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1、 维维生素生素C尿尿负负荷荷试验试验营养学系养学系 冯翔翔尿尿负负荷荷试验试验步步骤骤v晨起空腹晨起空腹时时被被检检者排出晨尿后，口服者排出晨尿后，口服500mg抗抗坏血酸，收集其后坏血酸，收集其后4小小时时尿液。尿液。v在尿液中加入一定量草酸，置于在尿液中加入一定量草酸，置于4度保存。度保存。v意意义义：评评价被价被检检者者维维生素生素C的的营营养状况。养状况。Company Logo尿中尿中还还原型抗坏血酸原型抗坏血酸测测定定原理原理v还原型抗坏血酸具有原型抗坏血酸具有还原性，能原性，能还原原2,6-二二氯酚酚靛酚染料。靛酚染料。v该染料在酸性溶液中呈染料在酸性溶液中呈红色，被色，被还原后
2、原后红色失去。色失去。v还原型抗坏血酸原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化成脱原染料后，本身被氧化成脱氢型抗坏血酸。型抗坏血酸。v一定量的尿一定量的尿样能能还原原标准染料的量与准染料的量与样品中所含品中所含抗坏血酸的量成正比。抗坏血酸的量成正比。Company Logo所需器材所需器材v容量瓶（容量瓶（50ml）v微量滴定管微量滴定管v三角三角烧烧瓶（瓶（50ml）v吸管等吸管等Company Logo试剂试剂v1%草酸溶液草酸溶液v0.02 2,6-二二氯氯酚靛酚溶液酚靛酚溶液v标标准抗坏血酸溶液准抗坏血酸溶液Company Logo 维维生素生素C应应用液配制和染料用液配制和染料标标定定vV
3、C应用液配制用液配制 取取1ml VC储备液（液（1mg/ml)50ml容量瓶，容量瓶，以以1%草酸溶液定容。草酸溶液定容。v空白空白试验 取取10ml 1草酸溶液草酸溶液三角瓶，以染料滴定至粉三角瓶，以染料滴定至粉红色，色，记录用量（用量（C）。）。v染料染料标定定 取取5ml VC应用液和用液和5ml 1草酸溶液于三角瓶，以染草酸溶液于三角瓶，以染料滴定至粉料滴定至粉红色，色，15s不褪色不褪色为终点，点，记录用量（用量（A）。）。v计算算T值 TCompany Logo步步骤骤v以吸管吸取尿以吸管吸取尿样样25ml至至50ml三角瓶，加入三角瓶，加入1%草酸草酸5ml。v立即用立即用标标
4、定定过过的的2,6-二二氯氯酚靛酚染料滴定之，直酚靛酚染料滴定之，直至淡粉至淡粉红红色色15s不褪色不褪色为终为终点，点，记录记录染料用量。染料用量。v做平行做平行样样。Company Logo计计算算v尿中尿中还原型抗坏血酸排出量原型抗坏血酸排出量 Company Logo评评价价v成人尿成人尿负负荷荷4小小时时（口服（口服500mg抗坏血酸）抗坏血酸）v不足不足 10mgCompany Logo注意事注意事项项v操作要迅速，滴定要准确。操作要迅速，滴定要准确。v样样品中可能含有其他物品中可能含有其他物质质能能还还原原2,6-二二氯氯酚靛酚酚靛酚染料，但染料，但还还原染料的速度要比抗坏血酸慢，所以原染料的速度要比抗坏血酸慢，所以滴定滴定时时以以15s不褪色不褪色为终为终点。点。Company L
