输血前相容性试验

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1、输血前相容性试验输血前相容性试验第一节第一节 重视血液标本重视血液标本一、血标本采集要求（一）输血申请单的正确书写 必须包含足够的信息以识别受血者身份的唯一性，大部分医疗机构都是使用受血者姓名及其身份证号码（或住院号）。 当输血科（血库）的技术人员在配血过程中遇到问题时，受血者的诊断、输血史及妊娠史是非常有意义的。凡资料不全的输血申请单，尤其是缺乏输血史、妊娠史和无主治医师签名的，要退回临床科室补上，不得迁就。 （二）受血者身份识别 1、采用标有受血者全名和住院号的腕带来识别受血者。 2、使用更安全的条形码系统对受血者身份进行识别。 在床边完成采血和粘贴标签后，可用一个便携式的条形码扫描仪进行

2、扫描，以确认血标本试管上的标签信息与受血者腕带上的身份信息是否相符。 3、使用其他标识方式。 受血者无法戴腕带，比如大面积烧伤的患者、早产儿以及某些外科手术中的患者。有些医疗机构就允许将患者的身份标识符放在患者的踝关节或者前额，门诊患者除了使用腕带之外，也可以用驾驶证或其他含本人相片的身份信息来识别。（三）血标本类型的选择1选择血清标本的情况(1)试管法：血浆标本中的纤维蛋白小凝块可干扰检测结果，而血清标本可避免。(2)存在需激活补体才能反应的抗体：血浆标本因为某些抗凝剂能螯合钙离子及镁离子，阻断补体激活途径。2选择血浆标本的情况(1)凝血时间延长或经过肝素化的血液：这种血标本可能发生不完全凝

3、血，如采用其血清进行检测，其结果可能不准确。因此，对于这种情况，可采集抗凝血标本分离血浆进行检测。如要使用其血清，可在这些血标本中加入凝血酶或加硫酸鱼精蛋白中和肝素。(2)采用微柱凝胶技术：应选择血浆标本进行检测。（四）血标本采集部位的选择1、不能在输液部位的上段（近心端）静脉穿刺采血，但可以在下段（远心端）采血，最好是在另一个肢体采血，以防止标本稀释。必须在输液血管内采血，应去掉最初的510ml血液。2、新生儿应取其脐带的胎盘血；婴幼儿采颈静脉血；重症休克患者可以采集股静脉血或在深静脉插管部位采血。（五）血标本的质量要求1血标本标识的要求(1)血标本标识与患者身份的一致性 (2)血标本采集者

4、的标识：采血者最好在血标本管标签上签名及记录采血日期。 (3)血标本的识别信息与输血申请单上的信息应一致2血标本外观的要求(1)避免使用溶血的血标本：采集过程中引起的机械性溶血，应当重新采集。患者确实存在血管内溶血，而必须使用溶血的血标本时，为了防止对溶血结果误判建议使用的方法是：在反定型及交叉配血的红细胞中加入适量EDTA盐水溶液。由于EDTA能够螫合补体激活所需的Mg2+和Ca2+，故可阻断补体活化引起的红细胞破坏，即溶血；另一种方法是在试验前后作溶血程度的比较。可用生理盐水（或6%白蛋白）与患者的红细胞混合为阴性对照，将患者血清与患者的细胞混合，反应后离心，比较两种细胞扣( cell b

5、utton)的大小，或者比较实验管与对照管的溶血程度，以证实是否有红细胞破坏增加的可能性。(2)避免使用高脂血标本：高脂血症患者禁食12小时后重新采血。(3)其他要求：试管应无破损和渗漏。（六）血标本的采集时间要求1、普通患者 一般用3天内的血标本做交叉配血试验。2、特殊患者 (1)地中海贫血患者：在每3天一次抗筛及鉴定为阴性时，血标本采集时间可适当放宽。 (2)需要剖宫产的孕妇：免疫抗体产生最可能发生于最后3个月。故至少是7天之内的标本。但尽可能在输血前采集血标本，以利于在发生输血不良反应时进行回顾性检查。 (3)需输注右旋糖酐的患者：右旋糖酐是大分子葡萄糖聚合物，会覆盖于红细胞膜上，使红细

6、胞容易发生假凝集，应在输注前抽取血标本备用。（七）血标本采集量的要求1、推荐用EDTA.K2抗凝，血量3ml，抗体鉴定5ml。2、疑难交叉配血 要求送检2管，一管抗凝，一管不抗凝，血量均 3ml。 综上所述，对不符合要求的情况，可遵循血标本“八不”接收原则：血标本无标签或填写不清不收；血标本与输血申请单所填项目不符不收；血标本量少于3ml不收；血标本被稀释不收；血标本溶血不收（溶血性疾病除外）；用肝素治疗者的血标本未经鱼精蛋白对抗使之凝血或未经标记说明不收；用右旋糖酐、羟乙基淀粉等大分子物质治疗后采集的血标本未作标记说明不收；非医护人员或非授权人员送血标本不收。二、血标本保存的要求（一）全血标

7、本的保存 在输血后，受血者和献血者的血标本必须密封或将试管盖紧，在16保存7天。用于输血反应尤其是迟发性溶血性输血反应（多发生于输血后37天）查因。（二）血清或血浆标本的保存 可将血标本分离血清或血浆，置于-30保存，保存（因许多迟发性溶血性输血反应在输血后10天未必出现临床表现）第二节 坚持正反定型 正反定型起到互相验证和质量控制的作用，只有正反定型结果相符才能正确判定ABO血型。除了出生4个月以内的婴儿和新生儿只做正定型之外，必须坚持正反定型。其主要临床意义有：1、易于发现和纠正血型鉴定错误。2、有助于发现ABO亚型，因为亚型患者红细胞上A或B抗原可能很弱，例如将A2型误判为A1型，如果这

8、种患者含有抗-A1，输A型血（含A1抗原）便会发生急性溶血性输血反应。一、ABO血型的鉴定（一）对常规血标本坚持正反定型1、人类在出生4个月后抗体已经形成，除了出生4个月以内的婴儿和新、生儿之外，常规检测受血者和献血者ABO血型必须正反定型, 并同时进行自身对照和阴性对照。为了防止对溶血结果误判, 用于配制反定型试剂红细胞的稀释液应含有EDTA。2、方法选择 不能用玻片法，可用试管法和微柱凝胶法。3、ABO正反定型不一致的原因(1)人为因素：操作中加错标本或试剂；离心速度不够或速度过快；细胞与血清比例不当；结果判读错误等。 (2)客观因素：因某种疾病（如白血病）导致抗原减弱，红细胞发生多凝集现

9、象及产生类B物质；抗体效价低，如婴幼儿、老年人、低丙种球蛋白血症等；存在不规则抗体；某些药物干扰；试剂不标准、试剂失效或污染等。 4ABO正反定型不一致的处理 使用原始标本重新配制红细胞悬液，采用试管法和洗涤红细胞重新检测时，同时做自身对照。当检测结果与以往记录不一致时，应重新采集血标本再检测一次。 5正反定型不相符时的输血 献血者正反定型不相符，该袋血不能发出使用；患者正反定型不相符，如遇紧急输血抢救，可先输O型红细胞（但不能输O型全血，因全血有近一半的血浆，可能导致溶血反应），然后再查找原因。（二）对出生4个月内的婴儿及新生儿血标本只做正定型二、RhD血型的鉴定 我国已规定常规血型鉴定还应

10、包括RhD定型。三、疑难血型鉴定（一）ABO疑难血型的鉴定主要原因：某些慢性疾病致ABH抗原减弱或丢失；老年人、化疗或与疾病有关的免疫抑制致天然抗体丢失。胃肠道肿瘤或梗阻患者出现过量可溶性ABH血型物质。多发性骨髓瘤或其他异常蛋白血症的患者或静脉输注高分子质量的液体可形成缗钱状红细胞。高效价冷自身抗体、脐带血标本中的Wharton胶可引起红细胞凝集。细菌酶、造血组织中体细胞的突变或遗传性疾病形成多凝集红细胞。多种细胞群或嵌合现象，如造血干细胞移植后、输不同ABO血型的红细胞、双胎红细胞生成组织的宫内交换，引起混合视野凝集。有结肠癌或败血症病史的患者产生获得性B抗原。红细胞表面存在少量异型血型抗

11、原。存在A2亚型抗原，血浆中存在抗-A1或IgM型同种抗体，如抗-P1、抗-M和抗-Leb等。缺乏ABH抗原，含有抗-H、抗-A和抗-B的盂买表型或类盂买表型的存在等。 为了解决以上ABO疑难血型鉴定的问题，可根据不同的情况选择延长室温孵育时间，降低孵育温度，采用 吸收放散试验、洗涤技术、生理盐水稀释、盐水替代、ABO血型基因分型、设自身对照，或观察是否出现不同程度的混合视野凝集等方法来解决。（二）其他疑难血型的鉴定 存在自身抗体或异常血清蛋白时RhD血型的鉴定直接抗球蛋白试验强阳性的致敏红细胞极易造成血型鉴定错误，这些致敏红细胞在高蛋白或高分子聚合物介质中易发生自凝，可出现RhD阴性受血者被

12、错误地鉴定为RhD阳性的情况。为了避免这种情况下血型鉴定的错误，可采用放散或解离红细胞上大多数自身抗体后再进行RhD定型。常用的方法有：56水浴放散法、氯喹放散法、酸洗脱法。 四、紧急情况下ABO和RhD血型鉴定（一）紧急情况的定义 紧急情况是指没有足够的时间采用常规的方法进行ABO血型和RhD血型定型。（二）紧急情况下的ABO和RhD血型鉴定 在紧急情况下进行血型鉴定时，必须包括用抗-A、抗-B和抗-D，并设立适当的对照或进行反定型试验。当检测结果显示患者血型为AB型和RhD阳性时，必须非常小心。 因为实验过程中没有进行严格的对照试验排除冷凝集等因素。紧急发血后，继续按规范进行ABO和RhD

13、血型鉴定，发现问题及时纠正。 第三节 做好抗体筛选与鉴定 对于有输血史、妊娠史、交叉配血不合或短期内需要接受多次输血者，应对患者的血液进行红细胞不规则抗体筛选试验，如果筛选结果为阳性，应该让临床医师知道可能要推迟提供所需的血液，同时要预留足够的时间，让技术人员鉴定抗体的特异性，选择相合的血液。一、抗体筛选（一）红细胞不规则抗体筛选的原理 红细胞不规则抗体筛选的原理是用一套商品化的23个献血者的O型红细胞对受血者的血清或血浆进行抗原抗体反应，以筛查出在37有临床意义的抗体。 每个筛选红细胞的表型或抗原谱已经被详细筛选过，由23个人份的O型红细胞组成一套试剂，要求尽可能包括更多的抗原，至少需要表达

14、下列18个抗原：D、C、E、c、e、M、N、S、s、P1、Lea、Leb、K、k、Fya、Fyb、Jka、Jkb，而且以纯合子基因所表达的抗原为佳，各组细胞抗原最好具有互补性。随机获得的O型红细胞作为筛选红细胞则难以达到上述要求，易造成漏检。 （二）红细胞不规则抗体筛选的临床意义 由于输血或妊娠接触外来的红细胞抗原引起同种免疫产生的抗体通常称为红细胞同种抗体。红细胞同种免疫患者中有20%产生多种同种抗体。有临床意义的红细胞同种抗体与溶血性输血反应有关。通过红细胞不规则抗体筛选，可检出这些抗体。 （三）抗体筛选的基本技术1、间接抗球蛋白试验：最可靠的方法。(1)盐水-间接抗球蛋白试验：由于需要较

15、长的孵育时间, 一般不做为常规检测方法。(2)白蛋白-间接抗球蛋白试验：可提高灵敏度，缩短孵育时间至30分钟。(3)低离子强度溶液-间接抗球蛋白试验：孵育时间可缩短至10分钟，是最合适的方法 (4)聚乙二醇-间接抗球蛋白试验：对IgM型抗体，尤其是ABO和Lewis系统中的IgM抗体呈弱反应性，甚至无法被检测出来，但能提高有临床意义的IgG型抗体检测的灵敏度。(5)酶-间接抗球蛋白试验：因为酶会破坏某些红细胞抗原，如M、N、S、Fya和Fyb，因此，酶法不作为常规使用方法。但是,酶法在Rh系统和Kidd系统的抗体鉴定中特别有用，经常用来提高抗体鉴定灵敏度。 2、凝聚胺试验 是孵育时间最短的敏感

16、试验。能够提高对RhD特异性抗体鉴定的灵敏度，但检测抗Kell (K)抗体的灵敏度却很低。3、凝胶法或微板法 可实现自动化测试，减少实验室血标本识别错误。其中微柱凝胶法简单、有效，但无法排除无临床意义抗体的干扰。（四）红细胞不规则抗体筛选的局限性1、低效价抗体的漏检 近30%红细胞同种抗体在产生后的5年内仍然存在于体内，有些抗体效价已降至难以检出的水平，有可能被漏检。在输血后，漏检的抗体会再次对献血者的红细胞上的特异性抗原发生回忆反应，产生相应的抗体。因此，即使抗筛阴性，也应结合输血史、妊娠史进行综合分析，防止发生迟发性溶血性输血反应。2、低频率抗原的抗体可能被漏检 低频率抗原比如Cw、V、K

17、pa、 Jsa和Wra抗原，在筛选细胞上是罕见的，筛选细胞可能不含有这些抗原。因此，如果血清或血浆中存在这些低频率抗原的抗体，也有可能被漏检，这对于有输血史和妊娠史的患者必须加倍小心。以往的抗体鉴定记录有重要参考价值。 二、抗体鉴定（一）红细胞不规则抗体鉴定的原理 红细胞不规则抗体鉴定是利用试剂红细胞（谱细胞）对受血者血清或血浆中的抗体进行检测，谱细胞常包含816种已知血型的O型红细胞配套组成，每一种红细胞来自一个O型献血者。要求含有8个或8个以上的谱细胞数，至少包括以下抗原：K、k、Fya、Fyb、Jka、Jkb、S、s和M等，应能鉴别多种抗体同时存在的情况。（二）红细胞不规则抗体鉴定的内容

18、1、自身抗体和同种抗体检查 观察受血者的血清与受血者自身红细胞的反应情况，确定血清内是否有自身抗体，或自身抗体和同种抗体两者同时存在。2、抗体特异性检查 应用各种抗体检查技术，检测受血者的血清，确定其抗体的特异性。 确定抗体特异性时可以综合运用以下的资料：观察受检血清与每个抗体鉴定谱细胞的反应结果；观察受检血清与其自身细胞的反应结果；观察受检血清与酶处理细胞的反应结果；观察反应的格局，检查各个反应相的结果，包括不同的温度、悬浮介质或酶作用的情况，一些抗体的特异性与反应介质直接相关；有否溶血现象；在阳性反应的细胞中，反应强度有否不同，是否出现剂量反应效应；对自身红细胞上的抗原进行详细检查，从所缺

19、少的抗原情况，来判断是否存在相应的抗体。 第四节 严格交叉配血 “严格交叉配血”是指所采用的方法必须能检出ABO不相容及ABO系统之外的有临床意义的抗体，主要为IgG类抗体。 一、交叉配血的内容（一）用于交叉配血的血液制品血型选择1、ABO血型的选择 表2-3血液成分的ABO血型选择 血液成分ABO血型选择全血必须与受血者的血型一致红细胞必须与受血者的血型一致或与受血者的血浆相容单采粒细胞必须与受血者的血型一致或与受血者的血浆相容新鲜冰冻血浆应该与受血者的红细胞相容单采血小板应该与受血者的红细胞相容冷沉淀应该与受血者的红细胞相容2、RhD血型的选择 紧急情况下，如果受血者为RhD阴性的女性，且

20、处于育龄期，输注RhD阳性的血液，其D抗原产生抗-D的概率约70%，必须输注RhD阴性血。RhD阴性的男性和超过生育年龄的女性中，如果血清中不存在抗-D时，可允许输注RhD阳性的红细胞； RhD阴性育龄期女性输注RhD阳性血液时，最好根据输注红细胞量，考虑使用RhD免疫球蛋白，但应充分权衡输血利益与风险，并充分告知患者及其家属。 3、其他血型抗原的选择 当存在或以前出现过有临床意义的红细胞不规则抗体时，应该选择相应抗原阴性红细胞进行交叉配血。但是，如果抗体鉴定确认该抗体是在37以下才起反应，则不需要输抗原阴性的血液。如果有冷反应抗体存在，只要在37下进行交叉配血是相容的，输注该袋血液是安全的，

21、但应注意保暖，必要时用输血加温器。 （二）交叉配血 交叉配血包括主侧交叉配血和次侧交叉配血。1、主侧交叉配血 可检出患者当前是否存在有临床意义的抗体，还可以验证血型是否正确。2、次侧交叉配血 在欧美等发达国家，对这个试验的需求已经逐渐减少，因为献血者的血液都经过了红细胞不规则抗体筛选。献血者抗筛阳性，其血液一般不准入库。此外，现在大部分的输血都是输注只含少量献血者血浆的红细胞，进行次侧交叉配血没有很大价值。但是，我国献血者的血液均未做红细胞不规则抗体筛选，在输注全血和红细胞时仍需做次侧交叉配血。 3、自身对照 由患者自身血清和自身红细胞组成（自身对照有助于分析交叉配血试验中出现的阳性结果）。二

22、、常用的交叉配血方法 如果患者过去或现在都没有红细胞不完全抗体的存在，那么盐水介质交叉配血或电子交叉配血是首选的方法。否则，必须选择能检出不完全抗体的交叉配血法，如凝聚胺法、酶法或抗球蛋白法等。（一）盐水介质交叉配血法 盐水法是验证ABO配合性最常用的方法，这种方法只能检出ABO. P. Lewis. MN等系统的天然IgM类型完全抗体，不能检出Rh . Kell. Kidd. Duffy等系统的免疫性IgG类不完全抗体。 盐水介质交叉配血法只适用于下列情况：第一、在用非混合的筛选细胞进行的红细胞不规则抗体筛选试验中，没有发现红细胞不规则抗体的存在；第二、患者过去没有检出红细胞不规则抗体的历史

23、记录。 （二）酶法 能检出不完全抗体。利用酶消化红细胞表面的唾液酸，降低表面电荷，缩小红细胞间距，使之得以互相靠拢而显示出肉眼可见的凝集。 酶法操作时间较长、较为费力，而且酶能改变某些血型系统的抗原构型，破坏其抗原性，加之酶不易保存，故使用受到一定限制。 （三）凝聚胺交叉配血法 凝聚胺溶解后产生很多正电荷，可中和红细胞表面负电荷，使红细胞间距缩短，引起红细胞非特异性凝聚，这种凝聚是可逆的；抗体致敏的红细胞在凝聚胺作用下发生凝集，这种凝集是不可逆的。因而可用带负电荷的枸橼酸钠中和凝聚胺正电荷，从而把凝聚和凝集区别开来。 凝聚胺法有几个优点：首先，凝聚胺交叉配血法对Rh血型系统抗体特别敏感，检出不

24、完全抗体的灵敏度高，特异性好。其次，因其方法简便、快速、价格不高，易于在基层医疗机构推广。因此，尽管凝聚胺对 Kell系统不敏感，但由于汉族人几乎100%为K抗原阴性，通常不考虑抗-Kell (K)，且在我国以Rh系统引起的迟发性溶血性输血反应最常见，我国中小医疗机构适合用凝聚胺交叉配血法。 （四）抗球蛋白交叉配血法 抗球蛋白是第二抗体(即抗抗体，抗-IgG)，在不完全抗体(IgG)间“搭桥”，延长了不完全抗体的长度，从而使红细胞互相靠拢显示凝集反应。 白种人中约有9%是K抗原阳性，凝聚胺对Kell系统不敏感，而抗球蛋白法对Kell系统抗体敏感性高，是检测IgG抗体最可靠的方法，缺点是试验过程

25、费时、费力。（五）微柱凝胶交叉配血法 微柱凝胶法的原理是抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合，通过调节葡聚糖凝胶的浓度控制分子筛孔径大小，使分子筛只允许游离红细胞通过，不允许凝集红细胞通过。 传统的交叉配血方法虽然所需设备简单，但因影响因素多，时而出现差错，甚至造成事故。而微柱凝胶法虽价格昂贵，耗时长，可出现假阳性，但其优点很多，如灵敏度高，重复性好，还能自动化操作，最大限度地减少了人为误差，可实现输血科（血库）各种信息的计算机管理。经过大量的临床实践，这种方法已逐渐成熟，使输血安全更有保障。现在欧美国家以及我国部分医疗机构已将微柱凝胶法作为交叉配血的常规手段。三、交叉配血不合的解决方案（一）抗

26、筛阴性、主侧阳性、自身对照阴性情况：1、ABO血型不合 盐水法主侧阳性提示血型鉴定错误，另一种情况是受血者的血清中含有从以前输的血液或在静脉注射免疫球蛋白治疗中获得的抗-A或抗-B。 2、冷反应同种抗体的存在 冷反应同种抗体（如抗-M或抗-P）也有可能在室温下发生反应。仔细地回顾患者的输血史，有可能提供依据。3、直接抗球蛋白试验阳性的血液 在抗球蛋白试验时，如果受血者的血清只与一袋血不配合，该袋血可能是直抗阳性，如果证实，该袋血不能用于输血。4、受血者存在抗低频率抗原的抗体 如果献血者血液是直抗阴性，有可能是受血者的血清里含有低频率抗原的同种抗体，但却未能被筛选细胞检出。这时候抗体鉴定试验应包

27、括对尽可能多的低频率抗原进行检查。5、受血者存在纯合子抗原的抗体 另外一种可能的答案是受血者存在只与献血者红细胞呈剂量依赖关系的纯合子抗原发生反应的抗体。在这种特殊的情况下，筛选细胞没有与受血者的抗体发生反应，是因为抗原抗体反应呈剂量依赖关系。这时要采用更高级的技术进行抗体鉴定以解决这个问题。（二）抗筛阳性、主侧阳性、自身对照阴性情况： 这通常是受血者产生了高频率同种抗体或已经用筛选细胞检出混合同种抗体，并且献血者的红细胞中含有相应的抗原。这时应对受血者作抗体鉴定，选择相应抗原阴性的血液进行配血试验。如果抗原阴性的血液仍然是不配合的，就要找另一种类型的血液，见表2-4。（三）抗筛阳性、主侧阳性

28、、自身对照阳性情况：1、自身抗体的存在 大多数的自身抗体会与所有的细胞反应，为了确定同种抗体是否被受血者血清中的自身抗体反应掩盖，必须在试验前采用一定的技术去除自身抗体。 2、同种抗体的存在 受血者最近输过血，则可能产生了同种抗体，导致了阳性的自身对照。此时，自身对照和直抗试验都会显示混合凝集。应该进行抗体鉴定，以解决配血不合的问题，包括对输血前血标本的红细胞抗原表型的研究。3、缗钱状细胞形成 受血者血清白蛋白和丙种球蛋白比例的倒置或使用大分子右旋糖酐或羟乙基淀粉溶液扩容时会导致红细胞形成缗钱状。这种现象与多发性骨髓瘤和巨球蛋白血症等疾病有关。如果有必要区分很强的缗钱状形成和抗体介导的凝集，可

29、以使用盐水替代技术，见表2-4。 表2-4 交叉配血不合的可能原因及解决方案现象可能原因解决方案(1)主侧： 自身对照：抗体筛选：a. 受血者或献血者ABO血型错误b受血者血清中有红细胞不规则抗体，但筛选细胞上无相应抗原c. 献血者红细胞已被致敏a重新鉴定血型，调查受血者有无输血史及移植史b选用抗原谱更广的筛选细检测受血者红细胞不规则抗体c. 对献血者红细胞做直接抗球蛋白试验(1)主侧：自身对照：抗体筛选：受血者血清中的同种抗体与献血者红细胞上相应抗原反应鉴定受血者红细胞不规则抗体，选择无对应抗原的血液进行交叉配血试验(1)主侧： 自身对照：抗体筛选：a. 受血者血清中可能同时存在自身抗体和同

30、种抗体b. 白蛋白/球蛋白比例不正常c. 血浆容量扩充剂的影响d污染a. 对受血者血清做自身吸收试验，用吸收后血清鉴定红细胞不规则抗体及交叉配血试验b. 盐水添加试验解决缗钱状凝集c. 洗涤细胞或重新采集血标本d使用洁净器具和符合要求的试剂 四、交叉配血试验的临床意义 交叉配血试验的目的是检测供、受者的血液是否相容，以确保供、受者血液间没有可测的不相容的抗原、抗体成分。少数临床医师发现血红蛋白在输血后反而下降而不查明原因又轻易地再次输血，导致不完全抗体的效价急剧升高，出现血红蛋白尿，甚至急性肾衰竭。在这种情况下，临床医师不要轻易地再次输血，而是应该请输血科（血库）技术人员协助检查受血者是否存在

31、不完全抗体。如果检测到不完全抗体而无法鉴定其特异性，则要多选几袋血并采用多种方法（至少应包括抗球蛋白试验）进行交叉配血，直到有相合的血液进行输注。但是，如果输血科（血库）技术人员在输血前已采用多种方法进行交叉配血仍未检测到不完全抗体，迟发性溶血性输血反应的发生，是因为以往输血或妊娠产生的红细胞不规则抗体效价已经下降到难以检测的水平，而在输血后引起回忆反应，使这种抗体的效价急剧升高。不过，这种情况极为少见。如在这种迟发性溶血性输血反应发生后抽取受血者的血液，即可检测到这种不完全抗体，从而在下次输血前多选几袋血进行交叉配血，以选取相合的血液进行输注。 五、交叉配血试验的局限性（一）单种血清学技术的

32、局限性：不能检测所有的抗体，在意外溶血的调查中，实验室应当用不同的强化介质、延长孵育时间、酶处理技术或增加血清与红细胞的比例等技术手段进行试验。（二）不能检测效价下降的同种抗体，这会导致输血后回忆反应，产生相应抗体。应根据以往的抗体鉴定结果，选择对应抗原阴性血液配血。（三）不能检出对红细胞以外的抗体（如血小板、白细胞、血清蛋白抗体等）。（四）献血者红细胞抗原的特殊性少数受血者红细胞不规则抗体不能用血清学方法鉴别。可对其红细胞进行Rh、MNSs、Kell、Duffy和Kidd系统抗原表型检测。对于缺乏某种红细胞抗原的受血者，选择这种红细胞抗原阴性的血液进行输注。第五节 认真对待疑难交叉配血一、免

33、疫性溶血性贫血患者 因其自身抗体可与所有红细胞发生凝集，难以找到相容性的血液输注。应遵循以下原则：有温抗体的受血者在交叉配血不完全相合时，选择多份ABO血型相同的血液进行交叉配血试验，采用所含红细胞与受血者血清反应最弱的献血者血液输注；对于存在冷抗体的受血者，应严格在37条件下进行交叉配血；如果ABO血型未能确定，在抢救受血者的紧急情况下可立即输注O型洗涤红细胞。（一）温抗体型自身免疫性溶血性贫血患者1、鉴别患者溶血的原因 采用特异性单克隆抗-IgG试剂和抗-C3d试剂做直接抗球蛋白试验，鉴别患者溶血的原因是IgG还是补体引起的。2、抗-C3d阳性、抗-IgG阴性患者对献血者血液的选择：选择A

34、BO及RhD血型相容血液，凝聚胺法交叉配血，或用特异性单克隆抗-IgG试剂进行抗球蛋白法交叉配血，输注主侧相合的洗涤红细胞。3、抗-IgG阳性患者献血者血液的选择：如果抗-IgG阳性（抗-C3d阳性或阴性），则选择Rh系统D、C、E、c、e抗原，Kidd (Jka，Jkb)系统抗原，Duffy(Fya，Fyb)系统抗原相同的献血者红细胞，或与多名献血者血液分别进行主侧交叉配血。根据交叉配血结果选择主侧交叉配血相合或凝集最弱献血者的洗涤红细胞输注。成人每次输注红细胞不超过2单位，尽量缓慢输注并密切观察。4、其他交叉配血方法 也可对其抗凝血标本的红细胞进行放散试验，对其不抗凝血标本血清进行吸收试验

35、。然后对放散后的红细胞和吸收后的血清复检ABO和RhD血型，并与ABO及RhD血型相容的献血者血液进行交叉配血试验。（二）冷抗体型自身免疫性溶血性贫血患者存在冷抗体的患者在交叉配血时应严格在37条件下进行。（三）紧急情况下自身免疫性溶血性贫血患者如果ABO血型一时难以确定，患者的病情又十分危急，需紧急输血抢救患者的生命，此时可立即给予O型洗涤红细胞输注。二、其他特殊情况（一）大量输血和紧急非同型输血1、大量输血(1) 一般情况下的大量输血：当24小时内输给受血者的血量等于或大于受血者全部的血容量时，即为大量输血。大量输血时除严格受血者与献血者之间的交叉配血外，应特别注意献血者之间的血液相容性。

36、 (2)紧急情况下的大量输血：此时可简化或取消交叉配血试验，在紧急发血前，进行盐水介质交叉配血试验确定ABO的相容性。如果已知受血者血液中存在有临床意义的不规则抗体，应当选择相应抗原阴性的血液进行输注。如无同型血液或受血者血型未知，可行紧急非同型血液输注。 2紧急非同型血液输注 (1)已知受血者ABO血型和RhD血型的情况：当发生急性大量失血时，需要对受血者进行紧急输血，但又缺乏ABO或RhD同型的血液，可按表2-5的原则输血，但不能输注全血，只能输注红细胞。输注的红细胞只要求主侧配血相合，次侧配血不做要求。血浆和冷沉淀可以相容性输注。表2-5 紧急非ABO同型血液成分血型选择原则受血者血型红

37、细胞血浆及冷沉淀首选次选三选首选次选AAO无AABBBO无BABOO无无OA、B或ABABABA或BOAB无 (2)未知受血者ABO血型和RhD血型的情况：输血科（血库）在接到输血申请单及血标本后，如病情“危急”且不知受血者血型情况下，应在1015分钟以内发出第一袋未经交叉配血的O型RhD阳性悬浮红细胞（O型红细胞必须正反定型相符），并在血袋上标明发血时尚未完成交叉配血试验。此后，应尽快鉴定献血者和受血者血型，并根据临床输血需要，发出经交叉配血主侧相合的非同型悬浮红细胞。在未知受血者RhD血型的情况下，即使是RhD阴性受血者，紧急情况下也可选择RhD阳性的ABO相容的红细胞，但对于有生育需求的

38、女性或未成年女性不轻易发给RhD阳性O型红细胞。病情“紧急”应在30分钟内完成正反定型及凝聚胺法主侧配血。 新生儿需紧急换血治疗时，首先确定是否为新生儿溶血病患儿，如果为ABO血型不合引起的新生儿溶血病，应选择O型红细胞和AB型血浆进行换血治疗。如果为Rh系统血型不合引起的新生儿溶血病，应选择ABO血型与患儿相同，Rh血型与母亲相同的红细胞进行交叉配血。 若已输入大量的O型红细胞成分后，能否输注与受血者同型的血液应视具体情况而定。当受血者原ABO血型的红细胞与新采集的受血者血标本血清相合时，可以输注与受血者原血型相同的血液（在改输原同型的血液时，须更换输血器）。若交叉配血试验由于受血者ABO抗

39、体所致的不合时，则应继续输注O型红细胞。 RhD阴性受血者需要输注血浆和冷沉淀时，可按ABO同型或相容性输注，RhD血型可忽略。 （二）凝血时间延长血标本的处理 由于疾病或药物的抗凝作用导致受血者凝血时间延长，这给交叉配血试验带来了困难。进行肝素治疗的受血者其血标本可能没有完全凝固，从凝固不完全的血标本中分离的血清可以不断地产生纤维蛋白，尤其是在37孵育时。可于每1ml血液中加入一滴凝血酶，或使用小玻璃珠在37孵育、离心并回收血清。如果血标本不凝是肝素引起的，则可加入一滴鱼精蛋白硫酸盐溶液到4ml全血中，然后在37孵育510分钟，血标本就会凝固。但鱼精蛋白不能过量使用，否则会促使细胞的缗钱状形

40、成并阻止血液凝固。（三）新生儿交叉配血试验与血液的选择 新生儿首次输血前，必须确定其ABO血型（只用抗-A和抗-B试剂做正定型）和RhD血型。新生儿或其母亲的血清或血浆都可以做红细胞不规则抗体筛选。如果初次筛选是阴性，对于新生儿，也需要与献血者红细胞进行交叉配血，如果选择输血的细胞不是O型，必须检测新生儿血清或血浆是否含有从母亲被动转移过来的抗-A或抗-B的存在，可用已知的试剂A1细胞、B细胞或献血者细胞进行抗球蛋白试验。如果检测出抗-A或抗-B。必须输注ABO血型相容的红细胞。还需要对这些血液进行交叉配血试验，且献血者血液中血红蛋白S的检测必须为阴性。 当证实受血者的血清或血浆中含有红细胞不

41、规则抗体，或献血者的血液中含有不相容的血浆时，例如O型红细胞输给A型受血者，应当每3天进行一次抗体筛选。如果初次筛选证实存在有临床意义的红细胞不规则抗体时，必须选择抗原阴性的血液，直到新生儿血清中不再存在这种红细胞不规则抗体。当选择宫内输血或换血时，血液应尽可能新鲜储存期不能超过7天。（四）红细胞不规则抗体筛选阳性受血者的交叉配血 对受血者红细胞不规则抗体进行特异性抗体鉴定，然后采用与红细胞不规则抗体相同特异性的单克隆抗体试剂，筛选该特异性抗体对应抗原阴性的红细胞进行交叉配血试验。对于不能确定抗体特异性的受血者，可随机与多名献血者血液进行交叉配血试验，选择交叉配血相合的血液输注。如果与多名献血

42、者血液进行交叉配血仍未能找到相合的血液时，紧急情况下可执行紧急非同型交叉配血。对于本实验室不能确定抗体特异性者，应尽快送有条件的实验室进行鉴定。（五）长期输血患者的相容性试验1、镰状细胞贫血 多次输血后是否产生同种免疫，个体差异很大。输血前血型鉴定应该尽量全面，如果不是非常困难，应陔尽量输注D、K、C、c和E、e血型相合的血液。很多患者为Dce表型，D阳性，C和E抗原阴性，要寻找相合的血液，尤其存在其他抗体时比较困难。这种情况要输注RhD阴性血，同时应该选择不含血红蛋白S的血液。2、长期输血的其他血液病患者输血前血型鉴定时一定要谨慎。虽然目前没有足够的证据表明一定要输注D、K、C、c和E、e血

43、型相合的血液，但在不是非常困难的情况下，还是建议采取这种方法。（六）异基因造血干细胞移植患者的相容性试验 接受异基因造血干细胞移植的患者血型鉴定及交叉配血难度较大。移植后患者体内可能出现新的ABH抗原（主要不相容）或ABO血型系统的同种抗体（次要不相容），或两者兼有。所有含细胞的血液制品都应该经过辐照以预防输血相关性移植物抗宿主病。1、主要ABO不相容 在移植后的早期，应输注与患者自身的ABO血型相同的红细胞或含有红细胞的血液制品，直至间接抗球蛋白试验检测不出患者原有的血型抗体、受血者红细胞直接抗球蛋白试验阴性以及供者ABO血型在受血者体内已建立。 2、次要ABO不相容 应输注与供者ABO血型

44、相同，并去除血浆的红细胞和含有红细胞的血液制品，直至无法检出移植受血者原来的红细胞。3、完全AB0不相容 移植前的输血应选择与受血者自身血型相同的血液。移植后，应使用O型血液，直至用间接抗球蛋白试验检测不到抗供者ABO血型抗体和直接抗球蛋白试验阴性。4、患者为RhD阳性而造血干细胞供者为RhD阴性 发生这种情况时，应该输注RhD阴性血液。（七）存在假凝集时的交叉配血试验 由于某些疾病的原因，患者血清中含有过量的球蛋白或纤维蛋白，使配血时的红细胞出现缗钱状改变，与抗原抗体引起的凝集反应相似，称之为假凝集。在假凝集试管中加入13滴盐水，这种缗钱状易于分散，而真凝集仍然存在。用显微镜观察时，在高倍镜下可见假凝集的红细胞边缘整齐，加盐水后细胞散开；真凝集在显微镜下红细胞边缘不齐，相互挤压，加盐水后凝集不散开。（八）存在冷凝集素时的交叉配血试验 所谓冷凝集是指在室温或更低温度下，与所有红细胞（包括患者自体的红细胞）都能发生凝集，是由冷凝集素引起。这种非特异性凝集严重干扰交叉配血试验。一般人血清中冷凝集素的效价不高，不易出现非特异性凝集。但在某些病理隋况下，如自身免疫性溶血性贫血、病毒性肺炎等，患者血清中常含有高效价的冷凝集素，与自体或他人的红细胞发生凝集。区分冷凝集与真凝集的方法是，冷凝集反应一般在37保温或用37生理盐水洗涤后凝集散开，而真凝集反应经上述操作则不会散开。