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1、实验一实验一 实验基本知识及实验基本知识及溶液的配制溶液的配制1111v实验目的v了解生化实验室的实验操作规则；v掌握溶液的配制方法三三 缓冲溶液的配制缓冲溶液的配制 1 概念概念： 由一定物质组成的溶液，在加入一定量的酸或碱时，其氢离子浓度改变甚微或基本不变，此种溶液称为缓冲溶液缓冲溶液；这种作用称为缓冲作用缓冲作用；其溶液内所含物质称为缓冲剂缓冲剂，调节缓冲剂的比例可以配置成各种pH的缓冲液。 缓冲剂的组成，多为弱酸及这种弱酸与强碱所组成的盐，或弱碱及这种弱碱与强酸所组成的盐。调节二者的比例可以配制成各种pH的缓冲液。 例如：某一缓冲液由弱酸（HA）及其盐(BA)所组成，它的解离方程式如下
2、： HA H A BA B A 若向缓冲液中加入碱（NaOH）, 则 HA NaOH NaA + H2O 弱酸盐 若向缓冲液中加入酸（HCl）,则 BA HCl BCl HA 弱酸 由此可见，向缓冲液中加酸或碱，主要的变化就是溶液内弱酸（HA）的增加或减少。由于弱酸（HA）的解离度很小，所以它的增加或减少对溶液内氢离子浓度改变不大，因而起到缓冲作用。 实例：磷酸氢二钠实例：磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液磷酸二氢钠缓冲液 原理原理：加入盐酸溶液，其缓冲作用： NaH2PO4 + Na2HPO4 + HCl 2 NaH2PO4 + NaCl 加入氢氧化钠溶液，其缓冲作用： NaH2PO4 + Na2
3、HPO4 + NaOH 2 Na2HPO4 + H2O 缓冲溶液：缓冲溶液：磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液 缓冲剂：缓冲剂： 磷酸氢二钠和磷酸二氢钠 2 配制100 ml 0.2 mol/l Na2HPO4溶液，100 ml 0.2 mol/l NaH2PO4溶液和100 ml 0.2 mol/l Na2HPO4- NaH2PO4缓冲液： (1) 计算 NaH2PO42H2O: 156.030.10.2=3.1206 (g) Na2HPO412H2O: 358.220.10.2=7.1644 (g) (2) 分别配制0.2 mol/l Na2HPO4和0.2 mol/lNaH2PO4各100ml，
4、定容于容量瓶之后。注意：在容量瓶上帖标签。 (3) 按照一定的比例分别量取按照一定的比例分别量取0.2 mol/l Na2HPO4和和0.2 mol/lNaH2PO4溶液，混合后溶液，混合后装入试剂瓶，贴上标签，标签应注明以下内容：装入试剂瓶，贴上标签，标签应注明以下内容：pH值，药品浓度，名称，配制值，药品浓度，名称，配制人和日期等。人和日期等。 (4) 磷酸氢二钠磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/l）的检验：）的检验： 取一滴所配置的缓冲溶液于精密取一滴所配置的缓冲溶液于精密pH试纸上，检测其试纸上，检测其pH值。值。v小组一（A):v10%NaOH溶液 50
5、0ml;（戴手套）v1%CuSO4溶液 100mlv0.5% 甘氨酸溶液 250mlv1mol/l 醋酸溶液 250mlv（醋酸：物质的量浓度17.5mol/l ）v小组二（B)v0.1mol/l 醋酸溶液 250mlv3%硝酸银溶液 100mL （戴手套）v5%三氯乙酸溶液 250mLv0.05mol/L 碳酸钠溶液 250mLv小组三v0.01mol/l 醋酸溶液 250mlv饱和硫酸铵溶液 250mLv0.1茚三酮水溶液茚三酮水溶液 250毫升毫升v酪蛋白的醋酸钠溶液酪蛋白的醋酸钠溶液 500毫升；毫升；v(2克酪蛋白，加少量水在研钵里仔细研磨，将所得到的悬浊液移入到克酪蛋白，加少量水在
6、研钵里仔细研磨，将所得到的悬浊液移入到200毫升锥毫升锥形瓶中，加形瓶中，加50的温水洗涤研钵，转入到锥形瓶内。在锥形瓶内加入的温水洗涤研钵，转入到锥形瓶内。在锥形瓶内加入50毫升的毫升的1. 0 mol/L醋酸钠溶液，并且置于醋酸钠溶液，并且置于50的温水浴，小心晃动锥形瓶，充分溶解。最的温水浴，小心晃动锥形瓶，充分溶解。最好定容到好定容到500毫升。毫升。)v（醋酸：物质的量浓度17.5mol/l ）v小组四v塞氏试剂 500毫升v0.25克间苯二酚溶解到150毫升浓盐酸，加水定容到500毫升v本尼迪特试剂本尼迪特试剂 500毫升v甲 柠檬酸钠86.5克,碳酸钠50克，加300毫升水中加热溶解，定容到425毫升；v乙 8.65克硫酸铜，溶解到50毫升热水，定容到75毫升；v将乙 缓慢加入到甲中，边加边搅拌，混匀，如果有沉淀，过滤，可以长期保存；v费林试剂费林试剂v甲 17.25克硫酸铜，溶解到250毫升水中毫升水中 ；v乙 62.5克氢氧化钠， 68.5克酒石酸钾钠，溶解到250毫升中毫升中 ；小组五v莫氏试剂 100毫升v1%葡萄糖溶液 500毫升v1%蔗糖溶液 500毫升v1%淀粉溶液 500毫升
