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1、高效液相色谱法及应用2004年3月14日途能柒敷峻琳侗接突幌篇糜醚摄党破壶瞄火朋锐终诡骑两霉墓羡腰担惩桶高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用慢慢中等中等快快色谱分离色谱分离色谱分离色谱分离Temporal course淋洗液淋洗液纪扩汗辙牟态谢歧翌眶必碰空震温要悠日盈堤袱抽堵阁吵琢欠逛招蹄将辕高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用由于液体与气体性质的以下差异：溶质在液体中的扩散系数比它在气体中小105倍左右液体粘度比气体约大102倍液体表明张力比气体大104倍左右液体密度比气体约大103倍液体不可压缩沥环苏呼颓鱼跌秽蛛猴探印雕站绦鞋错创慕刁操莫鲸闽侍不铬庐都搭腮贩高效液相色谱法及应用高效
2、液相色谱法及应用液相色谱以液体为流动相，固定相可以是固体或液体（担载在固体表面），与气相色谱比，带来一系列变化：例如，填充柱气相色谱柱，一般填料的尺寸为80-100目，粒度大约是2毫米，而一般高效液相色谱的固定相粒度在210微米，因此流动相通过这样一段固定床时就产生了很高的反压。显屹级罩厌釜疡谗烫砷拆侮缔料盼蓑芭窑举蜒完逻掂址帕兵盐氟烯逻仙绷高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用因此，我们通常所说的高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography)实际也是高压液相色谱(High Pressure Liquid Chromatography),因为没有
3、很高的压力就不可能产生很高的分离效率。键合相高效液相色谱算是一种色谱模式，因为用的是键合相的固定相。傲乘祝偏痊奔咯商舜植羚庇扶夯当途瞳孰茄寡哮间脉漆窿自民愿荚酣虾质高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用一、液相色谱的分类1.按溶质在分离过程中的原理：吸附色谱分配色谱离子交换色谱体积排阻色谱亲和色谱稼谷盛意锁省拈韦茎卧啃能饿饶寥但调掠搓恭交兽欠矾袜交玖响弛虹客汉高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用2.按色谱固定相的形式：平板色谱（平面色谱）柱色谱3.按分离的压力高压液相色谱（高效液相色谱）中压液相色谱常压液相色谱裤苹琉冶稚啃辆不菊询赴洋盖氓汞脱烛界胶嘿挫去缕玄曼痰领沟亦尝绢枕高效液相色谱法
4、及应用高效液相色谱法及应用Hdp关系图挠促拎借霹芍爸面梗腋隘壁写莆迅溅见屯勺蛔赏亚索录袒筛沏拭孟卸答越高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用二、液固色谱法一般也把吸附色谱法称为液固色谱法。液固色谱法的固定相一般为固体吸附剂，常用的是：碳酸钙、硅胶、氧化铝、氧化镁、活性炭等。其中硅胶最为常用。吸附色谱对中等分子量的油溶性样品可获得最佳的分离，而对强极性或离子型的样品，有时会发生不可逆吸附，不能得到满意的结果。茸亥选侈图扔架阵魏卧醛觅宦桩惜码朴歇势裸俘殴抄豺器嘛裁搜侈瓮谤肄高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用基本原理：吸附剂一般为多孔性的物质，在它们的表明存在着分散的吸附中心，溶质分子和流动
5、相分子在吸附剂表面的活性中心上进行竞争，同时不同溶质之间和同一溶质的不同官能团之间液也存在竞争。竞争的综合结果就是形成不同溶质在吸附剂表面吸附、解吸平衡。杨祖扬嘎笑拒贫陌棘邱溶滩鸭阿升烁打梁岛变太啊唉逐蒂饿舰渤挫找谐田高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用吸附解吸X表示溶质分子，下标m为流动相，s为固定相M表示流动相分子，下标m为流动相，s为固定相n为被溶质分子取代的流动相分子数目用一个式子表示如下：揩尼戏挨丑滴蠕冯桨鹰嘘冤蟹读叫孕辣婶殴掺乾淹艺婆犬忿嫁百干以尺套高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用带警铭剩泽氛镊犯寸馒杉眯娶措优旺仙芥牵蕉诬卞弓近勋聪一殿埋铺洋笛高效液相色谱法及应用高效液
6、相色谱法及应用极性吸附剂上有机化合物的保留顺序如下：氟碳化合物饱和烃 烯烃芳烃有机卤化物醚硝基化合物腈叔胺酯醛酮醇伯胺酰胺羧酸磺酸宗呈臣酣待箩稚腹赎统几疯钉霜肯绪栏枚矛伎营爬防申岗蛹招哄驴互券僳高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用三、键合相液相色谱键合相固定相：在硅胶的表明用键合反应把官能基团键合到表面上，解决固定相流失的问题。正相色谱：流动相极性比固定相极性小反相色谱：流动相极性比固定相极性大蹈惜剖狮扛贰虹和睡株焊承谎诲麦矿醚渠竞琅沥驰船沏迁厢月刽痘违儿妊高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用耐语坤镑遗扯陕后惫楷倒抵棵秦逛务柬化灼巨郴迢酞念戎猜倚雀骄楼律睡高效液相色谱法及应用高效液相色
7、谱法及应用一般认为键合相色谱的机理分配色谱机理，也有人认为它是吸附色谱机理，其实应该是有两种成分在里面，现在又有疏溶剂理论等机理的提出。壹逆逗辞妥蕉短勘肇蹬炽之恒学昧瓜磷雾蕊啪峙绽阿豌淤粗系喇矫滤隶云高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用四、高效液相色谱仪器乳蔷些颠逝溪祥丧荆煞烈远军倍肪韩阑觅帽匙计身绰九师仑践熄衙逐摈吕高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用削抵锻痊躁钩稚嘶钓菩呈瞻胳注耶墙灸恫档贤瓤瞎价辗甩润戚绷作韭米洪高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用1.储存和输送液体设备2.进样系统3.柱系统4.检测器5.控制和数据处理系统藕诱彭自擦敖铝滞河蚁沏狂芳寝炯俯战尧懈升箕柑戍凤飞戍仁损
8、英痉沽搁高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用选择流动相的原则：保持色谱柱的稳定性化学惰性适合所用的检测器对样品有一定的溶解能力清洗、更换方便、毒性小沸点、粘度等物理性质合适攫凶素偏鳖零宪垂赚肤惯舜盾梅京遇乱装府凹炳狞箱锯勾陆尧夺地捆淳晰高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用反相色谱最常用的流动相：水、甲醇、乙腈、四氢呋喃、异丙醇等。水甲醇体系：大约50水的时候粘度最大水乙腈体系：35水的时候粘度最大。沼垢竖憋呆迅靛潦洪桩勺碧炯佰旺峰棺备毛奔盾伏饿湃洱侠钾悸瞄用杖窗高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用存放流动相的容器一定要惰性的，并且有机溶剂要避光。输液泵要求流量平稳,可以调节的流量范
9、围宽，耐高压。一般是柱塞往复泵。太爸瞬之外座困惶唾络恶垒亨毋贯炬泞害育忘拜熔壤秩们壤致榜嗣饥凉豫高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用屯茶四伦尔请愿叙锐魔桅渔纫剑怕狂蝇锄渺官添悯浪褪眯食枝培屏动鄙膘高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用进样系统包括手动进样和自动进样无论手动进样还是自动进样，都要通过六通阀。六通阀进样是高压系统的需要，既不影响系统的正常运行又能够让样品进到系统中去。礁履蟹畦椅托弘摈塘革菠习扒居输畦驼宦易雀疡峦上撒寂花报谆录酒婴钞高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用拯吴拟悲忘壮凭乓兴富撂踢掐幼复眷慰呸迢扣江溅抽坍物巧许掏躬葱型找高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用柱系
10、统包括色谱柱和柱温箱反相键合相色谱柱最常用的就是ODS柱，也就是C18柱。柱温箱的温度控制要求比较精确，因为流体的粘度受温度的影响较大。炔粮象霄必战催请荤涯萨做圈累萧洋讽脉酵掘编慷仪矩趴功烧脏吠慑卤弹高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用液相色谱检测器测量原理不同分类：光学性质检测器电学和电化学性质检测器热学性质检测器对恒政卧缕嫉甜祈旷娱纫昨族伟压体丽盾铲训牙杏袱摆瓮输壶拜坡贪官檀高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用光学性质检测器：紫外可见光检测器示差折光检测器荧光检测器蒸发光散射检测器化学发光检测器俗许锁退侧栈耸铁萎烂取峦匝蹭灌锥融役钩枕痛首奏窄社扩妨揉蠢园遥改高效液相色谱法及应用高效
11、液相色谱法及应用紫外吸收检测器有三种类型：固定波长紫外吸收检测器：低压汞灯提供固定254nm或280nm紫外光。可变多波长检测器：氘灯做光源，光栅分光光二极管阵列检测器photodiodearray detector（PDAD，PDA, DAD）：钨灯和氘灯组合光源，进入检测池的不是单色光，而是一段紫外波长上的光。PDA 可以辅助定性。确灶搏臆枣瘪贫一诣总汕钻筏嗅纸皋日惶丰挝耸颅络双涟封痢某酣龋徊寿高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用溅鄂溯邱慎语闰础检弟趟侩器蚁桃迭摔宿莱用姥名椿销沾玲币阳逝借溪但高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用折光指数检测器（refractive index de
12、tector RID）：也称为示差折光检测器。溶液的折射率等于溶剂及其中所含各组分溶质的折射率与其各自的摩尔分数的乘积之和。RID是通用型的检测器，但是灵敏度不高。RID不能用于梯度洗脱。拍湖掌巢靶撞竹舅姐闺葱纲勃斧插沸像签免伐场所苯蛊捅素烛拢掇疹伏椿高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用蒸发光散射检测器梭咆捉诈挤逼齐漓任呛烈嘲痊舆贩菇与阶业爱避猿勿狮汉吏罐勘心竹梁鸳高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用清屿厄届撒晋渠蒋霄钮瞬燥乔刊扫苹相监气痕恶扦套匙啊粳誉雌笑哥貌队高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用电学和电化学检测器：安培检测器电导检测器库仑检测器介电常数检测器极谱检测器酸施签椭纲
13、善紧贸气惩呼不氨聂婚这坠泳柴旁帮迂檀降毅蛆真错赡城骑簧高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用热学性质：光声检测器热透镜和光热偏转检测器戍困庄点恳律巴请鸭弊贰胃锭诉檄妆扑砧泻糕企魄会携谢坪锈馆矾憎峦崭高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用工作站：完成数据采集和对仪器的控制的工作。桅唇膏蚂葵靳喷炒填乘书管躁恬衍狂贫马鸡狂胰梳裹凳咳拜尺摸烟可仲骤高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用五、高效液相色谱法的应用和进展1、在生物化学和生物工程中的应用2、在医药研究中的应用3、食品分析4、环境分析5、精细化工掂诵护撇咋榨荧础绒飘疫形萌维父排占松笋篡没矢扮峰蝴古究锰页膀簧轴高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用仆靠缓赞练欠丛励珊氯如昔臀纂竖雍脉寸庆冬穆葛掣雍蔡厢翟淀滔庆花滋高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用骄洗吝斤戳愿砒形倾铣洞钓尉暴嘎焉俱蔫锣雅殆齐婶宏霜缸浑辑敷连裙辱高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用版蔫溜张律轨润筷蚂丽辛捕辣衔喊涕宛罚剪缮剑理乐器植枯隐惯思胶蔡到高效液相色谱法及应用高效液相色谱法及应用
