动物实验前的准备与防护措施

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1、动物实验前的准备及动物实验前的准备及自身保护措施自身保护措施v1、动物实验的准备。、动物实验的准备。v2、自身防护措施。、自身防护措施。一、动物实验的常用方法一、动物实验的常用方法v 在医学教学、科研和医学工作中，不论是从事基础医学的在医学教学、科研和医学工作中，不论是从事基础医学的还是临床医学、预防医学，都需要用实验动物来进行各种实验。还是临床医学、预防医学，都需要用实验动物来进行各种实验。通过对动物的实验的观察和分析，来研究和解决医学上存在的通过对动物的实验的观察和分析，来研究和解决医学上存在的许多问题，动物实验方法已成为医学科学研究和教学工作中必许多问题，动物实验方法已成为医学科学研究和

2、教学工作中必不可少的重要手段。动物实验方法是多种多样的，在医学的各不可少的重要手段。动物实验方法是多种多样的，在医学的各个领域内都有其不同的应用，其中一些基本方法都是共同性的，个领域内都有其不同的应用，其中一些基本方法都是共同性的，如动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、如动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等，不管是从事何种课题的医学研究都要用急救、处死、尸检等，不管是从事何种课题的医学研究都要用这套基本方法，因此，动物实验基本方法，已成为医学科技工这套基本方法，因此，动物实验基本方法，已成为医学科技工作者必须掌握的一项基本功。作者必须掌握的

3、一项基本功。v 动物实验按机体水平不同的可分为整体实验和动物实验按机体水平不同的可分为整体实验和离体实验两种，还可进一步具体地分为亚细胞、细离体实验两种，还可进一步具体地分为亚细胞、细胞、组织、器官，整体动物和无损伤动物等水平的胞、组织、器官，整体动物和无损伤动物等水平的实验。按动物实验的时间长短可分为急性实验（实验。按动物实验的时间长短可分为急性实验（2天天以内）、亚急性实验（以内）、亚急性实验（14周）和慢性实验（周）和慢性实验（26个月或更长时间甚至整个生命期）。个月或更长时间甚至整个生命期）。v 动物实验的方法很多，如有生理学的动物实验动物实验的方法很多，如有生理学的动物实验方法；病理

4、生理学的动物实验方法；药理学的动物方法；病理生理学的动物实验方法；药理学的动物实验方法；病理解剖学、组织学的动物实验方法；实验方法；病理解剖学、组织学的动物实验方法；微生物学和免疫学的动物实验方法等等。微生物学和免疫学的动物实验方法等等。 下面列举一些动物实验的常用方法：下面列举一些动物实验的常用方法： 1、复制动物模型法；、复制动物模型法； 2、切开、分离法；、切开、分离法； 3、切除和注入提取液法；、切除和注入提取液法； 4、离体组织器官法；、离体组织器官法； 5、瘘管法；、瘘管法； 6、移植法；、移植法； 7、生物电、活性观察法；、生物电、活性观察法； 8、病理解剖学、组织学观察法；、病

5、理解剖学、组织学观察法；9、免疫学观察法；、免疫学观察法； 10、其它方法、其它方法 如联体动物法，条件反射法、生物遗传法、放射生物法、如联体动物法，条件反射法、生物遗传法、放射生物法、药物化学法等。药物化学法等。实验准备实验准备v（一）理论准备（一）理论准备（软件准备）软件准备）v（二）条件准备（二）条件准备（硬件准备）（硬件准备）（一）理论准备（一）理论准备软件准备软件准备实验设计实验设计实验设计：指科学研究的一般程序的知识它包括实验设计：指科学研究的一般程序的知识它包括从问题的提出、假说的形成、变量的选择等等一从问题的提出、假说的形成、变量的选择等等一直到结果的分析、论文的写作一系列内容

6、。它给直到结果的分析、论文的写作一系列内容。它给研究者展示如何进行科学研究的概貌，试图解决研究者展示如何进行科学研究的概貌，试图解决研究的全过程。研究的全过程。实验设计的内容实验设计的内容一一 动物实验前的理论准备动物实验前的理论准备（一）了解有关实验动物方面的基础知识（一）了解有关实验动物方面的基础知识1 首先要了解实验动物科学方面的基础理论，特别是熟悉实验首先要了解实验动物科学方面的基础理论，特别是熟悉实验动物的生物学特性。动物的生物学特性。2 其次其次要掌握有关动物实验方法学方面的基础知识和基本技能。要掌握有关动物实验方法学方面的基础知识和基本技能。（二）正确（二）正确选题立项和设定假设

7、选题立项和设定假设1 选题应遵循的原则选题应遵循的原则（1）科学性（）科学性（2）目的性）目的性（3）创造性（创造性（4）可行性）可行性2 假说是预先假定的答案或解释，亦即是实验的预期结果。假说是预先假定的答案或解释，亦即是实验的预期结果。动物实验设计动物实验设计（三）实验研究计划和方案的制订（三）实验研究计划和方案的制订实验研究计划和方案的制订是指对动物实验研实验研究计划和方案的制订是指对动物实验研究中涉及的各项基本问题的合理安排。究中涉及的各项基本问题的合理安排。（四）实验方法的选定（四）实验方法的选定无论选择何种实验方法，均应保证以下几点无论选择何种实验方法，均应保证以下几点（1）可靠性

8、）可靠性（2）优越性）优越性（3）创造性）创造性动物实验设计的意义动物实验设计的意义一、正确的动物实验设计对提高科学研究质量、发表一、正确的动物实验设计对提高科学研究质量、发表高水平的学术论文非常重要高水平的学术论文非常重要二、目前许多动物实验质量不高二、目前许多动物实验质量不高v1、动物质量不高动物质量不高,低级别动物给实验结果的科学性低级别动物给实验结果的科学性带来影响。带来影响。v2、实验设计和统计学分析能力有限、实验设计和统计学分析能力有限三、一个好的实验设计，对统计学分析来说帮助很大，三、一个好的实验设计，对统计学分析来说帮助很大，可以使问题变得更加容易解决可以使问题变得更加容易解决

9、四、一个不正确的实验设计，导致结果信息无用。四、一个不正确的实验设计，导致结果信息无用。创新的意义！创新的意义！个人成就个人成就1976年，乔布斯与斯蒂夫沃兹尼亚克成立苹果公司。1985年，乔布斯获得了由里根总统授予的国家级技术勋章。1997年，成为时代周刊的封面人物；同年被评为最成功的管理者，是声名显赫的“计算机狂人”。2007年，史蒂夫乔布斯被财富杂志评为了年度最有影响力的商人。2009年，被财富杂志评选为这十年美国最佳行政总裁，同年当选时代周刊年度风云人物之一。1985年，乔布斯在苹果高层权力斗争中离开苹果并成立了NeXT公司，瞄准专业市场。1997年，苹果收购NeXT，乔布斯回到苹果接

10、任行政总裁（CEO）。2011年8月24日，乔布斯辞去苹果公司行政总裁职位。2012年7月26日，时代杂志评出了一直以来美国最具影响力的20人，苹果已故CEO史蒂夫乔布斯（SteveJobs）当选。同年11月，苹果公司成为世界市值第一的公司。三个苹果改变了世界：三个苹果改变了世界：第一个诱惑了夏娃，第一个诱惑了夏娃， 第二个砸醒了牛顿，第二个砸醒了牛顿， 第三个是史蒂夫第三个是史蒂夫乔布斯的精彩世界。乔布斯的精彩世界。v布斯有一句经典语录是：布斯有一句经典语录是：v 领袖和跟风者的区别就在于领袖和跟风者的区别就在于创新创新。动物实验的分类动物实验的分类v1、确证性的实验：用一种最大可能、确证性

11、的实验：用一种最大可能,正确解答问题的系统方法，收集有关正确解答问题的系统方法，收集有关处理实施后动物反应的科学数据。处理实施后动物反应的科学数据。v2、探索性的实验：为产生新的假说提供素材。、探索性的实验：为产生新的假说提供素材。v这两类实验都涉及在实验人员的控制下，对动物施加一定的处理或操作，这两类实验都涉及在实验人员的控制下，对动物施加一定的处理或操作，来发现是否处理在实验对象上引起一定的反应，或者对这种反应进行定量。来发现是否处理在实验对象上引起一定的反应，或者对这种反应进行定量。v3、检验性实验：是观察性的实验，用于发现科研人员不能控制的变量之、检验性实验：是观察性的实验，用于发现科

12、研人员不能控制的变量之间的联系。这种联系可能是暂时的也可能是长期的。间的联系。这种联系可能是暂时的也可能是长期的。动物模型应用的重要步骤动物模型应用的重要步骤一、动物实验通常是研究某种类、品系或性一、动物实验通常是研究某种类、品系或性别动物的生物学特性，并间接推断人或其他别动物的生物学特性，并间接推断人或其他研究对象的相关方面。研究对象的相关方面。二、二、3个重要方面个重要方面 1、基于对研究对象和模型（候选）动物中疾基于对研究对象和模型（候选）动物中疾病发展方面掌握的已有知识。病发展方面掌握的已有知识。2、进行一个或多个实验，观察模型对所实施、进行一个或多个实验，观察模型对所实施的处理如何反

13、应。的处理如何反应。3、考察模型实验的结果与研究对象物种的相、考察模型实验的结果与研究对象物种的相关性关性。v进行动物试验设计时，需要考虑的一个重要控进行动物试验设计时，需要考虑的一个重要控制因素就是实验中的非研究目的差异。制因素就是实验中的非研究目的差异。v1、遗传引起表型差异、遗传引起表型差异(遗传学质量控制）。遗传学质量控制）。v2、其他原因，例如：分组因素、饲养条件微、其他原因，例如：分组因素、饲养条件微小变化。小变化。v3、在实验中引入了太多的、在实验中引入了太多的背景噪音背景噪音。v差异的来源差异的来源1、实验者引起的。、实验者引起的。2、动物固有的。、动物固有的。3、动物所处环境

14、相互作用产生的差异。、动物所处环境相互作用产生的差异。实验者带来的差异实验者带来的差异1、实验过程的实施实验操作的一致性、准确性、完整性：A: 每只动物更换注射器B: 注射器容量，精确C: 根据称重给药（吸入药品后注射器重量-空注射器重量=剂量）D: 良好的操作技术（避免给药时，药物溢漏）实验操作的小心，减少动物紧张情绪：A: 代谢B: 血流（影响血流速度，从而影响药物的吸收率）2、不准确的测量、不准确的测量 A：尽管现在的测量手段越来越先进，但是有些方法：尽管现在的测量手段越来越先进，但是有些方法本身就存在缺陷。本身就存在缺陷。例如：凝胶电泳（点和带的迁移率、密度、大小受很例如：凝胶电泳（点

15、和带的迁移率、密度、大小受很多微妙因素影响）；光密度扫描（色彩的饱和度可多微妙因素影响）；光密度扫描（色彩的饱和度可以使结果呈现非线性）以使结果呈现非线性）B: 观察动物自然行为的测量，控制更困难。观察动物自然行为的测量，控制更困难。例如：采用多个不同观察人员，数据交换分析数据。例如：采用多个不同观察人员，数据交换分析数据。 一个连续的时间点，重复观测。一个连续的时间点，重复观测。2、不准确的测量、不准确的测量 C: 动机状态观察动机状态观察 专业观察人员，采用同一标准。行为类型被专业观察人员，采用同一标准。行为类型被分解成更加数量化的组分。分解成更加数量化的组分。 动物不同行为分解为元素，采

16、用同一打分系动物不同行为分解为元素，采用同一打分系统。统。 D: 整体动物进行实验时，行为学和生态学观测整体动物进行实验时，行为学和生态学观测的差异是可以控制的。的差异是可以控制的。 固有动物之间的差异固有动物之间的差异 动物之间除了遗传组成的差异外，许多其他方面的影响也能增加动物间动物之间除了遗传组成的差异外，许多其他方面的影响也能增加动物间的差异，是我们进行试验设计时需要加以重视和考虑的差异来源。的差异，是我们进行试验设计时需要加以重视和考虑的差异来源。1、动物来源不同。、动物来源不同。 2、动物饲养管理的差别。、动物饲养管理的差别。3、动物生活环境的不同。、动物生活环境的不同。 4、动物

17、健康状况。、动物健康状况。温度：排气口的温度高温度：排气口的温度高34度。度。湿度：排气口湿度高湿度：排气口湿度高5%10%。光线：不同层面，感受光线不同。光线：不同层面，感受光线不同。声音：声音：2040HZ,交配推迟，产仔低。交配推迟，产仔低。垫料：松木和桉木可以引起大动物肝脏酶活性和细胞毒效应的物垫料：松木和桉木可以引起大动物肝脏酶活性和细胞毒效应的物质。质。 动物与环境之间相互作用引起的差异动物与环境之间相互作用引起的差异1、动物对环境应激或应激的生理反应、行为反应和生化、动物对环境应激或应激的生理反应、行为反应和生化反应反应v使用环境丰富物，增加生存环境的复杂性，减少应激。使用环境丰

18、富物，增加生存环境的复杂性，减少应激。2、群居、群居v群居体重差异小，等级明显，丰富物。（改善还是恶化群居体重差异小，等级明显，丰富物。（改善还是恶化）动物与环境之间相互作用引起的差异动物与环境之间相互作用引起的差异3、动物与实验操作过程之间相互作用诱发产生的、动物与实验操作过程之间相互作用诱发产生的差异是存在的。差异是存在的。v动物对不同饲养者表现不同，人员保持一致。动物对不同饲养者表现不同，人员保持一致。v实验时间和饲养程序的之间的关系：更换笼盒前实验时间和饲养程序的之间的关系：更换笼盒前后给药不同效果，给药顺序不同，同样引起差异。后给药不同效果，给药顺序不同，同样引起差异。v动物发出信号

19、。动物发出信号。v控制这类差异最有效的方法：控制这类差异最有效的方法： A: 确保操作人员的熟练程度确保操作人员的熟练程度 B: 开始实验前动物适应过程开始实验前动物适应过程 C: 给动物奖励给动物奖励实验设计的最初步骤实验设计的最初步骤1、查阅文献、查阅文献A: 明确研究焦点明确研究焦点B：明确方法：明确方法C：明确模型：明确模型D：评估实验：评估实验2、科研方法、科研方法A：观察和描述科研中的现象：观察和描述科研中的现象B：系统的陈述问题和解释问题的假说：系统的陈述问题和解释问题的假说C：利用假说预测新的观察结果：利用假说预测新的观察结果D：验证假说：验证假说3、问题的陈述、研究的目标和提

20、出假说v问题提出：实验将说明的问题是什么，意义。问题提出：实验将说明的问题是什么，意义。v研究目标：总目标，要解决的问题。研究目标：总目标，要解决的问题。v假说：对每一个至少给出两个预计结果。假说：对每一个至少给出两个预计结果。、动物模型的确定、动物模型的确定v使用系统发育水平最低的动物，符合原则。使用系统发育水平最低的动物，符合原则。v使用的动物具有研究要求种属或品系专一特点，特使用的动物具有研究要求种属或品系专一特点，特定研究目的必须特点。定研究目的必须特点。v实验期间动物模型维持条件。实验期间动物模型维持条件。v动物模型来源渠道。动物模型来源渠道。v最终确定动物模型前征询实验动物兽医意见

21、。最终确定动物模型前征询实验动物兽医意见。、实验合作者的确定、实验合作者的确定v在研究的过程中，明确应用的试验技术操作，并确在研究的过程中，明确应用的试验技术操作，并确认具有相应操作专长的人员来完成。认具有相应操作专长的人员来完成。v让合作者了解实验：设计、计算、样品集让合作者了解实验：设计、计算、样品集v实验动物中心可以提供动物实验有关技术操作培训实验动物中心可以提供动物实验有关技术操作培训及昂贵设备服务。及昂贵设备服务。、研究方案、研究方案v根据问题、目标、假说，提出实验操作安排的计划并根据问题、目标、假说，提出实验操作安排的计划并文字化文字化v考虑的方面：考虑的方面：vA：动物模型持续时

22、间：动物模型持续时间vB: 模型中预期疾病的进程（决定测定的最适时间点）模型中预期疾病的进程（决定测定的最适时间点）v：人员参加的时间，实验花费：人员参加的时间，实验花费v：给药方法：给药方法v：风险评估：风险评估v：统计学方法选定：统计学方法选定二、动物实验设计二、动物实验设计二、动物实验设计二、动物实验设计v、实验单元、实验单元v可以是一个动物，也可以是一组动物群体。可以是一个动物，也可以是一组动物群体。v、因子；实验组别的动物只数。、因子；实验组别的动物只数。v将适当数量的动物分配到每一个实验组别。将适当数量的动物分配到每一个实验组别。v每一个实验组别动物数量是通过预期各组接过差异每一个

23、实验组别动物数量是通过预期各组接过差异的可能程度和采用统计学的方法计算出来的。的可能程度和采用统计学的方法计算出来的。v一个标准笼盒能够容纳动物的数量。一个标准笼盒能够容纳动物的数量。、对照、对照过多的变量（如遗传、环境、感染因子）对动过多的变量（如遗传、环境、感染因子）对动物试验的结果产生影响，因此为消除这些外来变量物试验的结果产生影响，因此为消除这些外来变量或可能存在的未知变量的影响而设置对照动物。或可能存在的未知变量的影响而设置对照动物。对照种类：对照种类：v阳性对照阳性对照v阴性对照阴性对照v空白对照空白对照v媒介物对照媒介物对照v比拟物对照比拟物对照阳性对照：阳性对照：v一般在阳性对

24、照组希望有变化一般在阳性对照组希望有变化v作用：作为一个标准，测量各实验组间差异的程度。作用：作为一个标准，测量各实验组间差异的程度。v例如：毒物试验，动物给予毒物作为对照，结果是例如：毒物试验，动物给予毒物作为对照，结果是产生损伤或变化产生损伤或变化阴性对照：阴性对照：v期望有正常状态不产生变化期望有正常状态不产生变化v作用：保证未知变量对实验组动物引起相反的效应作用：保证未知变量对实验组动物引起相反的效应不存在，即排出假阳性不存在，即排出假阳性空白对照空白对照v模拟处理组的过程而实际上没有给予动物以受试物或处理。模拟处理组的过程而实际上没有给予动物以受试物或处理。v移植或损伤。移植或损伤。

25、媒介物对照媒介物对照v在测试化合物溶于一种媒介时，这种媒介需要对照。在测试化合物溶于一种媒介时，这种媒介需要对照。v作用：观察溶剂是否引起反应。作用：观察溶剂是否引起反应。比拟物对照比拟物对照v与阳性对照性质一样，使用一个已知的处理来对比待测的处理。与阳性对照性质一样，使用一个已知的处理来对比待测的处理。v例如：药物治疗，使用一种已知临床药物，对比实验药物。例如：药物治疗，使用一种已知临床药物，对比实验药物。实验设计的最后考虑实验设计的最后考虑 实验设计完成后要进行进一步的确认和审查，并在正式实验设计完成后要进行进一步的确认和审查，并在正式实验前进行小规模的预实验，初步检验设计的合理性，并为实

26、验前进行小规模的预实验，初步检验设计的合理性，并为进一步的完善提供依据。进一步的完善提供依据。1、实验步骤地确定、实验步骤地确定v实验开始前必须通过实验开始前必须通过IACUC和实验动物伦理委员会的确认。和实验动物伦理委员会的确认。v包括动物饲养管理和使用的具体操作方法包括动物饲养管理和使用的具体操作方法v按照相关法律按照相关法律v提供申请书时，需要相关证明提供申请书时，需要相关证明v实验涉及到危险品，还需要其他委员会的批准实验涉及到危险品，还需要其他委员会的批准2、人员、人员v必须有相关培训人员才能承担实验。必须有相关培训人员才能承担实验。v我国由省级科技主管部门进行培训。我国由省级科技主管

27、部门进行培训。3、小规模的预实验、小规模的预实验v小规模的预实验是使用少量的动物得到预示性的数小规模的预实验是使用少量的动物得到预示性的数据或通过预实将操作和技术固定并完善，以便于进据或通过预实将操作和技术固定并完善，以便于进行大规模的正式实验行大规模的正式实验v通过预实验确定实验动物用量通过预实验确定实验动物用量v证明实验合理性证明实验合理性v预实验同样需要经过预实验同样需要经过IACUC同意同意4、数据的输入和分析、数据的输入和分析 实验设计时应该规定在数据分析前，实验设计时应该规定在数据分析前，制定保证数据质量的措施和程序，确制定保证数据质量的措施和程序，确保实验后数据收集或输入发生的错

28、误保实验后数据收集或输入发生的错误能被及时辨别出来。能被及时辨别出来。5、讨论、讨论 实验设计完成后广泛征求意见。实验设计完成后广泛征求意见。v在实验设计中确定样本大小十分重要在实验设计中确定样本大小十分重要vA：满足科学研究需求：满足科学研究需求vB：符合实验动物法律法规：符合实验动物法律法规vC：符合：符合3R原则原则v由于科研目的的不一样，采用的实验动物种类也不一由于科研目的的不一样，采用的实验动物种类也不一样，计算实验样本大小的方法也就不一样。样，计算实验样本大小的方法也就不一样。样本大小的确定样本大小的确定一、小规模预实验一、小规模预实验原因：实验前缺乏资料信息或实验成功是否能够把握

29、原因：实验前缺乏资料信息或实验成功是否能够把握v有些实验无法计算样本大小（转基因动物实验）。有些实验无法计算样本大小（转基因动物实验）。v一般实验，复杂的统计学设计都可以简化成一个重一般实验，复杂的统计学设计都可以简化成一个重要事件的比较。要事件的比较。v样本量足够大可发现统计学的结果。样本量足够大可发现统计学的结果。v检查所要进行实验的必备条件。检查所要进行实验的必备条件。样本大小的确定样本大小的确定二、基于目标成功或失败的实验（成模率）二、基于目标成功或失败的实验（成模率）v由于实验中成功的机会相当不稳定，因此这类实验所用由于实验中成功的机会相当不稳定，因此这类实验所用的动物数量很难确定的

30、动物数量很难确定v例如：转基因动物例如：转基因动物vDNA整合率整合率v移植后受精卵的着床率移植后受精卵的着床率v整合位置和表达效果整合位置和表达效果v假定每个步骤地效率假定每个步骤地效率5% 根据公式根据公式 这需要这需要50只动物，如只动物，如果果1%则需要则需要300只动物。只动物。例如：如果动物被感染，并且研究者希望有的例如：如果动物被感染，并且研究者希望有的把握检测出感染，那么所需要的动物样本量是：把握检测出感染，那么所需要的动物样本量是：即总共需要只动物做实验，就有的把握在一个即总共需要只动物做实验，就有的把握在一个动物感染的群体中检测出感染。如果感染流行低，如果只动物感染的群体中

31、检测出感染。如果感染流行低，如果只有，那么根据公式大约需要只动物。有，那么根据公式大约需要只动物。单组实验样本大小计算单组实验样本大小计算条件准备条件准备v1、环境准备：运输环境、饲养环境、环境准备：运输环境、饲养环境v2、饲料准备：维持、繁殖、高脂饲料、饲料准备：维持、繁殖、高脂饲料v3、动物准备：大鼠、小鼠、家兔、动物准备：大鼠、小鼠、家兔v4、实验器械准备：手术、给药、取材、实验器械准备：手术、给药、取材v5、药品和试剂准备：实验用药、试剂盒、药品和试剂准备：实验用药、试剂盒动物实验前的条件准备动物实验前的条件准备1、动物实验前的条件准备主要是指准备好实验仪器、动物实验前的条件准备主要是

32、指准备好实验仪器、药品、试剂和实验动物等。药品、试剂和实验动物等。2、动物实验室的准备应根据实验目的、实验规模、动物实验室的准备应根据实验目的、实验规模（实验动物数目）、动物实验周期等来确定。（实验动物数目）、动物实验周期等来确定。3、笼盒及盖至少准备、笼盒及盖至少准备2套，以便换洗；饮水瓶至少准套，以便换洗；饮水瓶至少准备备2套以上，以防被动物咬破。套以上，以防被动物咬破。4、在实验前应对实验室、笼盒及盖、饮水瓶进行彻、在实验前应对实验室、笼盒及盖、饮水瓶进行彻底的清洗与消毒。底的清洗与消毒。5、还应准备好笼卡、记录本、垫料、饲料、温度计、还应准备好笼卡、记录本、垫料、饲料、温度计、湿度计等

33、必需物品。湿度计等必需物品。v购入或领取实验动物时，应注意的问题：购入或领取实验动物时，应注意的问题：v1 购入或领取实验动物前，应进行各项计划的购入或领取实验动物前，应进行各项计划的核实，检查各项实验前的准备工作。核实，检查各项实验前的准备工作。v2 购入或领取实验动物时，应向供应部门索取购入或领取实验动物时，应向供应部门索取所用动物的遗传背景和微生物质量资料（动物所用动物的遗传背景和微生物质量资料（动物质量合格证），以及动物品系、年龄、体重、质量合格证），以及动物品系、年龄、体重、胎次等资料。胎次等资料。v3 根据实验观察时间长短的需要，同时购入或根据实验观察时间长短的需要，同时购入或领取

34、相应数量的饲料和垫料。领取相应数量的饲料和垫料。v4 若是从外地购入动物需长途运输时，还应考若是从外地购入动物需长途运输时，还应考虑到途中各种因素对动物的影响。尤其注意途虑到途中各种因素对动物的影响。尤其注意途中污染和窒息死亡等问题。中污染和窒息死亡等问题。三三 预备实验预备实验预备实验也称预实验、初试实验，是在动物实验前预备实验也称预实验、初试实验，是在动物实验前对正式实验进行初步试验。对正式实验进行初步试验。目的在于检查各项准备工作是否完善，实验方法和目的在于检查各项准备工作是否完善，实验方法和步骤是否切实可行，测试指标是否稳定可靠，初步步骤是否切实可行，测试指标是否稳定可靠，初步了解实验

35、结果与预期结果的距离，从而为正式实验了解实验结果与预期结果的距离，从而为正式实验提供补充、修正的意见和经验，是动物实验必不可提供补充、修正的意见和经验，是动物实验必不可少的重要环节。少的重要环节。预备实验可以用少量动物进行，实验方法和观测指预备实验可以用少量动物进行，实验方法和观测指标与正式实验一样。标与正式实验一样。BIOHAZARDBIOHAZARD生物危害标识生物危害标识vv20032003年年年年9 9月新加坡实验室人员感染月新加坡实验室人员感染月新加坡实验室人员感染月新加坡实验室人员感染SARSSARS病毒。病毒。病毒。病毒。vv20032003年年年年9 9月台湾实验室人员感染月台

36、湾实验室人员感染月台湾实验室人员感染月台湾实验室人员感染SARSSARS病毒。病毒。病毒。病毒。vv20042004年年年年4 4月我国国家月我国国家月我国国家月我国国家CDCCDC的的的的SARSSARS实验室研究生感染实验室研究生感染实验室研究生感染实验室研究生感染SARSSARS病病病病毒并传染给别人。毒并传染给别人。毒并传染给别人。毒并传染给别人。v19991999年广州中医药大学博士后张某从事年广州中医药大学博士后张某从事“九五九五”国家攻关国家攻关课题课题“补肾法治疗老年性痴呆补肾法治疗老年性痴呆”的实验时接触大鼠，的实验时接触大鼠，3 3个个月后感染流行性出血热，月后感染流行性出

37、血热，20032003年被诊断为肾功能衰竭，年被诊断为肾功能衰竭，20062006年进行肾移植手术年进行肾移植手术v20022002年年, ,湖北省药检学校的一名毕业生在某药厂从事动物湖北省药检学校的一名毕业生在某药厂从事动物实验工作，由于接触了带出血热病毒的实验动物而感染流实验工作，由于接触了带出血热病毒的实验动物而感染流行性出血热不治死亡行性出血热不治死亡严重生物安全事故案例严重生物安全事故案例v动物约有动物约有200200种传染病、种传染病、8080种寄生虫病，其中种寄生虫病，其中半数可以感染给人。半数可以感染给人。v动物感染实验，有病原体随尿粪、唾液排出，动物感染实验，有病原体随尿粪、

38、唾液排出，有感染性气溶胶扩散的危险。有感染性气溶胶扩散的危险。v剖检动物时，有接触病原体的危险，还可能剖检动物时，有接触病原体的危险，还可能被动物咬伤或注射器、手术刀的创伤等。被动物咬伤或注射器、手术刀的创伤等。v肿瘤病毒引起的潜在致癌性等生物危害。肿瘤病毒引起的潜在致癌性等生物危害。动物实验中的生物安全事故动物实验中的生物安全事故v20012001年年6 6月月，北北京京发发生生了了因因使使用用质质量量不不合合格格实实验验动动物物和和动动物物实实验验不不规规范范致致使使鼠鼠源源性性人人兽兽共共患患病病流流行行性性出出血热感染：一名院士死亡和血热感染：一名院士死亡和700700多师生紧急预防接

39、种多师生紧急预防接种v20062006年年，东东北北三三省省由由于于个个体体户户养养殖殖、贩贩运运不不合合格格实实验验动动物物，导导致致几几十十名名教教学学科科研研人人员员感感染染流流行行性性出出血血热热v广广东东省省，19901990年年和和19971997年年分分别别出出现现因因使使用用不不合合格格实实验动物而感染人畜共患病的严重生物安全事故验动物而感染人畜共患病的严重生物安全事故美国国立卫生研究美国国立卫生研究所所美国疾病控制中美国疾病控制中心心病病 源源操操 作作一级屏障一级屏障二级屏障二级屏障P1BSL1不会经常引发健康成人疾病标准的微生物操作不要求开放实验台、洗手池P2BSL2人类

40、病源菌，因皮肤伤口、吸入、黏膜曝露而发生危险BSL1操作外加：1、限制进入2、有生物危险警告标志3、“锐器”安全措施4、生物安全手册，其中规定废物消毒和医疗观察1级、2级生物安全柜实验服、手套、若需要则采取面部保护措施 BSL-1外加：高压灭菌锅P3BSL3内源性和外源性病源，可通过气溶胶传播，能导致严重后果或生命危险 BSL-3 BSL-2操作外加：1、控制进入2、所有废物消毒3、洗涤前，实验服消毒4、有基础血清1级、2级生物安全柜保护性实验服、手套、若需要则采取呼吸保护措施BSL-2外加：1、和进入走廊隔开2、双门进入，门自动关闭3、排出的空气不循环4、实验室内负压P4BSL4对生命有高度

41、危险的危险性病源或外源性病源：致命、通过气溶胶而致实验室感染：或未知传播风险的有关病源BSL3操作外加：1、进入前换衣服2、出实验室前淋浴3、带出设施的所有材料消毒3级生物安全柜或1级、2级生物安全柜加全身的、供应空气的正压防护服BSL3外加：1、单独建筑或隔离区域2、有供气系统、排气系统、真空系统、消毒系统3、其他有关要四级生物安全防护实验室四级生物安全防护实验室四级生物安全防护实验室四级生物安全防护实验室实验室安全防护措施实验室安全防护措施v一、实验设施防护。一、实验设施防护。v1、设计防护。、设计防护。v2、设备防护。、设备防护。v二、实验室管理防护。二、实验室管理防护。v1、人员进出制

42、度。、人员进出制度。v2、实验室运行制度。、实验室运行制度。v3、实验物品及动物使用制度。、实验物品及动物使用制度。v实验室应设洗手池（靠近出口处）实验室应设洗手池（靠近出口处）v实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙，不得铺设地毯防滑、无缝隙，不得铺设地毯v实验室中的家具应牢固。应有专门放置生物实验室中的家具应牢固。应有专门放置生物废弃物容器的台（架）废弃物容器的台（架）v实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热v实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗v用过的针头用过的针头禁止禁止折弯、剪

43、断、折断、重新盖折弯、剪断、折断、重新盖帽，帽，禁止禁止用手直接从注射器取下。用手直接从注射器取下。v用过的针头用过的针头必须必须直接放入防穿透的容器中。直接放入防穿透的容器中。v非一次性利器非一次性利器必须必须放入厚壁容器中并运送到放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒。特定区域消毒，最好进行高压消毒。个人防护紧急处理措施紧急处理措施皮肤针刺伤或切割伤皮肤针刺伤或切割伤：立即用肥皂和大量流：立即用肥皂和大量流水冲洗，尽可能挤出损伤出的血液，用水冲洗，尽可能挤出损伤出的血液，用75%75%乙乙醇或其它消毒剂消毒伤口。醇或其它消毒剂消毒伤口。皮肤污染：皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部

44、位，并用用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当的消毒剂浸泡，如适当的消毒剂浸泡，如75%75%乙醇或其它皮肤消乙醇或其它皮肤消毒剂毒剂. .粘膜污染粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位。：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位。衣物污染衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理。：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理。污染物泼溅污染物泼溅： 发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理；发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理； 发生大范围污染物泼溅事故时，应立即通知实验室主发生大范围污染物泼溅事故时，应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清情况，确定消管领导和安全负责人到达

45、事故现场查清情况，确定消毒的程序。毒的程序。作 业动物实验前的条件准备动物实验前的条件准备动物实验前的条件准备主要是指准备好实验仪器、动物实验前的条件准备主要是指准备好实验仪器、药品、试剂和实验动物等。药品、试剂和实验动物等。动物实验室的准备应根据实验目的、实验规模（实动物实验室的准备应根据实验目的、实验规模（实验动物数目）、动物实验周期等来确定。验动物数目）、动物实验周期等来确定。笼盒及盖至少准备笼盒及盖至少准备2套，以便换洗；饮水瓶至少准备套，以便换洗；饮水瓶至少准备2套以上，以防被动物咬破。套以上，以防被动物咬破。在实验前应对实验室、笼盒及盖、饮水瓶进行彻底在实验前应对实验室、笼盒及盖、饮水瓶进行彻底的清洗与消毒。的清洗与消毒。还应准备好笼卡、记录本、垫料、饲料、温度计、还应准备好笼卡、记录本、垫料、饲料、温度计、湿度计等必需物品。湿度计等必需物品。