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1、常 用 层 析 方 法按分离原理分为按分离原理分为：* 吸附层析：利用吸附力的差别进行分离。吸附层析：利用吸附力的差别进行分离。* 分配层析：利用二种不互溶的溶剂中分配比分配层析：利用二种不互溶的溶剂中分配比不同进行分离。不同进行分离。* 离子交换层析：利用阴阳离子的交换作用达离子交换层析：利用阴阳离子的交换作用达到分离。到分离。* 凝胶层析：利用分子量大小进行分离。凝胶层析：利用分子量大小进行分离。* 电泳：利用在同一电场的作用下泳动的方电泳：利用在同一电场的作用下泳动的方 向和速度不同而分离向和速度不同而分离。层析技术如何选择合适的极性课件按分离形式分为按分离形式分为：薄层层析薄层层析（T
2、hin Layer Chromatography) 普通TLC；高效TLC； 制备TLC； 离心TLC； 柱层析柱层析（Column Chromatography) 普通C C；制备C C ( 快速CC; 低压CC； 中压CC；高压CC）电泳电泳（Electrophoresis) 纸电泳(PE)； 毛细管电泳(CE)层析技术如何选择合适的极性课件 含水量含水量% 氧化铝的活性氧化铝的活性 0 I 级级 3 II 级级 6 III 级级 10 IV 级级 15 V 级级 层析技术如何选择合适的极性课件氧化铝的适用性* 碱性氧化铝：应用于碳氢化合物的分离，以碱性氧化铝：应用于碳氢化合物的分离，以
3、及中性、碱性物质的分离，不适用于酸性及中性、碱性物质的分离，不适用于酸性 成分的分离。成分的分离。* 中性氧化铝：属于碱性吸附剂范畴，对于分中性氧化铝：属于碱性吸附剂范畴，对于分 离碱性中草药成分颇为理想，使用范围最广离碱性中草药成分颇为理想，使用范围最广 泛，不适合于酸性成分的分离。泛，不适合于酸性成分的分离。 * 酸酸性性氧氧化化铝铝：表表面面常常带带有有NO3-或或Cl-，具具有有离离 子交换剂的性质，适合于酸性成分的层析子交换剂的性质，适合于酸性成分的层析。 层析技术如何选择合适的极性课件 汉防己甲素 汉防己乙素层析技术如何选择合适的极性课件 对甲氧基偶氮苯 苏丹红层析技术如何选择合适
4、的极性课件 含水量含水量% 硅胶的活性硅胶的活性 0 I 级级 5 II 级级 15 III 级级 25 IV 级级 38 V 级级 层析技术如何选择合适的极性课件硅胶的适用性 能用于非极性化合物，也能用于极性化合能用于非极性化合物，也能用于极性化合物。适用于芳香油、萜类、甾体、生物碱、强物。适用于芳香油、萜类、甾体、生物碱、强心甙、蒽醌类、酸性、酚性化合物、脂肪酸、心甙、蒽醌类、酸性、酚性化合物、脂肪酸、氨基酸以及合成产品如：有机金属化合物等。氨基酸以及合成产品如：有机金属化合物等。层析技术如何选择合适的极性课件层析技术如何选择合适的极性课件层析技术如何选择合适的极性课件聚酰胺的适用性 分离
5、极性和非极性物质，如：黄酮体、酚分离极性和非极性物质，如：黄酮体、酚类、醌类、有机酸、生物碱、萜类、甾体、类、醌类、有机酸、生物碱、萜类、甾体、甙类、糖类、氨基酸衍生物、核苷类等。尤甙类、糖类、氨基酸衍生物、核苷类等。尤其对黄酮体、酚类、醌类物质的分离其对黄酮体、酚类、醌类物质的分离。层析技术如何选择合适的极性课件层析技术如何选择合适的极性课件层析技术如何选择合适的极性课件凝胶层析同义词：凝胶层析同义词：凝胶过滤层析凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)分子筛过滤层析分子筛过滤层析(molecular seive filtration -)阻滞扩散层析阻滞扩
6、散层析(restricted diffusion -)排阻层析排阻层析(exclusion chromatography)凝胶渗透层析凝胶渗透层析(gel permeation chromatography)层析技术如何选择合适的极性课件Sephadex 葡聚糖凝胶层析技术如何选择合适的极性课件Sephacryl 凝胶层析技术如何选择合适的极性课件Sepharose 琼脂糖凝胶层析技术如何选择合适的极性课件分子筛的适用性 水水溶溶性性的的高高分分子子化化合合物物，如如：蛋蛋白白质质，多肽，核酸，多糖等。多肽，核酸，多糖等。 Sephadex LH20 适适用用于于水水溶溶性性差差的的有有机机物
7、物质质的的分分离离，如如：脂脂类类、固固醇醇类类、黄黄酮酮类类、大大环环内内酯酯类类等等分分子子量量差差别别大大的的化化合物合物。层析技术如何选择合适的极性课件层析技术如何选择合适的极性课件层析技术如何选择合适的极性课件离子交换层析适用性 能在水溶液或含水极性溶剂中产生游离能在水溶液或含水极性溶剂中产生游离离子基团的酸、碱及两性成分。可用于氨基离子基团的酸、碱及两性成分。可用于氨基酸、肽类、生物碱、有机酸、酚类等水溶性酸、肽类、生物碱、有机酸、酚类等水溶性成分的分离。成分的分离。层析技术如何选择合适的极性课件使用离子交换剂使物质分离表 中药煎剂中药煎剂 强酸型强酸型(磺酸型磺酸型) 稀稀NH4
8、OH洗脱洗脱 通过液通过液 酸性、中性化合物酸性、中性化合物 解离型、两性化合物解离型、两性化合物 稀稀NaOH洗脱洗脱 强碱型强碱型(季铵型季铵型) 强碱型强碱型 稀稀HCl洗脱洗脱 通过液通过液 通过液通过液 酸性化合物酸性化合物 中性化合物中性化合物 解离型物质解离型物质 两性化合物两性化合物 (盐、生物碱盐、生物碱)层析技术如何选择合适的极性课件层析技术如何选择合适的极性课件1.溶剂槽 2. 高压泵 3. 进样器 4. 层析柱 5. 检测器 6. 收集器 7. 记录仪 8. 梯度淋洗 HPLC HPLC 主要流程方块图主要流程方块图层析技术如何选择合适的极性课件超临界流体萃取超临界流体
9、萃取Supercritical Fluid Extraction SCFE 当一种物质处于临界温度与临界压当一种物质处于临界温度与临界压力以上的状态下，形成即非液体又非气力以上的状态下，形成即非液体又非气体的单一相态，称超临界流体。体的单一相态，称超临界流体。 利用一种物质在超临界区域形成的利用一种物质在超临界区域形成的流体进行提取的方法称流体进行提取的方法称SCFE。层析技术如何选择合适的极性课件 SCF 与常温常压下的气体和液体比较与常温常压下的气体和液体比较流流体体 密密度度 (g.ml-1) 粘粘度度 (g.cm-1s-1) 扩扩散散系系数数 (cm2.s-1) 气体气体 0.62 1
10、03 13 10-4 0.10.4 SCF 0.20.9 19 10-4 0.20.7 10-3 液体液体 0.61.6 0.23 10-2 0.22 10-5层析技术如何选择合适的极性课件大孔树脂的基本结构大孔树脂的基本结构 层析技术如何选择合适的极性课件常用大孔树脂吸附剂性能一览表常用大孔树脂吸附剂性能一览表 树脂结构树脂结构 极性度极性度 比表面比表面(m2/g) 孔径孔径(A) 交联剂交联剂 备注备注Amberlite系列系列 XAD-1 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 100 200 二乙烯苯二乙烯苯 美国美国:Rohm- XAD-2 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 330 90 二乙烯苯二
11、乙烯苯 Haas XAD-4 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 750 50 二乙烯苯二乙烯苯 XAD-7 -甲甲基基丙丙烯烯酸酸甲甲酯酯 中中极极性性 450 80 双双( -甲甲基基丙丙烯烯酸酸)乙乙二二醇醇酯酯 XAD-9 亚亚 砜砜 极极 性性 250 80 XAD-10 丙烯酰胺丙烯酰胺 极极 性性 69 350 XAD-12 氧化氮类氧化氮类 强极性强极性 25 1300 层析技术如何选择合适的极性课件Diaion系列系列 HP10 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 400 二乙烯苯二乙烯苯 日本三菱化学日本三菱化学 HP20 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 600 二乙烯苯二乙烯苯 公司公司 H
12、P30 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 500-600 二乙烯苯二乙烯苯 HP40 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 600-700 二乙烯苯二乙烯苯 HP05 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 400-500 二乙烯苯二乙烯苯GDX104 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 590 二乙烯苯二乙烯苯 中国天津试剂中国天津试剂GDX401 乙烯、吡啶乙烯、吡啶 强极性强极性 370 二乙烯苯二乙烯苯 二厂二厂GDX501 含氮极性化合物含氮极性化合物 极极 性性 80 二乙烯苯二乙烯苯GDX601 带强极性基团带强极性基团 强极性强极性 90 二乙烯苯二乙烯苯Duolite s-30苯酚甲醛缩合物苯酚甲醛缩合物 极极
13、 性性 128 美国美国Diamond Alkali Co.Lewapol G-7318 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 42 440 德国德国层析技术如何选择合适的极性课件 本章要求：掌握天然药物化学的研究内容；掌握天然药物化学的研究内容；认识天然药物化学在中药现代化中的地位；认识天然药物化学在中药现代化中的地位；了解研究方法；了解研究方法；了解结构鉴定程序；了解结构鉴定程序；掌握常用层析方法的基本原理和应用。掌握常用层析方法的基本原理和应用。（氧化（氧化铝铝层析；硅胶层析；聚酰胺层析；纸层析；硅胶层析；聚酰胺层析；纸层析；凝胶层析；离子交换层析）层析；凝胶层析；离子交换层析）层析技术如何选择合适的极性课件
