3.2-体外受精和早期胚胎培养1课件

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1、一、学习目标:一、学习目标:1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。二、学习重点:二、学习重点:1.体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。2.哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。三、学习难点:三、学习难点: 1.卵母细胞的采集和培养。卵母细胞的采集和培养。 2.精子的采集和获能。精子的采集和获能。知识链接知识链接1.1.哺乳动物哺乳

2、动物体内胚胎体内胚胎的形成需要经过哪些过程?的形成需要经过哪些过程?精子和卵子的发生精子和卵子的发生受精受精胚胎的发育胚胎的发育2、早期胚胎发育分为几个阶段?、早期胚胎发育分为几个阶段?3、受精作用发生的部位及卵母细胞处的时期?、受精作用发生的部位及卵母细胞处的时期?19781978年年7 7月月2525日世界首例试管婴儿日世界首例试管婴儿思考:思考:试管婴儿试管婴儿的的形成及形成及发育需要完成哪些环节?发育需要完成哪些环节?获得精子和卵子获得精子和卵子体外受精体外受精体外胚胎培养体外胚胎培养试管动物技术试管动物技术试管动物技术试管动物技术 通过人工操作使通过人工操作使卵卵子子和和精子精子在在

3、体外体外条件条件下成熟和下成熟和受精受精,并通,并通过培养发育成过培养发育成早期胚早期胚胎胎后,再经后,再经移植移植产生产生后代的技术。后代的技术。试管动物技术涉及试管动物技术涉及了了哪些哪些生物技术?生物技术? 包括包括体外受精体外受精、早期胚胎体外培养早期胚胎体外培养和和胚胎移植技术胚胎移植技术。阅读课本阅读课本 “ “从试管牛说起从试管牛说起”思考:思考: 1. 1.传统的动物育种存在哪传统的动物育种存在哪些遗憾?些遗憾? 2. 2.试管动物与之相比有哪试管动物与之相比有哪些优点?些优点?意义:意义:可以通过试管动物技术大量繁殖可以通过试管动物技术大量繁殖良种良种家畜。家畜。“试试管管牛

4、牛” 生生产产的的技技术术流流程程图图采集良种母牛的卵母细胞采集良种母牛的卵母细胞采集良种公牛精子采集良种公牛精子卵母细胞的体外培养卵母细胞的体外培养精子体外获能精子体外获能体外受精胚胎体外受精胚胎培养培养胚胎移植胚胎移植受体牛受体牛良种犊牛良种犊牛体外受精体外受精试管动物技术过程:试管动物技术过程:第一步:体外受精第一步:体外受精 第二步:胚胎的早期培养第二步:胚胎的早期培养第三步:胚胎移植第三步:胚胎移植 主要包括主要包括 、 和和 等几个主要步骤等几个主要步骤 。概念:采取雌性动物的概念:采取雌性动物的卵母细胞卵母细胞和雄性动物的和雄性动物的精子精子,使其在,使其在试管试管中受中受精。精

5、。一、体外受精一、体外受精卵母细胞的采集卵母细胞的采集精子的获取精子的获取受精受精1.1.卵母细胞的采集和培养卵母细胞的采集和培养 对不同动物对不同动物, ,采集卵母细胞的方法不同。采集卵母细胞的方法不同。实验动物小鼠、兔,及家畜猪、羊等实验动物小鼠、兔,及家畜猪、羊等卵卵母母细胞的采集细胞的采集: 最常用的方法是给供体注射最常用的方法是给供体注射 ,使一头,使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子,之后母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子,之后从从 中冲取卵子,中冲取卵子,直接直接与获能的精子在体外受精。与获能的精子在体外受精。促性腺激素促性腺激素输卵管输卵管大家畜或大型动

6、物,如牛,大家畜或大型动物,如牛,卵细胞的采集卵细胞的采集: 从屠宰场已屠宰母畜的从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞,也可中采集卵母细胞,也可以借助以借助 、 或或 等工具确定卵泡位置,直接从活体动物中吸等工具确定卵泡位置,直接从活体动物中吸取泡卵液(连同卵母细胞)取出,在取泡卵液(连同卵母细胞)取出,在体外体外进行人工培养进行人工培养,使其成熟。,使其成熟。卵巢卵巢超声波超声波(B(B超超) )探测仪探测仪内窥镜内窥镜腹腔镜腹腔镜培养至培养至减数第二次分裂的中期减数第二次分裂的中期才能与精子受精的能力。才能与精子受精的能力。卵母细胞培养到什么时候才能与精子受精?卵母细胞培养到什么时候才能与

7、精子受精?注意注意B B B B超引导法:超引导法:超引导法:超引导法: 借助超声波探头借助超声波探头借助超声波探头借助超声波探头和屏幕的引导,从活和屏幕的引导,从活和屏幕的引导,从活和屏幕的引导,从活母畜卵巢采集卵母细母畜卵巢采集卵母细母畜卵巢采集卵母细母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有胞。操作员先将带有胞。操作员先将带有胞。操作员先将带有超声波探头和采卵针超声波探头和采卵针超声波探头和采卵针超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插的采卵器通过阴道插的采卵器通过阴道插的采卵器通过阴道插入子宫,同时通过将入子宫,同时通过将入子宫,同时通过将入子宫,同时通过将卵巢贴在探头上。根卵巢贴在探头上。根卵

8、巢贴在探头上。根卵巢贴在探头上。根据据据据B B B B超屏幕所显示的卵超屏幕所显示的卵超屏幕所显示的卵超屏幕所显示的卵泡位置,利用采卵针泡位置,利用采卵针泡位置,利用采卵针泡位置,利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸穿刺卵泡并同时抽吸穿刺卵泡并同时抽吸穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。卵母细胞。卵母细胞。卵母细胞。2.2.精子的收集和获能精子的收集和获能收集精子的方法有:收集精子的方法有:假阴道法假阴道法手握法手握法电刺激法电刺激法 在体外受精前,要对精子进行在体外受精前,要对精子进行获能获能处理。通常处理。通常采用的体外获能方法有采用的体外获能方法有 和和 两种。两种。 对于对于 、 和和 的精子,的精

9、子,一般采用一般采用培养法培养法,精子在精子在获能液获能液中获能中获能; 对于对于 、 等家畜的精子常用等家畜的精子常用化学诱导法。化学诱导法。精精子子放在放在一一定浓度的肝素定浓度的肝素定浓度的肝素定浓度的肝素或或钙离子载体钙离子载体A23187A23187溶液溶液中中,用化,用化学药物诱导获能。学药物诱导获能。培养法培养法化学诱导法化学诱导法啮齿动物啮齿动物家兔家兔猪猪牛牛羊羊3.3.受精受精 获能的获能的精子和培养精子和培养成熟成熟(减减中期中期)的的卵子,一般情况下卵子,一般情况下在在 或或中完成受精过程。中完成受精过程。获能溶液获能溶液专用受精溶液专用受精溶液二、早期胚胎的培养二、早

10、期胚胎的培养概念:是应用人工创造条件,对获取的概念:是应用人工创造条件,对获取的 进行体外培养。进行体外培养。培养液成分:培养液成分:水、无机盐、有机盐类、维生素、水、无机盐、有机盐类、维生素、激激素素、氨基酸、核苷酸、血清氨基酸、核苷酸、血清等等早期胚胎早期胚胎 不同动物胚胎移植时间不同动物胚胎移植时间不同不同马、马、牛、羊:牛、羊:桑椹胚或囊胚桑椹胚或囊胚阶段阶段小鼠、家兔:小鼠、家兔:卵裂期或囊胚卵裂期或囊胚 阶段阶段试管婴儿:试管婴儿:8-168-16个细胞阶段个细胞阶段 胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。出向受体移植或冷冻保存

11、。有性生殖 无性生殖体外受精体外受精胚胎移植胚胎移植核移植技术、胚胎移植遵循遵循不遵循不遵循知识巩固:知识巩固:1 1、以下是师生共同制订并研究设计的、以下是师生共同制订并研究设计的“试管牛试管牛”工厂化生产工厂化生产的流程,其中正确的是的流程,其中正确的是( )卵母细胞的采集和培养卵母细胞的采集和培养 精子的采集和获能精子的采集和获能 画出画出“试管牛试管牛”工厂化生产的技术流程图工厂化生产的技术流程图 受精受精 胚胎的早期培养胚胎的早期培养A A、 B B、C C、 D D、 答案:答案:B2 2、体外受精常用的采卵方法有:、体外受精常用的采卵方法有:用促性腺素处理后,从输卵管冲取卵子用促性腺素处理后,从输卵管冲取卵子 化学诱导法化学诱导法 电刺激法电刺激法 从活体从活体动物卵巢吸取卵母细胞动物卵巢吸取卵母细胞A A、B B、C C、 D D、答案:答案:D3 3、如下图,、如下图,所做的处理是所做的处理是_过程,过程,是是_过程,过程,是是_过程,过程,是是_过程。过程。 获能获能体外体外受精受精胚胎胚胎的早期的早期培养培养胚胎移植胚胎移植- - -母体母体 精子精子卵细胞卵细胞 作作 业业整理体外受精步骤、卵母细胞采集方法整理体外受精步骤、卵母细胞采集方法、精子获取方法及获能方法。、精子获取方法及获能方法。

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