细胞生物学实验：6 细胞中多糖和过氧化物酶的定位

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1、实验实验6 6 细胞中多糖和过氧化物细胞中多糖和过氧化物酶的定位酶的定位实验目的实验目的掌握显示细胞中多糖和过氧化物酶反应的原理方法。实验原理实验原理PASPAS反应反应高碘酸作为强氧化剂，能打开C-C键，使多糖分子中的乙二醇变成乙二醛，氧化所得到的醛基与Schiff试剂反应形成紫红色化合物。颜色的深浅与糖类的多少有关。实验原理实验原理过氧化物酶定位过氧化物酶定位细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色或棕色络合物，根据蓝色或棕色的出现来表现过氧化物酶的存在。实验步骤实验步骤细胞中多糖的测定细胞中多糖的测定高碘酸-希夫（PAS）反应1.把马铃薯块茎用刀片徒手切成薄片。（要很薄，要不然片子就有会很

2、多层细胞）2.加高碘酸溶液，浸10min。3.弃去高碘酸溶液，加入70%乙醇浸2min。（这两步在烧杯中进行）4.Schiff试剂染色10min。（这一步开始，用镊子将薄片置于在玻片上操作）5.用新鲜配制的亚硫酸水溶液洗3次，每次1min。6.蒸馏水洗2min，装片镜检。实验步骤实验步骤过氧化物酶的定位过氧化物酶的定位联苯胺反应1.用镊子撕取一小块洋葱鳞茎内表皮，置于载玻片上；2.浸在溶有0.1%钼酸铵的0.85%盐水溶液中5min；3.浸在联苯胺溶液内2min至切片出现蓝色；4.在0.85%盐水溶液中水洗1min；5.盖上盖玻片，显微镜检查思考题思考题简述PAS的反应原理绘图细胞中多糖的分布。绘图表示细胞中过氧化物酶的分布。