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1、培训人：培训人：XXXXXX实验室生物安全培室生物安全培训1目目 录录实验室生物安全危害实验室生物安全危害一一实验室生物安全防护实验室生物安全防护二二 手卫生手卫生三三23（一）、实验室感染事件（一）、实验室感染事件（二）、气溶胶与实验室感染（二）、气溶胶与实验室感染一、一、实验室生物安全危害室生物安全危害4（一）、实验室感染事件（一）、实验室感染事件前车之鉴前车之鉴1 1、美国、美国CDCCDC医务人员感染医务人员感染HIVHIV数据统计数据统计5（二）、气溶胶与实验室感染 对对对对39213921例实验室相关感染统计分析结果发例实验室相关感染统计分析结果发例实验室相关感染统计分析结果发例实
2、验室相关感染统计分析结果发现，已知原因的实验室感染只占全部感染的现，已知原因的实验室感染只占全部感染的现，已知原因的实验室感染只占全部感染的现，已知原因的实验室感染只占全部感染的1818，不明原因的实验室感染却高达，不明原因的实验室感染却高达，不明原因的实验室感染却高达，不明原因的实验室感染却高达8282。 对不明原因的实验室感染的研究表明，大对不明原因的实验室感染的研究表明，大对不明原因的实验室感染的研究表明，大对不明原因的实验室感染的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在多数可能是病原微生物形成的
3、感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病的。气感染发病的。气感染发病的。气感染发病的。678生物气溶胶无色无味、无孔不入，不易发现，实验人员在自然呼吸中不知不觉吸入而造成感染。若治疗控制不及时会造成严重后果。呼吸道传播的传染病的微生物特别是高致病性病毒常常发生变异，尤其是其抗原性、致病性都可能发生改变，在空气中存活力增强。可以远距离或较远距离传播，这是其与其他传播途径的显著区别，也是气溶胶传播难以预防的另一重要原因。气溶胶的特点气溶胶的特点9可产生各种
4、严重程度微生物气溶胶的实可产生各种严重程度微生物气溶胶的实验室操作验室操作 101112微生物气溶胶的控制微生物气溶胶的控制实验室空气传播与感染主要有三个过程：u一是微生物气溶胶的产生产生u二是微生物气溶胶的扩散扩散u三是微生物气溶胶人体暴露和吸入暴露和吸入因此，要控制或减少实验室空气传播和感染，要有相应得生物安全措施，以控制实验室微生物气溶胶感染的三个过程。13微生物气溶胶的控制微生物气溶胶的控制安全操作安全操作规范和改进操作过程和操作技术，规范和改进操作过程和操作技术，尽量避免操作失误。尽量避免操作失误。例如：例如：用冷却接种环沾取菌液进行接种-气溶胶减少效果可达91%。14使用生物安全柜
5、使用生物安全柜 各种产生感染性气溶胶的操作尽量在生物安全柜内操作。正确使用生物安全柜，以有效地减少实验室获得性感染和由于气溶胶暴露而导致的培养物的交叉感染，并能保护环境。15个人防护与实验室通风系统个人防护与实验室通风系统实验室工作人员在进行微生物检验时，应进行个人防护。操作时应穿戴防护服、口罩、面罩、帽子和手套防护服、口罩、面罩、帽子和手套。对实验室以外区域应形成一个相对密闭的系统，对实验室内部则是一个气流定向流动气流定向流动的系统，清洁区、缓冲区、低污染清洁区、缓冲区、低污染区、严重污染区区、严重污染区，每个区域之间保持一定压差，防止空气倒流。16做完的标本可以这样处理！做完的标本可以这样
6、处理！17（一）防护设备设施（一）防护设备设施（二）个人防护用品（二）个人防护用品（三）医疗垃圾处置（三）医疗垃圾处置二、二、实验室生物安全防室生物安全防护18安全防护的基本要求安全防护的基本要求在实验室工作时，必须穿着合适的工作在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。服或防护服。在进行可能接触到血液、体液以及其他在进行可能接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料的操作时，应戴具有潜在感染性的材料的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。再摘除，随后必须洗手。在处理完感染性实验材料后，以及在离在处理完感染性实验材料后，以及
7、在离开实验室工作区域前，都必须洗手。开实验室工作区域前，都必须洗手。为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴碰撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴合适的安全眼镜、面罩（面具）或其他合适的安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。防护设备。19安全防护的基本要求安全防护的基本要求严禁穿着实验室防护服离开实验室严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。工作区域。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。禁止在实验室工作区域进食、饮水、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。吸烟、化妆和处理隐形眼镜。禁止在实验室
8、工作区域储存食品和禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。饮料。在实验室内用过的防护服不得和日在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。常服装放在同一柜子内。20（一）防护设备设施生物安全柜生物安全柜压力蒸汽灭菌器压力蒸汽灭菌器可移动紫外灯可移动紫外灯红外加热灭菌器红外加热灭菌器酒精灯酒精灯洗眼冲淋装置洗眼冲淋装置2122生物安全柜生物安全柜主要的保护屏障，防主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶逃止生物有害气溶胶逃逸逸. .保护操作人员保护操作人员- -负压负压保护周边环境保护周边环境-HEPA-HEPA可以保护样品可以保护样品- -层流层流23生物安全柜生物安全柜实验室操作都可能产生感染
9、性气溶胶。 直径小于5m的气溶胶、直径为5100m的微小液滴亦可能产生吸入或交叉污染工作台面的其他材料。 正确使用生物安全柜将有效减少由于气溶胶暴露所造成的实验室感染以及培养物交叉污染。24CLASS II 二级生物安全柜二级生物安全柜层流负压柜层流负压柜 CLASSII级生物安全柜适用于1、2、3级生物安全水平的实验。它们可以安全的保护样品、它们可以安全的保护样品、人员和环境人员和环境。CLASS II 级生物安全柜根据结构以及气流分配的不同，主要是外排气流，分为： A A型型 （30%30%排在实验室内排在实验室内 ） B B型型 B1 B1 （70%70%接管道外排）接管道外排） B2
10、B2 （100%100%接管道外排）接管道外排） B3 B3 （30% 30% 接管道外排）接管道外排） HEPA（高效微粒子空气，能99.99%地去除0.3微米以上颗粒) 25在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作理想的工作台摆放原则（清洁理想的工作台摆放原则（清洁理想的工作台摆放原则（清洁理想的工作台摆放原则（清洁污染区）污染区）污染区）污染区） 在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行区的方向进行区的方向进行区的方向进行 26在生物安全柜上操作
11、在生物安全柜上操作 避免使用明火，用适当的灭菌措施避免使用明火，用适当的灭菌措施避免使用明火，用适当的灭菌措施避免使用明火，用适当的灭菌措施 避免使用干扰安全柜内层流的实验手段避免使用干扰安全柜内层流的实验手段避免使用干扰安全柜内层流的实验手段避免使用干扰安全柜内层流的实验手段 如使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染如使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染如使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染如使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染处理处理处理处理 安全柜必须处于安全柜必须处于安全柜必须处于安全柜必须处于操作状态时，操作状态时，操作状态时，操作状态时，才能彻底消毒内壁才能彻
12、底消毒内壁才能彻底消毒内壁才能彻底消毒内壁明火明火： 在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中应避在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中应避免使用明火。免使用明火。 -使用明火会对气流产生影响使用明火会对气流产生影响 -特别在处理挥发性物品和易燃物品时，也易造成危险特别在处理挥发性物品和易燃物品时，也易造成危险 -在对接种环进行灭菌时，可以使用微型燃烧器或电炉，而不应使在对接种环进行灭菌时，可以使用微型燃烧器或电炉，而不应使用明火。用明火。 27安全柜的维护保养安全柜的维护保养 用消毒剂清洁所有内壁，待其干燥用消毒剂清洁所有内壁，待其干燥 定期抬起工作面清洁下面的区域；洗定期抬起工作
13、面清洁下面的区域；洗 净抹布净抹布 每天关机后，打开安全柜内部的紫外每天关机后，打开安全柜内部的紫外 灯消毒灯消毒6060分钟分钟 安全柜每年需要进行性能检测安全柜每年需要进行性能检测 第三方机构（个体防护能力、样品保第三方机构（个体防护能力、样品保 护能力、交叉污染防护能力）护能力、交叉污染防护能力）28淋浴装置和应急消毒喷淋装置淋浴装置和应急消毒喷淋装置 1 1、 规定：规定：-BSL-2-BSL-2实验室在必要时应有应急喷淋装置。实验室在必要时应有应急喷淋装置。-BSL-3-BSL-3实验室应设置淋浴装置（清洁区），必要时在半污染区实验室应设置淋浴装置（清洁区），必要时在半污染区 设置应
14、急消毒喷淋装置。设置应急消毒喷淋装置。 2 2、要求：、要求：保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒。保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒。喷淋装置的摆放位置、培训其操作方法。喷淋装置的摆放位置、培训其操作方法。应急消毒喷淋装置应急消毒喷淋装置 。在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至少需要在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至少需要2020分钟。如果为化学物品溅出污染，用大量急水冲洗。分钟。如果为化学物品溅出污染，用大量急水冲洗。当使用紧急淋浴装置后必须立刻填写事故报告单并立即报告主当使用紧急淋浴装置后必须立刻填写事故报告单并立即报告主管领导管领导 。29（二）个人防护
15、用品 护目镜护目镜 口罩、帽子口罩、帽子 防护衣防护衣 ( 实验服、隔离衣实验服、隔离衣) 手套手套 鞋套鞋套30 个体防护的配备原则个体防护的配备原则BSLBSL1 1实验室：实验室：工作人员在实验时应穿工作服，戴医用口罩。工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套。 31个体防护的配备原则个体防护的配备原则BSL2实验室：除符合BSL1的要求外，还应该符合下列条件：在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出。用过的工作服应先消毒，然后统一洗涤或丢弃。当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手
16、套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。 3233正确使用手套正确使用手套 1 1、手套的选择：、手套的选择：生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈类类 或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂和生物危害物质的防护和生物危害物质的防护 。 2 2、手套的检查：、手套的检查：在使用手套前应该检查手套是否退色、穿在使用手套前应该检查手套是否退色、穿孔（漏损）或有裂缝。可以孔（漏损）或有裂缝。可以 通过充气试验，将其通过充气试验，将其 浸入水中观察是否有浸入水中观察是否有 汽泡来检
17、查手套的质汽泡来检查手套的质 量。量。 3 3、手套的使用：、手套的使用： a a） 一般情况下，佩戴一副手套即可（一般情况下，佩戴一副手套即可（BSL-1BSL-1实验室），实验室）， b b）若在生物安全柜中操作感染性物质时（）若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-2BSL-2和和BSL-3BSL-3实验室）应该佩戴两副手套。实验室）应该佩戴两副手套。 乳胶手套乳胶手套 聚脂手套聚脂手套 34正确使用手套正确使用手套 c c） 在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套 并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新并脱下
18、后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手手 套继续实验。套继续实验。 d d）戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服）戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服袖。袖。 4 4、手套的清洗和更换：、手套的清洗和更换： a) a)使用一次性手套，不可再次使用。用后立即进行使用一次性手套，不可再次使用。用后立即进行 高压灭高压灭菌消毒然后丢弃。菌消毒然后丢弃。 b) b)不得戴着手套离开实验室区域。不得戴着手套离开实验室区域。35戴手套注意要点戴手套注意要点: :1)1)在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型
19、和尺寸的手套；手套；2)2)将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖; ;手套的手要远离面部。手套的手要远离面部。 36 脱手套过程及注意要点脱手套过程及注意要点: :用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘, ,将手套从手上脱下并将将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；手套外表面翻转入内；用戴着手套的手拿住该手套；用戴着手套的手拿住该手套；用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面；用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面；脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状；脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状；丢弃在高温
20、消毒袋中并进行消毒处理。丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。37（三）医疗垃圾处置黄色垃圾袋医疗垃圾黑色垃圾袋生活垃圾红色垃圾袋放射性垃圾黄色锐器盒损伤性垃圾38医疗废物分类医疗废物分类感 染 性 废 物病 理 性 废 物损 伤 性 废 物药 物 性 废 物化 学 性 废 物39感染性废物特征：携带病原微生物具有引发感染性疾病传播危险的医疗废物。常见：1、被病人血液。体液。排泄物污染的物品，包括：棉球、棉签、引流面条、纱布及其他各种敷料；一次性使用卫生用品、一次性使用医疗用品；一次性医疗器械；废弃的被服；其它被病人血液、体液、排泄物污染的物品。2、医疗机构收治的隔离传染病病人或者疑似传染病病人产
21、生的生活垃圾。3、病原体的培养基、标本和菌种保存液。4、各种废弃的医学标本。5、废弃的血液、血清。40病理性废物特征：诊疗过程中产生的人体废弃物和医学实验动物尸体等。常见：1、手术及其它诊疗过程中产生的废弃的人体组织、器官等。2、医学实验动物的组织、尸体。3、病理切片后废弃的人体组织、病理腊块等。41损伤性废物特征：能够刺伤或者割伤人体的废弃的医用锐器。常见：1、医用针头、缝合针。2、各类医用锐器，包括：解剖刀、手术刀、备皮刀、手术锯等。3、载玻片、玻璃试管、玻璃安瓿等。42药物性废物特征：过期、淘汰、变质或者被污染的废弃的药品。常见：1、废弃的一般性药物，如：抗生素、非处方类药品等。2、废弃
22、的细胞毒性药物和遗传毒性药物，包括:致癌性药物，如环孢霉素、环磷酰胺等；可疑致癌性药物，如:顺铂、丝裂霉素、阿霉素等；免疫抑制剂等。3、废弃的疫苗、血液制品等。43化学性废物特征：具有毒性、腐蚀性、易燃易爆性的废弃的化学物品。常见：1、医学影像室、实验室废弃的化学试剂。2、废弃的过氧乙酸、戊二醛等化学消毒剂。3、废弃的汞血压计、汞温度计。44医疗废物严格按照分类分别置于黄色有警示标识的防渗漏、防破裂、防穿孔的专用垃圾袋/盒中，并贴好标签。45医疗垃圾由卫生员卫生员收集，并填写相应医疗垃圾收集处置登记本，再由指定的人员转运至医院医疗垃圾储存处。微生物培养基、鉴定药敏卡、菌毒株等医疗垃圾移交前需进
23、行预处理（高压灭菌）血液、血清以及体液等标本移交前需用有效氯2000mg/L的消毒液浸泡30分钟以上。针头、玻片等损伤性垃圾要放入黄色锐器盒中。医疗垃圾的收集处置医疗垃圾的收集处置4647三、手三、手卫生生48手卫生手卫生手的清洁与消毒是控制医院感染手的清洁与消毒是控制医院感染最重要、最重要、最简便最简便的措施之一。的措施之一。全球洗手日全球洗手日 每年每年1010月月1515日日49手卫生手卫生无生命的环境是病原体的储存库！无生命的环境是病原体的储存库！50 沾满各种病原菌的双手沾满各种病原菌的双手51手卫生的重要性手卫生的重要性接接 触触 病菌病菌 洗手洗手菌菌525354什么时间洗手什么
24、时间洗手? ?直接接触病人前后直接接触病人前后摘手套后（戴手套不能代替洗手）摘手套后（戴手套不能代替洗手）不论是否戴手套，进行侵袭性操作前不论是否戴手套，进行侵袭性操作前55接触体液或排泄物、粘膜、非完整皮肤或伤口接触体液或排泄物、粘膜、非完整皮肤或伤口敷料后敷料后 护理病人从污染部位移到清洁部位时护理病人从污染部位移到清洁部位时接触紧邻病人的物品后（包括医疗设备）接触紧邻病人的物品后（包括医疗设备）什么时间洗手什么时间洗手? ?5657第一步：第一步：掌心相对，手指并拢相掌心相对，手指并拢相互摩擦互摩擦 手卫生技术手卫生技术58第二步：第二步：手心对手背沿指缝相手心对手背沿指缝相互搓擦互搓擦
25、 手卫生技术手卫生技术59第三步：第三步：掌心相对，双手交叉沿指缝掌心相对，双手交叉沿指缝相互摩擦相互摩擦 手卫生技术手卫生技术60第四步：第四步：双手指交锁，指背在对双手指交锁，指背在对侧掌心侧掌心手卫生技术手卫生技术61第五步：第五步：一手握另一手大拇指旋转搓擦，一手握另一手大拇指旋转搓擦，交换进行交换进行 手卫生技术手卫生技术62第六步第六步 指尖在对侧掌心前指尖在对侧掌心前后擦洗后擦洗手卫生技术手卫生技术63第六步第六步 指尖在对侧掌心前指尖在对侧掌心前后擦洗后擦洗手卫生技术手卫生技术64必要时清洗手腕及手臂65手卫生手卫生医务人员手卫生要求医务人员手卫生要求u卫生手消毒后医务人员手表面的菌落总数应卫生手消毒后医务人员手表面的菌落总数应10cfu/cm10cfu/cm2 2。u外科手消毒后医务人员手表面的菌落总数应外科手消毒后医务人员手表面的菌落总数应 5cfu/cm5cfu/cm2 266 保护我们的双手保护我们的双手冲净洗手液冲净洗手液正确的干手正确的干手 不长时间戴手套不长时间戴手套接触污染物和腐蚀性物品时接触污染物和腐蚀性物品时戴手套戴手套67特别提醒特别提醒 所有的化学消毒剂都有所有的化学消毒剂都有毒性毒性! !不能过度使用不能过度使用! !68Thank You !69
