第十四章第十四章 唾液（斑）检验唾液（斑）检验 一、一、 唾液（斑）的特点唾液（斑）的特点唾液来源：唾液来源：唾液腺的分泌物唾液腺的分泌物--- 腮腮 腺腺、、颌下腺、舌下腺、小唾液腺颌下腺、舌下腺、小唾液腺 浆液浆液 粘粘 液液唾液成分：唾液成分：水分占水分占99.4%，， 有机物有机物---粘粘/球蛋白质、氨基酸、尿素、尿酸、唾液淀粉酶、球蛋白质、氨基酸、尿素、尿酸、唾液淀粉酶、 麦芽糖酶、血型物质麦芽糖酶、血型物质 无机物无机物---钠、钾、氯、钙、铵、磷酸盐、碳酸盐、硫氰酸盐钠、钾、氯、钙、铵、磷酸盐、碳酸盐、硫氰酸盐 其余为固形物（口腔脱落上皮细胞、大量细菌、食物残渣）其余为固形物（口腔脱落上皮细胞、大量细菌、食物残渣）唾液性状：唾液性状：无色、无味、接近中性（无色、无味、接近中性（ph6.6-7.1），），低渗粘蛋白多的时候低渗粘蛋白多的时候 呈粘液状，粘蛋白少的时候较稀薄呈粘液状，粘蛋白少的时候较稀薄唾液分泌：唾液分泌：L。
一、一、一、一、 唾液（斑）的证明唾液（斑）的证明唾液（斑）的证明唾液（斑）的证明淀粉酶淀粉酶淀粉酶淀粉酶+ +口腔黏膜上皮细胞口腔黏膜上皮细胞口腔黏膜上皮细胞口腔黏膜上皮细胞理理理理由由由由 ：：：：唾唾唾唾液液液液中中中中含含含含有有有有大大大大量量量量的的的的淀淀淀淀粉粉粉粉酶酶酶酶，，，，是是是是进进进进行行行行唾唾唾唾液液液液斑斑斑斑斑斑斑斑痕痕痕痕种种种种类类类类鉴鉴鉴鉴定定定定的的的的依依依依据据据据之之之之一一一一，，，，但但但但淀淀淀淀粉粉粉粉酶酶酶酶分分分分布布布布极极极极广广广广（（（（人人人人类类类类粪粪粪粪便便便便、、、、几几几几乎乎乎乎所所所所有有有有的的的的植植植植物物物物、、、、真真真真菌菌菌菌等等等等都都都都含含含含有有有有淀淀淀淀粉粉粉粉酶酶酶酶、、、、人人人人体体体体的的的的其其其其他他他他分分分分泌泌泌泌液液液液液液液液含含含含少少少少量量量量的的的的淀淀淀淀粉粉粉粉酶酶酶酶）））），，，，单单单单纯纯纯纯检检检检出出出出淀淀淀淀粉粉粉粉酶不能确定唾液斑酶不能确定唾液斑酶不能确定唾液斑酶不能确定唾液斑方法：方法：方法：方法：淀粉酶检测：淀粉酶检测：淀粉酶检测：淀粉酶检测：淀粉淀粉淀粉淀粉 + + 碘碘碘碘 ----- ----- 蓝色蓝色蓝色蓝色 （（（（- -）不含淀粉酶）不含淀粉酶）不含淀粉酶）不含淀粉酶 淀粉酶（检材）淀粉酶（检材）淀粉酶（检材）淀粉酶（检材） 糖糖糖糖 + + 碘碘碘碘 ----- ----- 无色无色无色无色 （（（（+ +）可能是唾液）可能是唾液）可能是唾液）可能是唾液 + + 碱性铜碱性铜碱性铜碱性铜 ------ ------ 棕红色沉淀棕红色沉淀棕红色沉淀棕红色沉淀 证明糖的存在证明糖的存在证明糖的存在证明糖的存在 上皮细胞：上皮细胞：上皮细胞：上皮细胞：检材检材检材检材——离心离心离心离心--------涂片涂片涂片涂片--------HEHE染色染色染色染色 如果检出食物残渣，更支持是唾液斑的检测结论如果检出食物残渣，更支持是唾液斑的检测结论如果检出食物残渣，更支持是唾液斑的检测结论如果检出食物残渣，更支持是唾液斑的检测结论 三、唾液斑的遗传标记检测三、唾液斑的遗传标记检测三、唾液斑的遗传标记检测三、唾液斑的遗传标记检测ABOABO血血血血型型型型--------漱漱漱漱口口口口，，，，自自自自然然然然流流流流出出出出唾唾唾唾液液液液置置置置于于于于干干干干净净净净容容容容器器器器，，，，水水水水浴浴浴浴中中中中煮煮煮煮沸沸沸沸1010minmin。
灭灭灭灭火血型分解酶火血型分解酶火血型分解酶火血型分解酶 分分分分 泌泌泌泌 型人的唾液斑型人的唾液斑型人的唾液斑型人的唾液斑----------中和试验测定中和试验测定中和试验测定中和试验测定ABOABO血型血型血型血型 非分泌型人的唾液斑非分泌型人的唾液斑非分泌型人的唾液斑非分泌型人的唾液斑--------酶标抗体免疫测定的方法酶标抗体免疫测定的方法酶标抗体免疫测定的方法酶标抗体免疫测定的方法蛋白蛋白蛋白蛋白/ /酶型酶型酶型酶型--------可以用特殊的双环杯提取腮腺液可以用特殊的双环杯提取腮腺液可以用特殊的双环杯提取腮腺液可以用特殊的双环杯提取腮腺液 多态性蛋白多态性蛋白多态性蛋白多态性蛋白 PaPa腮腺酸性蛋白腮腺酸性蛋白腮腺酸性蛋白腮腺酸性蛋白 Pb Pb 腮腺碱性蛋白腮腺碱性蛋白腮腺碱性蛋白腮腺碱性蛋白 PnPn腮腺中性蛋白腮腺中性蛋白腮腺中性蛋白腮腺中性蛋白 Pm Pm 腮腺中带蛋白腮腺中带蛋白腮腺中带蛋白腮腺中带蛋白 Ph Ph腮腺重蛋白腮腺重蛋白腮腺重蛋白腮腺重蛋白 Pr Pr 唾液富含脯氨酸蛋白唾液富含脯氨酸蛋白唾液富含脯氨酸蛋白唾液富含脯氨酸蛋白 Db Db唾液双带蛋白唾液双带蛋白唾液双带蛋白唾液双带蛋白 GL GL 唾液糖蛋白唾液糖蛋白唾液糖蛋白唾液糖蛋白、、、、 多态性酶多态性酶多态性酶多态性酶 唾液淀粉酶、唾液酯酶、唾液酸性磷酸酶、唾液淀粉酶、唾液酯酶、唾液酸性磷酸酶、唾液淀粉酶、唾液酯酶、唾液酸性磷酸酶、唾液淀粉酶、唾液酯酶、唾液酸性磷酸酶、 唾液过氧化物酶等唾液过氧化物酶等唾液过氧化物酶等唾液过氧化物酶等DNADNA分分分分析析析析--------唾唾唾唾液液液液中中中中含含含含有有有有口口口口腔腔腔腔粘粘粘粘膜膜膜膜脱脱脱脱落落落落上上上上皮皮皮皮细细细细胞胞胞胞------提提提提取取取取DNA---DNA---基基基基因因因因组组组组DNA/DNA/线粒体线粒体线粒体线粒体DNADNA 唾唾唾唾 液：液：液：液：漱口水或口腔式子，提取漱口水或口腔式子，提取漱口水或口腔式子，提取漱口水或口腔式子，提取DNADNA 唾液斑：唾液斑：唾液斑：唾液斑：烟蒂（注意：取有唾液的部分进行烟蒂（注意：取有唾液的部分进行烟蒂（注意：取有唾液的部分进行烟蒂（注意：取有唾液的部分进行DNADNA提取）提取）提取）提取） 四、唾液（斑）的性别鉴定四、唾液（斑）的性别鉴定分分子子杂杂交交---男男性性特特有有的的Y染染色色体体DNA片片断断作作为探针检测性别为探针检测性别 特特异异性性高高、、但但费费时时耗耗力力、、对对DNA的的含量及其完整性要求较高含量及其完整性要求较高PCR技技术术---性性染染色色体体特特异异性性片片断断---片片断断的的有有无无 性性染染色色体体同同源源性性片片断断---片片断断的的数数目目 ZFP----锌锌 指指 状状 蛋蛋 白白 基基 因因 ：：5’ZFYX+3’ZFY/ZFX，，男男340，女，女488 AMG--牙牙釉釉质质蛋蛋白白基基因因：：根根据据碱碱基基缺失部位两侧的同源序列设计引物缺失部位两侧的同源序列设计引物 。