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1、千层纸素诱导非小细胞肺癌A549失巢凋亡的作用及初步机制报告提纲n n立项依据和意义n n实验材料与方法n n实验结果分析n n讨论与展望n n致谢立项依据和意义1. 失失巢凋亡巢凋亡是一是一种特殊的程序化细胞死亡种特殊的程序化细胞死亡形式。失形式。失巢凋亡被巢凋亡被介导的效应决定细胞生存或凋亡的命运介导的效应决定细胞生存或凋亡的命运, ,乃至细胞的病变及癌乃至细胞的病变及癌转移转移。2. 2. 但但不同肿瘤细胞都存在不同肿瘤细胞都存在抗失巢凋亡抗失巢凋亡现象，现象，因此，因此，不同不同的肿瘤细胞可的肿瘤细胞可能存在着不同的抗失巢凋亡机制能存在着不同的抗失巢凋亡机制。3. 3. 前期研究结果表
2、明前期研究结果表明千千千千层纸素层纸素层纸素层纸素对人类对人类非小细胞肺癌非小细胞肺癌非小细胞肺癌非小细胞肺癌A549A549体外培养体外培养的有显著的生长的有显著的生长抑制作用抑制作用，但，但其其具体机制有待探讨。具体机制有待探讨。 4. 针对非小细胞肺癌，建立其失巢凋亡的研究模型，以初步确定起关键作用的信号通路或信号分子, 为其干预措施提供线索。实验材料与方法1.药物药物 千千层纸素（层纸素（oroxylin oroxylin ）由中国药科大学药学院）由中国药科大学药学院提供提供2 2 细胞株细胞株 非非小细胞肺癌小细胞肺癌A549A549细胞株引自中国科学院上海细胞株引自中国科学院上海生
3、物化学生物化学与细胞生物学与细胞生物学研究所研究所实验材料与方法体外细胞培养体外细胞培养台盼蓝染色台盼蓝染色Annexin V/PI流式流式双染双染DAPI染染色色免疫印迹免疫印迹实验结果分析台盼蓝染色说明A549细胞悬浮培养发生失巢凋亡抵抗实验结果分析Annexin V/PI流式双染说明A549细胞发生失巢凋亡抵抗实验结果分析光镜观察和DAPI染色非小细胞肺癌A549细胞加药组细胞核出现明显的凋亡现象加药36小时后，加药组悬浮细胞减少；空白组细胞生长良好实验结果分析免疫印迹Procaspase-3下调，PARP蛋白表达量降低，出现切割形式。讨论与展望1.1.本研究发现本研究发现：在在短时间内
4、短时间内短时间内短时间内悬浮生长的非小细胞悬浮生长的非小细胞肺癌肺癌A549A549细胞并无明显的失巢凋亡作用细胞并无明显的失巢凋亡作用发生发生。2.2.本研究结果表明：本研究结果表明：一定一定浓度的千层纸素的确诱浓度的千层纸素的确诱导非小细胞肺癌导非小细胞肺癌A549A549失巢凋亡的发生，且其具体失巢凋亡的发生，且其具体作用机制可能是通过作用机制可能是通过激活内源性凋亡通路激活内源性凋亡通路激活内源性凋亡通路激活内源性凋亡通路来实现来实现的的。结论与讨论n n1. 1. 本研究本研究结果结果虽然虽然暗示千层纸素暗示千层纸素A A可以诱导肿瘤细胞发生可以诱导肿瘤细胞发生失巢凋亡。但千层纸素诱导失巢凋亡的详细机制尚需进一失巢凋亡。但千层纸素诱导失巢凋亡的详细机制尚需进一步研究。步研究。n n2. 2. 不同的肿瘤细胞可能存在着不同的抗失巢凋亡机制。不同的肿瘤细胞可能存在着不同的抗失巢凋亡机制。因此，因此，建立建立非小细胞肺癌非小细胞肺癌的的失巢凋亡研究模型失巢凋亡研究模型是十分有必是十分有必要的。要的。n n3. 3. 非小细胞肺癌细胞抗失巢凋亡过程中起关键作用的信非小细胞肺癌细胞抗失巢凋亡过程中起关键作用的信号通路或信号分子号通路或信号分子尚需进一步鉴定和研究。尚需进一步鉴定和研究。 讨论与展望展望与建议致 谢
