肿瘤及其标志物课件.ppt

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1、1肿肿瘤瘤及及其其标标志志物物曾玲莉曾玲莉曾玲莉曾玲莉2恶性肿瘤发生与分类恶性肿瘤发生与分类定义定义肿肿瘤瘤（tumor）又又称称新新生生物物（neoplasma），是是机机体体在在各各种种致致瘤瘤因因素素的的作作用用下下，组组织织和和细细胞胞在在基基因因水水平平上上失失去去了了对对其其生生长长的的正正常常调调控控，导导致致的的异异常常生长和分化。生长和分化。即即指指失失去去了了正正常常生生物物调调控控的的异异常常生生长长、分分化化的的细胞和组织。细胞和组织。3良良性性肿肿瘤瘤：局局部部膨膨胀胀性性生生长长，速速度度比比较较缓缓慢慢；常常 有有 较较 完完 整整 的的 包包 膜膜 ； 压压 迫

2、迫 邻邻 近近 组组 织织 器器 官官 ， 但但 不不 侵侵 蚀蚀 破破 坏坏 不向远处转移，危害性较小不向远处转移，危害性较小。特点：特点：细胞增殖、分化异常出现恶性生长；失去细胞细胞增殖、分化异常出现恶性生长；失去细胞与细胞间及细胞与组织间的正常联系，侵袭周围正与细胞间及细胞与组织间的正常联系，侵袭周围正常组织并发生转移常组织并发生转移根据肿瘤的生物学行为和临床表现可分为：根据肿瘤的生物学行为和临床表现可分为：恶性肿瘤恶性肿瘤：表现为细胞的无休止和无序的分裂，表现为细胞的无休止和无序的分裂，有侵袭性（向周围组织侵润）和转移有侵袭性（向周围组织侵润）和转移性，性，危害性大危害性大4恶性肿瘤的

3、分类恶性肿瘤的分类 癌症（癌症（CarcinomaCarcinoma） 起源于上皮细胞，约占恶性肿瘤的起源于上皮细胞，约占恶性肿瘤的85%85%； 恶性肉瘤（恶性肉瘤（SarcomaSarcoma）: : 起源于组织细胞，如肌肉组织、骨骼及脂肪组织，起源于组织细胞，如肌肉组织、骨骼及脂肪组织， 约占肿瘤的约占肿瘤的6%6%左右；左右； 淋巴瘤和白血病（淋巴瘤和白血病（Lymphoma and LeukemiaLymphoma and Leukemia）: : 起源于白细胞的产生组织，如骨髓、淋巴腺等，可起源于白细胞的产生组织，如骨髓、淋巴腺等，可 发生于各年龄段，约占恶性肿瘤的发生于各年龄段，

4、约占恶性肿瘤的5%5%左右；左右； 其它恶性肿瘤：其它恶性肿瘤： 包括脑瘤及其它罕见的癌症，约占恶性肿瘤的包括脑瘤及其它罕见的癌症，约占恶性肿瘤的4%4%左右。左右。5恶性肿瘤的发生的机制恶性肿瘤的发生的机制肿瘤是一种基因疾病，其发生是一个多因素、多阶段、肿瘤是一种基因疾病，其发生是一个多因素、多阶段、多基因参与的复杂过程。多基因参与的复杂过程。癌癌变变正常细胞正常细胞癌变细胞癌变细胞细胞生物大分子细胞生物大分子（DNA、RNA、蛋白质）蛋白质）结构与功能异常结构与功能异常化学致癌剂化学致癌剂环境因素环境因素致癌病毒致癌病毒放射线放射线 引引起起细细胞胞癌癌变变外外因因通通过过内内因因起起作作

5、用用6细胞癌变的分子学基础：细胞癌变的分子学基础：癌基因与抑癌基因其结构或表达异常癌基因与抑癌基因其结构或表达异常细胞增殖生长调节系统：细胞增殖生长调节系统：癌基因（正调节）癌基因（正调节）（促进增殖，抑制分化和凋亡）（促进增殖，抑制分化和凋亡）（通过表达产物（通过表达产物-生长因子发挥作用）生长因子发挥作用）抑癌基因（负调节）抑癌基因（负调节）（抑制增殖，促进分化、成熟、衰老，（抑制增殖，促进分化、成熟、衰老，最后凋亡）最后凋亡）当多个癌基因异常激活时或当抑癌基因缺当多个癌基因异常激活时或当抑癌基因缺失、突变或基因产物失活时可引起细胞癌变。失、突变或基因产物失活时可引起细胞癌变。7正常肠上皮

6、细胞癌基因的激活抑癌基因的丢失K-ras的突变腺瘤级 遗传型AFP突变级FAP丢失或息肉级 基因丢失P53基因丢失（占70%）一部分人直接有息肉转变成癌C-myc的过量表达大肠癌P53基因突变使细胞增殖加速，若同时其等位转移人大肠癌癌变的分子机理8 细胞癌变的免疫监视学说细胞癌变的免疫监视学说 1、机体免疫活化性细胞（T细胞、NK细胞、K细胞和巨噬细胞等）有识别肿瘤细胞的作用，在早期杀灭异常细胞，当机体免疫功能低下或受抑制时，肿瘤的发生率高。 2、肿瘤细胞有逃脱免疫监视的能力，妨碍机体的免疫监视的功能。9 （一）肿瘤标志物定义（一）肿瘤标志物定义（TumorMarkers，TM）是指由恶性肿瘤

7、细胞异常产生的或特征性存在于是指由恶性肿瘤细胞异常产生的或特征性存在于恶性肿瘤细胞的物质，或是宿主对肿瘤反应而产生的恶性肿瘤细胞的物质，或是宿主对肿瘤反应而产生的物质。当肿瘤发生、发展时，这些物质明显异常，标物质。当肿瘤发生、发展时，这些物质明显异常，标志肿瘤的存在志肿瘤的存在。肿瘤标志物的概念肿瘤标志物的概念TM或是大分子的蛋白质（包括肽类激素和酶），或是大分子的蛋白质（包括肽类激素和酶），或是小分子的脂类或氨基酸衍生物；或是小分子的脂类或氨基酸衍生物；存在于肿瘤细胞和组织中，存在于血液和其它存在于肿瘤细胞和组织中，存在于血液和其它体液；体液； 能利用化学、免疫和分子生物学等技术进行定能利用

8、化学、免疫和分子生物学等技术进行定性或定量的检测性或定量的检测10理想的肿瘤标志物条件理想的肿瘤标志物条件 特异性高； 灵敏度高； 器官特异性，可对肿瘤进行定位；肿瘤标志物浓度变化与肿瘤的大小、生长、消退、转移、恶性程度有直接的定性或定量的比例关系； 易检测出，取材方便，检出方法简单灵敏。11肿瘤标志物的研究概况肿瘤标志物的研究概况 肿瘤标志物的发展历史大体分为4个阶段：1846年1928年，本周氏蛋白的发现（第1个发现的肿瘤标志物，现已被确认为多发性骨髓瘤的标志）；121929年1962年，发现一些激素、酶及同工酶等在恶性肿瘤的应用价值，1930年Zondek发现人绒毛膜促性腺激素（HCG）

9、可辅助诊断绒毛膜癌等1932年Cushing等报道了促肾上腺皮质激素（ACTH）对恶性肿瘤的辅助诊断价值。40年代报道了一些酶在肿瘤病人的血清中增高，成骨肉瘤血清中有碱性磷酸酶的升高。1959年Markert等发现恶性肿瘤患者体液中可出现异常变化的同工酶谱131963年1975年，现代肿瘤标志物研究以发现胚胎蛋白为标志物1963年Abelev发现甲胎蛋白（AFP）1965年Glod和Freeman发现癌胚抗原（CEA）141976年至今，其研究进展及应用主要表现以下三方面：第一，1975年Kohler和Milstein成功地创建了淋巴细胞杂交瘤技术，1979年Koprowski用结肠癌细胞制备

10、单克隆抗体，识别糖类抗原，建立了一系列特异性较强的肿瘤标志和CA系列，第二，发现肿瘤的基因标志，1976年Bishop和Varmug等发现癌基因与肿瘤的发生关系，是使肿瘤标志的研究从分子水平提高到基因水平第三，肿瘤标志的检测技术的灵敏度和特异性大为提高。免疫定量技术由半定量或灵敏度较低的过渡到高灵敏度并能准确定量的放射免疫测定或酶联免疫吸附测定单克隆抗体技术的广泛应用15肿瘤标志物的分类肿瘤标志物的分类按肿瘤标志物本身的化学特性可分为以下7类：肿瘤胚胎性抗原标志物；酶类标志物；糖类标志物；激素类标志物；微球蛋白类标志物；基因类标志物；其它类标志物。16肿瘤标志物检测及临床应用17一、肿瘤胚胎性

11、抗原标志物一、肿瘤胚胎性抗原标志物肿瘤胚胎性抗原是指癌瘤细胞重新表达某些在胚胎细胞才有的而在成人后逐渐下降、消失的蛋白质成分最常见的是AFPCEA18（一）甲胎蛋白（一）甲胎蛋白（-fetoportein，AFP）生生化化特特性性是胎儿血中的主要蛋白质成分，主要由胚胎期的肝细胞和卵黄囊产生妊娠6周开始合成；1214周合成达高峰（血清浓度为13g/L）；出生后下降，出生时的脐带血含量约10100mg/L，一年后约为5.8g/LMW：70KD，由590氨基酸组成，含糖量为4%，糖链主要由甘露糖、半乳糖、N-乙酰葡萄糖和唾液酸组成的寡糖。糖链结构不同的AFP称AFP分子的异质体191.AFP与肝癌诊

12、断原发性肝癌；是目前公认早期诊断的主要标志物；（以血清含量400g/L作为诊断阈值）肝癌普查（但需注意AFP阴性不能排除HCC）临临床床应应用用判断分化程度；用于病情监测、预后判断；AFP含量与肿瘤的大小呈正相关，动态观察AFP含量和ALT酶活性的变化鉴别诊断良性肝脏疾病。(5)AFP异质体分析对AFP持续在50200g/L的原发性肝癌和良性肝病有鉴别诊断意义。常以小扁豆凝集素LCA结合型AFP25%作为原发性肝癌的诊断标准。202.AFP与生殖细胞瘤AFP与HCG同时检测有利于生殖细胞瘤的分型和分期AFPHCG睾丸癌+卵巢癌+绒毛膜上皮细胞癌+畸胎瘤+临临床床应应用用21（二）癌胚抗原（二）

13、癌胚抗原（carcinoembryonicantigen,CEA）生生化化特特性性1、于结肠癌的提取物中发现，因此抗原也出现在胚胎细胞上，故称癌胚抗原。2、CEA是一种结构复杂的可溶性酸性糖蛋白，含糖量约为45%55%；CEA属细胞表面糖蛋白家族，不规则地分布于细胞表面，易被细胞分泌或脱落至血液或其它体液中；电泳位置于-球蛋白的位置；有5种互相不重叠的抗原决定族，分别命名为Gold15，其中13有很高的特异性，45有交叉反应22基因位于19号染色体上，由10个基因组成，可表达36种不同的糖蛋白，胚胎期主要由胎儿的消化道上皮、肝脏和胰细胞分泌，出生后消失。成人CEA主要是由结肠粘膜细胞分泌到粪便

14、中，少量重吸收入血。健康成人血中CEA浓度小于2.5g/L。生生化化特特性性23临临床床应应用用CEA是一种低器官特异性肿瘤标志物。不适合作某种恶性肿瘤的诊断和筛查，但对预后判断、疗效观察及辅助诊断是一个有效的监测指标，也是发现复发的理想指标1、用于辅助诊断：肿瘤名称阳性率结肠癌70%90%胰腺癌（中晚期）88%91%，肺癌76%，乳腺癌70%2、检测胃液中的CEA对胃癌有一定的诊断意义。243、CEA比正常持续升高510倍（如20g/L） 往往提示有恶性肿瘤特别是肠癌的存在。4、注意排除非癌性CEA升高。良性疾病如吸烟者、酒精性肝硬化、肺气肿、结肠息肉、非特异性结肠炎、胰腺炎、良性乳腺疾病等

15、也可引起CEA的上升临临床床应应用用25二、酶类肿瘤标志物二、酶类肿瘤标志物恶性肿瘤患者酶活力改变原因：肿瘤细胞恶变时引起基因表达的改变，肿瘤细胞产生异常含量的酶；肿瘤细胞的破坏或通透性增加，导致细胞内酶释放入血；肿瘤特异的生长方式及代谢改变而导致酶的异常尤其是同工酶谱的改变；肿瘤组织压迫管腔使某些酶返流入血；肿瘤的存在或转移机体某些组织诱导并生成大量的酶。261、PAS是一种由前列腺上皮细胞分泌的单链糖蛋白2、具有酶活性，与精液液化有关。3、基因结构分析表明，PSA与激肽释放酶KLK1和KLK2高度同源，4、血中总的PSA(t-PSA)包括两种形式，游离型（f-PSA）20%结合型（cPSA

16、）80%，（一）前列腺特异性抗原（一）前列腺特异性抗原（prostatespecificantigen,PSA）生生化化特特性性27PSA-ACT（1抗胰蛋白酶）复合物抗胰蛋白酶）复合物cPSA形式形式2巨球蛋白（巨球蛋白（2MG）结合的复合物结合的复合物目前可以测定的是：目前可以测定的是：f-PSAACT-cPSAt-PSA=（f-PSA+ACT-cPSA）28PSA是前列腺癌的特异性标志物是前列腺癌的特异性标志物临临床床应应用用前列腺癌的筛查和早期诊断；一般以4.0g/L作为参考值的上限，t-PSA4g/L判断为阳性应用血清中的f-PSA/t-PSA比值来鉴别良、恶性前列腺肿瘤；f-PSA

17、/t-PSA比值为0.15可作为前列腺肥大和前列腺癌的鉴别要点，比值0.25,提示前列腺肥大；病情、疗效监测和预后判断；29（二）神经元特异性烯醇化酶（二）神经元特异性烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE)生生化化特特性性是烯醇化酶的一种同工酶有5种形式，即、 。二聚体是该酶的活性形亚基主要存在于肝、肾等组织；亚基主要存在于骨骼肌和心肌组织中；亚基组成的同工酶和存在于神经元和神经内分泌组织中，故称为NSE。30临临床床应应用用NSE水平升高还可见于某些神经内分泌肿瘤如嗜铬细胞瘤、黑色素瘤、胰岛细胞瘤，甲状腺髓样瘤等。NSE是小细胞肺癌和神经母细胞瘤的标志物。NSE对小细

18、胞肺癌敏感度为80%，特异性为80%90%，应用于疗效观察、预报复发及预后判断NSE对儿童型的神经母细胞阳性率为90%31AFU存在于多种细胞的溶酶体及体液存在于多种细胞的溶酶体及体液中，为一种酸性糖蛋白，是水解糖蛋白或中，为一种酸性糖蛋白，是水解糖蛋白或糖脂中糖脂中-L岩藻糖苷键的酶，参与糖脂、岩藻糖苷键的酶，参与糖脂、糖蛋白、糖的代谢糖蛋白、糖的代谢临临床床意意义义1、主要用于遗传性、主要用于遗传性AFU缺乏引起的岩缺乏引起的岩藻糖贮藻糖贮积病的诊断积病的诊断2、又可作为原发性肝癌又一敏感、特、又可作为原发性肝癌又一敏感、特异的新标异的新标志物。志物。（三）（三）-L岩藻糖苷酶（岩藻糖苷酶

19、（AFU）生生化化特特性性32异常血清酶名称异常血清酶名称相关肿瘤相关肿瘤乙醇脱氢酶（Alcoholdehydrogenase）肝 醛缩酶（Aldolase） 肝 碱性磷酸酶（ALP） 骨、肝、白血病、肉瘤、卵巢等 淀粉酶（Amylase） 胰腺等 肌酸激酶（CK BB） 前列腺、小细胞肺癌、乳腺、结肠、卵巢 -谷氨酰转肽酶（-GT） 肝 乳酸脱氢酶（LD） 肝、淋巴瘤、白血病 神经元特异性烯醇化酶（NSE） 小细胞肺癌、神母细胞瘤、类癌、黑色素瘤 5-核苷酸酶（5Nucleotidase） 肝 酸性磷酸酶（ACP） 前列腺 -L-岩藻糖苷酶（AFU） 肝 芳香硫酸酯酶 结肠、乳腺 33异常血

20、清酶名称异常血清酶名称相关肿瘤相关肿瘤半乳糖转移酶（Galactosyltransferase） 结肠、膀胱、胃肠、卵巢丙酮酸激酶（PyruvateKinase） 肝、卵巢胸腺苷激酶（Terminaldeoxytransferase） 淋巴瘤、白血病、小细胞肺癌亮氨酸氨基肽酶（Leucineaminopeptidase） 胰腺、肝 核糖核酸酶（Ribonuclease） 卵巢、肺、乳癌 34三、糖类抗原糖类抗原（Carbohydrateantigen，CA）定义：定义：是当正常细胞转化为恶性细胞时，细胞表 面糖蛋白发生变异而形成的一种与正常细胞不同的特殊抗原物质，或是由肿瘤细胞分泌的含糖的复合

21、物。命名命名：CA后面的数字代表的是制造该抗原的肿瘤细胞株的编号分类：分类： CA125、CA15-3、CA594、CA27-29是哺乳动上皮细胞分泌的大分子量粘蛋白，其中有些如CA15-3、CA549、CA27-29实际上是异构体，是乳癌的肿瘤标志物； CA19-9、CA50、CA72-2、CA242是唾液酸岩藻糖的衍生物，常是消化道肿瘤的标志物。35 （一）卵巢、乳腺肿瘤标志物（一）卵巢、乳腺肿瘤标志物1、CA125生生化化特特性性是用人类卵巢浆液性囊腺癌细胞系作抗原免疫小鼠通过淋巴细胞杂交而获得的单克隆抗体OC125识别而得名，主要在卵巢癌中，又称为卵巢相关抗原。CA125是一种分子量2

22、00KD的高分子糖蛋白。主要存在于上皮性卵巢癌组织和病人的血清中，健康人群血清中CA125的含量很低，其上限为35KU/L。36临临床床意意义义2、其他恶性肿瘤及其他妇科肿瘤CA125也可升高，胰腺癌、肺癌、乳腺癌、直肠癌及子宫内膜癌等3、鉴定良性和恶性骨盆肿块较好的标志物 某些良性疾病如子宫内膜异位症，盆腔炎、卵巢囊肿等疾病也有不同程度升高，但阳性率较低，1、主要作为卵巢癌肿瘤标志， 早期诊断卵巢癌 可用于监查已诊断为卵巢癌病人，评价疗效果及预报肿瘤复发372、CA15-3 是一种在乳腺癌细胞表面含量较高的细胞表面糖蛋白，是监测乳腺癌的重要抗原。对乳腺癌具有较高特异性，但灵敏度较差，不适用于

23、早期诊断和肿瘤筛查，主要用于治疗评价、预后判断和转移、复发监测。被认为是诊断转移性乳腺癌的首选指标，/期乳腺癌复发检测指标故是监测病程 其他多种腺癌也有CA15-3升高，包括有胰腺癌、肺腺癌、卵巢癌、直肠癌、肝癌等。38 （二）消化道肿瘤标志物（二）消化道肿瘤标志物 1、CA19-9 是一种大分子量的低聚糖类粘蛋白抗原用人结肠癌细胞株SW-1116制备的单克隆抗体116-NS-19-9识别糖类抗原CA19-9分布于正常胎儿的胰腺、胆囊、肝、肠等组织中及正常人胰、胆管上皮处，在血清中以唾液粘蛋白的形式存在 是一种与胰腺癌、胆囊胆管癌、结肠癌、胃癌相关的肿瘤标志物，又称为胃肠癌相关抗原。消化系癌肿

24、患者血清CA19-9明显增高。39 2 2、CA50CA50 CA50是一种与CA19-9密切相关，以唾液酸脂和唾液酸糖蛋白为主要成分的糖类抗原 遍布于结肠、胃肠道、肺、胰腺、肝脏、胆囊、脑膜等恶性肿瘤组织中；细胞正常代谢过程中不分泌CA50成分。 可用结肠、直肠癌COCO205细胞制成的单克隆抗体CA50来进行检测，不同的方法测得血清CA50的正常参值不同。 临床应用与CA19-9有良好的相关性，诊断胰腺癌、胆管癌，肝癌、胃癌、结直肠癌、肺癌、卵巢癌等亦有较高的价值。CA50和其它肿瘤标志物如CA19-9、CA242、CEA、AFP等联合测定，可有效提高恶性肿瘤检测的特异性和敏感性。40 名

25、称名称 性性质 相关相关肿瘤瘤 常用单克隆抗体常用单克隆抗体CA125 糖蛋白，分子量200KD 卵巢、子宫内膜癌 OC125 CA15-3 糖蛋白，分子量400KD 乳腺、卵巢癌 DF3 115D3CA549 高分子量糖蛋白 乳腺、卵巢癌 BC4E549, BC4N154CA27.29 高分子量糖蛋白 乳腺癌 B27.29 CA19-9 唾液酸化Lexa 胰腺、胃肠、肝 116NS19-9 CA19-5 唾液酸化Lea和 Leag 胰腺、卵巢、胃肠 116NS19-5CA50 唾液酸化Lea 胰腺、胃、结肠 Colo-50 CA72-4 唾液酸化Tn 胰腺、直肠、胃肠道 B27.3，CC49

26、CA242 唾液酸化CHO 结肠、直肠、胰腺 C242 常用糖类抗原标志物一览表常用糖类抗原标志物一览表41 四、激素肿瘤标志物四、激素肿瘤标志物 激素类肿瘤标志物分类： 原位激素（eutopicdhormone）：具有分泌激素功能的细胞癌变导致其所分泌的激素量发生异常， 这些异常的原位激素具有高度的腺体特异性，有助于该内分泌腺或内分泌细胞肿瘤的诊断。 异位激素（ectopichormone）：是指在正常情况下，不产生激素的细胞癌变后所生成的激素，这些激素几乎都是肽类激素，具有与原位激素相同或相似的结构，和天然激素有相同的免疫原性，可用天然激素的抗体检测出来。42 异位激素作为肿瘤标志物特点：

27、异位激素作为肿瘤标志物特点： 1、许多产生异位激素的恶性肿瘤能分泌一种或多种激素或类激素，或者几种肿瘤可分泌同一种异位激素； 2、恶性肿瘤异位激素分泌量少且不恒定的，激素类标志很少用于恶性肿瘤的诊断。 3、最易产生异位激素的肿瘤是肺癌，特别是小细胞癌，最常见的异位激素是ACTH及其衍生物。43 人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素 （humanchorionicgonadotrophin,HCG,HCG） 生化特性生化特性 HCG是由胎盘滋养层细胞所分泌的糖蛋白激素，由a和两个亚基组成，每个亚基上有两条N-糖链。 a亚基的生物特性与促黄体生成素（LH）、促卵泡激素（FSH）、促甲状腺激素（TS

28、H）的a亚基氨基酸排列顺序基本相同， 亚基决定了各类激素的免疫学性质和激素的特异性，现行的许多测定HCG的分析方法都是专为检验HCG分子的链而设计。44 临床意义临床意义 1、用于早孕诊断及用于了解胚胎生长情况及随访观察。 2、是睾丸肿瘤和胎盘肿瘤最基本的标志物。 良性葡萄胎、恶性葡萄胎、绒癌患者血清HCG有不同程度增高。腺癌、前列腺癌、肺非小细胞癌、肝癌、白血病及淋巴瘤等其他肿瘤患者HCG也可见升高。 45 激 素 相 关 肿 瘤儿茶酚胺类（CA） 嗜铬细胞瘤 促肾上腺皮质激素（ACTH） 肺小细胞癌、胰岛癌、胸腺癌生长激素（GH） 垂体腺瘤、肺癌、肾癌抗利尿素（ADH） 肺小细胞、肾上腺皮

29、质瘤、胰腺癌5-羟色胺（5-HT） 原发性类癌降钙素（CT） 甲状腺髓样癌、肺小细胞癌、嗜铬细胞瘤绒毛膜促性腺激素（hCG） 绒毛膜癌、睾丸癌、肺癌、乳腺癌、肝母细胞瘤人胎盘催乳素（HPL） 滋养层细胞癌、性腺腺瘤、肺癌、乳腺癌甲状旁腺素（PTH） 肺癌、肾癌、乳腺癌、肝癌、卵巢癌促红细胞生成素 肝癌、子宫癌胰高血糖素 肾癌 激素与肿瘤关系一览表激素与肿瘤关系一览表46 五、微球蛋白肿瘤标志物五、微球蛋白肿瘤标志物（一）铁蛋白（一）铁蛋白（Ft）结构：核心（结晶状的氢氧化高铁）外壳（去铁蛋白，呈球状，由24亚基组成） 其亚基分为H和L两类，心铁蛋白主要为H亚基，肝铁蛋白主要为L亚基，胎儿和癌组

30、织中以H型为主。 作用：贮铁和供铁，471、衡量有无严重铁代谢失调和体内铁贮存水平， 正常人铁蛋白250g/L。 成人300g/L为增多指标， SF是诊断体内缺铁最敏感、最特异的指标，也是铁负荷过多性疾病的诊断和鉴别诊断2、是一种新的肿瘤标志物 急性白血病患者SF显著升高，其它的恶性肿瘤的患者如霍奇金病、肝癌、胰腺癌、乳腺癌肺癌、卵巢癌等SF含量升高，升高的程度与肿瘤的活动及临床床分期有关。应用：应用：48 （二）二）2微球蛋白微球蛋白（2-microglobulin,2-M） 2-M是一种分子量为11.8KD的单链多肽， 存在于除成熟红细胞和胎盘滋养层细胞以外的几乎所有有核细胞表面，特别是淋

31、巴细胞表面尤其丰富。 血清2-M 2.5mg/L，尿平均值为98g/L，上限为320g/L。 应用：1、评估肾功能 2、监测肿瘤病情变化 淋巴细胞增生性肿瘤如多发性骨髓瘤、慢性淋巴性白血病等病人血清中2-M浓度可明显增高，在确诊的肝癌病人血清2-M与AFP有良好的相关性，49 （三）角蛋白（三）角蛋白（cytokeratin，CK） 细胞角蛋白是一类分子量为4070KD的细胞结构蛋白应用双向电泳可将角蛋白分离出20条区带， 分别命名为CK1CK20，肿瘤细胞中最丰富的是CK18和CK19。CYFRA21-1-是指的单层上皮细胞癌变时，可释放CK19的片段进入血循环，此可溶性的片段称为CYFRA

32、21-1。 CYFRA21-1水平测定是磷状上皮细胞肺癌患者诊断和疗效观察的首选指标。 CYFRA21-1和NSE组合测定可提高诊断肺癌的灵敏度而不降低特异性。50 六、肿瘤基因标志六、肿瘤基因标志 癌基因的激活实质：结构异常； 表达异常 癌基因的激活途径： 抑癌基因的失活： 一是抑癌基因的缺失或突变 二是抑癌基因产物失活。5152癌 基 因 相 关 肿 瘤 C-myc 乳腺癌、胃癌、肺癌（巨细胞型）、 急性粒细胞白血病、结肠癌 N-myc 神经、视网膜母细胞瘤、肺癌（小细胞） C-erb-2 胃癌、肾癌、乳腺癌 N-ras 胃腺癌 H-ras 黑色瘤、膀胱癌、皮肤鳞癌 K-ras 结肠癌、骨

33、肉瘤、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌 常见癌基因类肿瘤标志物常见癌基因类肿瘤标志物53 抑 癌 基 因 相 关 肿 瘤 RB 视网膜母细胞瘤、骨肉瘤、乳腺癌、肺癌 P53 肺癌、结肠癌、胃癌 WT1Wilms肿瘤 NF-1 神经纤维瘤 Erb-B-2 乳腺癌 常见抑癌基因类肿瘤标志物常见抑癌基因类肿瘤标志物54 肿瘤基因标志检测方法肿瘤基因标志检测方法1、定量病理学： 原位图像分析（确定细胞中总DNA含量） 细胞测量学方法（用于研究小肿瘤）2、免疫组织化学法（利用单克隆抗体检测其相关的蛋白质以检测癌基因和抑癌基因的产物）3、分子生物学方法： 聚合酶链反应（PCR）技术 ：PCR-ASO法；PCR-SS

34、CP；PCR-RFLP；直接测序法。55 （一）癌基因肿瘤标志物（一）癌基因肿瘤标志物 1. 1.rasras基因家族与肿瘤的关系基因家族与肿瘤的关系2、mycmyc基因家族成员与肿瘤的关系基因家族成员与肿瘤的关系（二）抑癌基因（二）抑癌基因1RB基因基因 2 2、P53P53基因基因56 肿瘤类型 临 床 意 义 乳腺癌c-Ha-ras基因mRNA水平升高 结直肠癌50%的肿瘤出现c-Ki-ras基因点突变 肺癌 20%30%肿瘤出现ras基因家族成员点突变， 其中 c-Ki-ras基因突变与预后不良相关 胰腺癌90%左右的肿瘤出现c-Ki-ras基因点突变 胃癌 p21表达水平明显升高，c

35、-Ha-ras基因编码的 12位氨基酸突变与肿瘤的转移及预后不良有关 髓性白血病10%50%的肿瘤出现c-N-ras基因突变 膀胱癌 部分病例可出现c-Ha-ras基因点突变及P21 蛋白表达过度 rasras基因家族与肿瘤的关系基因家族与肿瘤的关系57肿瘤类型 临 床 意 义神经母细胞瘤 在20%肿瘤中有N-myc基因扩增， 是预后的预测因子乳腺癌6%57%的肿瘤中可见c-myc基因扩增, c-myc基因mRNA水平升高与预后不良有关结直肠癌10%20%的肿瘤中可见c-myc基因扩增小细胞癌30%的肿瘤可见L-myc基因过度表达宫颈癌c-myc过度表达与预后不良有关胶质母细胞瘤 均见N-my

36、c基因扩增Burkitti淋巴瘤 几乎100%的病人均有c-myc基因异位mycmyc基因家族成员与肿瘤的关系基因家族成员与肿瘤的关系58（二）抑癌基因（二）抑癌基因1RB基因基因（retinoblatoma，RB） 基因产物为P105蛋白， P105磷酸化修饰对细胞的生长、分化起重要的调节作用，非磷酸化的P105能促进细胞分化，抑制细胞增殖。RB基因失活见于成视肉膜细胞瘤、骨肉瘤、小细胞肺癌、乳腺癌、膀胱癌等许多肿瘤59 基因产物：53KD蛋白 功能 ：野生型的P53蛋白维持细胞正常生长； 时刻监控基因的完整性 “基因卫士” 抑制恶性增殖 检测：应用多种P53的单克隆/多克隆抗体来检测野生型

37、/突变型P53蛋白，一般测得的只是突变型P53蛋白。2P53基因基因60肿 瘤 临 床 意 义 结肠癌50%80%表现P53突变 肺癌45%70%P53水平升高，57%的小细胞癌过度表达P53 肝癌50%的有P53点突变 膀胱癌 61%有P53基因突变 乳腺癌40%有P53突变，9%的病人血清有P53蛋白 卵巢癌 50%的肿瘤有P53基因的突变 食管癌 35%44%有P53突变 骨肉瘤 33%76%的肿瘤有P53基因的突变 胃癌 37%有P53基因突变 神经纤维瘤 30%肿瘤有P53基因突变 非霍奇金淋巴瘤 61%有P53蛋白增加 甲状腺癌 24%肿瘤有P53基因突变 P53基因与肿瘤的关系基

38、因与肿瘤的关系61 七、其它肿瘤标志物七、其它肿瘤标志物 唾液酸、多胺、羟脯氨酸、假尿嘧啶核苷、新蝶呤等低分子量的生化物质也被作为肿瘤标志物，归类于其它肿瘤标志物。 （一）肿瘤标志物的评价指标（一）肿瘤标志物的评价指标 表表15-915-962第三节第三节恶性肿瘤标志物恶性肿瘤标志物 实验室诊断实验室诊断 一一、肿瘤标志物临床判断值确定、肿瘤标志物临床判断值确定 （一）常见的评估肿瘤标志物的指标（一）常见的评估肿瘤标志物的指标（二）（二）ROC工作曲线确定肿瘤标志物判断值工作曲线确定肿瘤标志物判断值 二、检验方法和质量控制二、检验方法和质量控制（一）肿瘤标志研究及检测的常用技术（一）肿瘤标志研

39、究及检测的常用技术 （二）质量控制（二）质量控制三、常用肿瘤标志物的联合应用三、常用肿瘤标志物的联合应用63 评价指标评价指标 计算公式计算公式 敏感度（真阳性数/所有肿瘤病人数即真阳性+假阴性） 100% 特异性（真阴性数/所有非肿瘤病人数即真阴性+假阳性） 100% 阳性预测值PV（+）（真阳性数/真阳性例数+假阳性例数）100% 阴性预测值PV（-）（真阴性数/真阴性例数+假阴性例数）100% 准确率（有效率）（真阳性+真阴性）/总例数100%64（二）（二）ROC工作曲线确定肿瘤标志物判断值工作曲线确定肿瘤标志物判断值TM临界值的决定：临界值的决定： 根据金标准确定患者和对照组二组例数

40、相似的人群，并测出各组的实验数据。 使用该实验数据的不同的域值来区分阳性和阴性的不同分界点，并分别计算其灵敏度和特异性。 绘制受试者工作曲线（receiver operatingcharacteristiccurve,ROC曲线）以接近左上角的点即为最佳诊断临界值。65 乳癌时乳癌时CA15-3CA15-3的的ROCROC曲线曲线66 前列腺癌前列腺癌PSAPSA试验和试验和PAPPAP试验的试验的ROCROC曲线比较曲线比较67 PSA PSA的的ROCROC曲线曲线68 二、检验方法和质量控制二、检验方法和质量控制（一）肿瘤标志研究及检测的常用技术1免疫学技术免疫学技术 主要是三大技术：

41、放射性免疫测定（RIA）， 酶联免疫测定（EIR） 荧光素标记的荧光免疫测定（FIA）。 使免疫学抗原抗体反应的特异性与标记物的敏感性相结合具有特异、敏感、快速等优点，且试剂标准化，操作简便，可定性、定量。693免疫组织化学技术免疫组织化学技术 从形态上详细阐明细胞分化、增殖和功能变化的情况， 确定肿瘤组织的类型以及临床特征的分析。4肿瘤免疫显像技术肿瘤免疫显像技术 确定肿瘤的生长部位，在外科手术中发现放射性标记 物抗体的积蓄的细胞、组织和器官。5基因诊断技术基因诊断技术分子探针； DNA重组技术；分析基因结构和功能的变化2、生物化学技术、生物化学技术常用方法包括电泳法、酶生物学活性法等。70

42、1标本标本（1）常常用用的的标标本本：血清（但阳性率有一定的局限性）（2）其其它它标标本本：直接收集肿瘤组织或胃液、肠液、胰液、胸水、乳汁 （3 3）标标本本采采集集除少量的酶外，一般无严格的时间要求但应注意各种影响因素，（4）标标本本的的保保存存，一般肿瘤标志物在室温下比较稳定近期测定，离心后保存在4冰箱中，长期保存，建议于-20（23个月）或-70保存待测。（二）质量控制（二）质量控制712质控质控质控物质控物：阴性、低阳性浓度和高阳性浓度三种 最好能自已准备质控物应用肿瘤标志物 进行治疗监测时：检测方法：检测方法：仪器；试剂应保持一致723肿瘤标志物测定结果的影响因素肿瘤标志物测定结果的

43、影响因素 体内影响体内影响TMTM浓度因素浓度因素： 某些良性疾患可产生的测定值升高； 强烈的治疗（手术、放疗、化疗） 连续的细胞死亡 肿瘤本身状态 （大小、供血状况、扩散及扩散程度） 药物的影响73标本污染 同一患者、同一标本使用不同的试剂盒有时结果差异极大。 其它干扰因素 “钩状现象”（hookeffect） 即待测标本中抗原浓度过高，出现抗原不能全部与抗体结合，免疫反应被明显抑制，出现错误的低读数。 “嗜异性抗体”（heterophilicantibodies）的影响 可导致TM的假性高值， 体外影响因素包括有体外影响因素包括有：74恶性肿瘤 主要标志 其它标志原发性肝癌AFP-GT，ALP，CEA，AFU胰腺癌 CA19-9CEA，CA50，CA242胃癌CA72-4CEA，CA19-9，SA结直肠癌 CEACA19-9，CA-50，NSE小细胞肺癌NSECEA，CA50，ACTH，CT非小细胞肺癌CYFRA21-1CEASCCANSE，TSA乳腺癌 CA15-3CEA，CA549，CA72-4卵巢癌 CA125CA72-4，CA19-9，CEA子宫颈癌SCCACEA，HCG前列腺癌PSAf-PSA,PAP,ALP,CEA白血病ALP，2M，铁蛋白常见肿瘤标志物在主要肿瘤中的联合应用常见肿瘤标志物在主要肿瘤中的联合应用