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1、实验二实验二 温度、激活剂温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影和抑制剂对酶活力的影响响温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响一、实验目的一、实验目的1 1、了了解解温温度度对对酶酶活活性性的的影影响响，学学会会检检测测酶酶最最适温度的方法。适温度的方法。2 2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。3 3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应速、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。度的原理和方法。温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响二、实验原理二、实验原理（一）（一）温度对酶活性的影响温度对酶活性的影响一方面是温度升高一方面是温度升高, ,酶促反酶促反应速度加快
2、。应速度加快。另一方面另一方面, ,温度升高温度升高, ,也将导也将导致酶活性降低甚至丧失。致酶活性降低甚至丧失。 因此大多数酶都有一个因此大多数酶都有一个最适最适温度温度( (即酶促反应速度最快即酶促反应速度最快时的环境温度时的环境温度) )酶的最适温度不是一个常数，酶的最适温度不是一个常数，它与作用时间长短有关。它与作用时间长短有关。 温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响人唾液中淀粉酶为人唾液中淀粉酶为-为淀粉酶，在唾液腺细为淀粉酶，在唾液腺细胞内合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉被胞内合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉被水解，经过一系列被称为糊精的中间产物，水解，经过一系列被称为糊精的中间产物，
3、最后生成麦芽糖。不同阶段的糊精遇碘有最后生成麦芽糖。不同阶段的糊精遇碘有不同颜色反应，分别呈现为：不同颜色反应，分别呈现为： 蓝色蓝色 紫色紫色 褐色褐色 红色红色棕黄色棕黄色( (遇碘不显色遇碘不显色) )。温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响（二）激活剂和抑制剂对酶反应的影响二）激活剂和抑制剂对酶反应的影响 酶活力常受到有些物质的影响酶活力常受到有些物质的影响, ,有些物质有些物质能使酶活力增强能使酶活力增强, ,称为酶的称为酶的激活剂；激活剂； 另一些另一些物质则能使酶活力降低，物质则能使酶活力降低，称为酶的称为酶的抑制剂。抑制剂。 剂i温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响三、试剂和器材三、试剂
4、和器材1 1、实验器材、实验器材 (1) (1)恒温水浴锅恒温水浴锅 (2)(2)试管试管 (3)(3)烧杯烧杯 (4)(4)量筒量筒 (5)(5)玻璃棒玻璃棒 (6)(6)白磁板白磁板 (7)(7)铁三角架铁三角架 (8)(8)酒精灯酒精灯 (10 )(10 )试管夹试管夹 (11)(11)试管架试管架 (12)(12)秒表秒表 2 2、实验试剂、实验试剂 (1) 0.5% (1) 0.5%淀粉的淀粉的0.3%0.3%氯化钠溶液氯化钠溶液 (2) KI-I(2) KI-I2 2 (3) 1% NaCl (4) 1% CuSO(3) 1% NaCl (4) 1% CuSO4 4 (5) 1%
5、Na (5) 1% Na2 2SOSO4 4 (6) 0.1%(6) 0.1%淀粉溶液淀粉溶液 (7) (7) 唾液淀粉酶唾液淀粉酶温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响四、操作步骤四、操作步骤（一）温度对酶活性的影响（一）温度对酶活性的影响 取取6 6支试管，编号，按下表的顺序准确支试管，编号，按下表的顺序准确地加入各种试剂，记录结果。地加入各种试剂，记录结果。温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响 管管 号号1 12 23 30.5%0.5%淀粉的淀粉的0.3%0.3%氯氯化钠（化钠（mL）2.02.02.02.02.02.0 温度（温度（）冰浴冰浴37377070各保温各保温10 min10 min
6、 管管 号号1 1E E2 2E E3 3E E唾液淀粉酶（唾液淀粉酶（mL）1.01.01.01.01.01.0 温度（温度（）冰浴冰浴37377070各保温各保温10 min10 min 1 1和和1 1E E，2 2和和2 2E E各对应管混和并摇匀后各对应管混和并摇匀后, ,置各温度保温置各温度保温5-10 min 5-10 min * * KI-I KI-I2 2液（液（滴滴）1 11 11 1 记录观察结果记录观察结果* *温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响( (二二) ) 激活剂和抑制剂对酶活性的影响激活剂和抑制剂对酶活性的影响试 剂 管管 号号12341% NaCl（mL）1.0
7、1% CuSO4（ mL）1.0蒸馏水蒸馏水（ mL）1.01% Na2SO4（ mL）1.00.1%淀粉淀粉（ mL ）1.51.51.51.5 唾液淀粉酶唾液淀粉酶1.01.01.01.0摇匀，置摇匀，置37水浴中水浴中515分钟，取出冷却。分钟，取出冷却。 KI-I2（滴滴）1-2滴滴1-2滴滴1-2滴滴1-2滴滴 记录结果记录结果温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响五、注意事项五、注意事项 1 1、 本实验中的保温时间是本实验中的保温时间是5 min-10 min5 min-10 min，因不同的，因不同的唾液淀粉酶的活性是不同的。唾液淀粉酶的活性是不同的。 2 2、淀粉溶液与酶液务必充分混匀，反应后才能得到、淀粉溶液与酶液务必充分混匀，反应后才能得到理想的颜色梯度变化结果。理想的颜色梯度变化结果。思考题思考题 1 1、 高温导致酶活性丧失的分子机理是什么？如何在酶高温导致酶活性丧失的分子机理是什么？如何在酶 的分离纯化中克服这种影响？的分离纯化中克服这种影响？ 2 2、 哪些因素可以导致酶活性的降低？哪些因素可以导致酶活性的降低？剂i温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响
