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1、输血前检验应重视的几个问题输血前检验应重视的几个问题1不规则抗体与输血安全n输血前要做三血前要做三项检查：血型血型鉴定；定； 抗体抗体筛选；交叉配血交叉配血试验。目的有二：目的有二：使使输入的血液成分有效存活；入的血液成分有效存活；不会引起受血者的不会引起受血者的红细胞胞发生破坏。生破坏。三者有互补作用，缺一不可。三者有互补作用，缺一不可。2不规则抗体与输血安全n在在检验医医学学中中，没没有有几几项检验像像输血血前前检验一一样，临床医生几乎完全依床医生几乎完全依赖其其结果的正确性。果的正确性。输血血前前检验的的每每一一个个环节均均可可能能发生生差差错，标本本搞搞错最最为常常见。给患者患者输入不
2、相容的血液成分入不相容的血液成分导致致严重不良后果：重不良后果：急急性性溶溶血血反反应：多多由由ABO血血型型不不相相容容输血血引引起起，人人为差差错是其主要原因；是其主要原因；迟发性性溶溶血血反反应：多多由由ABO以以外外血血型型不不相相容容输血血所致，所致，输血前血前检验不不规范是其主要原因。范是其主要原因。3不规则抗体与输血安全安全安全输血从源血从源头上抓起就上抓起就应重重视如何如何获取正确的血液取正确的血液标本；本；一一旦旦受受血血者者的的血血标本本张冠冠李李戴戴，安安全全输血血的的所所有有防防范范措措施施都将化都将化为泡影。泡影。减减少少这种种错误的的有有效效方方法法是是给每每一一位
3、位住住院院患患者者手手腕腕上上系系上上一个腕一个腕带（腕（腕环）；）；各各种种各各样的的塑塑料料腕腕带在在国国外外已已广广泛泛使使用用，国国内内已已有有不不少少医医院开始使用。院开始使用。一、重视血液标本一、重视血液标本4不规则抗体与输血安全应制制定定严格格的的“血血标本本的的采采集集与与送送检管管理理制制度度”，并并做做到到医医、护、技人人皆知：、技人人皆知：患患者者在在采采集集血血标本本后后又又转科科或或转床床，需需要要输血血时应重重新新采集血采集血标本（有腕本（有腕带可例外）；可例外）；未未配配戴戴腕腕带而而又又不不知知血血型型的的患患者者，应遵遵循循两两次次采采集集血血标本的本的规定；
4、定；一、重视血液标本一、重视血液标本5不规则抗体与输血安全检验科科做做血血常常规时做做正正定定型型，输血血时由由血血库复复查正正定定型型，加做反定型；加做反定型；或或者者备血血时由由血血库做做血血型型鉴定定，输血血时重重新新采采集集血血标本本做血型做血型鉴定及交叉配血定及交叉配血试验。如如果果两两次次血血标本本血血型型不不一一致致，或或血血标本本血血型型与与申申请单上上的血型不一致，的血型不一致，则应重新采集血重新采集血标本。本。一、重视血液标本一、重视血液标本6不规则抗体与输血安全采采集集血血标时必必须认真真核核对受受血血者者身身份份，只只有有申申请单上上的的资料与患者腕料与患者腕带的的资料
5、完全一致才能采集血料完全一致才能采集血标本。本。使使用用条条形形码的的医医院院，应在在采采血血后后将将标有有患患者者信信息息的的条条形形码标签贴在在试管上并与腕管上并与腕带资料核料核对。一、重视血液标本一、重视血液标本7不规则抗体与输血安全采采集集血血标本本时应要要求求患患者者回回答答自自己己的的姓姓名名，意意识不清不清应通通过亲属确属确认患者身份。患者身份。不得使用来源不明或无人不得使用来源不明或无人对其来源其来源负责的血的血标本。本。血血标本本采采集集后后必必须在在离离开开床床边之之前前在在标本本上上标明明患患者者姓姓名名、住住院院号号及及标本本采采集集日日期期（国国外外要要求求标明出生日
6、期）。明出生日期）。专用用试管管上上有有两两个个相相同同的的号号码条条，在在采采集集标本本后后立即将另一个号立即将另一个号码条条贴在在输血申血申请单上。上。一、重视血液标本一、重视血液标本8不规则抗体与输血安全一一位位医医护人人员不不得得同同时采采集集两两位位或或两两位位以以上上患患者者的的血血标本，以避免将血本，以避免将血样注入到注入到错误的的试管中。管中。最最好好由由采采血血者者和和患患者者在在申申请单上上签名名，共共同同确确认血血标本本的正确性。的正确性。一、重视血液标本一、重视血液标本9不规则抗体与输血安全贴有有标签的的血血标本本连同同输血血申申请单经核核对后后由由医医护人人员送送输血
7、血科科（血血库），双双方方核核对后后签名名确确认。不不得得由由非非医医护人人员送送标本（本（护工送工送标本必本必须经过培培训、考核并授、考核并授权）。）。输血血科科（血血库）工工作作人人员在在检验前前必必须确确认试管管上上的的标签与与申申请单上上的的资料料一一致致，如如有有疑疑问，应重重新新采采集集血血标本本。不得不得电话询问后就擅自修改后就擅自修改错误的的标签及申及申请单。一、重视血液标本一、重视血液标本10不规则抗体与输血安全血血标本要做到八不收：本要做到八不收：血血标本无本无标签或填写不清不收；或填写不清不收；血血标本与申本与申请单所填所填项目不符不收；目不符不收；血血标本量少于本量少于
8、3ml不收；不收；血血标本本被被稀稀释不不收收（如如从从输液液管管获取取血血标本本，应以以生生理理盐水水冲注，并将首先抽取的冲注，并将首先抽取的5ml血液弃去）；血液弃去）；一、重视血液标本一、重视血液标本11不规则抗体与输血安全血血标本本溶溶血血不不收收（溶溶血血性性疾疾病病例例外外，为防防止止对溶溶血血结果果误判判为阴阴性性，建建议反反定定型型及及交交叉叉配配血血的的细胞胞中中加加入入EDTA，以以阻阻断断补体激活途径）；体激活途径）；用肝素治用肝素治疗者的血者的血标本未用本未用鱼精蛋白精蛋白对抗使之凝抗使之凝结不收；不收；一、重视血液标本一、重视血液标本12不规则抗体与输血安全非医非医护
9、人人员送送标本不收；本不收；用用右右旋旋糖糖酐等等大大分分子子物物质治治疗后后采采集集的的血血标本本未未作作标记说明明不收（如已不收（如已标记说明明应将将红细胞洗胞洗涤）。）。一、重视血液标本一、重视血液标本13不规则抗体与输血安全献血者的血献血者的血标本必本必须从与血袋相从与血袋相连的塑料管中的塑料管中获得。得。血血清清和和血血浆原原则上上均均可可用用于于输血血前前检验，但但血血清清更更好好。原原因因是是血血浆中中有有时可可出出现细小小纤维蛋蛋白白包包裹裹红细胞胞的的凝凝块，与凝集反与凝集反应不易区分。不易区分。一、重视血液标本一、重视血液标本14不规则抗体与输血安全国国外外认为必必须使使用
10、用不不抗抗凝凝或或者者EDTA抗抗凝凝的的血血标本本。如如果果用用血血浆标本本，必必须通通过检测弱弱抗抗体体来来评估估其其有有效效性性，确确保保临床有意床有意义的抗体不被漏的抗体不被漏检。配配血血用用的的血血标本本必必须是是输血血前前3天天之之内内的的（我我国国规定定），或血或血标本能代表患者当前免疫学状本能代表患者当前免疫学状态的。的。一、重视血液标本一、重视血液标本15不规则抗体与输血安全国外国外对有有输血史患者的血史患者的标本采集要求（本采集要求（见表表1）表表1 标本采集要求本采集要求一、重视血液标本一、重视血液标本前次输血时间采集血标本时间314天输血前24h内1528天输血前72h
11、内29天3个月输血前1周内16不规则抗体与输血安全当当患患者者反反复复输血血，不不需需要要每每天天采采集集血血标本本，但但要要每每隔隔3天天进行行一一次次抗抗体体筛选试验，随随时了了解解是是否否有有新新的的不不规则抗抗体体产生。生。不不用用溶溶血血的的血血标本本，因因为血血清清中中的的游游离离血血红蛋蛋白白可可蒙蒙蔽蔽抗抗体引体引发的溶血的溶血现象。象。一、重视血液标本一、重视血液标本17不规则抗体与输血安全标本本保保存存不不当当会会溶溶血血、细菌菌污染染、补体体失失活活以以及及不不规则抗抗体效价降低。保存要求体效价降低。保存要求见表表2表表2 标本保存要求本保存要求一、重视血液标本一、重视血
12、液标本18254-30EDTA抗凝全血48h7d不允许血清或血浆不允许7d6个月18不规则抗体与输血安全常常规ABO血血型型鉴定定应包包括括正正反反定定型型，二二者者起起到到互互相相验证和和质控控的的作作用用。我我国国已已规定定常常规血血型型鉴定定还应包包括括Rh（D）定定型。反定型要用型。反定型要用试管法，不用玻片法。管法，不用玻片法。ABO正正定定型型采采用用单克克隆隆抗抗-A、抗抗-B血血型型试剂，抗抗-B试剂不不应该与与获得性得性B抗原反抗原反应。二、坚持正反定型二、坚持正反定型19不规则抗体与输血安全采采用用A和和B试剂细胞胞进行行反反定定型型检测。新新生生儿儿和和以以前前做做过反反
13、定定型型可可省省略略。依依据据记录而而省省略略反反定定型型存存在在一一定定风险，因因为第一次第一次标本有可能采本有可能采错。只只有有正正反反定定型型结果果相相符符才才能能正正确确判判定定ABO血血型型。单纯正正定定型型O型不可靠，型不可靠，单纯反定型反定型AB型也不可靠。型也不可靠。二、坚持正反定型二、坚持正反定型20不规则抗体与输血安全正反定型不一致，需正反定型不一致，需进一步一步鉴定：定：在正定型在正定型试剂中增加抗中增加抗-A1、抗、抗-AB及抗及抗-H：抗抗-AB用用来来确确认弱弱A和和弱弱B抗抗原原（这种种抗抗-A和和抗抗-B的的混混合合物与弱物与弱A和弱和弱B亲和力和力强，发生生强
14、烈反烈反应）；）；二、坚持正反定型二、坚持正反定型21不规则抗体与输血安全抗抗-A1用用来来鉴定定A亚型型（A型型中中A1和和A2这两两种种亚型型占占99.99%，A1约占占80%，A2约占占20%，抗，抗-A1与与A2不反不反应）；）；抗抗-H用用于于鉴定定亚型型及及孟孟买型型（亚型型细胞胞上上有有较多多的的H抗抗原，与抗原，与抗-H反反应较强，而孟，而孟买型型红细胞上无胞上无H抗原）。抗原）。二、坚持正反定型二、坚持正反定型22不规则抗体与输血安全在血型在血型鉴定中有若干因素可定中有若干因素可导致致错误结果：果：人人为因素有：因素有：试剂不不标准、失效或准、失效或污染；染；操作中加操作中加
15、错样本或本或试剂；离心速度不足或离心速度不足或过度；度；细胞与血清比例不当，胞与血清比例不当，结果判断果判断错误等；等；人工判人工判读结果有可能果有可能发生生书写写错误。二、坚持正反定型二、坚持正反定型23不规则抗体与输血安全客客观因素有：因素有：因某种疾病（如白血病）因某种疾病（如白血病）导致抗原减弱；致抗原减弱；红细胞胞发生多凝集生多凝集现象或象或产生生类B物物质（如（如细菌感染）；菌感染）；抗体效价低（如抗体效价低（如婴幼儿、老年人、低免疫球蛋白血症等）；幼儿、老年人、低免疫球蛋白血症等）；血清中有意外抗体，某些血清中有意外抗体，某些药物干物干扰等。等。二、坚持正反定型二、坚持正反定型2
16、4不规则抗体与输血安全n反反定定型型对ABO亚型型的的发现特特别有有帮帮助助。原原因因是是亚型型患患者者红细胞胞上上A或或B抗抗原原很很弱弱，通通过正正反反定定型型易易于于发现二者二者结果不一致，从而引起警惕。果不一致，从而引起警惕。n出出现异常异常结果的果的处理理办法：法：正反定型不一致正反定型不一致应重新重新检测；重重新新检测时应使使用用洗洗涤红细胞胞。为预防防差差错事事故故发生生，建建议使使用用原原始始标本本重重新新配配制制红细胞胞悬液液而而不不用用以前配好的以前配好的红细胞，同胞，同时应做自身做自身对照。照。二、坚持正反定型二、坚持正反定型25不规则抗体与输血安全如果重新如果重新检测结
17、果仍然异常，果仍然异常，请资深工作人深工作人员协助。助。当当检测结果果与与以以往往记录不不一一致致时，应重重新新采采集集血血标本本再再一一次次检测。如如果果一一时无无法法找找到到正正反反定定型型结果果不不一一致致的的原原因因，患患者者又又需需紧急急输血血，此此时可可输注注Rh（D）同同型型的的O型型红细胞胞（正正反反定定型型相相符）。符）。二、坚持正反定型二、坚持正反定型26不规则抗体与输血安全nRh（D）血型）血型鉴定原定原则：对受血者常受血者常规只只测Rh（D）抗原；）抗原；对献献血血者者不不仅要要检测Rh（D）抗抗原原，在在初初筛为阴阴性性时必必须进一步确定是否一步确定是否为弱弱D；弱弱
18、D针对受受血血者者而而言言为Rh（D）阴阴性性，而而对献献血血者者而而言言则为Rh（D）阳性；）阳性；二、坚持正反定型二、坚持正反定型27不规则抗体与输血安全当当Rh（D）定型）定型结果有疑果有疑问时，在确，在确认之前之前应当作阴性当作阴性对待；待；目目前前各各种种单克克隆隆抗抗-D检测部部分分D或或弱弱D时差差异异较大大，建建议使使用两种以上不同厂家的用两种以上不同厂家的试剂有助于弱有助于弱D的定型。的定型。二、坚持正反定型二、坚持正反定型28不规则抗体与输血安全n紧急急情情况况下下血血型型鉴定定时，必必须做做正正定定型型及及阴阴阳阳性性对照照（见表表3），或者正反定型。），或者正反定型。表
19、表3 阴性阴性/阳性阳性对照表照表二、坚持正反定型二、坚持正反定型试剂试剂阳性对照细胞阳性对照细胞阴性对照细胞阴性对照细胞抗抗-A-AA AB B抗抗-B-BB BA A抗抗-D-DD D阳性阳性D D阴性阴性29不规则抗体与输血安全n当当患患者者体体内内含含有有高高效效价价的的冷冷自自身身抗抗体体或或冷冷凝凝集集素素时。采采用用温温的的盐水洗水洗涤细胞有助于血型胞有助于血型鉴定。定。n日日常常工工作作中中需需要要定定期期做做阳阳性性/阴阴性性对照照，使使用用自自动化化检测设备时，应在在常常规检测中中加加入入对照照标本本；采采用用手手工工操操作作时应每每一批次做阳性一批次做阳性/阴性阴性对照。
20、照。二、坚持正反定型二、坚持正反定型30不规则抗体与输血安全n在在可可能能的的情情况况下下，最最好好每每天天在在使使用用定定型型试剂前前作作阳阳性性/阴阴性性对照，以照，以检测其活性。其活性。n在在观察察定定型型结果果时，既既要要观察察有有无无凝凝集集，也也要要观察察凝凝集集强度度，这有助于有助于A、B亚型、型、类B等的等的发现。二、坚持正反定型二、坚持正反定型31不规则抗体与输血安全n对受受血血者者作作抗抗体体筛选的的目目的的是是检出出有有临床床意意义的的抗抗体体，并并可可在在配配血血前前有有足足够的的时间来来选择缺缺乏乏相相应抗抗原原的的相相配配合合的的血血液液，避免盲目配血。避免盲目配血
21、。n方方法法是是用用受受检者者血血清清与与试剂红细胞胞起起反反应，以以发现在在37有有临床意床意义的抗体。的抗体。三、做好抗体筛选三、做好抗体筛选32不规则抗体与输血安全n抗抗体体筛选试验用用的的筛选细胞胞通通常常以以2 23 3个个单人人份份的的O O型型红细胞胞组成一套成一套筛选细胞胞试剂。n抗抗体体筛选用用试剂红细胞胞必必须含含有有1818种种抗抗原原，所所表表达达的的抗抗原原以以纯合合子子基基因因所所表表达达的的抗抗原原为佳佳，随随机机获得得的的O O型型红细胞胞易易造造成成抗体漏抗体漏检。三、做好抗体筛选三、做好抗体筛选33不规则抗体与输血安全n抗抗体体筛选试验的的方方法法很很多多，
22、国国外外以以间接接抗抗球球蛋蛋白白法法为金金标准准，国内中小医院多采用凝聚胺法，大医院多采用微柱凝胶技国内中小医院多采用凝聚胺法，大医院多采用微柱凝胶技术。n微微柱柱凝凝胶胶法法是是简单、有有效效检测不不规则抗抗体体的的方方法法，但但无无法法排排除无除无临床意床意义抗体的干抗体的干扰。n抗抗体体筛选用用的的红细胞胞一一定定要要保保存存在在44环境境中中，以以防防红细胞胞上抗原上抗原丢失。失。三、做好抗体筛选三、做好抗体筛选34不规则抗体与输血安全n抗体抗体筛选试验并非能并非能检出所有有出所有有临床意床意义的抗体。原因有二：的抗体。原因有二：一是低一是低频抗原的抗体可能被忽略；抗原的抗体可能被忽
23、略；二是以往所二是以往所产生的抗体已降至生的抗体已降至难以以检出的水平。出的水平。n以往的抗体以往的抗体鉴定定记录有重要参考价有重要参考价值。三、做好抗体筛选三、做好抗体筛选35不规则抗体与输血安全n国国外外对所所有有受受血血者者常常规作作抗抗体体筛选试验，并并认为抗抗体体筛选是是检测不不规则抗体最可靠、最敏感的方法。抗体最可靠、最敏感的方法。n我国我国规定凡遇下列情况之一必定凡遇下列情况之一必须做抗体做抗体筛选试验：交叉配血不合交叉配血不合时；对有有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者。血者。三、做好抗体筛选三、做好抗体筛选36不规则抗体与输血安全n如如抗
24、抗体体筛选试验阳阳性性，缺缺乏乏谱细胞胞鉴定定其其特特异异性性时，可可送送有有条件的条件的单位位鉴定。定。n抗体抗体鉴定定试验包括：包括：自自身身细胞胞检查：确确定定患患者者血血清清内内是是否否有有自自身身抗抗体体或或自自身身抗抗体体与同种抗体并存；与同种抗体并存；三、做好抗体筛选三、做好抗体筛选37不规则抗体与输血安全使使用用试剂谱细胞胞：谱细胞胞一一般般是是由由8 81616单人人份份的的已已知知血血型型表表型的型的O O型型红细胞配套胞配套组成，具有各种不同的抗原成分；成，具有各种不同的抗原成分；根据根据谱细胞的反胞的反应格局一般可以格局一般可以鉴定常定常见的抗体。的抗体。n国国外外认为
25、采采用用一一组谱细胞胞进行行抗抗体体鉴定定有有一一定定的的局局限限性性，有有可可能能漏漏检常常见的的组合合抗抗体体。采采用用两两组谱细胞胞可可以以提提高高检出出组合合抗体的能力。抗体的能力。三、做好抗体筛选三、做好抗体筛选38不规则抗体与输血安全n输血血前前必必须严格格交交叉叉配配血血，这是是防防止止输血血前前检验程程序序中中发生生差差错的最后一道的最后一道“安全安全岗”。n所所谓“严格格”是是指指所所采采用用的的方方法法必必须能能检出出ABOABO不不相相容容及及ABOABO系系统之外的有之外的有临床意床意义的抗体（的抗体（IgGIgG抗体）。抗体）。四、严格交叉配血四、严格交叉配血39不规
26、则抗体与输血安全n交叉配血的方法有：交叉配血的方法有：主主侧交叉：由患者血清和供者交叉：由患者血清和供者红细胞胞组成；成；次次侧交交叉叉：由由患患者者红细胞胞和和供供者者血血清清（浆）组成成（由由于于我我国国尚尚未未对供供者者进行行抗抗体体筛选，故故次次侧交交叉叉是是有有必必要要的的，尤尤其其是是输全血全血时）；）；自自身身对照照：由由患患者者自自身身血血清清和和患患者者自自身身红细胞胞组成成（自自身身对照有助于分析解照有助于分析解释交叉配血交叉配血试验中出中出现的阳性的阳性结果）。果）。四、严格交叉配血四、严格交叉配血40不规则抗体与输血安全n交交叉叉配配血血的的方方法法有有盐水水法法、酶法
27、法、抗抗球球蛋蛋白白法法、凝凝聚聚胺胺法法等等，各有各有优缺点：缺点：盐水法：水法：简便、快捷、价廉，但有局限性：便、快捷、价廉，但有局限性：盐水水法法只只能能检出出ABOABO、P P、LewisLewis、MNMN等等系系统的的抗抗体体，此此类抗抗体体属属天天然然抗抗体体，属属IgMIgM球球蛋蛋白白。IgMIgM是是五五聚聚体体，分分子子量量大大，分分子子长度度长，能在，能在盐水中出水中出现可可见的凝集反的凝集反应；四、严格交叉配血四、严格交叉配血41不规则抗体与输血安全盐水水法法不不能能检出出RhRh、KellKell、KiddKidd、DuffyDuffy等等系系统的的抗抗体体，此此
28、类抗抗体体由由免免疫疫产生生，属属IgGIgG球球蛋蛋白白。IgGIgG是是单聚聚体体，分分子子量量小小，分子分子长度短，不能在度短，不能在盐水中起凝集反水中起凝集反应。四、严格交叉配血四、严格交叉配血42不规则抗体与输血安全交交叉叉配配血血不不能能只只用用盐水水法法，还要要选用用能能有有效效检出出IgGIgG抗抗体体的的方法，方法，这些方法有：些方法有：酶法法：对RhRh系系统较为敏敏感感，但但会会改改变某某些些血血型型系系统的的抗抗原原构型，加之不易保存，构型，加之不易保存，应用受限；用受限；抗球蛋白法是抗球蛋白法是检测IgGIgG抗体最可靠的方法，但操作繁抗体最可靠的方法，但操作繁琐。四
29、、严格交叉配血四、严格交叉配血43不规则抗体与输血安全凝凝聚聚胺胺法法对KellKell系系统之之外外的的大大多多数数血血型型系系统敏敏感感度度高高，且且操作操作简便，快速。便，快速。微微柱柱凝凝胶胶试验（卡卡式式配配血血）灵灵敏敏度度高高，特特异异性性强，结果果直直观，能能自自动化化操操作作，还能能保保存存，缺缺点点是是价价格格昂昂贵、耗耗时长、可出可出现假阳性，有条件的医院可采用。假阳性，有条件的医院可采用。四、严格交叉配血四、严格交叉配血44不规则抗体与输血安全欧欧美美国国家家常常用用抗抗体体球球蛋蛋白白法法或或微微柱柱凝凝胶胶法法，因因为白白种种人人中中约有有9%9%是是KellKel
30、l（K K）阳性，而凝聚胺）阳性，而凝聚胺对KellKell系系统不敏感。不敏感。我我国国中中小小医医院院适适合合用用凝凝聚聚胺胺法法，因因为凝凝聚聚胺胺对RhRh系系统特特别敏敏感感，在在我我国国以以RhRh系系统引引起起的的迟发性性溶溶血血性性输血血反反应最最为常常见，而而汉族人几乎族人几乎100%100%为K K抗原阴性，通常不考抗原阴性，通常不考虑抗抗-K-K。四、严格交叉配血四、严格交叉配血45不规则抗体与输血安全n凝聚胺凝聚胺试验原理原理凝凝聚聚胺胺（PolybrenePolybrene）是是一一种种阳阳离离子子聚聚合合物物，溶溶解解后后能能产生生很很多多正正电荷荷，可可中中和和红
31、细胞胞表表面面负电荷荷，引引起起红细胞胞非非特特异异性凝聚，性凝聚，这种凝聚是可逆的；种凝聚是可逆的；如如果果是是抗抗体体致致敏敏的的红细胞胞在在凝凝聚聚胺胺作作用用下下发生生凝凝集集，这种种凝凝集是不可逆的；集是不可逆的；四、严格交叉配血四、严格交叉配血46不规则抗体与输血安全在在凝凝聚聚胺胺试验中中，首首先先让红细胞胞和和血血清清在在低低离离子子介介质中中孵孵育育，促促进抗抗体体与与红细胞胞抗抗原原结合合，然然后后加加入入凝凝聚聚胺胺使使红细胞胞凝凝聚聚，再再加加入入枸枸橼酸酸钠重重悬液液（枸枸橼酸酸根根带负电荷荷）中中和和凝凝聚聚胺胺正正电荷荷，恢恢复复红细胞胞表面的表面的负电荷；荷；重
32、重悬后后如如果果是是非非特特异异性性凝凝聚聚，则由由于于红细胞胞表表面面负电荷荷的的排排斥斥作作用用，红细胞胞散散开开，结果果为阴阴性性；若若是是由由于于抗抗原原抗抗体体引引起起的的特特异异性性凝凝集集则不不会会散散开开，结果果为阳性。阳性。四、严格交叉配血四、严格交叉配血47不规则抗体与输血安全n凝聚胺凝聚胺试验的注意事的注意事项加加入入重重悬液液后后，应尽尽快快观察察结果果，最最好好在在1min1min内内，最最长不要超不要超过3min3min，以免弱反，以免弱反应消失；消失；凝凝聚聚胺胺溶溶液液若若放放玻玻璃璃瓶瓶中中太太久久作作用用会会变弱弱，所所以以必必须保存在黑色塑料瓶中；保存在黑
33、色塑料瓶中；凝凝聚聚胺胺是是一一种种抗抗肝肝素素药物物，所所以以使使用用含含肝肝素素的的血血标本要稍稍多加一些凝聚胺来中和肝素。本要稍稍多加一些凝聚胺来中和肝素。四、严格交叉配血四、严格交叉配血48不规则抗体与输血安全n主主侧交叉配血不相合的原因：交叉配血不相合的原因：患者或供者患者或供者ABOABO血型定型不正确；血型定型不正确；患者血清中存在同种抗体与供者患者血清中存在同种抗体与供者红细胞上的相胞上的相应抗原起反抗原起反应；四、严格交叉配血四、严格交叉配血49不规则抗体与输血安全患患者者血血清清中中存存在在自自身身抗抗体体，与与供供者者红细胞胞上上的的相相应抗抗原原起起反反应；患者血清中白
34、蛋白与球蛋白比例不正常引起的患者血清中白蛋白与球蛋白比例不正常引起的缗钱状假凝集；状假凝集；血血浆扩容容剂的影响或的影响或试剂被被污染等。染等。四、严格交叉配血四、严格交叉配血50不规则抗体与输血安全n主主侧（+ +）、自自身身（- -）、抗抗体体筛选（- -），可可能能原原因因是：是：患者或供者患者或供者ABOABO血型血型错误；（重新定型，（重新定型，检查患者患者亚型、型、输血史及移植史）血史及移植史）患者血清中有抗体，但患者血清中有抗体，但筛选细胞上无相胞上无相应抗原；抗原；（对患者患者进行抗体行抗体鉴定）定）供者供者红细胞已被致敏。胞已被致敏。（对供者做直接抗球蛋白供者做直接抗球蛋白试
35、验）四、严格交叉配血四、严格交叉配血51不规则抗体与输血安全n主主侧（+ +）、自身（）、自身（- -）、抗体）、抗体筛选（+ +），可能原因是：），可能原因是：患者血清中的同种抗体与供者患者血清中的同种抗体与供者红细胞上相胞上相应抗原起反抗原起反应。（对患者患者进行抗体行抗体鉴定，定，选择无无对应抗原的血液抗原的血液输注。）注。）四、严格交叉配血四、严格交叉配血52不规则抗体与输血安全n主主侧（+ +）、自身（）、自身（+ +）、抗体）、抗体筛选（+ +），可能原因是：），可能原因是：患者血清中可能同患者血清中可能同时存在自身抗体和同种抗体；存在自身抗体和同种抗体；（对患者血清自身吸收及抗体
36、患者血清自身吸收及抗体鉴定，用吸收后血清配血）定，用吸收后血清配血）白蛋白白蛋白/ /球蛋白比球蛋白比值不正常不正常（盐水添加水添加试验解决解决缗钱状假凝集）状假凝集）血血浆扩容容剂（如右旋糖（如右旋糖酐）的影响；）的影响；（洗（洗涤细胞，或等待胞，或等待扩容容剂消失后重新抽取消失后重新抽取标本）本）污染染（使用（使用洁净的器具和符合要求的的器具和符合要求的试剂）四、严格交叉配血四、严格交叉配血53不规则抗体与输血安全n交交叉叉配配血血实验中中，离离心心力力、离离心心时间不不当当，可可造造成成假假阴阴性性或或假阳性假阳性结果。果。n恒温水浴箱温度不正确也会造成恒温水浴箱温度不正确也会造成错误结
37、果。果。n对于于高高效效价价O O型型血血清清出出现前前带现象象时，应当当用用EDTAEDTA盐水水适适当当稀稀释，以阻止，以阻止补体体C C1 1引起的凝集。引起的凝集。n出出现溶血或部分溶血溶血或部分溶血应判判为阳性阳性结果（果（标本本身溶血例外）。本本身溶血例外）。四、严格交叉配血四、严格交叉配血54不规则抗体与输血安全n含含有有冷冷凝凝集集素素的的患患者者交交叉叉配配血血时可可采采用用3737生生理理盐水水洗洗涤3 3次，如次，如还显弱凝集，再用弱凝集，再用4242或或4545盐水洗水洗1 1次再配血。次再配血。n温温抗抗体体型型的的自自身身免免疫疫性性溶溶血血性性贫血血患患者者血血清
38、清中中的的游游离离抗抗体体有有时很很难吸吸收收完完全全，导致致配配血血困困难。在在排排除除同同种种抗抗体体的的情情况况下下可可选择凝集反凝集反应弱的同型血液弱的同型血液输注，亦可注，亦可输注注O O型洗型洗涤红细胞。胞。四、严格交叉配血四、严格交叉配血55不规则抗体与输血安全n某某些些紧急急情情况况下下需需要要快快速速配配血血，建建议血血清清（血血浆）与与细胞胞比比例例为2:12:1，细胞胞悬液液浓度度为2%2%3%3%。同同时离离心心前前孵孵育育2 25min5min，有利于，有利于检测弱的弱的ABOABO抗体。抗体。n婴儿儿输注注O O型型血血或或ABOABO同同型型血血，应当当采采用用母
39、母亲的的血血清清（血血浆）进行交叉配血。行交叉配血。四、严格交叉配血四、严格交叉配血56不规则抗体与输血安全n在在任任何何情情况况下下，一一定定要要选择ABOABO和和RhRh（D D）同同型型的的血血液液。如如果果同同型型血血不不够用用，可可以以输注注O O型型相相合合的的添添加加剂红细胞胞（红细胞胞悬液、液、悬浮浮红细胞），胞），这种种红细胞所含血胞所含血浆量很少。量很少。nABAB型型血血液液不不能能满足足供供应，可可选择A A型型或或B B型型红细胞胞，尽尽量量不不用用O O型，型，O O型型红细胞以胞以备它用。它用。四、严格交叉配血四、严格交叉配血57不规则抗体与输血安全nRhRh（
40、D D）阴阴性性血血不不够用用，可可以以选择RhRh（D D）阳阳性性血血，但但有有生生育育能能力的力的妇女不能用。女不能用。n在在大大量量输血血时如如果果输的的是是同同型型相相合合的的添添加加剂红细胞胞（未未输全全血血），供供者者之之间可可以以不不做做交交叉叉配配血血试验。若若是是输了了ABOABO不不同同型型的的相相合合红细胞胞，以以后后要要尽尽快快输注注与与患患者者同同型型的的红细胞胞，不不要要坚持一直持一直应用用ABOABO不同型的相合不同型的相合红细胞。胞。四、严格交叉配血四、严格交叉配血58不规则抗体与输血安全病例讨论病例讨论例例1： 王某，女，王某，女，44岁，因乳腺癌岁，因乳腺
41、癌1年前作根治术。年前作根治术。手术期间患者输手术期间患者输A型全血型全血400ml，无不良反应。术，无不良反应。术后曾化疗后曾化疗8次。此次入院进行第次。此次入院进行第9次化疗。血常规：次化疗。血常规：红细胞红细胞 4.121012/L，血红蛋白，血红蛋白125g/L，白细胞，白细胞 3.3109/L，血小板，血小板 60109/L。59不规则抗体与输血安全血型血型“A”。因白细胞和血小板偏低，为了能顺。因白细胞和血小板偏低，为了能顺利进行第利进行第9次化疗，给患者输当天新鲜全血次化疗，给患者输当天新鲜全血400ml ，输血过程无任何反应。化疗顺利。输血，输血过程无任何反应。化疗顺利。输血后
42、第后第7天血红蛋白降为天血红蛋白降为90 g/L。再输新鲜全血。再输新鲜全血400ml，输后约，输后约20分钟，患者觉腰痛，继而出现分钟，患者觉腰痛，继而出现畏寒、头痛、恶心、体温畏寒、头痛、恶心、体温39，尿呈酱油样。，尿呈酱油样。经及时抢救，患者转危为安。经及时抢救，患者转危为安。60不规则抗体与输血安全例例1复查血型及交叉配血试验复查血型及交叉配血试验一、患者血型：一、患者血型：“A”（CCDee) ； 供者血型：供者血型：“A”(CCDEe) 二、交叉配血试验：二、交叉配血试验： 盐水介质不发生凝集反应；盐水介质不发生凝集反应； 抗球蛋白和酶介质中，主侧发生强凝集反应抗球蛋白和酶介质中
43、，主侧发生强凝集反应 ，次侧无凝集反应。，次侧无凝集反应。三、抗体鉴定：三、抗体鉴定： 患者血清中存在抗患者血清中存在抗E抗体，效价：抗体，效价：512。四、问题：四、问题： 1、该患者是什么输血反应？、该患者是什么输血反应？ 2、诊疗过程中有哪些失误？、诊疗过程中有哪些失误？61不规则抗体与输血安全例例2：患者女，李患者女，李芝，芝，39岁，农民，因子宫肌岁，农民，因子宫肌瘤行子宫次全切除术。术前定血型为瘤行子宫次全切除术。术前定血型为A型，型，Hb110g/L。术中失血约。术中失血约400mL，手术结束时，手术结束时输输A型新鲜全血型新鲜全血400mL。输完血后，回病房约。输完血后，回病房
44、约10分钟，患者寒战、腰痛、发热分钟，患者寒战、腰痛、发热39，1.5小小时后排出酱油色尿，手术切口渗血不止，即按时后排出酱油色尿，手术切口渗血不止，即按急性溶血反应治疗，再次核定血型为急性溶血反应治疗，再次核定血型为B型。型。2天天后出现急性肾功能衰竭。后出现急性肾功能衰竭。3天后，死于转院途天后，死于转院途中。中。问题：问题：1.该患者是什么输血不良反应？该患者是什么输血不良反应？ 2.本例应吸取什么教训？本例应吸取什么教训？62不规则抗体与输血安全调查发现调查发现采集标本的医护人员误将采集标本的医护人员误将39岁看成岁看成39床，错用床，错用39床的血标本测定血型并作配血试验。床的血标本
45、测定血型并作配血试验。39床血型床血型为为A型，女，李型，女，李兰。兰。实际上，患者为实际上，患者为28床，血型为床，血型为B型。型。63不规则抗体与输血安全IgM抗体凝集红细胞示意图抗体凝集红细胞示意图 IgM在盐水介质中产生凝集在盐水介质中产生凝集64不规则抗体与输血安全IgG凝集红细胞示意图凝集红细胞示意图 IgG 在盐水介质中一般不产生凝集在盐水介质中一般不产生凝集65不规则抗体与输血安全红细胞间的距离缩短，红细胞间的距离缩短， IgG产生凝集产生凝集 酶处理、凝聚胺酶处理、凝聚胺66不规则抗体与输血安全 抗球蛋白试验抗球蛋白试验 抗球蛋白抗球蛋白67不规则抗体与输血安全68不规则抗体与输血安全不规则抗体与输血安全
