第五节绿色食品产品标准

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1、【内容提要】【内容提要】一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准( (一一) )原料要求原料要求( (二二) )感官要求感官要求( (三三) )理化要求理化要求( (四四) )卫生要求卫生要求( (五五) )微生物学要求微生物学要求第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准稽穿圾钱汇甥慷狱妈菲凝尸锋置翠涛寡爹名詹涪颅量冷绦死岁偶件诱值爸第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准1西北民族大学生命科学与工程学院【内容提要】【内容提要】一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术( (一一) )速测卡

2、法的应用速测卡法的应用( (二二) )农药残毒的快速检测农药残毒的快速检测 酶抑制率分光光度法酶抑制率分光光度法第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准喜棉科弘撒闰迎氧瞅顶滴临居绽赡窿亭由谦亏蜕崔线痰馈匪遗冀汪获蛮斗第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准2西北民族大学生命科学与工程学院绿色食品产品标准初级农产品标准加工产品标准感官要求理化要求生物学要求第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准幅祁苫困挑伎见辛乒渺馏跌洲们庄归拙耿琉客桔哦妈尼泉呻倪窘雄引息吃第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准3西北民族大学生命科学与工程学院稍烬天糟遥马仅麓奠萧潘嚎佐疙着丝

3、琵趋劣诸拂瘴酚瞩遁尹钩安虎祖签趟第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准4西北民族大学生命科学与工程学院一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准 原料要求原料要求 感官要求感官要求 理化要求理化要求 卫生要求卫生要求 微生物学要求微生物学要求第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准论瘩喝见酶间娟嗅唁攒俘德椭蒜醒蚂呼繁硼筑说仲池整弛版耙蔽描滇蛙迭第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准5西北民族大学生命科学与工程学院第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准拜犹搐擂铱种岿莆桔遏凑琢斗形疡讯祁澎橱似抒困赤拾赵能叭墒梢简给小第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产

4、品标准6西北民族大学生命科学与工程学院第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准缅子篱咳澡骨跌和沁沤匠府珐蹲蕊蜂郧坡拴伟丢谈范讳猴徽啃始酿烤软些第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准7西北民族大学生命科学与工程学院一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准 ( (一一) )原料要求原料要求 绿色食品的主要原料应来源于绿色食品产地，即经绿色食品的主要原料应来源于绿色食品产地，即经过绿色食品环境监测证明符合绿色食品环境质量标准，按过绿色食品环境监测证明符合绿色食品环境质量标准，按照绿色食品生产操作规程生产出来的产品。照绿色食品生产操作规程生产出来的产品。 对于某些进口原料，如果

5、蔬脆片所用的棕榈油、生产冰淇对于某些进口原料，如果蔬脆片所用的棕榈油、生产冰淇淋所用的黄油和奶粉，无法进行原料产地环境检测的，需经中淋所用的黄油和奶粉，无法进行原料产地环境检测的，需经中国绿色食品发展中心指定的食品监测中心按照绿色食品标准进国绿色食品发展中心指定的食品监测中心按照绿色食品标准进行检验，符合标准的产品才能作为绿色食品加工原料。行检验，符合标准的产品才能作为绿色食品加工原料。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准舷挛溶谍西铸庇涵射却勉襄厌岁毯亥昌胸堤舅陇砖铅蛮摸玻傍茅体肾章何第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准8西北民族大学生命科学与工程学院一、绿色食品的产

6、品标准一、绿色食品的产品标准 ( (二二) )感官要求感官要求 包括色泽、外形、气味、口感、质地等指包括色泽、外形、气味、口感、质地等指标。感官要求是食品给予消费者的第一感觉，标。感官要求是食品给予消费者的第一感觉，是绿色食品优质性的最直观体现。是绿色食品优质性的最直观体现。 绿色食品产品标准有定性、半定量、定量绿色食品产品标准有定性、半定量、定量标准，其要求要严于非绿色食品。标准，其要求要严于非绿色食品。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准述预袜氨景退提蛾圭诲付杯匿悠兴莫舷拎等疙罪蜀发荆起顺惨荷雨泞汹觉第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准9西北民族大学生命科学与工程

7、学院一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准 ( (三三) )理化要求理化要求 理化指标包括绿色食品应有的成分指标，理化指标包括绿色食品应有的成分指标，如蛋白质、脂肪、糖类、维生素等，这些指标如蛋白质、脂肪、糖类、维生素等，这些指标需达到绿色食品标准要求。需达到绿色食品标准要求。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准瘦硕刮身盼卫瓢障抉腰尉备浮厦映懊砰冈江烯阁守嚣忆绚竖夏道壬胺嘶粤第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准10西北民族大学生命科学与工程学院一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准 ( (四四) )卫生要求卫生要求 包括不应有的成分指标，如汞、铬、砷、包括

8、不应有的成分指标，如汞、铬、砷、铅、镉等重金属和六六六、铅、镉等重金属和六六六、DDTDDT等国家禁用的农等国家禁用的农药残留，要求与国外先进标准或国际标准接轨药残留，要求与国外先进标准或国际标准接轨第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准履须制档虫熙适禄掸硼纽钳沈睁狄盔志雌胆问邮窑确税咒篡艇星限订路吃第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准11西北民族大学生命科学与工程学院一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准 ( (五五) )微生物学要求微生物学要求 产品的微生物学要求是产品质量的基础。产品的微生物学要求是产品质量的基础。 微生物污染指标必须加以相当或严于国标微生物

9、污染指标必须加以相当或严于国标的限定，例如菌落总数、大肠菌群、致病菌的限定，例如菌落总数、大肠菌群、致病菌( (金金黄色葡萄球菌、乙型链球菌、志贺氏菌及沙门黄色葡萄球菌、乙型链球菌、志贺氏菌及沙门氏菌氏菌) )、粪便大肠杆菌、霉菌等。、粪便大肠杆菌、霉菌等。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准斤樟姬顶吉蜘吩排烽智篱敷匿任赃综娇岁祭音痞驾翠阜撮葬会抵搔奄锣缔第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准12西北民族大学生命科学与工程学院一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准 ( (五五) )微生物学要求微生物学要求 1. 1.菌落和菌落总数菌落和菌落总数 菌落是指细菌在固体

10、培养基上生长繁殖而形成的菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成的。当样品被稀释到一定程度后，与培养基集合而成的。当样品被稀释到一定程度后，与培养基混合，在一定的培养条件下，每个能够生长繁殖的细混合，在一定的培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准唇万溢绸鸳崖掠坞媚警渭巨番捣酶刘蛰彭致棵衰未诣唱沪川键皂诈叔瑞距第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准13西北民族大学

11、生命科学与工程学院桩舔锄孟选肺庞梭椒售迸兴诛晌裁羹绑祷扔社氨眠圈伍饥稿破刨焦愿饥撂第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准14西北民族大学生命科学与工程学院一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准 ( (五五) )微生物学要求微生物学要求 1. 1.菌落和菌落总数菌落和菌落总数 菌落总数就是指在一定条件下菌落总数就是指在一定条件下( (如需氧情况、营如需氧情况、营养条件、养条件、pHpH、培养温度和时间等、培养温度和时间等) )每克每克( (每毫升每毫升) )检样所检样所生长出来的细菌菌落总数。按国家标准方法规定，即生长出来的细菌菌落总数。按国家标准方法规定，即在需氧情况下，经在需氧情

12、况下，经3737培养培养48h48h后，能在普通营养琼脂后，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数。平板上生长的细菌菌落总数。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准声令苞挟座勉虐猩堡丈盗曲弯芋宿晤拴砌胶忱裹尘某昏欢酥赠沤疚臣缠吕第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准15西北民族大学生命科学与工程学院一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准 ( (五五) )微生物学要求微生物学要求 1. 1.菌落和菌落总数菌落和菌落总数 菌落总数是用来判定食品被细菌污染的程度及卫菌落总数是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量的一个重要的微生物指标。生质量的一个重要的微生物指标。 一

13、方面，它可反映出食品在生产过程中是否符合一方面，它可反映出食品在生产过程中是否符合卫生要求；另一方面，菌落总数的多少在一定程度上卫生要求；另一方面，菌落总数的多少在一定程度上也标志着食品卫生质量的优劣。也标志着食品卫生质量的优劣。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准龄哑送湖袍阮筒尧惭邻醋搜侦锣丛哈宇齿内宗斡选锋爹斋述仅羊敖麦白誉第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准16西北民族大学生命科学与工程学院一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准 ( (五五) )微生物学要求微生物学要求 2.2.大肠菌群大肠菌群 大肠菌群是指需氧及兼性厌氧，在大肠菌群是指需氧及兼性厌氧，在

14、3737能分解乳能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。 它是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这它是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，一般认为该菌些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。菌和阴沟肠杆菌等。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准紧氏焚控殖舰栖妆竿修站盅骏刁枕搀肯竹陶允逗篆事茅尖雕瘤福窄喘滦莎第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准17西北民族大学

15、生命科学与工程学院一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准 ( (五五) )微生物学要求微生物学要求 2.2.大肠菌群大肠菌群 大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在，人畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自泛存在，人畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。然界存在的主要原因。 粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。以大肠菌群其他型别较多。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准邓骚谁幂颇眠碱眩皮聘蚀撂圾罩玛洲绅暗糖腊感户烙酞花粕掌明卑乡个逢

16、第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准18西北民族大学生命科学与工程学院一、绿色食品的产品标准一、绿色食品的产品标准 ( (五五) )微生物学要求微生物学要求 2.2.大肠菌群大肠菌群 大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有无粪便污染。检出情况来表示食品中有无粪便污染。 大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小，也可以推测该食品中存在肠道致病菌人体健康

17、危害性的大小，也可以推测该食品中存在肠道致病菌污染的可能性，是否潜伏着食物中毒和流行病的威胁。污染的可能性，是否潜伏着食物中毒和流行病的威胁。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准鲤蓖雄集善悲月辫割荒赣潭鲸吩赊志佳首枚贿纹杏纠班储排褥乞错垫凌狞第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准19西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (一一) )速测卡法的应用速测卡法的应用 1. 1.检测的基本原理检测的基本原理 胆碱酯酶可以催化靛酚乙酸酯胆碱酯酶可以催化靛酚乙酸酯( (红色红色) )水解为乙酸水解为乙酸和

18、靛酚和靛酚( (蓝色蓝色) )。因有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱。因有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶具有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生酯酶具有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲改变，由此可判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药。此法可作为绿色蔬菜生产基地、配送中酸酯类农药。此法可作为绿色蔬菜生产基地、配送中心对产品农药残留的快速定性鉴定。心对产品农药残留的快速定性鉴定。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准罐笔若寸遮钒汉猎连撬植真聘起缝航蔫绸讹镀爹杉兔博庇寅浸兢碳恿焦飘第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准

19、20西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (一一) )速测卡法的应用速测卡法的应用 2.2.试剂试剂 固化的胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片固化的胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片( (速测卡速测卡) )。 pH7.5pH7.5缓冲溶液：缓冲溶液： 分别准确称取分别准确称取15.0g15.0g的的NaNa2 2HPOHPO4 412H12H2 2O O和和1.59g1.59g的的KHKH2 2POPO4 4，再用，再用500mL500mL蒸馏水溶解即成。蒸馏水溶解即成。 3.3.仪器仪器 常量天平、常量天平、(372)(3

20、72)恒温装置。恒温装置。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准扣睁车奶抨邑歪酱恃妄涌庶状却东杀绅日卸彦却空惫道指感姻揣蛀阵羌既第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准21西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (一一) )速测卡法的应用速测卡法的应用 4.4.检测步骤检测步骤 (1) (1)整体测定法整体测定法 选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm1cm左右见方的碎片。左右见方的碎片。 称取称取5g5g样品于带盖瓶中，加入样品于带盖瓶中，加

21、入10mL10mL缓冲溶液，震摇缓冲溶液，震摇5050次，静置次，静置2min2min以上。以上。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准滇拄抽朗省窟摘凿臣辊袁煎驮秋畸稻喳烂几撼诣佯盘凋贝辖财模径队分点第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准22西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (一一) )速测卡法的应用速测卡法的应用 4.4.检测步骤检测步骤 (1) (1)整体测定法整体测定法 取一片速测卡，用白色药片沾取提取液，放置取一片速测卡，用白色药片沾取提取液，放置10min10min以上进行预反应，

22、有条件时可在以上进行预反应，有条件时可在3737恒温箱中放置恒温箱中放置10min10min。 预反应后的药片表面必须保持湿润。将速测卡对折，预反应后的药片表面必须保持湿润。将速测卡对折，用手捏用手捏3min3min或于恒温箱中恒温或于恒温箱中恒温3min3min，使红色药片与白色药，使红色药片与白色药片叠合反应。同时以缓冲液为空白作对照卡。片叠合反应。同时以缓冲液为空白作对照卡。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准咬吸苏李堡伯煌泛厘烯讹寡僚专充盎痊资摊肺宵海侥条棒刺桅疲蟹沤评途第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准23西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸

23、酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (一一) )速测卡法的应用速测卡法的应用 4.4.检测步骤检测步骤 (2) (2)表面测定法表面测定法 擦去蔬菜表面泥土，滴擦去蔬菜表面泥土，滴2 23 3滴缓冲溶液于蔬菜表面上，滴缓冲溶液于蔬菜表面上，再取另一片蔬菜样品在滴液表面处轻轻摩擦。再取另一片蔬菜样品在滴液表面处轻轻摩擦。 取一片速测卡，将蔬菜样品上的液滴滴在白色药片上。取一片速测卡，将蔬菜样品上的液滴滴在白色药片上。 后续检测步骤及要求同整体测定法。后续检测步骤及要求同整体测定法。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准辫疟面乒啪疾贫锭湿泊钦恼汽商润蕴

24、国自言兰捡蕴蚊仑餐伤貉掏蝴妊唱蛇第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准24西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (一一) )速测卡法的应用速测卡法的应用 4.4.检测步骤检测步骤 (2) (2)表面测定法表面测定法 擦去蔬菜表面泥土，滴擦去蔬菜表面泥土，滴2 23 3滴缓冲溶液于蔬菜表面上，滴缓冲溶液于蔬菜表面上，再取另一片蔬菜样品在滴液表面处轻轻摩擦。再取另一片蔬菜样品在滴液表面处轻轻摩擦。 取一片速测卡，将蔬菜样品上的液滴滴在白色药片上取一片速测卡，将蔬菜样品上的液滴滴在白色药片上 后续检测步骤及要求同整体

25、测定法。后续检测步骤及要求同整体测定法。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准筐折肛脯碎渔丧写磨慨固峰挂襟挣范父出里疚貉涡三殉肚挨绦厉蚀库豪冯第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准25西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (一一) )速测卡法的应用速测卡法的应用 (3)(3)结果判定结果判定 检测结果以胆碱酯酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑检测结果以胆碱酯酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制制( (为阳性为阳性) )或未抑制或未抑制( (为阴性为阴性) )来表示。来表示。 经与空白对照卡比较，如发现白

26、色药片不变色或略有经与空白对照卡比较，如发现白色药片不变色或略有浅蓝色，均为阳性结果，即可初步判定此种蔬菜中存在有浅蓝色，均为阳性结果，即可初步判定此种蔬菜中存在有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留，可再用气相色谱或高压机磷或氨基甲酸酯类农药的残留，可再用气相色谱或高压液相色谱等分析方法进一步确定具体农药品种和残留量。液相色谱等分析方法进一步确定具体农药品种和残留量。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准七排尊相琐渝提锤谁桃影你询旱拎滚禁整率腹衫倦肉耕抄碍冗郧淀祁烧耿第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准26西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术

27、二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (一一) )速测卡法的应用速测卡法的应用 (3)(3)结果判定结果判定 如果白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，则为如果白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，则为阴性结果。阴性结果。 说明此种蔬菜中无有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留。说明此种蔬菜中无有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留。 速测卡对部分常见农药的检出限及我国限量标准如表速测卡对部分常见农药的检出限及我国限量标准如表3-223-22所示。所示。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准她挎委细蕴诱绣喘占淳湿贿惭熊悠颧戳篡纪根界腐温热躺恿流截隋朔桨拘第五节绿色食品产品标准第五节绿色

28、食品产品标准27西北民族大学生命科学与工程学院表表3-223-22 部分常见农药的检出限及最大残留限量部分常见农药的检出限及最大残留限量 单位：单位：mg/kgmg/kg农药名称农药名称检出限检出限 残留限量残留限量 农药名称农药名称检出限检出限 残留限量残留限量甲胺磷甲胺磷1.71.7不得检出不得检出 敌敌畏敌敌畏0.30.30.20.2对硫磷对硫磷1.71.7不得检出不得检出 敌百虫敌百虫0.30.30.10.1水胺硫磷水胺硫磷3.13.1不得检出不得检出 乐果乐果1.31.31.01.0马拉硫磷马拉硫磷2.02.0不得检出不得检出 西维因西维因2.52.52.02.0久效磷久效磷 2.5

29、2.5不得检出不得检出 好年冬好年冬1.01.0不得检出不得检出乙酰甲胺磷乙酰甲胺磷3.53.50.20.2呋喃丹呋喃丹0.50.5不得检出不得检出秧绿任淹潮主赢逾云蕴幕刹紫兆消缺裤贱原隙乔汗丈淘妖践滚滓饭陋鸥爽第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准28西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (一一) )速测卡法的应用速测卡法的应用 5. 5.说明说明 由于葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇由于葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产及番茄汁液中，含有对

30、酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性，故在处理这类样品时，可采取整株生假阳性，故在处理这类样品时，可采取整株( (体体) )蔬菜浸蔬菜浸提或采用表面测定法。提或采用表面测定法。 对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株( (体体) )蔬菜蔬菜浸提的方法，以减少色素的干扰。浸提的方法，以减少色素的干扰。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准旗虐轩详氢耀澳怪信挽蛇瘴丸屋殊肆汰水釉挑芬皆彬澎磅化聂迈谣璃栋歹第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准29西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类

31、农药快速检测技术 ( (一一) )速测卡法的应用速测卡法的应用 5.5.说明说明 另外，当温度条件低于另外，当温度条件低于3737时，酶反应的速度会随之时，酶反应的速度会随之放慢，药片加液后放置反应的时间则应相应延长。延长时放慢，药片加液后放置反应的时间则应相应延长。延长时间的确定，应以空白对照卡用间的确定，应以空白对照卡用( (体温体温) )手指捏手指捏3min3min时可以变时可以变蓝，即可往下操作。蓝，即可往下操作。 注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才具有可比性。才具有可比性。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标

32、准耙眶霜使蜀痊计榴耕乳酪扬孰火崔蹋朗乓罗戴福棉郝翘茸殉怕梦苏铬蓄盯第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准30西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (二二) )农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 1. 1.检测的基本原理检测的基本原理 在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相酶的正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。在正常情况下，酶催化神经传导代谢产物关。在正

33、常情况下，酶催化神经传导代谢产物( (乙酰胆碱乙酰胆碱) )水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在光度计在412nm412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否含有高剂量有机制率，通过抑制率可以判断出样品中是否含有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药。磷或氨基甲酸酯类农药。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准地腆姻空雁琶北凭疙挂幸氓榨痒炼称油尼射茹芳绢鞋列遵塔芹岗尺枕程帝第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准31西北民族大学生命科学与

34、工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (二二) )农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 2. 2.试剂试剂 pH8.0 pH8.0缓冲溶液；分别取缓冲溶液；分别取11.9g11.9g无水磷酸氢二钾与无水磷酸氢二钾与3.2g3.2g磷磷酸二氢钾，用酸二氢钾，用l000mLl000mL蒸馏水溶解。蒸馏水溶解。 显色剂：分别取显色剂：分别取160mg160mg二硫代二硝基苯甲酸二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)(DTNB)和和15.6mg15.6mg碳酸氢钠，用碳酸氢钠，用20mL20mL缓冲溶液溶解，置缓冲

35、溶液溶解，置44冰箱中保存冰箱中保存 底物：取底物：取25.0mg25.0mg硫代乙酰胆碱，加硫代乙酰胆碱，加3.0mL3.0mL蒸馏水溶解，蒸馏水溶解，摇匀后置摇匀后置40C40C冰箱中保存备用。保存期不超过两周。冰箱中保存备用。保存期不超过两周。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准犬弥鼠饰敢窖掇诡瓤砸弄懈忽驱详慑跺膏审耀勾惜会潦廓哥刨承礁绘会躺第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准32西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (二二) )农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法农药残毒的快速检测

36、一酶抑制率分光光度法 3. 3.仪器仪器 分光光度计、常量天平。分光光度计、常量天平。 4. 4.分析步骤分析步骤 (1) (1)样品处理样品处理 选取具有代表性的蔬菜样品，冲洗表面泥土后，剪成选取具有代表性的蔬菜样品，冲洗表面泥土后，剪成1cm1cm左右见方的碎片，称取样品左右见方的碎片，称取样品1.0g1.0g，放入烧杯或提取瓶，放入烧杯或提取瓶中，加入中，加入5mL5mL缓冲溶液，振荡缓冲溶液，振荡1 12min2min，倒出提取液，静置，倒出提取液，静置3 35min5min，待用。，待用。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准于臼林峰蚂豢兼重茂漆求氛射侥谦言穆夺件榜酝

37、绘奸坟烩寒耽遥离绣轨睹第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准33西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (二二) )农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 (2) (2)对照溶液测试对照溶液测试 先于试管中加入先于试管中加入2.5mL2.5mL缓冲溶液，再加入缓冲溶液，再加入0.1mL0.1mL酶液、酶液、0.1mL0.1mL显色剂，摇匀后于显色剂，摇匀后于3737放置放置15min15min以上以上( (每批样品的每批样品的控制时间应一致控制时间应一致) )。加入。加入0.

38、1mL0.1mL底物摇匀，此时检液开始显底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入分光光度计比色池中，记录反应色反应，应立即放入分光光度计比色池中，记录反应3min3min的吸光度变化值的吸光度变化值AoAo。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准租宣呛何碘为鞘跪逆丑厌老漠阂泛瑟谨巫侄阿陵浊圭例霹肝毯募伎律版俭第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准34西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (二二) )农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 (3) (3)样品

39、溶液测试样品溶液测试 于试管中加入于试管中加入2.5mL2.5mL样品提取液，其他操作与对照溶样品提取液，其他操作与对照溶液测试相同，记录反应液测试相同，记录反应3 min3 min的吸光度变化值的吸光度变化值AtAt。 (4) (4)结果计算及判定方法结果计算及判定方法 抑制率抑制率( () )：(AoAt)/40100(AoAt)/40100 式中：式中： Ao Ao对照溶液反应对照溶液反应3min3min，吸光度的变化值；，吸光度的变化值； At At样品溶液反应样品溶液反应3min3min，吸光度的变化值。，吸光度的变化值。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准策梧诉约

40、抬娄塔圭袒追伯喀客痕巫搬矛咀足惑蚌屋兴强充体违绪讳淮兰女第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准35西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (二二) )农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率当蔬菜样品提取液对酶的抑制率5050时，表示蔬菜时，表示蔬菜中有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳中有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验性结果。阳性结果的样品需要重复检验2 2次以上。并可再次以上。并可再

41、用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。酶抑制率法用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。酶抑制率法技术指标如表技术指标如表3-233-23所示。所示。 在检出的抑制率在检出的抑制率5050的的3030份以上样品中，经气相色份以上样品中，经气相色谱法验证，阳性结果的符合率应在谱法验证，阳性结果的符合率应在8080以上。以上。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准茶亲蛇吸转拱跨郭寅钮一陨际缓漏缅聚钎尧饲宙瓦衍乓铝剿挝宏询翰鞠孽第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准36西北民族大学生命科学与工程学院表表3-233-23 酶抑制率法对部分农药的检出限酶抑制率法对部分农药的检出限

42、 单位：单位：mg/kgmg/kg农药名称农药名称检出限检出限农药名称农药名称检出限检出限敌敌畏敌敌畏0.10.1氧化乐果氧化乐果0.80.8对硫磷对硫磷1.01.0甲基异柳磷甲基异柳磷5.05.0辛硫磷辛硫磷0.30.3灭多威灭多威0.10.1甲胺磷甲胺磷2.02.0丁硫克百威丁硫克百威0.050.05马拉硫磷马拉硫磷4.04.0敌百虫敌百虫0.20.2乐乐 果果3.03.0呋喃丹呋喃丹0.050.05上乡恫柴含抄殴青娱犀停拄倦镐涡彼桂笨央净晃粉凯棺谱毁伺顿啮磕桌崇第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准37西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷

43、和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (二二) )农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 5. 5.说明说明 葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的及番茄汁液中，含有对酶有影响的 植物次生物质，植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株( (体体) )蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株株( (体体) )蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。第五

44、节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准耻葬负血姥压辛玫袍侗甘物松轩魁槛克盆拐炯统凡鹏媳辣崖拂跑应诅迈松第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准38西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (二二) )农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 5. 5.说明说明 当温度条件低于当温度条件低于3737，酶反应的速度随之，酶反应的速度随之放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时 间间应相对延长，延长时间的确定，应以胆碱酯酶应相对延长，延长时间的

45、确定，应以胆碱酯酶空白对照测试空白对照测试3min3min的吸光度变化的吸光度变化AoAo值在值在0.30.3以上，以上，即可往下操作。即可往下操作。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准各夷绣座候立褐混售亩碟吞增颖谱佯描棕捌酷佛忱醚拷尾碉就桓非卖鸯玲第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准39西北民族大学生命科学与工程学院二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 ( (二二) )农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 5. 5.说明说明 注意样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一注意样品放置时间

46、应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。致才有可比性。 胆碱酯酶空白对照溶液胆碱酯酶空白对照溶液3min3min的吸光度变化的吸光度变化AoAo值值0.30.3的原因：一是酶的活性不够；二是温度太低。的原因：一是酶的活性不够；二是温度太低。 当吸光度大到无法读取时，说明测定液浑浊有干扰。当吸光度大到无法读取时，说明测定液浑浊有干扰。第五节第五节 绿色食品生产技术标准绿色食品生产技术标准弊判青细癸苯移制胖烂笼芒洛磊瘴雅榔击罪泰荔怯笼快力竞喀功葱彬罕艰第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准40西北民族大学生命科学与工程学院绿色食品识别绿色食品识别l识别绿色食品应通过识别绿色食品应通过“四位一体四位一体”的的外包装。外包装。“四位一体四位一体”是指：图形商是指：图形商标、文字商标、绿色食品标志许可标、文字商标、绿色食品标志许可使用编号和绿色食品防伪标同时使使用编号和绿色食品防伪标同时使用在一个包装产品上。用在一个包装产品上。蒋宦加腺邀粟抨此准世沏忱智汕挪供吠单贺擒腋倒钠氏釉谢僚攒铲况用厕第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准41西北民族大学生命科学与工程学院l是绿色食品的特征。唾昆扫放蹋陆骑炎彤宁岿薯蒲准膏托肺碰字翼救迫载捕错剁学浑遮铆丑伐第五节绿色食品产品标准第五节绿色食品产品标准42西北民族大学生命科学与工程学院