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1、第七章第七章 人类疾病的动物模型人类疾病的动物模型 主要介绍了人类疾病动物模型概念、复制模型的意义和原则;常用疾病模型的复制方法和应用;免疫缺陷动物、转基因动物定义及其在生命科学研究中的应用。研究动物模型目的在于揭示人类疾病发病机理,寻找预防疾病的有效措施。 实验动物学最新第一节第一节 动物模型概述动物模型概述 人类疾病动物模型人类疾病动物模型: :(Animal Model of Human Diseases) 是指医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。动物模型的研究,实质上是有关实验动物的应用科学。动物模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验治疗学(药物筛选和新疫苗
2、开发)。 实验动物学最新一、人类疾病动物模型的意义一、人类疾病动物模型的意义 避免人体实验造成的危害 可复制不易见到的疾病 可复制发病率低、潜伏期和病程长的疾病 严格控制试验条件,增加实验的可比性 样品易得,实验操作简化 有助于全面认识疾病本质 实验动物学最新二、人类疾病动物模型的复制原则二、人类疾病动物模型的复制原则 相似性重复性 可靠性 适用性和可控性易行性和经济性 实验动物学最新三、人类疾病动物模型的分类三、人类疾病动物模型的分类 (一)按产生原因分类(一)按产生原因分类 1 1实验性动物摸型实验性动物摸型(Experimental Animal Model) 又称诱发性动物模型 是指研
3、究者通过使用物理性、化学性、生物性和复物理性、化学性、生物性和复合性合性致病因素作用于动物,造成动物组织、器官或全身特定的损害,出现某些类似人类疾病时的功能、代谢或形态结构方面的病变,即人为地诱发动物产生类似人类疾病模型。 实验动物学最新2 2自发性动物模型自发性动物模型(Spontaneous Animal Model) 是指实验动物未经任何人工处置,动物自然发生的疾病,或由于基因突变,通过遗传育种保留下来的动物模型。主要包括突变系的遗传疾病模型和近交系的肿瘤疾病模型。 实验动物学最新3 3抗疾病型动物模型抗疾病型动物模型(Negative Animal Model) 是指特定的疾病不会在某
4、种动物身上发生,从而可以用来探讨为何这种动物对该疾病有天然的抵抗力。 如哺乳动物均易感染血吸虫病,而居于洞庭湖流域的东方田鼠却不能复制血吸虫病。 实验动物学最新4 4生物医学动物模型生物医学动物模型(Biomedical Animal Model) 是指利用健康动物生物学特征来提供人类疾病相似表现的疾病模型。 兔甲状旁腺分布比较分散,位置不固定,有的附着在主动脉弓附近,摘除甲状腺不影响甲状旁腺功能,是摘除甲状腺实验较理想的动物模型实验动物学最新(二)按系统范围分类(二)按系统范围分类 1 1疾病的基本病理过程动物模型疾病的基本病理过程动物模型Animal Model of Fundamenta
5、l Pathologic Processes of Disease 是指各种疾病共有的一些基本病理过程模型。2 2系统疾病动物模型系统疾病动物模型Animal Model of Different System Diseases 是指与人类各系统疾病相应的动物模型,如消化、呼吸、泌尿、心血管、神经等系统疾病相应的动物模型。 实验动物学最新(三)按模型种类分类(三)按模型种类分类 疾病模型的种类包括整体动物、整体动物、离体器官和组织、细胞株和数字模型离体器官和组织、细胞株和数字模型。 整体动物模型是常用的疾病模型,也是研究人类疾病常用的手段。 实验动物学最新四、影响动物模型质量的因素四、影响动物
6、模型质量的因素 致模因素动物因素实验技术因素1实验季节2昼夜不同时间的影响 3麻醉深度的影响 4操作技术的5实验给药的影响 6对照组对造模的影响环境因素和营养因素实验动物学最新第二节第二节 常用动物模型的复制常用动物模型的复制 一、肿瘤动物模型一、肿瘤动物模型 自发性动物肿瘤模型 诱发性肿瘤动物模型 1.1.肝癌肝癌 二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌,雌雄不限。 亚胺基偶氮甲苯(OAAT)诱发小鼠肝癌 黄曲霉素诱发大鼠肝癌 2.2.胃癌胃癌 甲基苄基亚硝胺(MBNA)复制小鼠前胃癌 3.3.肺癌肺癌 二乙基亚硝胺(DEN)诱发小鼠肺癌 移植性肿瘤动物模型实验动物学最新二、消化系统疾病动物模型
7、二、消化系统疾病动物模型 幽门螺杆菌感染动物模型 肝硬化动物模型 胃肠渍疡动物模型 三、呼吸系统疾病动物模型三、呼吸系统疾病动物模型 慢性支气管炎动物模型 支气管哮喘动物模型急性呼吸窘迫综合征动物模型 实验动物学最新四、心血管系统疾病动物模型四、心血管系统疾病动物模型动脉粥样硬化 高血压动物模型五、内分泌及营养代谢性疾病动物模型五、内分泌及营养代谢性疾病动物模型 糖尿病动物模型 营养性肥胖动物模型 实验动物学最新六、传染性疾病动物摸型六、传染性疾病动物摸型 病毒性肝炎动物模型 流行性出血热动物模型 七、生殖医学动物模型七、生殖医学动物模型 致畸试验动物模型 前列腺增生症病理实验动物模型 实验动
8、物学最新第三节第三节 免疫缺陷动物免疫缺陷动物 免疫缺陷动物免疫缺陷动物 (immunodeficient animal) 是指由于先天性遗传突变或用人工诱导的方法建立的一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。实验动物学最新一、一、 免疫缺陷动物的分类免疫缺陷动物的分类 1 1 先天性免疫缺陷动物:先天性免疫缺陷动物: a. Ta. T淋巴细胞功能缺陷动物:淋巴细胞功能缺陷动物:裸小鼠裸小鼠,裸大鼠裸大鼠 b. Bb. B淋巴细胞功能缺陷动物:淋巴细胞功能缺陷动物:CBA/NCBA/N小鼠小鼠 c. NKc. NK细胞功能缺陷动物:细胞功能缺陷动物:BeigeBeige小鼠小鼠 d. d. 联合
9、免疫缺陷动物:联合免疫缺陷动物:SCIDSCID小鼠小鼠等等2 2 获得性免疫缺陷动物:获得性免疫缺陷动物:猴、小鼠、猫等猴、小鼠、猫等AIDSAIDS模型模型实验动物学最新二、免疫缺陷动物的特征及其应用二、免疫缺陷动物的特征及其应用 1 1裸小鼠裸小鼠 (nude mice)(1)发现与培育:裸鼠(nu/nu)1962年由英国格拉斯哥医院的Grist在非近交系小鼠培育中偶尔发现无毛小鼠。1966年经英国爱丁堡研究所的Flanagan证实,这种小鼠是由于11号染色体上的等位基因发生突变所致。1968年Pantelouris研究发现该无毛小鼠没有胸腺。1969年Rygaard首先将人结肠腺癌移植
10、裸小鼠获得成功实验动物学最新(2)裸小鼠的主要缺陷特征:被毛生长发育异常,表现为全身形似无毛,呈裸体状;无胸腺,仅有胸腺残迹或异常的上皮细胞,这种上皮细胞不能使T细胞正常的分化,因而免疫力低下;细胞正常,成年裸小鼠的NK细胞活性较高,但幼鼠的NK细胞活性相对低下。实验动物学最新(3)裸小鼠在生物医学研究中的应用:在组织移植(人类肿瘤)研究方面 在肿瘤药物治疗和肿瘤免疫研究方面 免疫和遗传研究方面 病毒、细菌、寄生虫感染机制的研究方面 其他方面的研究 实验动物学最新2 2裸大鼠裸大鼠 (nude rat) (1)裸大鼠的发现与培育:1953年由英国的阿伯丁研究所发现,基因符号为rnu;1975年
11、又发现了纯合子的裸大鼠(nunu),1977年在英国的MRC实验动物中心建立了裸大鼠种群。此后逐步引入美国、日本等。1983年引人中国。 实验动物学最新(2)裸大鼠的一般特征:体毛稀少,裸大鼠并不像裸小鼠一样完全无毛,而是体毛稀少,尾根往往多毛;发育迟缓与裸小鼠一样发育相对较缓慢,体重为正常大鼠的70左右;繁育能力差,由于裸大鼠与裸小鼠一样在妊娠期间乳腺发育缺损,故其繁殖方式同裸小鼠相同,即用纯合子的雄鼠与杂合子的雌鼠交配方式进行繁育;易患呼吸道疾病,由于其无胸腺,免疫力低下,因此易感各种疾病,特别是在环境较差时,易感溃疡性气管炎和化脓性支气管炎等,生存时间约67个月。实验动物学最新(3)裸大
12、鼠的免疫缺陷特征:免疫器官的组织学与裸小鼠相似,幼龄裸大鼠的解剖发现,有胸腺残迹,内有未分化的上皮细胞,但未见淋巴细胞;先天性无胸腺,无T细胞,T细胞功能缺失,但B细胞功能正常,NK细胞的活力较正常鼠高。 实验动物学最新(4)裸大鼠在生物医学上的应用:主要用于人体肿瘤的移植研究。进行外科手术,为各部位肿瘤移植和肿瘤供血研究提供了方便。 实验动物学最新(二)(二)B B淋巴细胞缺陷动物淋巴细胞缺陷动物又称为性连锁免疫缺陷小鼠(X-Linked Immune Deficiency Mice,XID) 起源于CBAN品系,其B细胞功能缺陷,基因xid,位于X性染色体上。纯合子雌鼠(xidxid)和杂
13、合子雄鼠(xidY)对非胸腺依赖型抗原没有体液免疫反应,血清中IgM和IgG含量降低,对B细胞分裂素缺乏反应,B细胞数量减少,T细胞功能正常。其病理与人类Bruton丙种球蛋白缺乏症和Wziskott-Aidsch综合征相似。 实验动物学最新(三)(三)NKNK细胞缺陷细胞缺陷BeigeBeige小鼠小鼠(四)严重联合免疫缺陷小鼠(四)严重联合免疫缺陷小鼠 实验动物学最新第四节第四节 转基因动物转基因动物 一、转基因动物的概念一、转基因动物的概念 转基因动物是指基因组中稳定地整合有以实验方法所导入的外源基因或特定DNA片段的动物。嵌合体动物(嵌合体动物(chimeric animal):):只
14、有部分组织细胞的基因组中整合有外源基因。 逆转录病毒感染法、胚胎干细胞介导法制备的动物第一代均为嵌合体。雄原核显微注射法制备的动物第一代中1-10%为嵌合体(延迟整合)。实验动物学最新二二、转转基基因因动动物物的的原原理理方方法法实验动物学最新转基因动物的制作方法转基因动物的制作方法1 1、受精卵雄原核显微注射法、受精卵雄原核显微注射法2 2、胚胎干细胞(、胚胎干细胞(ESES细胞)法细胞)法3 3、逆转录病毒感染法、逆转录病毒感染法4 4、体细胞核移植法、体细胞核移植法5 5、精子载体法、精子载体法6 6、YACYAC法(法(YACYAC:酵母人工染色体):酵母人工染色体)实验动物学最新三、
15、转基因动物的制备三、转基因动物的制备实验程序如下:(1)准备假孕母鼠(养母)(2)受精卵的准备(3)基因导入(4)胚胎移植(5)对幼鼠的鉴定实验动物学最新人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、兔、牛等人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、兔、牛等等大小动物。等大小动物。实验动物学最新四、转基因动物的应用四、转基因动物的应用1 1、动物乳腺生物反应器、动物乳腺生物反应器 1987年,世界上第一只商业化转基因绵羊在英国著名的罗斯林研究所诞生。这只转基因母羊的乳汁中可以分泌-抗胰蛋白酶,含量高达30毫克/升。 “生物反应器”的概念也由此产生。 实验动物学最新目前已在下列动物的乳汁中生产出一些人类蛋白质药物: 牛
16、:抗凝血酶、纤维蛋白原、人血清白蛋白、胶原蛋白、乳铁蛋白、糖基转移酶、蛋白C等; 山羊:抗凝血酶原、抗胰蛋白酶、血清白蛋白、组织纤溶原激活因子、单克隆抗体等; 绵羊:抗胰蛋白酶、凝血因子、蛋白C; 猪:凝血因子、蛋白C、纤维蛋白原、血红蛋白。 实验动物学最新2 2、建立疾病模型,用于疾病研究和药物筛选等、建立疾病模型,用于疾病研究和药物筛选等 目前已建立的疾病模型有:癌症、动脉粥样硬化、镰状细胞性贫血、囊状纤维化、红细胞增多症、肝炎、免疫缺陷、自发性高血压等。 3 3、用于育种,提高育种效率、用于育种,提高育种效率 转基因技术用于育种,不仅可以加快改良遗传性状的进程,使选择的效率提高,改良的机
17、会更多,而且不会受到有性繁殖的局限。 实验动物学最新 目前转基因动物研究领域尚存在:1 1)制备的效率低)制备的效率低 制备一只转基因小鼠,需40个注射过的受精卵,而绵羊、山羊、猪、牛分别为110、90、110和1600。而转基因个体的后代中只有50%表达基因)2 2)转入的基因不能表达或表达混乱)转入的基因不能表达或表达混乱3 3)不能遗传给后代等。)不能遗传给后代等。实验动物学最新第五节第五节 胚胎工程技术胚胎工程技术 胚胎工程技术主要是指从雌、雄生殖细胞至囊胚的体外操作技术,包括人工授精、同期发情、超数排卵、胚胎培养、胚胎保存、胚胎移植、胚胎分割、胚胎嵌合、体外授精、显微授精、性别控制、
18、基因转移、胚胎干细胞、细胞核移植、卵母细胞激活与孤雌发育等等。 实验动物学最新( (一一) )胚胎分割胚胎分割 用显微术将未着床的早期胚胎一分为二,四或更多,然后分别移植给受体,妊娠产仔。一枚胚胎可克隆出两个或两个以上的后代。 Mular等于1968年将兔的28细胞期胚胎一分为二,移植给受体获得成功。70年代,利用胚胎分割先后得到小鼠、牛、山羊、马和猪的同胚双生后代。1986年,西北农业大学张涌、窦忠英等分别获得胚胎二分割的同胚双鼠和半胚犊牛。1987年,谭丽玲等,奶牛,张涌等,山羊获得同胎双生后代。1988年,杜森等,获得同胚双生后代兔。1992年,徐宁等得同胚三鼠6组。1996年陶涛等得胚
19、胎单细胞(分裂球)移植仔猪。目前,小鼠、家兔、山羊、绵羊、猪等实验动物均可用胚胎分割技术获得同卵孪生后代。 实验动物学最新( (二二) )胚胎嵌合胚胎嵌合 将两枚或多枚胚胎细胞聚合共同发育成一个胚胎,称为嵌合体(chimera)。 两种以上不同基因型(如A和B)的变精卵,复合而发育成的个体也称为嵌合体,又称异表型体(allophenics)。 小鼠、大鼠、兔、牛、猪、山羊嵌合体以及大鼠小鼠、绵羊-山羊、马-斑马和牛-水牛等属间嵌合体 实验动物学最新嵌嵌合合体体小小鼠鼠实验动物学最新( (三三) )胚胎干细胞胚胎干细胞 胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES) 来源于胚胎的内细
20、胞团(innercellmass,ICM)和原始生殖细胞(primordialgerm,PGC), 具有发育全能性(具有分化发育成三个胚层细胞的潜力)的细胞,是动物多种组织细胞的祖细胞。能分化出成体动物的所有组织和器官,包括生殖细胞。 实验动物学最新(四四)细细胞胞核核移移植植实验动物学最新(五五)卵卵母母细细胞胞激激活活与与孤孤雌雌发发育育实验动物学最新思考题:思考题:1、什么是疾病动物模型? 2、使用人类疾病动物模型的意义? 3、免疫缺陷动物?祼小鼠、裸大鼠的生物学特性? 4、转基因动物、原理、方法和应用?5、胚胎工程技术包括哪些? 6、什么是ES细胞?实验动物学最新第八章第八章 动物实验
21、技术动物实验技术实验动物学最新第一节第一节 实验动物的选择基本原则实验动物的选择基本原则 实验动物的选择是动物实验研究中首要考虑的问题之一,不同实验的研究目的和要求不同,不同种类实验动物也有其各自的生物学特点和解剖生理特征。实验动物学最新选择动物应遵循的原则是:选择动物应遵循的原则是:一、相似性原则一、相似性原则 是指利用动物与人类某些机能、代谢、结构及疾病特点的相似性选择实验动物。 组织结构方面系统机能方面生理特性方面繁殖特性方面体液成分方面解剖特性方面 1骨骼构成 2脏器构成 3脏器形态 疾病特点方面实验动物学最新二、特殊性原则二、特殊性原则 是指利用不同种系的实验动物机体存在的特殊构造或
22、某些特殊反应选择解剖、生理特点符合实验目的和要求的动物。保证实验成功的关键减少实验准备方面的麻烦降低操作难度实验动物学最新三、标准化原则三、标准化原则 是指动物实验中选择和使用与研究内容相匹配的标准化的实验动物。遗传学微生物学环境营养控制实验动物学最新四、规格化原则四、规格化原则 是指选择与实验要求一致的动物规格。动物的种类及品系动物的年龄体重性别生理及健康状况等。实验动物学最新1岁的犬对应人的年龄约为15岁;2岁的犬对应人的年龄约为24岁;5岁的犬对应人的年龄约为36岁;8岁的犬对应人的年龄约为48岁;10岁的犬对应人的年龄约为56岁;12岁的犬对应人的年龄约为64岁;14岁的犬对应人的年龄
23、约为72岁;16岁的犬对应人的年龄约为80岁。 实验动物学最新五、经济性原则五、经济性原则 是指尽量选用容易获得、价格便宜和饲养经济的动物。实验动物学最新在具体实际工作中:在具体实际工作中:首先必须了解实验动物生物学特性方面的基本知识,为正确选择合适的动物打下基础。其次,还应充分查阅相关文献,利用前人的实践经验积累,选择科研、检验和生产传统上应用的实验动物。同时,加强与实验动物科学工作者的交流,及时有效地利用实验动物学的最新成果。则可用较少的人力、动物和时间,以最小的代价最大限度地获得科学性强的实验结果。实验动物学最新第二节第二节 常见动物实验中实验动物的选择常见动物实验中实验动物的选择药理学
24、研究中的选择毒理研究中的选择心血管系统免疫学传染病学寄生虫病学环境科学畜牧兽医学实验动物学最新第三节第三节 动物实验前的准备动物实验前的准备 准备工作的内容有:饲养室和饲养器具的准备动物数目的确定动物的购入动物的称重动物的分组标记及动物的管理等。实验动物学最新动物的购入时注意事项动物的购入时注意事项 1各项实验前的准备工作是否已落实,如动物笼具数量、清洁卫生情况、动物观察室内是否已消毒。2购入动物时应向供应部门索取动物的遗传背景资料、实验动物有效的质量合格证、实验动物微生物控制的检查资料以及动物的年龄和健康等方面的资料。实验动物学最新3如若是清洁级以上级别的动物,其运输工具应严格检查密封状况。
25、购入动物回到实验室的时间不宜太长。如若是长途运输,还应考虑到途中各种因素对动物的影响,如运输环境的温度、湿度、饮食等等。尤其要注意动物在途中不能被污染和引起窒息死亡。实验动物学最新4动物健康检查:应对购入动物的健康情况进行详细检查,检查包括:(1)外观。一般常发生异常的部位及其外观检查内容有: 皮毛:有无光泽和脱毛变化。 口腔:流涎、出血、粘膜汤疡、口臭等。 鼻腔:鼻汁、出血、干燥(有些动物鼻镜干燥)。 眼:眼屎、流泪、白内障、角膜损伤等。 耳:外伤、耳壳曲折、贫血、中耳炎等。 尾:弯曲、断折等。 四肢:弯曲、脱臼、外伤、关节炎等。 肛门:下痢、血便、脱肛等。(2)营养状况。被毛逆立、精神倦怠
26、、瘦弱或过肥等属于营养不良。(3)饲料、水摄入量。有无采食减少、食欲低下、过食等。(4)动物状态。不活动、转圈运动、卧地不起、跛行、痉挛等属不正常。实验动物学最新动物的标记动物的标记 1染色法 染色法是用化学试剂在动物身体明显部位如被毛、四肢等处进行涂染,或用不同颜色等来区别各组动物,是实验室最常用、最容易掌握的方法。常用的标记液有: 35苦味酸溶液(黄色)。 05中性红或品红浴液(红色)。 2硝酸银溶液(咖啡色,涂后需光照10分钟)。 煤焦油酒精溶液(黑色)。标记时用标记笔蘸取上述溶液,在动物体表不同部位涂上斑点,以示不同号码。编号的原则是:先左后右,从前到后。实验动物学最新2烙印法3挂牌法
27、 4耳孔法 一般来说,小型动物适宜用耳孔法和染色法,中型动物适用挂牌法和烙印法。实验动物学最新动动物物体重(体重(g) 日日饲饲料量(料量(g)日日饮饮水量(水量(ml)小鼠小鼠18253557大鼠大鼠12025015202025豚鼠豚鼠400600203030120兔兔1500250080100150200实验动物学最新第四节第四节 动物实验中的基本操作动物实验中的基本操作一、实验动物的抓取和固定一、实验动物的抓取和固定1、小鼠2、大鼠3、豚鼠4、兔5、犬实验动物学最新二、实验动物的麻醉三、实验动物的给药方法实验动物学最新四、体液的采集四、体液的采集(一)、血液采集(一)、血液采集1)、小鼠
28、、大鼠的尾静脉采血2)、小鼠、大鼠眼眶静脉丛采血3)、豚鼠的心脏采血4)、兔耳缘静脉采血5)、兔耳中央动脉采血实验动物学最新(二)、消化液采集(二)、消化液采集1)胃液的采集2)胆汁的采集3)胰液的采集实验动物学最新(三)、尿液采集(三)、尿液采集1)代谢笼 2)压迫膀犹(强制排尿)实验动物学最新第五节第五节 动物实验后的有关问题动物实验后的有关问题 动物实验后,受试动物机体受到不同程度的外界刺激或损伤,若加上管理不当,则可能因死亡而造成对实验结果的严重影响。实验动物学最新一、动物实验后的护理一、动物实验后的护理注意饮食卫生细心护理,防止意外损伤控制好受试动物的环境实验动物学最新二、实验动物的
29、处死方法二、实验动物的处死方法遵循动物安乐死安乐死的原则。操作时要保证操作人员安全、易于操作、致死时间要短。确认动物已死亡。从人的安全及实验室条件来看,用乙醚或三氯甲烷处死动物,还有不少问题,尽量不要使用。实验动物学最新1 1、颈椎脱臼法、颈椎脱臼法2 2、空气栓塞法、空气栓塞法3 3、急性大出血法、急性大出血法4 4、吸入麻醉剂致死法、吸入麻醉剂致死法5 5、注射麻醉剂法、注射麻醉剂法6 6、其他方法、其他方法实验动物学最新三、动物实验的描述三、动物实验的描述标题中实验动物种名的记述实验动物的品种(系) 实验动物的来源、遗传背景动物性别 动物年龄、体重动物饲养方式实验环境 实验动物和动物实验
30、条件合格证使用的麻醉剂 施加实验因素所采用的方式处死方法 实验动物学最新思考题思考题1、动物实验过程中实验动物选择的原则是什么2、动物实验前应做好哪些准备工作3、动物标记常用的方法有哪些4、动物常用的麻醉剂和给药方式5、不同实验动物常用的采血方式6、实验动物不同的处死方法7、实验动物的描述应注意哪些问题实验动物学最新第九章第九章 实验动物的质量控制实验动物的质量控制实验动物学最新实验动物的遗传质量控制实验动物的遗传质量控制 实验动物的微生物学、寄生虫学质量控制实验动物的微生物学、寄生虫学质量控制实验动物的环境控制实验动物的环境控制 实验动物的营养控制实验动物的营养控制实验动物学最新实验动物的营养控制实验动物的营养控制一、实验动物的营养需要一、实验动物的营养需要二、饲料的加工、消毒、贮存及运输二、饲料的加工、消毒、贮存及运输1干热灭菌法2高温高压灭菌法3药物熏蒸灭菌法4射线照射灭菌法 三、饲料的检测三、饲料的检测1感观性状的检验2营养成分的测定 3饲料卫生指标的测定 实验动物学最新思考题思考题1、实验动物质量控制包含哪几方面内容。2、实验动物饲料的消毒有几种方式。3、实验动物饲料如何检测。实验动物学最新