革兰氏染色法

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1、微生物学实验微生物学实验实验二实验二 革兰氏染色法革兰氏染色法 刘森林 执 教 单单 位位 生命科学学院生命科学学院生命科学学院生命科学学院v学学习习并并初初步步掌掌握握革革兰兰氏氏染染色色法法初初步步认认识识细细菌菌的形态特征的形态特征 v了解革兰氏染色的原理及其在细菌分类鉴定了解革兰氏染色的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性中的重要性 实验目的实验目的实验原理实验原理革兰氏阳性菌：革兰氏阳性菌：革兰氏阴性菌：革兰氏阴性菌：v1. 制片：取菌种培养物常规涂片、干燥、固定。制片：取菌种培养物常规涂片、干燥、固定。v2. 初染：滴加结晶紫（以刚好将菌膜覆盖为宜）初染：滴加结晶紫（以刚好将菌膜覆盖为

2、宜）染色染色1-2分钟，水洗。分钟，水洗。v3. 媒染：用碘液冲去残水，并用碘液覆盖约媒染：用碘液冲去残水，并用碘液覆盖约1分钟，分钟，水洗。水洗。v4. 脱色：用滤纸吸取载玻片上的残水，将载玻片脱色：用滤纸吸取载玻片上的残水，将载玻片倾斜，在白色背景下，用滴管流加倾斜，在白色背景下，用滴管流加95%的乙醇脱的乙醇脱色，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗。色，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗。 三三.实验步骤实验步骤:v注意：乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环注意：乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节。脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌；脱节。脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌；脱色过度，阳性菌被误染成阴性菌。脱色时间色过度，阳性菌被误染成阴性菌。脱色时间一般为一般为20-30秒。秒。v5. 复染：用番红液复染约复染：用番红液复染约2分钟，水洗。分钟，水洗。v6.镜检：干燥后，用油镜观察。镜检：干燥后，用油镜观察。 三三.实验步骤实验步骤: 作业作业 v根据观察结果，画出大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的形态图，并注明菌体染色后的颜色，说明是G+还是G-。