高中生物 精讲优练课型 专题2 细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体同课异构课件 新人教版选修3.ppt

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1、2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体学学习目目标1.1.掌握掌握动物物细胞融合技胞融合技术。2.2.理解理解单克隆抗体技克隆抗体技术。3.3.了解了解动物物细胞融合和胞融合和单克隆克隆抗体的抗体的应用。用。一、动物细胞融合一、动物细胞融合1.1.概念:概念:是指是指_结合形成一个细胞的过程,也称结合形成一个细胞的过程,也称_。2.2.诱导原理和结果:诱导原理和结果:(1)(1)诱导原理:诱导原理:_。(2)(2)诱导结果:形成诱导结果:形成_细胞。细胞。两个或多个动物细胞两个或多个动物细胞细胞杂交细胞杂交细胞膜的流动性细胞膜的流动性杂交杂交3.3.诱导因素:诱导因素:常用的诱导因素有常用的诱导因

2、素有_、_、_等。等。4.4.意义:突破了意义:突破了_方法的局限,使方法的局限,使_成为可能。成为可能。聚乙二醇聚乙二醇(PEG)(PEG)灭活的病毒灭活的病毒电激电激有性杂交有性杂交远缘杂交远缘杂交二、单克隆抗体二、单克隆抗体1.1.制备原理:制备原理:(1)B(1)B淋巴细胞特点:一种淋巴细胞特点:一种B B淋巴细胞分泌一种特异性抗体。淋巴细胞分泌一种特异性抗体。(2)(2)骨髓瘤细胞特点:能在体外大量骨髓瘤细胞特点:能在体外大量_。(3)(3)杂交瘤细胞特点:杂交瘤细胞特点:B B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞,既能交瘤细胞,既能_又能产生大量

3、又能产生大量_。增殖增殖无限增殖无限增殖特定抗体特定抗体2.2.单克隆抗体的制备:单克隆抗体的制备:3.3.单克隆抗体的优点:单克隆抗体的优点:_、_、可大量制备。、可大量制备。4.4.单克隆抗体的应用:单克隆抗体的应用:(1)(1)作为作为_,具有准确、高效、简易、快速的优点。,具有准确、高效、简易、快速的优点。(2)(2)用于用于_和和_。骨髓瘤骨髓瘤 杂交瘤杂交瘤特异性强特异性强灵敏度高灵敏度高诊断试剂诊断试剂治疗疾病治疗疾病运载药物运载药物杂交瘤杂交瘤单克隆单克隆抗体抗体【微点拨】【微点拨】1.1.诱导动物物细胞融合与植物胞融合与植物细胞胞杂交融合的方法有什么不同?交融合的方法有什么不

4、同?提示:提示:动物细胞融合能用灭活的病毒进行诱导。动物细胞融合能用灭活的病毒进行诱导。2.2.经促融促融处理后的理后的细胞就是符合要求的胞就是符合要求的杂交交细胞胞吗?哪种融合?哪种融合细胞才是符合要求的?胞才是符合要求的?提示:提示:不是。促融后可能会出现不是。促融后可能会出现3 3种融合细胞:种融合细胞:B-BB-B融合细胞、融合细胞、瘤瘤- -瘤融合细胞、瘤融合细胞、B-B-瘤融合细胞。其中瘤融合细胞。其中B-B-瘤融合细胞瘤融合细胞( (杂交瘤细杂交瘤细胞胞) )才是符合要求的细胞。才是符合要求的细胞。3.3.动物物细胞完成融合的胞完成融合的标志是什么?志是什么?提示:提示:动物细胞

5、融合时,先是细胞膜发生融合,然后是细胞核动物细胞融合时,先是细胞膜发生融合,然后是细胞核的融合。当两个细胞核融合后形成具有单核的杂交细胞时,则的融合。当两个细胞核融合后形成具有单核的杂交细胞时,则标志着动物细胞融合的完成。标志着动物细胞融合的完成。4.4.在制在制备单克隆抗体克隆抗体时,为什么不直接用什么不直接用经过免疫的免疫的B B淋巴淋巴细胞胞( (浆细胞胞) )来来获得得单克隆抗体,而需要与骨髓瘤克隆抗体,而需要与骨髓瘤细胞胞杂交后来交后来获取?取?提示:提示:用于获得杂交瘤细胞的用于获得杂交瘤细胞的B B淋巴细胞为浆细胞,是高度分淋巴细胞为浆细胞,是高度分化的动物细胞,培养时很难恢复分

6、裂能力,不能进行无限增殖,化的动物细胞,培养时很难恢复分裂能力,不能进行无限增殖,获得大量单克隆抗体。获得大量单克隆抗体。1.1.动物物细胞融合和植物原生胞融合和植物原生质体融合决定于体融合决定于( () )A.A.细胞膜的流胞膜的流动性性 B.B.细胞膜的胞膜的选择透透过性性C.C.细胞胞质的流的流动性性 D.D.细胞胞质中中酶酶的活性的活性【解析】【解析】选选A A。动物细胞融合和植物原生质体融合决定于细胞。动物细胞融合和植物原生质体融合决定于细胞膜的流动性。膜的流动性。2.2.基因型基因型为AaAa与基因型与基因型为BbBb的的动物体物体细胞,用胞,用灭活的病毒活的病毒处理理后,不可能后

7、,不可能获得下列哪种基因型的得下列哪种基因型的细胞胞( () )A.AAaaA.AAaa B.AaBb B.AaBbC.AabbC.Aabb D.BBbb D.BBbb【解析】【解析】选选C C。诱导融合处理后可能会出现。诱导融合处理后可能会出现3 3种融合细胞,即同种融合细胞,即同种细胞相互融合,基因型为种细胞相互融合,基因型为AAaaAAaa和和BBbbBBbb,不同种细胞相互融合,不同种细胞相互融合,融合后的杂交细胞基因型为融合后的杂交细胞基因型为AaBbAaBb,C C项基因型细胞不可能出现。项基因型细胞不可能出现。3.3.要想要想获得大量的得大量的单克隆抗体就必克隆抗体就必须用用单个

8、的个的B B淋巴淋巴细胞胞进行行无性繁殖,形成无性繁殖,形成细胞群。其原因是胞群。其原因是( () )A.A.在体外培养条件下,在体外培养条件下,B B淋巴淋巴细胞可以无限增殖胞可以无限增殖B.B.在在动物体内物体内B B淋巴淋巴细胞可以胞可以产生多达百万种以上的抗体生多达百万种以上的抗体C.C.每一个每一个B B淋巴淋巴细胞都参与特异性免疫反胞都参与特异性免疫反应D.D.每一个每一个B B淋巴淋巴细胞只分泌一种特异性抗体胞只分泌一种特异性抗体【解析】【解析】选选D D。B B淋巴细胞的免疫具有特异性,即每一个淋巴细胞的免疫具有特异性,即每一个B B淋巴淋巴细胞只能产生一种与特定抗原结合的抗体

9、。细胞只能产生一种与特定抗原结合的抗体。4.4.科学家科学家们用小鼠骨髓瘤用小鼠骨髓瘤细胞与某种胞与某种细胞融合,得到胞融合,得到杂交瘤交瘤细胞,胞,经培养可培养可产生大量的生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是胞融合的是( () )A.A.经过免疫的免疫的T T淋巴淋巴细胞胞B.B.未未经过免疫的免疫的T T淋巴淋巴细胞胞C.C.经过免疫的免疫的B B淋巴淋巴细胞胞D.D.未未经过免疫的免疫的B B淋巴淋巴细胞胞【解析】【解析】选选C C。B B淋巴细胞接受抗原刺激后,形成浆细胞,才能淋巴细胞接受抗原刺激后,形成浆细胞,才能产生抗体,所以只有经过免疫的产生抗体,所以只有经

10、过免疫的B B淋巴细胞才会产生专一性的淋巴细胞才会产生专一性的抗体。抗体。5.5.灭活的病毒的抗原性和感染能力是活的病毒的抗原性和感染能力是( () )A.A.失去抗原性,具有感染能力失去抗原性,具有感染能力B.B.具有抗原性,也具有感染能力具有抗原性,也具有感染能力C.C.失去抗原性,也失去感染能力失去抗原性,也失去感染能力D.D.具有抗原性,失去感染能力具有抗原性,失去感染能力【解析】【解析】选选D D。灭活的病毒不具有生物活性,不具有侵染细胞。灭活的病毒不具有生物活性,不具有侵染细胞的能力,但具有抗原性,能够促进动物细胞融合。的能力,但具有抗原性,能够促进动物细胞融合。6.6.生物生物导

11、弹是指是指( () )A.A.单克隆抗体克隆抗体B.B.带有特定有特定药物的物的单克隆抗体克隆抗体C.C.杂交交细胞胞D.BD.B淋巴淋巴细胞胞【解析】【解析】选选B B。生物导弹用于定位杀死癌细胞,原理是利用抗。生物导弹用于定位杀死癌细胞,原理是利用抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素结癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素结合后注入体内,借助单克隆抗体的导向作用进行定位。合后注入体内,借助单克隆抗体的导向作用进行定位。一、动物细胞融合一、动物细胞融合1.1.过程:过程:(1)(1)融合过程:细胞膜融合融合过程:细胞膜融合细胞质融合细胞质融合细胞核融合。细胞核

12、融合。(2)(2)细胞膜融合的过程体现出细胞膜具有一定的流动性。细胞膜融合的过程体现出细胞膜具有一定的流动性。(3)(3)融合后重组细胞的特点:融合形成的杂种细胞具有两种细融合后重组细胞的特点:融合形成的杂种细胞具有两种细胞的遗传信息,通过动物细胞培养,杂种细胞表现出两个亲本胞的遗传信息,通过动物细胞培养,杂种细胞表现出两个亲本细胞的特点。细胞的特点。2.2.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较:植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较:植物体植物体细胞胞杂交交动物物细胞融合胞融合原理原理细胞膜的流胞膜的流动性和植物性和植物细胞的全能胞的全能性性细胞膜的流胞膜的流动性性步步骤酶酶解法去掉解法去掉细胞壁

13、后,胞壁后,诱导原生原生质体融合,形成体融合,形成杂种体种体细胞,再胞,再经过植物植物组织培养形成培养形成杂种植株种植株分散成分散成单个个细胞胞后后诱导细胞融合胞融合诱导方法方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法物理方法、化学物理方法、化学方法、方法、灭活病毒活病毒结果果形成形成杂种植株种植株形成形成杂种种细胞胞【易错提醒】【易错提醒】(1)(1)灭活是指利用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,灭活是指利用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但是并不破坏这些病原体的抗原结构。但是并不破坏这些病原体的抗原结构。(2)(2)病毒在不同过程或操作中的病毒在不同过程或操作中的“身份不同身份不

14、同”。在免疫调节中。在免疫调节中病毒属于抗原,在基因工程中可作为载体,在细胞工程中可作病毒属于抗原,在基因工程中可作为载体,在细胞工程中可作为诱导剂。为诱导剂。(3)(3)动物细胞融合与植物体细胞杂交相似,形成的杂交细胞包动物细胞融合与植物体细胞杂交相似,形成的杂交细胞包含两个亲本的遗传物质,其染色体数、基因组成、染色体组都含两个亲本的遗传物质,其染色体数、基因组成、染色体组都是两个细胞之和,将表现出两个亲本的遗传特征。是两个细胞之和,将表现出两个亲本的遗传特征。1.(20141.(2014湛江高二检测湛江高二检测) )下列关于动物细胞融合的说法,错误下列关于动物细胞融合的说法,错误的是的是(

15、 () )A.A.动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程形成一个细胞的过程B.B.动物细胞融合需要用纤维素酶处理动物细胞融合需要用纤维素酶处理C.C.动物细胞融合时需人工诱导动物细胞融合时需人工诱导D.D.常用的诱导动物细胞融合的因素有:聚乙二醇、灭活的病毒、常用的诱导动物细胞融合的因素有:聚乙二醇、灭活的病毒、电激等电激等【解题关键】【解题关键】解答本题需关注以下两点:解答本题需关注以下两点:(1)(1)诱导动物细胞融合可以用灭活的病毒。诱导动物细胞融合可以用灭活的病毒。(2)(2)植物体细胞杂交诱导融合前需

16、要去除细胞壁,而动物细胞植物体细胞杂交诱导融合前需要去除细胞壁,而动物细胞无细胞壁。无细胞壁。【解析】【解析】选选B B。动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形。动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。动物细胞无细胞壁,所以诱导融合前不需成一个细胞的过程。动物细胞无细胞壁,所以诱导融合前不需要用纤维素酶处理。动物细胞融合需要人工诱导融合,诱导因要用纤维素酶处理。动物细胞融合需要人工诱导融合,诱导因素包括聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。素包括聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。2.2.下图所示为细胞融合技术的一些过程:下图所示为细胞融合技术的一些过程:(1)(1)从从A A细胞和胞和

17、B B细胞到胞到C C细胞的胞的过程中,采用的方法中与程中,采用的方法中与诱导植植物原生物原生质体融合不同的是体融合不同的是处理。理。(2)(2)若若A A、B B细胞胞为单倍体烟草植物的体倍体烟草植物的体细胞,那么胞,那么这样的的细胞胞已已经用用酶酶降解脱掉了降解脱掉了。这种种酶酶可能是可能是、,由此形成的,由此形成的细胞胞经培养形成的培养形成的细胞胞团称称为。(3)(3)若将基因型若将基因型为AaBBAaBB的番茄的番茄细胞与基因型胞与基因型为AAbbAAbb的番茄的番茄细胞胞融合,所形成融合,所形成细胞的基因型是胞的基因型是。(4)(4)若将染色体若将染色体组成成为2A+XX2A+XX的

18、人的人细胞与染色体胞与染色体组成成为2B+XX2B+XX的的鼠鼠细胞融合,培育成的人胞融合,培育成的人- -鼠鼠细胞的染色体胞的染色体组成是成是。【解题关键】【解题关键】解答本题要注意以下两点:解答本题要注意以下两点:(1)(1)理解植物细胞融合和动物细胞融合过程的异同点。理解植物细胞融合和动物细胞融合过程的异同点。(2)(2)杂种植物细胞中染色体来自两个融合的亲本细胞。杂种植物细胞中染色体来自两个融合的亲本细胞。【解析】【解析】(1)(1)动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导融动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导融合。合。(2)(2)植物细胞有细胞壁,若植物细胞有细胞壁,若A A、B

19、 B细胞为单倍体烟草植物的体细细胞为单倍体烟草植物的体细胞,那么这样的细胞已经用纤维素酶和果胶酶脱掉了细胞壁;胞,那么这样的细胞已经用纤维素酶和果胶酶脱掉了细胞壁;植物体细胞杂交获得的杂种细胞,经脱分化形成愈伤组织。植物体细胞杂交获得的杂种细胞,经脱分化形成愈伤组织。(3)(4)(3)(4)细胞融合后的染色体或基因分别是两种细胞的染色体或细胞融合后的染色体或基因分别是两种细胞的染色体或基因累加。基因累加。答案:答案:(1)(1)灭活的病毒灭活的病毒(2)(2)细胞壁纤维素酶果胶酶愈伤组织细胞壁纤维素酶果胶酶愈伤组织(3)AAAaBBbb(3)AAAaBBbb(4)2A+2B+2X+2X(4)2

20、A+2B+2X+2X【方法规律】【方法规律】生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源源(1)(1)转基因生物:目的基因来自外源生物,绝大多数基因来自转基因生物:目的基因来自外源生物,绝大多数基因来自两个亲本。两个亲本。(2)(2)杂种植株:遗传物质来自融合的两个亲本细胞。杂种植株:遗传物质来自融合的两个亲本细胞。(3)(3)经细胞培养获得的动物细胞:遗传物质只来自一个亲本。经细胞培养获得的动物细胞:遗传物质只来自一个亲本。(4)(4)动物细胞融合形成的杂交细胞:遗传物质来自融合的两个动物细胞融合形成的杂交细胞:遗传物质来自融合的两个亲本细胞。亲本细

21、胞。(5)(5)克隆动物:细胞核中的遗传物质来自供体动物,细胞质中克隆动物:细胞核中的遗传物质来自供体动物,细胞质中的遗传物质来自提供卵母细胞的动物个体。的遗传物质来自提供卵母细胞的动物个体。二、单克隆抗体二、单克隆抗体1.1.技术手段:动物细胞培养、动物细胞融合。技术手段:动物细胞培养、动物细胞融合。2.2.制备过程:制备过程:3.3.比较制备单克隆抗体中的几种细胞:比较制备单克隆抗体中的几种细胞:细胞胞特点特点B B淋巴淋巴细胞胞能能产生生单一抗体,但不能无限增殖一抗体,但不能无限增殖骨髓瘤骨髓瘤细胞胞能无限增殖,但不能能无限增殖,但不能产生抗体生抗体杂交瘤交瘤细胞胞既能既能产生抗体,又能

22、无限增殖生抗体,又能无限增殖4.4.制备单克隆抗体的两次筛选:制备单克隆抗体的两次筛选:第一次筛选:由于细胞融合是随机的,因此细胞混合物中融合第一次筛选:由于细胞融合是随机的,因此细胞混合物中融合细胞将以多种形式出现,因此必须从中筛选出既能分泌抗体同细胞将以多种形式出现,因此必须从中筛选出既能分泌抗体同时又能大量增殖的杂交瘤细胞。时又能大量增殖的杂交瘤细胞。第二次筛选:从杂交瘤细胞群中选出能产生专一抗体的特异性第二次筛选:从杂交瘤细胞群中选出能产生专一抗体的特异性杂交瘤细胞。杂交瘤细胞。 【易错提醒】【易错提醒】诱导融合的诱导融合的B B淋巴细胞是经免疫产生的淋巴细胞是经免疫产生的B B淋巴细

23、胞,未经免疫的淋巴细胞,未经免疫的B B淋巴细胞不能产生抗体。淋巴细胞不能产生抗体。1.1.关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是( () )A.A.可直接从动物体内获取可直接从动物体内获取B B淋巴细胞进行培养淋巴细胞进行培养B.B.杂交瘤细胞具有杂交瘤细胞具有B B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的双重特点淋巴细胞和骨髓瘤细胞的双重特点C.C.用灭活病毒诱导融合后形成的融合细胞即可产生单克隆抗体用灭活病毒诱导融合后形成的融合细胞即可产生单克隆抗体D.D.经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产的

24、生产【解题关键】【解题关键】明确制作单克隆抗体的步骤,诱导融合可能会产明确制作单克隆抗体的步骤,诱导融合可能会产生多种融合细胞,但只有不同种细胞融合形成的杂交细胞才是生多种融合细胞,但只有不同种细胞融合形成的杂交细胞才是符合要求的细胞。符合要求的细胞。【解析】【解析】选选B B。将骨髓瘤细胞与免疫后的。将骨髓瘤细胞与免疫后的B B淋巴细胞融合,经过淋巴细胞融合,经过选择性培养基的筛选得到杂交瘤细胞,并经专一抗体检测后,选择性培养基的筛选得到杂交瘤细胞,并经专一抗体检测后,培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞,即可得到单克隆抗体。杂培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞,即可得到单克隆抗体。杂交瘤细胞具有骨髓

25、瘤细胞无限增殖的特点和交瘤细胞具有骨髓瘤细胞无限增殖的特点和B B淋巴细胞产生特淋巴细胞产生特异性抗体的特点。诱导融合后可能会形成三种融合细胞,即同异性抗体的特点。诱导融合后可能会形成三种融合细胞,即同种细胞融合种细胞融合(B-B(B-B融合细胞、瘤融合细胞、瘤- -瘤融合细胞瘤融合细胞) )、不同种细胞融合、不同种细胞融合(B-(B-瘤融合细胞瘤融合细胞) ),故需要进一步筛选。,故需要进一步筛选。2.(20142.(2014徐州模拟徐州模拟) )如图表示用生物工程制备人抗如图表示用生物工程制备人抗A A抗体的过抗体的过程。回答下列问题。程。回答下列问题。(1)(1)人的人的红细胞膜表面有具

26、有胞膜表面有具有识别作用的凝集原,其化学本作用的凝集原,其化学本质是是;从免疫学角度看,;从免疫学角度看,这种凝集原是种凝集原是 。(2)(2)图中中细胞胞1 1是小鼠体内注入人是小鼠体内注入人A A型血型血红细胞后胞后获得的得的 细胞,胞,这种种细胞具有胞具有产生生的特点,的特点,但但难以在体外培养。甲培养皿中培养的以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞胞2 2,是从患骨髓瘤,是从患骨髓瘤的小鼠体内的小鼠体内获取的骨髓瘤取的骨髓瘤细胞,胞,这种种细胞在体外培养胞在体外培养时能能,但不会,但不会产生抗体。生抗体。(3)(3)为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点,经特殊处理,为了能充分发挥上述两种细

27、胞各自的特点,经特殊处理,在促细胞融合因子的作用下,使两种细胞发生融合,形成图中在促细胞融合因子的作用下,使两种细胞发生融合,形成图中的细胞的细胞3 3,这种细胞称为,这种细胞称为。把它放在乙培。把它放在乙培养皿中进行培养,则能产生大量的细胞群,这种方法称为养皿中进行培养,则能产生大量的细胞群,这种方法称为。(4)(4)过程过程的主要目的是的主要目的是 。通。通过过程过过程或或的培养方法能产生大量的培养方法能产生大量抗体。抗体。【解题关键】【解题关键】解答本题需注意两点:解答本题需注意两点:(1)(1)单克隆抗体的制备所用两种细胞的特点。单克隆抗体的制备所用两种细胞的特点。(2)(2)诱导动物

28、细胞融合后需要经过两次筛选。诱导动物细胞融合后需要经过两次筛选。【解析】【解析】(1)(1)人红细胞膜表面的凝集原具有特异性,化学本质人红细胞膜表面的凝集原具有特异性,化学本质是糖蛋白,从免疫学角度看,它是抗原。是糖蛋白,从免疫学角度看,它是抗原。(2)(3)(2)(3)免疫后的免疫后的B B淋巴细胞能产生特异性抗体,小鼠骨髓瘤细淋巴细胞能产生特异性抗体,小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,在选择培养基中,只有胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,在选择培养基中,只有免疫后的免疫后的B B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞( (细胞细胞3)3

29、)才同时具备分泌抗体的功能和保持细胞无限增殖两种特征。才同时具备分泌抗体的功能和保持细胞无限增殖两种特征。(4)(4)过程过程的主要目的是筛选出能产生单一抗的主要目的是筛选出能产生单一抗A A抗体的杂交瘤细抗体的杂交瘤细胞,过程胞,过程或或分别是体内培养和体外培养,以产生大量抗分别是体内培养和体外培养,以产生大量抗A A单克隆抗体。单克隆抗体。答案:答案:(1)(1)糖蛋白抗原糖蛋白抗原(2)B(2)B淋巴单一的抗淋巴单一的抗A A抗体抗体( (或单一的特异性抗体或单一的特异性抗体) )大量增殖大量增殖(3)(3)杂交瘤细胞克隆杂交瘤细胞克隆(4)(4)筛选出能产生单一抗筛选出能产生单一抗A A抗体的杂交瘤细胞抗抗体的杂交瘤细胞抗A A单克隆单克隆

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