HIVHBV梅毒实验室检测实用教案

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1、培训培训(pixn)(pixn)目标目标课程结束课程结束(jish)(jish)时，受训者应能够：时，受训者应能够：理解实验室检测在诊断和监测理解实验室检测在诊断和监测HIVHIV和和HBVHBV、梅毒感染的重要作用、梅毒感染的重要作用了解诊断和监测了解诊断和监测HIVHIV和和HBVHBV、梅毒感染的不同检测方法、梅毒感染的不同检测方法解释检测结果解释检测结果描述孕产妇及配偶描述孕产妇及配偶/ /伴侣的检测流程伴侣的检测流程描述暴露婴儿描述暴露婴儿/ /儿童的检测流程儿童的检测流程1第1页/共94页第一页，共95页。妇幼机构(jgu)确证实验室1个0.87%筛查实验室52个45.6%检测点8

2、个7%江西省妇幼保健机共114个，省级1个，市级12个，县级101个）全省第2页/共94页第二页，共95页。一一 、 HIVHIV、 梅梅 毒毒 (mid)(mid)和和HBVHBV的的 实验室检测实验室检测简介简介(jin ji)(jin ji)3第3页/共94页第三页，共95页。综合产前检查服务综合产前检查服务(fw)+ (fw)+ 检测检测孕产妇参加(cnji)产前检查服务检测(jin c)前信息HBV 检测梅毒检测HIV 检测全血细胞计数和其它检测取血样4第4页/共94页第四页，共95页。HIVHIV和和HBVHBV筛查检测筛查检测(jin c)(jin c)筛筛查查检检测测( (j

3、ji i n n c c ) )用用于于诊诊断断产产检检、临临产产及及分分娩娩的的孕孕产产妇妇是是否否感感染染H HI IV V和和H HB BV VH HI IV V抗抗体体检检测测( (j ji i n n c c ) )乙乙肝肝表表面面抗抗原原（H HB Bs sA Ag g）检检测测( (j ji i n n c c ) )筛筛查查检检测测( (j ji i n n c c ) )应应具具有有较较高高的的灵灵敏敏度度和和特特异异度度操操作作简简单单、容容易易获获得得、便便宜宜尽尽可可能能在在“当当日日”获获得得结结果果5第5页/共94页第五页，共95页。iPMTCTiPMTCT筛查检测

4、筛查检测(jin c)(jin c)何时使用何种检测何时使用何种检测(jin c)(jin c)？HIVHBV检测方法检测方法HIVHIV快速检测快速检测 和/或 ELISAHBsAgHBsAg检测检测如果有条件，其他乙肝标记物检测检测时间检测时间第一次产检（孕早期）第一次产检（孕早期）或下一次产检时此前未检测，分娩时应检测第一次产检（孕早期）第一次产检（孕早期）或下一次产检时此前未检测，分娩时应检测6第6页/共94页第六页，共95页。二、二、HIVHIV试验试验(shyn)(shyn)和检测和检测7第7页/共94页第七页，共95页。全国艾滋病检测(jinc)技术规范（2014年修订版）中的变

5、化2009年版第8页/共94页第八页，共95页。2014年版第9页/共94页第九页，共95页。2014年版第10页/共94页第十页，共95页。补充(bchng)试验（核酸）第11页/共94页第十一页，共95页。补充试验包括抗体补充试验和核酸补充试验等。建议首选抗体补充试验，如蛋白(dnbi)免疫印迹试验（WB，原确证试验）、条带/线性免疫试验（RIBA/LIA）。第12页/共94页第十二页，共95页。HIVHIV检测检测(jin c)(jin c)：抗体检测：抗体检测(jin c)(jin c)一个人感染了一个人感染了HIVHIV病毒后，体内将产生特异性抗病毒后，体内将产生特异性抗体对抗体对抗

6、(dukng)HIV(dukng)HIV病毒病毒* * 。HIVHIV抗体通常在感染后抗体通常在感染后4 64 6周出现，但也有时周出现，但也有时也会在感染后也会在感染后3 3个月才出现。个月才出现。从感染从感染HIVHIV病毒到出现特异的病毒到出现特异的HIVHIV抗体的一段时抗体的一段时期称为期称为“窗口期窗口期”。标准标准(biozhn)(biozhn)的的HIVHIV诊断检测诊断检测* * *是识别是识别HIVHIV抗体。抗体。注意：注意： *与其他大多数疾病不同，与其他大多数疾病不同，HIVHIV抗体没有保护性作用。抗体没有保护性作用。 * 所有HIV检测工具应经过SFDA审批，并在

7、有效期内使用。13第13页/共94页第十三页，共95页。感染(gnrn)HIV后各种标志物消长变化第14页/共94页第十四页，共95页。孕产妇艾滋病检测方法包括抗体筛查试验和补充试验。抗体筛查试验包括快速检测（RT）、酶联免疫(miny)吸附试验（ELISA）、化学发光免疫(miny)试验（CLIA）、明胶颗粒凝集试验（PA）等。补充试验包括抗体补充试验和核酸补充试验等。建议首选抗体补充试验，如蛋白免疫(miny)印迹试验（WB，原确证试验）、条带/线性免疫(miny)试验（RIBA/LIA）。第15页/共94页第十五页，共95页。HIVHIV抗体检测抗体检测(jin c)(jin c)类型类

8、型16第16页/共94页第十六页，共95页。HIVHIV检测检测(jin c)(jin c)：病毒核酸检测：病毒核酸检测(jin c)(jin c)这些检测检测HIV感染者血液或血浆中的病毒必须由经过专门培训的实验室人员(rnyun)操作实验室需有资质，并配备专门设备昂贵，不是针对所有人进行的常规检测方法PCR（多聚酶连反应法）检测HIV DNA-PCR定性检测血液中是否含有病毒，用于诊断18月龄内婴儿是否感染HIVHIV RNA-PCR定量检测病毒载量，即血浆中的病毒数量，用于监测对抗病毒治疗的反应。17第17页/共94页第十七页，共95页。第18页/共94页第十八页，共95页。 HIV E

9、IA / ELISA（酶联免疫试验(shyn)）试剂第19页/共94页第十九页，共95页。HIVHIV筛查检测结果筛查检测结果(ji gu)(ji gu)的的含义含义HIV筛查检测结果“阴性(-)”：受检者没有感染HIV或者受检者已经感染了HIV，但处于窗口期：3个月后再次进行检测HIV筛查检测结果“阳性(+)”：病人(bngrn)可能已经感染HIV但应再次重复检测20第20页/共94页第二十页，共95页。HIVHIV确认确认(qurn)(qurn)试验结果试验结果的含义的含义如果筛查检测结果阳性，两次重复检测中1次或2次检测结果为阳性，需要进行确认试验免疫印迹法（WB）确认试验结果：阳性病人

10、确认感染HIV阴性受检者没有感染HIV不确定(qudng)结果为“不确定(qudng)”受检者必须在4周后再次采血，重复前述所有步骤进行检测21第21页/共94页第二十一页，共95页。抗体检测中的问题初筛实验中的假阳性血液恶性病变自身免疫性疾病多发性胆汁型肝硬化酒精(jijng)性肝炎疫苗接种（流感，乙肝）多发性骨髓瘤肾移植或慢性肾衰竭疟疾或丝虫病其他第22页/共94页第二十二页，共95页。抗体(kngt)检测中的问题初筛实验中的假阴性窗口期免疫移植换血(hunxu)输血恶性肿瘤免疫功能丧失（B细胞功能缺损）其他（试剂或操作原因第23页/共94页第二十三页，共95页。中国预防(yfng)艾滋病

11、、梅毒和乙肝母婴传播HIV检测流程 在产前检查服务(fw)中开展整合的检测咨询所采用的HIV检测流程24第24页/共94页第二十四页，共95页。产时产时HIVHIV抗体检测抗体检测(jin c)(jin c)流程流程中国预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播HIV检测(jin c)流程*有关(yugun)确认试验详见幻灯片1425第25页/共94页第二十五页，共95页。三、儿童三、儿童(r tng)HIV (r tng)HIV 检测检测26第26页/共94页第二十六页，共95页。HIVHIV暴露婴儿和儿童的暴露婴儿和儿童的HIVHIV抗体抗体(kngt)(kngt)检测检测不是所有HIV感染母亲所生儿

12、童都会感染HIV，但是如果对12-18个月以内的婴儿进行( jnxng)HIV抗体检测，所有HIV感染母亲所生婴儿都将是HIV检测结果阳性。-即使婴儿并没有感染HIV-由于母体自身抗体可通过胎盘进入胎儿体内。母体传入的抗体可在婴儿体内持续18个月，所以12-18月龄以内的婴儿不能应用(yngyng)抗体检测方法进行诊断。27第27页/共94页第二十七页，共95页。未感染婴儿HIV-1抗体(kngt)S/CO比值动态曲线第28页/共94页第二十八页，共95页。婴儿感染婴儿感染(gnrn)(gnrn)早期诊断（早期诊断（EIDEID）HIVHIV病毒检测（病毒检测（DNA-PCRDNA-PCR）H

13、IV病毒检测（DNA-PCR）检测细胞内的HIV病毒，能够检测低至1 10 拷贝前病毒DNA，以及可在HIV暴露(bol)婴儿出生后6周内诊断HIV感染用于HIV暴露(bol)婴儿HIV感染早期诊断（EID）29第29页/共94页第二十九页，共95页。应用应用DNA-PCRDNA-PCR方法进行方法进行婴儿婴儿(yng r)(yng r)感染早期诊断感染早期诊断（EIDEID）（）（1 1） 如果可以开展HIV DNA-PCR检测，应用干血斑（DBS）在婴儿6周龄时进行PCR检测。如果PCR检测结果阳性 尽快再次采血再次进行DNA-PCR检测如果第二次PCR检测结果阳性，婴儿确定(qudng)

14、感染HIV如果PCR检测结果阴性 婴儿出生后3个月再次进行PCR检测30第30页/共94页第三十页，共95页。应用应用DNA-PCRDNA-PCR方法进行方法进行婴儿感染早期婴儿感染早期(zoq)(zoq)诊断诊断（EIDEID）（）（2 2）出生后出生后3 3个月再次进行个月再次进行HIV DNA-PCRHIV DNA-PCR检测检测如果如果PCRPCR检测结果阳性检测结果阳性(yngxng)(yngxng) 尽快再次采血再次进行尽快再次采血再次进行DNA-PCRDNA-PCR检测检测如果第二次如果第二次PCRPCR检测结果阳性检测结果阳性(yngxng)(yngxng)，婴儿确定，婴儿确定

15、感染感染HIVHIV如果如果PCRPCR检测结果阴性检测结果阴性 婴儿视为未感染婴儿视为未感染HIVHIV考虑在婴儿满考虑在婴儿满1212月龄时进行月龄时进行HIVHIV抗体检测（如有必要，抗体检测（如有必要，在在1818月龄时再次进行检测）月龄时再次进行检测）检测结果阴性的婴儿(yng r)接受母乳喂养，必须在停止母乳喂养后6周再次进行PCR检测，以确保婴儿(yng r)没有在母乳喂养期间感染HIV。31第31页/共94页第三十一页，共95页。婴儿婴儿HIVHIV感染感染(gnrn)(gnrn)早期诊断流程早期诊断流程32第32页/共94页第三十二页，共95页。HIVHIV暴露暴露(bol)

16、(bol)婴儿婴儿/ /儿童的儿童的HIVHIV抗抗体检测体检测所有HIV感染母亲所生儿童，在出生后6周或3个月未接受EID检测(jin c)者，应进行HIV抗体检测(jin c)。检测(jin c)时间：满12月龄 和满18月龄（必要时，见HIV抗体检测(jin c)流程）出生后3个月EID检测(jin c)结果为阴性的儿童也应接受HIV抗体检测(jin c)满18月龄HIV抗体检测阳性(yngxng)，可确认儿童HIV感染。33第33页/共94页第三十三页，共95页。HIVHIV暴露儿童暴露儿童HIVHIV抗体抗体(kngt)(kngt)检测流程检测流程34第34页/共94页第三十四页，共

17、95页。四、收集四、收集(shuj)(shuj)、制备干血斑（、制备干血斑（DBSDBS）操作操作(cozu)(cozu)练习练习35第35页/共94页第三十五页，共95页。什么什么(shn me)(shn me)是干血斑（是干血斑（DBSDBS）？）？干血斑是直接用滤纸收集一滴全血进行干燥用于血样本的长时间储存DBS是用HIV DNA-PCR方法进行婴儿HIV感染早期诊断检测的最佳采血方法HIV DNA和HIV抗体(kngt)可稳定地保存在干血斑中转运方便：无需冷藏36第36页/共94页第三十六页，共95页。如何如何(rh)(rh)采集干血斑血样本（采集干血斑血样本（1 1）时刻(shk)遵

18、循“普遍防护原则”采集足跟血选择合适的采血部位，皮肤消毒（图片中阴影部位）必要时保暖足跟使用一次性消毒采血针足跟置于心脏水平位或之下不要“挤”足跟37第37页/共94页第三十七页，共95页。样本类型(lixng)末梢血制备DBS抗凝静脉血制备(zhbi)DBS第38页/共94页第三十八页，共95页。如何采集如何采集(cij)(cij)干血斑血样本干血斑血样本（2 2）1. 用消毒纱布擦掉第一滴血(d xu)2. 收集此后滴出的大滴血(d xu)液3. 快速、轻柔地用滤纸片的一面接触血滴4. 让血液滴到采血圈中重复步骤1-4，直到整个采血圈全部充满血液。在卡片上标注患者的编号。每个儿童用一张新纸

19、片。收集2-4个血斑。不要：用滤纸片按压出血部位不要多次在同一个采血圈中涂抹血滴在滤纸片两面均滴入血滴39第39页/共94页第三十九页，共95页。如何采集干血斑如何采集干血斑(xu bn)(xu bn)血样本血样本（3 3）采血圈充满后：避免碰触或涂抹血滴水平放置滤纸片，室温下自然晾干血样本（至少4小时）避免阳光直射，不要加热不要将多张滤纸片叠放在一起，避免血滴接触其他表面一旦(ydn)血样本完全干燥：放入可封闭的塑料袋中加入干燥剂和湿度指示卡干燥、阴凉保存干血斑滤纸片包装袋，直到转送到相关实验室40第40页/共94页第四十页，共95页。五、五、HIVHIV感染感染(gnrn)(gnrn)的实

20、验室监测的实验室监测41第41页/共94页第四十一页，共95页。HIVHIV感染感染(gnrn)(gnrn)的实验室监测的实验室监测实验室监测主要用于：决定开始抗病毒治疗还是(hi shi)预防性应用抗病毒药物是否有抗病毒治疗指征？效果监测抗病毒治疗有效吗？毒性监测抗病毒药物是否引起了其他问题？42第42页/共94页第四十二页，共95页。CD4+ TCD4+ T淋巴细胞是淋巴细胞是HIVHIV病毒攻击的靶细胞病毒攻击的靶细胞CD4+ TCD4+ T淋巴细胞检测用于：淋巴细胞检测用于：决定开始决定开始(kish)(kish)抗病毒治疗还是预防性应用抗病抗病毒治疗还是预防性应用抗病毒药物毒药物为判

21、断抗病毒治疗成功或失败提供定量依据为判断抗病毒治疗成功或失败提供定量依据对调整抗病毒治疗方案提供指导对调整抗病毒治疗方案提供指导孕期每孕期每3 3个月及产后个月及产后4 64 6周应进行周应进行CD4+ TCD4+ T淋巴细胞淋巴细胞检测（急性感染时可适当推迟检测，因为在急性感检测（急性感染时可适当推迟检测，因为在急性感染期，染期，CD4+ TCD4+ T淋巴细胞通常会下降）淋巴细胞通常会下降）CD4+ TCD4+ T淋巴细胞检测淋巴细胞检测(jin c)(jin c)43第43页/共94页第四十三页，共95页。第44页/共94页第四十四页，共95页。CD4+T细胞绝对数的临床意义评价免疫功能

22、减退的程度和AIDS进程指导治疗策略的制订确定预防机会感染的最佳时机监控(jinkn)抗逆转录病毒（ARV）治疗、细胞因子治疗和保护治疗性疫苗的疗效第45页/共94页第四十五页，共95页。艾滋病诊疗(zhnlio)指南CD4+T淋巴细胞计数(j sh)350个细胞ul时，建议定期复查，暂不予治疗；CD4+T淋巴细胞计数(j sh)在200350个细胞ul时，需考虑患者CD4+T淋巴细胞计数(j sh)和病毒载量(如有条件检测)的变化以及患者的经济条件和依从性等综合因素后再考虑是否开始治疗。CD4+T淋巴细胞200个细胞ul时，应给予抗卡氏肺孢子虫肺炎的预防性治疗。 第46页/共94页第四十六页

23、，共95页。病毒载量测量血浆中的病毒数量病毒载量测量血浆中的病毒数量病毒载量检测可用于：病毒载量检测可用于：是抗病毒治疗失败是抗病毒治疗失败(shbi)(shbi)早期、最可靠的标记物，早期、最可靠的标记物，抗病毒治疗失败抗病毒治疗失败(shbi)(shbi)的原因，如：的原因，如：依从性差依从性差耐药耐药监测对抗病毒治疗的反应监测对抗病毒治疗的反应诊断诊断HIVHIV感染后和孕晚期各进行一次病毒载量检测感染后和孕晚期各进行一次病毒载量检测病毒病毒(bngd)(bngd)载量（载量（RNA-PCRRNA-PCR）检测）检测47第47页/共94页第四十七页，共95页。第48页/共94页第四十八页

24、，共95页。在HIV/AIDS中进行病毒载量检测的意义一、早期诊断和辅助诊断二、病程监控、预测疾病进程(jnchng)三、开始进行抗病毒治疗的指针四、评价药物的疗效（无效、耐药）1、检测的频度应在基线后每3-4月进行1次2、新药应在2-4周进行。病毒载量下降50%(0.3log10)才有意义3、治疗理想的反应：第4周病毒载量下降1.5-2log10,12-16周小于500cp/ml,16-24周小于50cp/ml第49页/共94页第四十九页，共95页。检测检测检测检测对象对象原因原因临床指导临床指导CD4+ T淋巴细胞计数所有HIV感染孕产妇基线评估是否需要抗病毒治疗孕产妇：抗病毒治疗：CD4

25、 350个细胞/mm3预防应用抗病毒药物：CD4 350个细胞/mm3全血细胞计数（CBC）所有HIV感染孕产妇AZT可引起贫血或白细胞计数降低如果Hb100mIU/ml），婴儿有免疫保护如果(rgu)HBsAg阴性和抗HBs抗体 100mIU/ml，婴儿应再次接受3剂乙肝疫苗接种55第55页/共94页第五十五页，共95页。七、妊娠期整合检测七、妊娠期整合检测(jin c)(jin c)采采血程序血程序56第56页/共94页第五十六页，共95页。妊娠期整合检测妊娠期整合检测HIVHIV、梅毒、梅毒(mid)(mid)和和HBVHBV的的采血程序采血程序检测前提供相关信息后，医务人员应：获得孕产

26、妇及配偶（如果配偶也同时接受检测）的口头同意戴上乳胶手套，采血摘掉手套标记采血管（根据当地方案要求），填写化验单，登记(dngj)患者编号和采血日期用合适的容器将血样本转送到实验室进行检测向孕产妇解释如何能够获得检测结果57第57页/共94页第五十七页，共95页。八、要点八、要点(yodin)(yodin)小结小结(xioji)(xioji)58第58页/共94页第五十八页，共95页。要点要点(yodin)-HIV(yodin)-HIV使用快速筛查试验诊断HIV感染。筛查检测结果阳性，进行确认试验以保证结果的准确性。HIV感染抗病毒治疗应根据：CD4+ T淋巴细胞计数检测结果，反映(fnyng

27、)HIV对免疫系统的影响HIV病毒载量检测结果，反映(fnyng)血液中HIV病毒的数量如果有条件，应用HIV-DNA PCR检测方法诊断婴儿是否HIV感染儿童满12-18月龄，HIV抗体检测方可确认儿童是否感染59第59页/共94页第五十九页，共95页。要点要点(yodin)-HBV(yodin)-HBV通过筛查HBsAg诊断HBV感染如有条件，筛查HBsAg结果阳性，可进一步检测其他HBV标记物，如乙肝二对半、乙肝三对HBsAg阳性母亲所生婴儿，出生时接受(jishu)乙肝疫苗接种，应在出生后12个月接受(jishu)HBsAg和抗HBs抗体检测60第60页/共94页第六十页，共95页。婴

28、儿艾滋病感染早期诊断(zhndun)工作方案第61页/共94页第六十一页，共95页。第62页/共94页第六十二页，共95页。一、梅毒一、梅毒(mid)(mid)的实验室检测的实验室检测简介简介(jin ji)(jin ji)63第63页/共94页第六十三页，共95页。综合综合(zngh)(zngh)产前检查服务产前检查服务+ + 检测检测孕产妇参加(cnji)产前检查服务检测(jin c)前信息HBV 检测梅毒检测HIV 检测全血细胞计数和其它检测取血样64第64页/共94页第六十四页，共95页。梅毒梅毒(mid)(mid)筛查检测筛查检测筛查检测用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染(gn

29、rn)梅毒：梅毒血清学检测筛查检测应具有较高的灵敏度和特异度操作简单、容易获得、便宜尽可能在“当日”获得结果65第65页/共94页第六十五页，共95页。iPMTCTiPMTCT筛查检测筛查检测(jin c)(jin c)何时使用何种检测何时使用何种检测(jin c)(jin c)？梅毒梅毒检测方法检测方法非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验（RPRRPR或TRUSTTRUST检测）梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验（TPPATPPA、ELISA或梅毒快速检测）检测时间检测时间第一次产检（孕早期）第一次产检（孕早期）或下一次产检时如有必要，孕晚期再次检测此前无检测结

30、果，则在分娩时检测66第66页/共94页第六十六页，共95页。二、梅毒二、梅毒(mid)(mid)感染的检测感染的检测67第67页/共94页第六十七页，共95页。梅毒(mid)早期诊断的依据之一是病原学检测，即在组织或分泌物中检测到苍白螺旋体： 暗视野显微镜 镀银染色镜检 梅毒梅毒(mid)(mid)诊断检测（诊断检测（1 1）68第68页/共94页第六十八页，共95页。血清学试验检测梅毒感染相关抗体血清学试验检测梅毒感染相关抗体非梅毒螺旋体抗原血清学试验（检测非特异性抗体）非梅毒螺旋体抗原血清学试验（检测非特异性抗体）RPRRPR（快速血浆反应素环状卡片试验）（快速血浆反应素环状卡片试验）T

31、RUSTTRUST（甲苯胺红不加热血清试验）（甲苯胺红不加热血清试验）VDRLVDRL（性病（性病(xngbng)(xngbng)研究实验室试验）研究实验室试验）梅毒螺旋体抗原血清学试验（检测特异性梅毒螺旋梅毒螺旋体抗原血清学试验（检测特异性梅毒螺旋体抗体）体抗体）TPPATPPA（梅毒螺旋体颗粒凝集试验）（梅毒螺旋体颗粒凝集试验）ELISAELISA（酶联免疫吸附试验）（酶联免疫吸附试验） POCPOC（快速检测、一站式检测）（快速检测、一站式检测）梅毒梅毒(mid)(mid)诊断检测（诊断检测（2 2）69第69页/共94页第六十九页，共95页。梅毒梅毒(mid)(mid)血清学试验基本实

32、验室血清学试验基本实验室设备设备检方法检方法检测样本类型检测样本类型必要设备必要设备血清血清血浆血浆全血全血RPR/TRUSTRPR/TRUST水平旋转仪TPPATPPA震荡仪ELISAELISA酶标仪、洗板机POCPOC检测检测无需特殊设备70第70页/共94页第七十页，共95页。非梅毒非梅毒(mid)(mid)螺旋体抗原血清学试验螺旋体抗原血清学试验（1 1） 梅毒螺旋体感染可产生非特异性抗体（非梅毒螺旋体抗体）非梅毒螺旋体抗体又称之为反应素，是抗心磷脂等抗原的抗体随菌体和宿主细胞的类脂质抗原量升高除梅毒外，其他医学情况会造成非梅毒螺旋体抗原血清学试验假阳性(yngxng)结果，包括结核、

33、疟疾、妊娠和风湿关节炎、狼疮及硬皮病等自体免疫学疾病71第71页/共94页第七十一页，共95页。非梅毒螺旋体抗原非梅毒螺旋体抗原(kngyun)(kngyun)血清学血清学试验（试验（2 2）抗体滴度通常与疾病活动度有关。治疗后（可能几个月）非梅毒螺旋体抗原血清学试验通常转变为不反应如果用同一种实验，相同试验滴度4倍变化（如从1:16下降到1:4或从1:8上升到1:32）为临床显著变化有些病人，抗体滴度可始终处于较低水平，有时可持续终生（血清固定）注意：病人血清学监测应在同一个实验室使用同一种检测方法（RPR、TRUST）进行连续多次检测；RPR和TRUST方法均有效(yuxio)，但检测的滴

34、度结果不能直接进行比较72第72页/共94页第七十二页，共95页。非梅毒螺旋体抗原非梅毒螺旋体抗原(kngyun)(kngyun)血清学血清学试验的特点试验的特点非梅毒螺旋体抗原非梅毒螺旋体抗原(kngyun)(kngyun)血清学试验：血清学试验：快速、简便、便宜快速、简便、便宜敏感性和特异性较高敏感性和特异性较高硬下疳后硬下疳后1-21-2周变为阳性周变为阳性可用于可用于筛查样本筛查样本评估对治疗的反应评估对治疗的反应鉴别复燃还是再次感染鉴别复燃还是再次感染73第73页/共94页第七十三页，共95页。治疗后非梅毒治疗后非梅毒(mid)(mid)螺旋体抗原血清学试螺旋体抗原血清学试验验抗体滴

35、度变化的临床意义抗体滴度变化的临床意义一期梅毒和二期梅毒：成功治疗，抗体滴度应3个月后下降2倍6个月后下降4倍一期梅毒：1年后抗体滴度转阴二期梅毒：2年后抗体滴度转阴晚期梅毒：治疗后抗体滴度缓慢(hunmn)下降50%的病人2年后抗体滴度仍为阳性74第74页/共94页第七十四页，共95页。确保确保(qubo)(qubo)非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验质量的关键点质量的关键点1.按照标准操作程序（SOP）进行操作2.推荐使用评价特性(txng)较好的试剂*3.按照统一的标准报告结果4.开展实验室室内质控（IQC）和参加室间能力验证（PT）* 由中国疾病(jbng)预防控制中

36、心性病中心国家参比实验室提供75第75页/共94页第七十五页，共95页。梅毒螺旋体抗原梅毒螺旋体抗原(kngyun)(kngyun)血清学试血清学试验验梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验检测检测(jin c)(jin c)梅毒螺旋体抗原特异性抗体梅毒螺旋体抗原特异性抗体可用于确认非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果，排除其假阳性可用于确认非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果，排除其假阳性阳性结果可持续存在，即使治疗后仍可为阳性。阳性结果可持续存在，即使治疗后仍可为阳性。* * 梅毒螺旋体抗原血清学试验与疾病的活动度无关，不能用于鉴别(jinbi)现症感染还是既往感染，也不能用于判

37、断疗效* 一期梅毒治疗病人中，15%-25%可在2-3年后转为血清学阴性76第76页/共94页第七十六页，共95页。梅毒诊断(zhndun)方法学比较一期梅毒二期梅毒三期梅毒敏感性 特异性敏感性特异性敏感性特异性非特异性抗体（RPR、TRUST)74-87%96-99%100%96-99%34-94%96-99%特异性抗体(TPPA、ELISA)70-100%94-100%100%94-100%95-98%94-100%第77页/共94页第七十七页，共95页。妊娠期梅毒妊娠期梅毒(mid)(mid)检测检测所有孕产妇应进行梅毒筛查检测：孕期尽早（如果可能，在孕早期时）以及 如果在分娩前/临产时

38、没有筛查检测结果，在分娩时检测筛查检测可应用以下任何一类方法：非梅毒螺旋体抗原血清学试验（滴度）或 梅毒螺旋体抗原血清学试验所有筛查检测结果阳性的孕产妇都应用另外一类检测方法进行复检确认是否为现症梅毒所有产妇及所生婴儿出院前，产妇梅毒检测结果都应记录(jl)在病历中，以确保需要时给予治疗78第78页/共94页第七十八页，共95页。孕产妇梅毒检测孕产妇梅毒检测(jin c)(jin c)流程流程非梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验孕产妇治疗后，随访监测非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验每3个月进行非梅毒螺旋体抗原血清学试验如果需要进行治疗报

39、告：非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性阴性报告：两种检测均阳性两种检测均阳性治疗病人治疗病人报告： 梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性阴性报告：非梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性阳性梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性阴性报告：梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性阳性非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性阴性阳性反应阴性反应阴性反应阳性反应阳性反应或阴性反应阳性反应阴性反应阳性反应79第79页/共94页第七十九页，共95页。HIVHIV感染病人的梅毒感染病人的梅毒(mid)(mid)血清学试血清学试验验一些HIV感染病人，其梅毒(mid)血清学试验结果不典型，包括滴度超常高或超常低滴度不断变动如果临床表现提示早期梅毒(mid)，而

40、血清学试验结果与此不一致，考虑病灶活检 或暗视野显微镜检查注意：对于大多数注意：对于大多数HIVHIV感染病人而言，梅毒血清学试验感染病人而言，梅毒血清学试验(shyn)(shyn)是诊断梅是诊断梅毒感染、随访观察疗效准确、可靠的检测方法毒感染、随访观察疗效准确、可靠的检测方法80第80页/共94页第八十页，共95页。梅毒梅毒(mid)(mid)血清学检测结果的解释血清学检测结果的解释非梅毒螺非梅毒螺旋体试验旋体试验梅毒螺旋梅毒螺旋体试验体试验临床参考意义临床参考意义+ -RPR假阳性 考虑其他医学状况*+ +现症梅毒现症梅毒- +既往感染既往感染或极早期梅毒极早期梅毒- -排除梅毒感染由于免

41、疫缺陷，也可发生于艾滋病晚期*包括(boku)结核、疟疾、风湿性关节炎或妊娠。81第81页/共94页第八十一页，共95页。三、暴露三、暴露(bol)(bol)婴儿的梅毒检测婴儿的梅毒检测82第82页/共94页第八十二页，共95页。梅毒暴露婴儿先天梅毒暴露婴儿先天(xintin)(xintin)梅毒梅毒检测检测母体非梅毒螺旋体和梅毒螺旋体IgG抗体可通过胎盘，所以应谨慎地对婴儿梅毒血清学试验结果进行解释婴儿需要接受预防性治疗还是规范的抗梅毒治疗应根据：母亲确诊梅毒感染母亲治疗情况婴儿梅毒感染的临床表现、实验室或放射线检查结果母亲及婴儿非梅毒螺旋体抗原(kngyun)血清学试验滴度水平的比较（尽可

42、能在同一个实验室使用相同的试验方法）83第83页/共94页第八十三页，共95页。先天梅毒先天梅毒(mid)(mid)的诊断标准的诊断标准梅毒暴露婴儿具有以下条件之一： 任何先天梅毒临床表现暗视野显微镜检梅毒螺旋体阳性(yngxng)（+）梅毒螺旋体IgM抗体阳性(yngxng)*RPR/TRUST检测阳性(yngxng)，滴度比母亲分娩前最近一次滴度高4倍及以上RPR/TRUST监测随访中，任何一次滴度不下降或反而上升满18月龄后，梅毒螺旋体抗原血清学试验（TPPA、ELISA或梅毒快速检测）检测阳性(yngxng)* IgM抗体反映近期感染，可帮助鉴别(jinbi)婴儿先天梅毒，但我国尚不能

43、广泛开展84第84页/共94页第八十四页，共95页。梅毒梅毒(mid)(mid)暴露婴儿的评估暴露婴儿的评估梅毒暴露婴儿：婴儿RPR检测婴儿RPR检测不能使用脐带血，因其易被母体血液污染，从而出现假阳性(yngxng)结果。先天梅毒临床表现： 非免疫性水肿、黄疸、肝脾大、鼻炎、皮疹、末端肢体假性麻痹对可疑病灶或体液进行暗视野显微镜检查85第85页/共94页第八十五页，共95页。先天梅毒检测先天梅毒检测(jin c)(jin c)流程流程 婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验定量检测梅毒暴露婴儿母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验定量检测（应同时进行梅毒螺旋体抗原血清学试验，用于随访诊断）组织或分泌物

44、暗视野显微镜检，有条件进行IgM抗体检测报告母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测滴度水平报告婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测滴度水平报告暗视野显微镜检或IgM抗体检测结果阳性阴性或没有梅毒感染的症状有梅毒感染的症状86第86页/共94页第八十六页，共95页。四、妊娠期整合四、妊娠期整合(zhn h)(zhn h)检测检测采血程序采血程序87第87页/共94页第八十七页，共95页。妊娠期整合检测妊娠期整合检测(jin c)HIV(jin c)HIV、梅毒和、梅毒和HBVHBV的的采血程序采血程序检测前提供相关信息后，医务人员应：获得孕产妇及配偶（如果配偶也同时接受检测）的口头同意戴上乳胶手

45、套，采血摘掉手套标记采血管（根据当地方案要求），填写化验单，登记患者编号和采血日期用合适的容器将血样本转送到实验室进行检测向孕产妇解释(jish)如何能够获得检测结果88第88页/共94页第八十八页，共95页。五、要点五、要点(yodin)(yodin)小结小结(xioji)(xioji)89第89页/共94页第八十九页，共95页。要点要点(yodin)1-(yodin)1-梅毒梅毒早期梅毒诊断可根据在组织或分泌物样本中通过显微检测到苍白螺旋体而诊断应用梅毒血清学试验进行梅毒筛查非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒感染过程中产生的非特异抗体。滴度通常与疾病(jbng)的活动度有关，因此可用于监测

46、对治疗的反应梅毒螺旋体抗原血清学试验检测对抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体，可用于确认临床诊断或非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果，可反映任何阶段的梅毒暴露90第90页/共94页第九十页，共95页。要点要点(yodin)2-(yodin)2-梅毒梅毒先天梅毒的诊断复杂，应根据：母亲梅毒感染状态母亲梅毒治疗情况婴儿(yng r)梅毒感染的临床表现、实验室或X线检查结果母亲、婴儿(yng r)非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度水平的比较随访第91页/共94页第九十一页，共95页。要点要点(yodin)3-(yodin)3-梅毒梅毒转变一种观念：老观念：梅毒筛查试验只指非梅毒螺旋体抗原血清学试验（RPR、

47、TRUST）新观念：用检测灵敏度高的梅毒确诊试验-梅毒螺旋体抗原血清学试验（TPPA、ELISA）也可以作为筛查试验，可以减少漏诊。筛查阳性再做RPR或TRUST+滴度，以判断是既往感染还是现症感染，决定是否(shfu)需要治疗，治疗后复查RPR或TRUST+滴度观察疗效！第92页/共94页第九十二页，共95页。93第93页/共94页第九十三页，共95页。感谢您的观看(gunkn)！第94页/共94页第九十四页，共95页。内容(nirng)总结培训目标。* 所有HIV检测工具应经过SFDA审批，并在有效期内使用。 免疫功能丧失（B细胞功能缺损）。尽快再次采血再次进行DNA-PCR检测。选择合适的采血部位，皮肤消毒（图片中阴影部位）。1、检测的频度应在基线后每3-4月进行1次。2、新药应在2-4周进行。HBV暴露婴儿出生后24小时内给予HBV疫苗和免疫球蛋白注射。获得孕产妇及配偶（如果配偶也同时接受检测）的口头(kutu)同意。第93页/共94页。感谢您的观看第九十五页，共95页。