2IL-2含有含有133aa133aa，分子量为，分子量为15.5kDa15.5kDaN N端有糖基化修饰端有糖基化修饰三个半胱氨酸：三个半胱氨酸：5858、105105、125125位位IL-2IL-2主要产生细胞：主要产生细胞： 主要由活化主要由活化CD4CD4+ + Th1Th1分泌分泌,CD8,CD8+ +T T和和NKNK也能产生也能产生T T细胞肿瘤细胞系细胞肿瘤细胞系: :如人如人JurkatJurkat和小鼠和小鼠EL-4EL-4T T淋巴细胞杂交瘤等淋巴细胞杂交瘤等IL-2IL-2受体：受体：CD25()CD25()；CDl22()CDl22()；CDl32(C
12、Dl32(c c) )11北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体 IL-2别名BF( blastogenic factor ); EDF( eosinophil differentiation factor ); KHF( killer cell helper factor ); LMF( lymphocyte mitogenic factor ); LCMfactor( lymphocyte-conditioned medium factor ) LPF( lymphocyte proliferation factor ); MAF-CI( macrophage-activating facto
13、r for cytotoxicity I ); PFC-EA( plaque forming cell enhancing factor ); SCIF( secondary cytotoxic T-cell inducing factor ); TCGF( T-cell growth factor ); TCPA( T colony-promoting activity ); TDF( thymocyte differentiation factor ); TMF( thymocyte mitogenic factor ); TMF( T-cell maturation factor );
14、TMF( T-cell mitogenic factor ); TRF-3( T-cell replacing factor-3 ); TSF( thymocyte stimulating factor ). Costimulator;12北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体IL-2主要生物学活性主要生物学活性13北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体IL-2IL-2对对T T细胞的作用细胞的作用14北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体2.2.集落刺激因子集落刺激因子(Colony-Stimulating Factor, CSF)(Colony-Stimulating Factor, CSF) 能够刺
15、激多能造血干细胞和不同发育阶段的造血祖细胞增殖能够刺激多能造血干细胞和不同发育阶段的造血祖细胞增殖分化，并在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。分化，并在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。 根据刺激不同造血细胞系或不同分化阶段的细胞有不同的命根据刺激不同造血细胞系或不同分化阶段的细胞有不同的命名名。15北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体造血干细胞HSC髓样干细胞淋巴样干细胞血小板单核巨噬细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞T细胞B细胞中性粒细胞红细胞NK细胞SCF / EPOTPOG-CSFM-CSFIL-3 / IL-5IL-3 / IL-4IL-7 / IL-3IL-7 / IL-1
16、1IL-12 / IL-15SCF16北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体G-CSF(G-CSF(粒细胞集落刺激因子粒细胞集落刺激因子) )19831983年命名年命名,1986,1986年克隆成功年克隆成功. .人人G-CSFG-CSF基因位于基因位于1717号染色体号染色体, ,人类有两种不同的人类有两种不同的G-CSF DNA,G-CSF DNA,分别编码含分别编码含207207和和204204个个蛋白，有蛋白，有5 5个半胱氨酸个半胱氨酸36=42,64=74,1736=42,64=74,17游离。游离。来源来源多种细胞可产生多种细胞可产生内毒素、内毒素、TNF-TNF-、IL-1IL-
17、1、IFN-IFN-活化单核活化单核/ /巨噬细巨噬细胞可产生，胞可产生，刺激成纤维、内皮细胞也可产生，刺激成纤维、内皮细胞也可产生，某些肿瘤细胞可产生某些肿瘤细胞可产生17北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体生物学活性：生物学活性：主要作用于中性粒细胞谱系造血细胞的增殖、分化和活化。主要作用于中性粒细胞谱系造血细胞的增殖、分化和活化。对人粒细胞、单核细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞等有趋对人粒细胞、单核细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞等有趋化作用。化作用。临床应用：临床应用： 粒细胞减少症粒细胞减少症 肿瘤化疗引起血细胞减少症肿瘤化疗引起血细胞减少症 贫血和骨髓发育异常综合症贫血和骨髓发育异常综合症1
18、8北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体 3.3.干扰素干扰素 (Interferon,IFN) (Interferon,IFN) 具有干扰病毒感染和复制功能的细胞因子。 1957年从病毒感染细胞培养中分离到一种生物活性物质，因它可以干扰其它病毒的复制而被命名为干扰素。19北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体干扰素的命名干扰素的命名根据来源及对酸的耐受程度，将干扰素分成根据来源及对酸的耐受程度，将干扰素分成I I 和和 II II型；型；I I型型(IFN-(IFN-，IFN-)IFN-)耐酸，耐酸，pH2pH2活性稳定，其中白细胞产生的称白细活性稳定，其中白细胞产生的称白细胞干扰素，成纤维细胞产生
19、的称成纤维干扰素；胞干扰素，成纤维细胞产生的称成纤维干扰素；IIII型型(IFN-)(IFN-)不耐酸，是抗原或有丝分裂原刺激不耐酸，是抗原或有丝分裂原刺激PBMCPBMC产生又叫免疫干产生又叫免疫干扰素；扰素；后后又将其称为又将其称为IFN-IFN-，IFN-IFN-，IFN-IFN-；IFN-IFN-是异质性的，包括是异质性的，包括1414个亚型，编码基因成串排列在个亚型，编码基因成串排列在9p239p23，产物高度同源。，产物高度同源。20北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体干扰素的产生和作用干扰素的产生和作用21北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体I I型干扰素抑制型干扰素抑制IL-1IL
20、-1的产生的产生22北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体10 12 g干扰素能在培养组织中保护一百万个细胞免受一千万个病毒颗粒的感染23北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体4.4.肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor, TNF) 19751975年发现的一种能使肿瘤发生出血坏死的物质，年发现的一种能使肿瘤发生出血坏死的物质，该因子对多种肿瘤细胞系具有细胞毒作用，而且在多种动该因子对多种肿瘤细胞系具有细胞毒作用，而且在多种动物模型中可引起肿瘤坏死，将其命名为肿瘤坏死因子物模型中可引起肿瘤坏死，将其命名为肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis FactorTumor
21、 Necrosis Factor， TNF TNF）。）。 1984TNF 1984TNF的的cDNAcDNA克隆成功，后来相继克隆了该家族的克隆成功，后来相继克隆了该家族的多个成员，构成了多个成员，构成了TNFTNF超家族细胞因子。超家族细胞因子。24北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体TNF超家族特征绝大多数成员为绝大多数成员为IIII型膜蛋白；在特异性金属蛋白酶作用型膜蛋白；在特异性金属蛋白酶作用下，形成可溶形式下，形成可溶形式活性形式多为同源三聚体；活性形式多为同源三聚体；TNFTNF超家族包括超家族包括TNFTNF，, TRAIL, FASL, TRAIL, FASL等；此外，尚有等；
22、此外，尚有一批与一批与TNFTNF序列同源，但缺乏诱导凋亡活性的序列同源，但缺乏诱导凋亡活性的TNFTNF家族家族成员。成员。TNF-:TNF-:巨噬细胞产生；巨噬细胞产生；TNF-:TNF-:又称为淋巴毒素又称为淋巴毒素(lymphotoxin-(lymphotoxin-，LT-LT-），），主要由主要由活化活化T T细胞产生；细胞产生；TNF-TNF-和和TNF-TNF-共用受体，功能相似。共用受体，功能相似。25北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体骨 髓MjT 细胞B 细胞巨噬细胞中性粒细胞IL-2 IL-4 -IFNTNF-a上调细胞因子产生水平（IL-2，IL-4， -IFN，CSF）
23、 上调 IL-2 受体的表达诱导分化 上调抗体 产生数量上调前列腺素产生水平 上调细胞因子产生水平（IL-1，IL-6，IL-8，GM-CSF）趋化并活化中性粒细胞体内刺激产生CSF 上调造血功能TNF- 对 淋 巴 组 织 的 作 用TNF-炎性因子：引起发热、诱导急性期蛋白合成、介导内毒素性休克炎性因子：引起发热、诱导急性期蛋白合成、介导内毒素性休克、诱导细胞凋亡诱导细胞凋亡26北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体L-选择素选择素SLex整合素整合素ICAM-1粘粘附附内皮细胞内皮细胞炎症炎症趋化趋化因子因子 5. 趋化因子趋化因子(Chemokine，CK) 趋化运动是指趋化运动是指趋化运
24、动是指趋化运动是指细胞向高浓度细胞向高浓度细胞向高浓度细胞向高浓度刺激物方向的刺激物方向的刺激物方向的刺激物方向的定向运动。定向运动。定向运动。定向运动。27北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CX3CRCXCRCX3CCXCCK及及CKR分类分类CCCCCRXCR1999年国际命名委员会根年国际命名委员会根据据CK的结构特征命名的结构特征命名依据依据N端前两个半胱氨酸端前两个半胱氨酸(Cys)的相对位置不同的相对位置不同分为分为:ELR?ELR-CXCnon-ELR-CXC趋化因子的分类趋化因子的分类28北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CK及及CKR生物学功能：生物学功能：CXCCCSDF-
25、1GROIL-8IP-10 PF4 MigMIP-1 MCP-4TECKEotaxin调调 节节 造造 血血促进血管生成促进血管生成抑制血管生成抑制血管生成参与器参与器官发生官发生29北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CCR9T淋巴细胞性白血淋巴细胞性白血病病CD4+ T细胞细胞抗凋亡抗凋亡促进肿瘤细胞恶促进肿瘤细胞恶性增殖；性增殖；结果：结果：CXCR5正常正常T细胞细胞促进凋亡促进凋亡参与免疫细胞更参与免疫细胞更新；新；作用：作用：CK及及CKR与与T细胞：细胞：30北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体6.6.生长因子生长因子(Growth factor)(Growth factor) 具有
26、促进不同类型细胞生长效应的细胞因子，具有促进不同类型细胞生长效应的细胞因子，如如TGF-TGF-、FGFFGF、EGFEGF、VEGFVEGF、NGFNGF、PDGFPDGF等。等。31北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体VEGF-AisoformsVEGF121, VEGF165, VEGF-AisoformsVEGF121, VEGF165, VEGF189, VEGF206VEGF189, VEGF206，VEGF145 VEGF145 ，VEGF183VEGF183VEGF-BVEGF-B； VEGF-CVEGF-C； VEGF-DVEGF-D。 VEGFR1VEGFR1、VEGFR2
27、VEGFR2 、VEGFR3VEGFR3血管内皮生长因子血管内皮生长因子(VEGF)(VEGF)32北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体 细胞因子受体细胞因子受体细胞因子发挥生物学功能是通过与细胞因子发挥生物学功能是通过与靶细胞膜表面的受体结合并将信号靶细胞膜表面的受体结合并将信号传递到细胞内部。因此，了解细胞传递到细胞内部。因此，了解细胞因子受体的结构和功能对于深入研因子受体的结构和功能对于深入研究细胞因子的生物学功能是必不可究细胞因子的生物学功能是必不可少的少的。 从细胞因子结合受体开始，到从细胞因子结合受体开始，到某些基因转录的启动，要经历复杂某些基因转录的启动，要经历复杂的细胞内分子间的
28、相互作用，这样的细胞内分子间的相互作用，这样的作用过程称为细胞因子的信号转的作用过程称为细胞因子的信号转导；导；33北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体34北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体1.1.造血细胞因子受体超家族（造血细胞因子受体超家族（I I类）类）结构特征：是细胞因子受体中最大的一个家族，多数成员属于多亚单位受结构特征：是细胞因子受体中最大的一个家族，多数成员属于多亚单位受体，其中一种或两种亚单位多肽负责结合细胞因子体，其中一种或两种亚单位多肽负责结合细胞因子膜外区序列结构相似于膜外区序列结构相似于EpoR,EpoR,即膜外即膜外N N端含端含4 4个高度保守个高度保守Cys,Cys
29、,近膜侧含近膜侧含1 1个个Trp-Ser-Xaa-Trp-Ser(WSXWS)Trp-Ser-Xaa-Trp-Ser(WSXWS)的基序的基序35北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体D2002.IFN2.IFN受体家族受体家族(II(II类细胞因子受体家族类细胞因子受体家族) )结构特征：两条肽链组成，胞外区结构特征：两条肽链组成，胞外区Fn3Fn3样结构域由样结构域由200200个氨基酸残个氨基酸残基组成，也称基组成，也称D200D200，并含有，并含有4 4个不连续的半胱氨酸，包括个不连续的半胱氨酸，包括IFNIFN和和IL-10IL-10受体受体7个aa22个aaIL-1036北医免疫课
30、程细胞因子和细胞因子受体TNF TNF CD40LNerve growth factor (NGF)FASL3. TNFR3. TNFR超家族超家族主要包括：主要包括：TNFTNF、 Fas Fas、 CD40 CD40、神经生长因子受、神经生长因子受体体等等结构特征：结构特征： 这类受体富含半胱氨酸，在与细胞因子结合这类受体富含半胱氨酸，在与细胞因子结合后三聚体化。胞外区有后三聚体化。胞外区有3-53-5个由个由4040个氨基酸残基个氨基酸残基组成的重复亚单位；每个重复亚单位含有组成的重复亚单位；每个重复亚单位含有4-64-6个个保守的半胱氨酸；形成保守的半胱氨酸；形成“配体结合区域。配体结
31、合区域。 TNFR ITNFR I（P55P55，CD120aCD120a）：胞内同源序列即）：胞内同源序列即“死亡死亡结构域结构域”TNFR IITNFR II（P75P75，CD120bCD120b）不含死亡结构域）不含死亡结构域37北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体 4. 趋化因子受体趋化因子受体（ GPCRs，G-protein coupled receptors ） 属于属于7次跨膜受体超家族，胞内环状结构与次跨膜受体超家族，胞内环状结构与Gi/Go蛋白偶联蛋白偶联胞外胞外细胞膜细胞膜细胞质细胞质COOHNH2G 蛋白蛋白38北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CKRCKR分类分类1
32、1、根据结合配体的不同，分为、根据结合配体的不同，分为CXCRCXCR， CCR CCR， XCR, CX3CR XCR, CX3CR；2 2、根据特异性不同，分为特异性受体、共享性受体、杂合、根据特异性不同，分为特异性受体、共享性受体、杂合性受体（性受体（DARCDARC：DuffyDuffy血型抗原，红细胞趋化因子受体）、血型抗原，红细胞趋化因子受体）、孤儿受体、病毒受体等。孤儿受体、病毒受体等。39北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CC类趋化因子类趋化因子CC类趋化因子类趋化因子前两个前两个 Cys相邻排列相邻排列大部分染色体定位于大部分染色体定位于17q11.2 嗜酸性粒嗜酸性粒 细胞
33、细胞嗜碱性粒细嗜碱性粒细胞胞 单核单核/巨噬巨噬 细胞细胞淋巴细胞淋巴细胞CCL2/MCP-1CCL3/MIP-1CCL5/RANTESCCL11/Eotaxin40北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CXC类趋化类趋化因子因子前两个前两个Cys之间含有之间含有一个其他的残基一个其他的残基 染色体主要定位于染色体主要定位于4q12-q13或或4q21.21 CXCL8/IL-8CXCL4/PF4CXCL1/GROCXCL10/IP-10ELR-CXC non-ELR-CXC ELR? 血管生长因子，直接血管生长因子，直接作用于内皮细胞促进作用于内皮细胞促进血管生成。血管生成。 抑制血管生长的因子
34、抑制血管生长的因子,能能抑制抑制ELR-CXC诱导的内诱导的内皮细胞趋化。皮细胞趋化。 淋巴细胞淋巴细胞内皮细胞内皮细胞中性粒细胞中性粒细胞41北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体C类趋化因子 CX3C 类趋化因子 N端前两个半胱氨酸之间含端前两个半胱氨酸之间含有其他有其他3个氨基酸残基个氨基酸残基 染色体主要定位于染色体主要定位于16q13 T淋巴细胞淋巴细胞单核细胞单核细胞NK细胞细胞Fractalkine 膜结合型膜结合型分泌型分泌型v介导细胞间的粘附，并介导细胞间的粘附，并传递活化信号传递活化信号v行使细胞趋化功能行使细胞趋化功能 N端只含两个端只含两个半胱氨酸半胱氨酸 染色体主要定位于
35、染色体主要定位于1q23 T细胞细胞骨髓细胞骨髓细胞XCL1/LymphotactinXCL2/SCM-142北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体 CXCR4CXCR4和和CCR5CCR5是是HIVHIV感染的共受体感染的共受体43北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体 CXCR4与与CCR5是是HIV感染靶细胞的共受体感染靶细胞的共受体44北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体HIVHIV世界第一治愈人蒂莫西雷世界第一治愈人蒂莫西雷- -布朗，一名居住在德国柏林的美国翻译。布朗，一名居住在德国柏林的美国翻译。19951995年年：血液中携带血液中携带HIVHIV病毒。病毒。20062006年年：白血病
36、。白血病。 化疗化疗/ /干细胞移植。干细胞移植。主治医生迪尔同时思考着艾滋病治愈的可能。主治医生迪尔同时思考着艾滋病治愈的可能。 HIV/ HIV/CD4CD4/ /CCR5CCR5 迪尔的设想迪尔的设想45北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体 为了实现这样的天方夜谭，迪尔医生在全世界找到了为了实现这样的天方夜谭，迪尔医生在全世界找到了232232名志愿者，他们名志愿者，他们的骨髓可以与布朗匹配。随后，对他们进行基因检测，试图寻找特定的突变。的骨髓可以与布朗匹配。随后，对他们进行基因检测，试图寻找特定的突变。迪尔医生的实验室将支付这笔迪尔医生的实验室将支付这笔4040美金美金/ /人的检测费用
37、。人的检测费用。寻找骨髓源的过程中，上天对布朗表现出更多的是仁慈。第寻找骨髓源的过程中，上天对布朗表现出更多的是仁慈。第6161位捐献者位捐献者带来了福音。找到合适的骨髓源后，他在医院中接受了两次骨髓干细胞移植带来了福音。找到合适的骨髓源后，他在医院中接受了两次骨髓干细胞移植手术。手术。这一次，布朗的命运豁然转折，使他成为了千万分之一的幸运儿。这一次，布朗的命运豁然转折，使他成为了千万分之一的幸运儿。移植的干细胞在布朗体内发挥了应有的作用，源源不断地产生新细胞，移植的干细胞在布朗体内发挥了应有的作用，源源不断地产生新细胞，重建起具有重建起具有CCR5CCR5受体缺失的免疫系统。这意味着，受体缺
38、失的免疫系统。这意味着，HIVHIV病毒在他体内渐渐走投病毒在他体内渐渐走投无路。无路。20102010年，布朗体内的年，布朗体内的HIVHIV病毒已被彻底清除，他成为了艾滋病根治的第一病毒已被彻底清除，他成为了艾滋病根治的第一人。人。这是人类战胜艾滋病的首个案例，打破了这是人类战胜艾滋病的首个案例，打破了“艾滋病不可治愈艾滋病不可治愈”的神话。的神话。尽管这项成功难以复制，它仍为艾滋病研究带来了希望和信心。尽管这项成功难以复制，它仍为艾滋病研究带来了希望和信心。布朗也因此成为了医学界的明星人物。布朗也因此成为了医学界的明星人物。46北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体47北医免疫课程细胞因子和
39、细胞因子受体1.1. （二）细胞因子受体的几个特点（二）细胞因子受体的几个特点1.1.细胞因子受体共细胞因子受体共用用链链 两个或更多细胞因子受体亚单位组成异聚或多聚体形式，两个或更多细胞因子受体亚单位组成异聚或多聚体形式，包括包括特异性配体结合链特异性配体结合链和一个参与信号转导链。和一个参与信号转导链。48北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体IL-2IL-2受体受体49北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体IL-2IL-2受体家族受体家族50北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体51北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体gp130参与造血因子受体家族高亲和力受体形成参与造血因子受体家族高亲和力受体形成和
40、信号转导，不直接参与配体结合和信号转导，不直接参与配体结合52北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子受体共用链的意义细胞因子受体共用链的意义节约；节约；细胞因子功能替代；细胞因子功能替代；共用链缺失或功能缺陷，将引起严重后果，如共用链缺失或功能缺陷，将引起严重后果，如IL-IL-2R2R亚家族的亚家族的 g 链缺陷，将引起链缺陷，将引起SCIDSCID。53北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体g gC突变导致突变导致T细胞发育障碍细胞发育障碍54北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体2.2.可溶性细胞因子受体可溶性细胞因子受体(sCKR)(sCKR)产生方式：产生方式：大部分为膜受体脱落，如大部
41、分为膜受体脱落，如SIL-1RSIL-1R、SIL -2RSIL -2R、sTNFRsTNFR、sIFNrRsIFNrR、sGM-CSFRsGM-CSFR、sIL-5RsIL-5R、sIL-6RsIL-6R等等小部分为分泌型，如小部分为分泌型，如sIL-4RsIL-4R、sG-CSFRsG-CSFR、sIL-5RsIL-5R、sIL-6RsIL-6R生物学活性：生物学活性：膜受体正常代谢途径膜受体正常代谢途径 膜受体相应配体膜受体相应配体“竞争抑制剂竞争抑制剂” 55北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体sCKRsCKR与临床：与临床：检测：检测：sIL-2RsIL-2R：恶性肿瘤、自身免疫性疾病
42、、病毒感染与其他传染性疾：恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染与其他传染性疾病、移植排斥反应等病、移植排斥反应等sIL-6RsIL-6R：炎症与自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤和白血病等：炎症与自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤和白血病等sTNFRsTNFR： 炎症与自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤和白血病、炎症与自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤和白血病、骨髓移植等骨髓移植等治疗：治疗： 大多数大多数sCKRsCKR与细胞因子结合后阻断细胞因子与膜受体结合，从而抑与细胞因子结合后阻断细胞因子与膜受体结合，从而抑制细胞因子的生物学活性。应用制细胞因子的生物学活性。应用sCKRsCKR为减轻或防止细胞
43、因子造成的病为减轻或防止细胞因子造成的病理损害提供了新的治疗途经。理损害提供了新的治疗途经。56北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子结构与功能特点细胞因子结构与功能特点结构：同源性低，小分子蛋白，多为单链，少为双链、三结构：同源性低，小分子蛋白，多为单链，少为双链、三聚体（聚体（TNFTNF）、多含糖基）、多含糖基量微而活性强（量微而活性强（pmol/Lpmol/L）57北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子作用特点细胞因子作用特点旁分泌或自分泌，瞬时、距离范围小旁分泌或自分泌，瞬时、距离范围小通过与相应受体结合发挥作用通过与相应受体结合发挥作用细胞因子诱导的受体亚单位聚合可以活化蛋
44、白酪氨酸激酶细胞因子诱导的受体亚单位聚合可以活化蛋白酪氨酸激酶(JAK),(JAK),导致转录因子导致转录因子STATSTAT酪氨酸磷酸化而激活靶基因转录酪氨酸磷酸化而激活靶基因转录多效性、重叠性、拮抗性、协同性、网络性：多效性、重叠性、拮抗性、协同性、网络性：生理调节、病理反应生理调节、病理反应58北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体59细胞因子间可相互诱生：细胞因子间可相互诱生： IL-1IL-1能诱生能诱生IFNIFN、IL-1IL-1、IL-2IL-2、IL-4IL-4等，等， IL-2 IL-2能诱生能诱生TNFTNF、IL-2IL-2、LTLT等。等。细胞因子可调节细胞因子受体的表达
45、：细胞因子可调节细胞因子受体的表达： IL-1IL-1、IL-5IL-5、IL-6IL-6等可促进等可促进IL-2IL-2受体的表达；受体的表达； IL-1 IL-1能降低能降低TNFTNF受体的密度。受体的密度。 B B细胞和细胞和T T细胞活化过程中，常需要两种以上细胞细胞活化过程中，常需要两种以上细胞 因子的协同作用或彼此调节。因子的协同作用或彼此调节。59北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体自分泌自分泌内分泌内分泌远距离作用远距离作用旁分泌旁分泌作用于比邻作用于比邻细胞细胞作用于分泌细作用于分泌细胞自身胞自身细细胞胞因因子子分分泌泌的的方方式式血液循环血液循环60北医免疫课程细胞因子和细
46、胞因子受体 多效性多效性61北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体重叠性重叠性（丰裕性）（丰裕性）协同性协同性协同性协同性拮抗性拮抗性拮抗性拮抗性62北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体TH1MjIL- 4 骨髓基质细胞IL-1 IL-6 IL-7 SCF 造血干细胞IL-1 IL-6 IL-11 TNF-a GM-CSF G-CMF M-CSF单核细胞TH2B中性粒细胞嗜酸性粒细胞IL-1 IL-8 TNF-aIL-1 TNF-aIL-10 IL- 4IL- 4 IL-6 IL-10 IL-13 IL-4 TGF-bIL-4 IL-5 IL-6 IL-13 IL-10 TGF-bIL-4IL-4内
47、皮细胞IL-4TcIL-4IL-2 IFN-gIL-10 IL-13 IL-4 NK1+T NK 细胞IFN-gIL-2IL-2 IFN-gIL-2IL-2 IL-12G-CMF IFN-g GM-CSF IL-12IL-1 TNF-a TGF-b PDGF FGF M-CSF GM-CSF 内皮细胞纤维母细胞下 丘 脑IL-1 TNF-aM-CSF GM-CSF IL-1 IL-6 TNF-aIL- 4IL- 6IL- 4细胞因子的作用具有网络性细胞因子的作用具有网络性63北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子的免疫学功能细胞因子的免疫学功能调控免疫细胞的发育、分化和功能调控免疫细胞的发
48、育、分化和功能中枢免疫器官：IL7，SCF,CXCL12 ,IL3，MCSF,MCSF 外周免疫器官：IL4，IL5，IL6，IL13-B细胞 IL2，IL7，IL18-T细胞 64北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体TregTh0Th17Th2Th1TGFIL10TGF,IL-10IFN，IL2IL12IL13,IL4IL6/IL1TGFIFN,IL2IL4,IL36,IL22IL17,IL36,IL22细胞免疫细胞免疫体液免疫体液免疫固有免疫固有免疫免疫负调控免疫负调控65北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体调节机体的免疫应答调节机体的免疫应答抗感染免疫抗感染免疫抗菌免疫抗菌免疫抗病毒免疫抗病
49、毒免疫抗肿瘤作用抗肿瘤作用诱导细胞凋亡诱导细胞凋亡66北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子与疾病细胞因子与疾病 细胞因子风暴（细胞因子风暴（cytokinestorm)/高细胞因子血症高细胞因子血症免疫应答分泌大量细胞因子免疫细胞刺激调控异常、失控迅速大量产生细胞因子（TNF,IL1,6，12，8，18等异常免疫应答，全身炎症反应综合征多器官功能障碍综合征，ARDS感染67北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子与炎症：细胞因子与炎症：炎症是生命个体其组织与细胞对损伤性因素所产生的炎症是生命个体其组织与细胞对损伤性因素所产生的防御反应。引起炎症的因素多种多样，局部的炎症发应有防御反应。
50、引起炎症的因素多种多样，局部的炎症发应有利于机体清除致病因子，严重的炎症可危及生命。炎症反利于机体清除致病因子，严重的炎症可危及生命。炎症反应是典型的多细胞多因子共同参与的过程。促进和抑制炎应是典型的多细胞多因子共同参与的过程。促进和抑制炎症的发生发展是免疫系统的固有功能，代表机体清除异己，症的发生发展是免疫系统的固有功能，代表机体清除异己，对抗损伤及进行修复的过程。免疫系统参与炎症的发生与对抗损伤及进行修复的过程。免疫系统参与炎症的发生与平息过程主要是通过细胞因子介导的。平息过程主要是通过细胞因子介导的。抗炎与促炎因子抗炎与促炎因子68北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子致热与炎症病理
51、损伤细胞因子致热与炎症病理损伤TNF最为突出,作用多效应，参与天然免疫和适应免疫。IL17：促进多种细胞因子的释放和招募中性粒细胞，与多种细胞因子协同放大炎症反应，具有双向调节作用。IL-1:是促炎反应细胞因子，主要参与抗感染免疫。IL-6：是炎症网络的关键组分，具有抗炎抑炎双重作用。IL23:诱导TH17细胞分化，和促进IL17的分泌。也具有双向调节作用。IL-2：维持Treg功能，抑制TH17分化69北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体H5N1H5N1H5N1H5N1病毒感染病毒感染病毒感染病毒感染70北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体固有免疫与禽流感固有免疫与禽流感71北医免疫课程细胞因子
52、和细胞因子受体肿瘤的发生与逃逸肿瘤的发生与逃逸 骨髓瘤细胞表面高表达IL6R并分泌大量IL6心脏粘液瘤、浆细胞瘤、子宫颈癌及膀胱癌均异常分泌IL6 IL1可刺激急慢性髓样白血病细胞、浆细胞和卵巢癌细胞生长 多种肿瘤细胞分泌的TGFB、IL-10可抑制机体的免疫功能，有助于肿瘤逃逸免疫系统的监控。72北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体免疫系统相关疾病：免疫系统相关疾病：超敏反应：超敏反应：自身免疫病自身免疫病免疫缺陷病免疫缺陷病器官移植排斥反应器官移植排斥反应73北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子与疾病的治疗细胞因子与疾病的治疗细胞因子直接治疗细胞因子拮抗治疗74北医免疫课程细胞因子和细
53、胞因子受体已上市的细胞因子重组药物已上市的细胞因子重组药物细胞因子细胞因子适应症适应症IL-2癌症、免疫缺陷、疫苗佐剂IL-11血小板减少IFN 白血病、乙肝、肿瘤、AIDSIFN-多发性硬化症IFN-慢性肉芽肿、生殖器疣、过敏性皮炎、类风湿关节炎G-CSF自体骨髓移植、粒细胞减少、再障GM-CSF自体骨髓移植、血细胞减少、再障EPO各种贫血SCF外周血干细胞移植EGF外用治疗烧伤、口腔溃疡bFGF外用治疗烧伤、外周神经炎75北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体名称名称适应症适应症可溶型IL1R（干粉吸入）哮喘可溶型IL1R（注射剂）急性髓性白血病可溶型IL-4R哮喘IL-1R拮抗剂类风湿关节炎
54、TNFRII-Fc融合蛋白类风湿关节炎、心衰TNFRI-Fc融合蛋白类风湿关节炎、休克、多发性硬化症抗IL-1单抗Muckle-Wells综合征抗IL-2R单抗移植排斥抗IL-4单抗、抗IL-5单抗哮喘抗TNF单抗类风湿关节炎、克罗恩病抗IL-6R单抗类风湿关节炎抗IL-8单抗、抗IL-12/23单抗银屑病抗IL-15单抗类风湿关节炎IL13-PE38QQR肾癌DAB389-IL-2T细胞淋巴瘤、I型糖尿病、类风湿银屑病已上市细胞因子抑制剂已上市细胞因子抑制剂76北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子及受体药物研发及应用细胞因子及受体药物研发及应用IL: IL-2:IL-11IL: IL-
55、2:IL-11；IL-12IL-12；IL-1RaIL-1Ra干扰素：干扰素：IFN-aIFN-a；IFN-rIFN-r集落刺激因子：集落刺激因子：GM-CSF;G-CSF;M-CSFGM-CSF;G-CSF;M-CSF；EPOEPO细胞因子及受体为靶点：细胞因子及受体为靶点：FDAFDA批准的单抗有批准的单抗有4242种，针对细种，针对细胞因子与受体的有胞因子与受体的有8 8种种, ,如针对如针对VEGFVEGF、EGFREGFR、TNFTNF、IL12/23IL12/23、IL-6IL-6、IL-17aIL-17a等等77北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子的临床应用举例细胞因子的临
56、床应用举例1 1、重组细胞因子、重组细胞因子： IFN- IFN-治疗肝炎治疗肝炎、G-CSFG-CSF治疗白细胞减少、治疗白细胞减少、多种细胞因子用多种细胞因子用于肿瘤病人的细胞治疗于肿瘤病人的细胞治疗。2 2、细胞因子抑制剂：、细胞因子抑制剂：（1 1）IL-1IL-1受体拮抗剂（受体拮抗剂（IL-1raIL-1ra）治疗类风湿关节炎）治疗类风湿关节炎（2 2）抗）抗TNF-TNF-抗体抗体治疗治疗RARA。 TNFaTNFa受体和受体和FcFc融合蛋白：融合蛋白： 依那西普：依那西普：84.0684.06亿美元亿美元（20122012） 抗抗TNFaTNFa单抗：单抗： 英利昔英利昔61
57、.3961.39亿；亿； 阿达木阿达木92.6592.65亿；亿； 戈利木戈利木6.076.07亿；亿； 塞妥珠塞妥珠6.066.06亿。亿。3.3.免疫毒素：免疫毒素：DAB389-IL-2DAB389-IL-2免疫毒素治疗免疫毒素治疗T T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤78北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体美国美国FDA2001FDA2001年年1111月批准上市的月批准上市的IL-IL-1ra1ra（KineretKineret），治疗类风湿关节炎），治疗类风湿关节炎79北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体治疗：炎症和自身免疫病；T细胞淋巴瘤、白血病；移植排斥等白喉毒素片段（389aa） IL-2治
58、疗治疗T T细胞淋巴瘤的细胞因子免疫毒素细胞淋巴瘤的细胞因子免疫毒素DAB389-IL2DAB389-IL2结构示意图结构示意图80北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体Bubble-boy(IL-2R的的链缺陷引起链缺陷引起SCID)81北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体XSCID XSCID 基因治疗原理基因治疗原理82北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体表达细胞因子表达细胞因子VEGFVEGF的腺病毒或裸的腺病毒或裸DNADNA直接体内注射直接体内注射治疗梗塞性血管病治疗梗塞性血管病83北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体细胞因子检测常用方法细胞因子检测常用方法生物活性检测法生物活性检测法(bi
59、ossay)-(biossay)-检测细胞因子的检测细胞因子的生物学活性生物学活性免疫学检测法免疫学检测法(immnuossay)-(immnuossay)-检测细胞因子蛋检测细胞因子蛋白质的抗原特性白质的抗原特性分子生物学检测法分子生物学检测法- -检测细胞因子的检测细胞因子的mRNAmRNA表达表达芯片检测：基因、芯片检测：基因、mRNAmRNA、蛋白水平、蛋白水平84北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体生物生物活性活性检测法检测法增殖实验增殖实验：应用某一细胞因子能特异刺激或抑制某些指示细胞的增殖应用某一细胞因子能特异刺激或抑制某些指示细胞的增殖, ,通过通过 3 3HTdRHTdR摄入摄
60、入,MTT,MTT,反应待测细胞因子的活性水平反应待测细胞因子的活性水平; ;集落形成实验集落形成实验：半固体培养系统半固体培养系统, ,造血因子集落刺激因子诱导干细胞形成某一或造血因子集落刺激因子诱导干细胞形成某一或某些种类的集落某些种类的集落. .直接杀伤靶细胞直接杀伤靶细胞： 3 3HTdRHTdR、5151CrCr释放法释放法抗病毒活性抗病毒活性：干扰素抑制病毒致病变的程度干扰素抑制病毒致病变的程度, ,计算样品中计算样品中IFNIFN的活性单位的活性单位凋亡实验：凋亡实验：各种试剂盒、流式细胞仪各种试剂盒、流式细胞仪趋化实验趋化实验：琼脂糖中的趋化实验、微孔小室趋化实验琼脂糖中的趋化
61、实验、微孔小室趋化实验迁移、侵袭实验迁移、侵袭实验：划痕试验、：划痕试验、transwelltranswell85北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体 免疫学检测法免疫学检测法放射免疫测定（放射免疫测定（RIARIA）：特异）：特异AbAb包被包被+ +待测样品和同位素待测样品和同位素标记的细胞因子标记的细胞因子- -竟争抑制实验竟争抑制实验酶联免疫吸附实验（酶联免疫吸附实验（ELISAELISA）双抗体加心法）双抗体加心法Western BlotWestern Blot检测单个细胞分泌的细胞因子：细胞斑点、酶联斑点检测单个细胞分泌的细胞因子：细胞斑点、酶联斑点86北医免疫课程细胞因子和细胞因子
62、受体87北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体88北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体分子生物学检测分子生物学检测Southern BlotSouthern BlotNorthern BlotNorthern Blot原位杂交原位杂交RT-PCRRT-PCR89北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体体内功能研究体内功能研究基因敲除、转基因基因敲除、转基因利用特异性抗体观察细胞因子在体内的生物学作利用特异性抗体观察细胞因子在体内的生物学作用用90北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体发展趋势和展望发展趋势和展望利用系统生物学破解复杂细胞因子调节网络作用机制；新型细胞因子还会不断发现：天然细胞因子发现（反向生物
63、学）；已知因子改良；重组细胞因子的创制。细胞因子相关药物开发细胞因子与疾病的因果关系91北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体一个新的细胞因子一个新的细胞因子CTRP4CTRP4的发现与研究的发现与研究92北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体立题背景立题背景人类基因组计划大量功能未知的新基因被陆续克隆并得到鉴定；功能基因组学；以新基因功能探索作为疾病研究和治疗切入点；反向生物学策略；新基因高通量平台筛选；新细胞因子的筛选和鉴定；93北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体筛选潜在的细胞因子的策略筛选潜在的细胞因子的策略未知蛋白的生物信息学分析94 获得的基因，获得的基因，ORFORF克隆连接在真核表达载体
64、克隆连接在真核表达载体基因筛选平台基因筛选平台 功能研究、应用探讨功能研究、应用探讨94北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CTRP4CTRP4简介简介 C1q/TNF related protein4 (homo sapiens) NM_031909.2 Located on11P11 1436bp 2 exons /329 amino acids Predicted molecular weight 35.26KD PI:8.3895北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CTRP4CTRP4简介简介 96北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CTRP4CTRP4简介简介 97北医免疫课程细胞因子和细
65、胞因子受体真核表达质粒构建及表达效果验证真核表达质粒构建及表达效果验证Neg.ctrl.CTRP4-mycCTRP4Beta-Actin98北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体双荧光素酶报告基因筛选双荧光素酶报告基因筛选 99北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体我们得到了一个具有典型信号肽结构，可以活化NF-kappaB炎症信号通路的新基因。 下一步的工作？验证分泌功能研究（体内体外）阐明机制100北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CTRP4 CTRP4 与与 NF-kappaB NF-kappaB信号通路的调节信号通路的调节101北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CTRP4 CTRP4 与与 N
66、F-kappaB NF-kappaB信号通路的调节信号通路的调节TNF-alphalevelEMSAHepG2cells102北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CTRP4CTRP4对下游靶基因影响的筛查对下游靶基因影响的筛查HepG2cells103北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CTRP4 CTRP4 与与IL6/STAT3IL6/STAT3信号通路的调节信号通路的调节IL6Expression：STAT3Phosphorylation:HepG2104北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体IL6IL6可被可被CTRP4CTRP4剂量依赖性的上调剂量依赖性的上调IL6Level：HepG210
67、5北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体HepG2CelllysateHepG2CulturalsupernatantN-terminal sequencingCTRP4CTRP4的分泌验证的分泌验证Neg.ctrl.CTRP4CTRP4Beta-actin106北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CTRP4CTRP4的原核表达质粒构建及原核蛋白纯化制备的原核表达质粒构建及原核蛋白纯化制备107北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体rhCTRP4rhCTRP4对于对于NF-kappaBNF-kappaB信号通路的调节活性信号通路的调节活性HepG2108北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体rhCTRP4r
68、hCTRP4对于对于IL6/STAT3IL6/STAT3通路的调节作用通路的调节作用HepG2109北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体rhCTRP4 rhCTRP4 发挥功能的动力学特征发挥功能的动力学特征剂量依赖性剂量依赖性时间依赖性时间依赖性IL6110北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体剂量依赖性剂量依赖性时间依赖性时间依赖性TNF-alpha111北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体rhCTRP4rhCTRP4对肿瘤细胞增殖能力的影响对肿瘤细胞增殖能力的影响HepG2112北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体补体补体C1qC1q分子的结构分子的结构Trends Immunol. 2004,
69、25(10): 551-561 17113北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CTRP4CTRP4和补体和补体C1qC1q分子之间分子之间C1QC1Q球状结构域的比较球状结构域的比较C1QC1Q球状结构域中完全匹配氨基酸位点主要集中在疏水性氨基酸：球状结构域中完全匹配氨基酸位点主要集中在疏水性氨基酸：丙氨酸（丙氨酸（A A）、苯丙氨酸（）、苯丙氨酸（F F）、缬氨酸（）、缬氨酸（V V）、亮氨酸（）、亮氨酸（L L）、甘氨酸（）、甘氨酸（G G）等）等18114北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体C1QC1Q球状结构域的配体谱球状结构域的配体谱ICs、IgG 、IgM and - amyloid
70、peptideCRP、SAP and PTX3FibronectingC1Q domaingC1Q domainViral ptoteins and LPSApoptotic cell、platelets20CTRP4115北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体CTRP4病原体的清除：病原体的清除： LPS、virus 清除凋亡细胞清除凋亡细胞血凝血凝 脂肪代谢与肥胖脂肪代谢与肥胖免疫细胞调节免疫细胞调节36炎症与肿瘤炎症与肿瘤116北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体思考题：思考题：1 1、试述细胞因子及其受体未来发展的趋势和展望、试述细胞因子及其受体未来发展的趋势和展望2 2、试述细胞因子与哪些疾病的发生密切相关、试述细胞因子与哪些疾病的发生密切相关117北医免疫课程细胞因子和细胞因子受体
