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1、ATP:Adenosine-5-tripholsphateATP is an energy substance in cells ATP exists in all kinds of living cells. Dead cells dont have ATP ,because it will be analyzed by some extracellular enzyme .The amount of intercellular ATP present varies with cell size , health, the type of cell , etc.腺嘌呤核苷磷酸(ln sun)
2、基团上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第1页/共40页第一页，共41页。细胞内ATP含量(hnling)受细菌种类，生长状态，周围环境的影响。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)ATP平均值2.5x10-18mol/cell第2页/共40页第二页，共41页。ATP生物发光技术可以检测细菌和真菌(zhnjn)。ATP生物发光技术只能检测活细胞。ATP生物发光技术无法分辨微生物细胞的种类，只可检测微生物总数上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)
3、(yu xin n s)第3页/共40页第三页，共41页。ATP生物发光(fun)技术Why?ATP + D-Luciferin + O2 AMP + ppi + Oxyluciferin + CO2 + lightLuciferase Mg2+ 第4页/共40页第四页，共41页。ThefireflybioluminescencetechnologyGiven an excess concentration of D-luciferin and luciferase,the light intensity emitted is proportional to the concentration
4、 of ATPMore ATP more intensive the lightWe can determine the quantity of living cells (bacteria) according to the light intensity第5页/共40页第五页，共41页。细菌(xjn)细胞越多，ATP含量也就越高，在同等的检测范围之内，发光值也越强。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第6页/共40页第六页，共41页。ATP浓度与细胞(xbo)数量成正比杂菌悬液与ATP浓度(nngd)的关系上海乐宇生物科技有限公司
5、上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第7页/共40页第七页，共41页。ATP荧光(ynggung)检测技术背景介绍1000Fmol ATP4x105cells上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第8页/共40页第八页，共41页。ATP发光(fun)值不能严格对应微生物数量，发光(fun)值对于微生物数量为正相关。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第9页/共40页第九页，共41页。ComparisonQuantify the microor
6、ganismsTraditional way:Colony countingAdvantage:Easy to distinguish the category of bacteriaDisadvantage:The complexity of the processThe requirements for high skills and timeRapid detection method:ATP bioluminescenceAdvantage:Easy to operateDont need skillsRapidDisadvantage:Cant identify the catego
7、ry of bacteria上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第10页/共40页第十页，共41页。乐宇乐宇 ATP ATP 检测检测(jin c)(jin c)产品产品I-GenieTM 手持便携式ATP 荧光(ynggung)检测仪CleanSenseTM表面(biomin)洁净度检测试剂盒上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司第11页/共40页第十一页，共41页。CleanSense表面(biomin)洁净度检测试剂盒冻干粉：荧光素和荧光素酶优点：保存时间长，能够耐受一定程度的温差变化，在高温(gown)环境下，更稳定
8、。采样棒：上有提取液优点：能在短时间内提取出细胞内90% 以上的ATP，并且(bngqi)能迅速破坏细胞外ATP酶，使结果更为真实。稀释液：快速溶解冻干粉为发光反应提供一个稳定的液体环境。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司第12页/共40页第十二页，共41页。使用(shyng)方法：Step 5. 放入放入ATP荧光检测仪检荧光检测仪检测测Step 4. 洗脱样品洗脱样品Step 3. 涂抹取样涂抹取样Step 2. 溶解冻干粉溶解冻干粉Step 1. 开机自检开机自检上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第13页/共40
9、页第十三页，共41页。ATP检测技术的优点无需培养，仅需15s，即可得到结果( jigu)。待测样品无需预处理，操作简便操作人员无需培训，容易上手灵敏度高上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第14页/共40页第十四页，共41页。ATP检测(jinc)的意义HACCP（HazardAnalysisCriticalControlPoint）危害分析关键控制点确认设定限值关键控制点监控ATP检测整改措施记录验证上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第15页/共40页第十五页，共41页
10、。ATP检测(jinc)的意义卫生(wishng)与清洗上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第16页/共40页第十六页，共41页。ATP检测(jinc)的意义清洁剂配制(pizh)调整(tiozhng)浓度清洁程序肉眼观察清洁效果可见污垢无可见污垢验证I-Genie TM ATP荧光检测继续以下工作继续或重新清洗和复查重新评估清洁人员的清洁工作，整改措施重新清洁验证不合格警告合格完善清洁程序完善清洁程序上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司第17页/共40页第十七页，共41页。ATP检测技术(jsh)的应用食品与饮料(ynl
11、io)加工用于检验生产卫生安全体系，确保符合HACCP的规定，辅助监督人员的工作并快速确定食品加工设备的洁净度。工业和制造快速简便的确认产品表面污染和清洁效果医疗方便CSSD（消毒供应中心，centralsterilesupplydepartment）以及其他卫生工作人员在短时间内客观地证实表面清洁的有效性。食品服务可以在一分钟内快速准确检测出由生物膜及细菌残留所造成的污染，实时监测结果可以快速识别问题区域，保证及时发现食品安全问题，保证质量上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第18页/共40页第十八页，共41页。问题与注意事项Cle
12、anSenseTM表面(biomin)洁净度检测试剂盒1.为什么在溶解冻干粉之后需要放置一段时间？冻干粉溶解之后，短时间放置可使试剂背景值降低，从而(cngr)更有利于检出痕量的ATP。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第19页/共40页第十九页，共41页。2.为什么采样棉签是湿润的？采样棒上含有高效裂解剂，能在短时间内裂解微生物细胞，更大限度地释放细胞内ATP。注意：*请避免采集残水过多的表面。*使用(shyng)采样棉签时，不要触碰棉签头，避免污染棉签，使检出值升高。*采样棉签打开后，请立即使用(shyng)，避免长时间放置，造
13、成棉签污染。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第20页/共40页第二十页，共41页。3.为什么在采集样品时，要注意涂抹手法，并保证每次涂抹都要一致？在采样时，请尽可能的增大棉签头与待测表面的接触面积，在采样的不断旋转棉签，使样品能均匀分布在棉签表面，这样有利于裂解剂完全作用(zuyng)于采集到的细胞，更完全地释放出细胞内的ATP。为了保证检测结果的重现性和可靠性，请注意同一位点每次涂抹时手法都要一致。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)10cm第21页/共40页第二十一页
14、，共41页。4.为什么在洗脱(xtu)样品后要取出采样棉签？由于I-GenieATP荧光检测仪的检测窗口处于检测池底部，所以洗脱(xtu)样品之后，需取出棉签，避免棉签头遮蔽检测窗口。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第22页/共40页第二十二页，共41页。试剂盒使用(shyng)前需平衡室温取出冷藏中的试剂盒后需在环境中放置10分钟后再使用(shyng)，否则结果会不准确（偏低）上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第23页/共40页第二十三页，共41页。CleanSens
15、eTM表面洁净度检测试剂盒的存放(cnfng)试剂盒应冷藏保存，温度为282128下可以保存8周，请注意避光保存上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第24页/共40页第二十四页，共41页。空白(kngbi)试剂的合理检测值空白(kngbi)试剂允许有正常的背景值，为0-10RLU上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第25页/共40页第二十五页，共41页。检测瓶置入仪器前保持干燥(gnzo)与干净尤其是从冷藏取出后会有冷凝水，可用干燥(gnzo)的布擦拭干，然后再放入仪器检测，
16、以避免检测腔污染。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第26页/共40页第二十六页，共41页。不要(byo)将采样棒遗留在仪器中否则将可能污染检测腔！上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第27页/共40页第二十七页，共41页。试剂盒检测完后的处理本试剂盒使用的容器以及内含的试剂均为无害的物质(wzh)，无需灭菌再抛弃。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第28页/共40页第二十八页，共41页。问题(wnt)与注意事项
17、I-Genie手持便携式ATP荧光检测仪充电与电池持续时间本设备可外接电源适配器工作或者使用(shyng)两节AA，LR6或类似的电池。两节电池可以维持250次测试。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第29页/共40页第二十九页，共41页。机器内存I-GenieTM手持便携式ATP检测仪可储存500组数据，包括(boku)检测时间，日期和RLU值。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第30页/共40页第三十页，共41页。仪器操作时的环境温度要求1.操作时最佳温度为5402.
18、存放时最适温度为-10oC50oC3.待测表面的温度对检测无影响(yngxing)（如：高温的表面）上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第31页/共40页第三十一页，共41页。检测腔若被污染，不要自行清洁!仪器(yq)外壳可用柔软的抹布+温和的清洁剂清洁上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第32页/共40页第三十二页，共41页。乐宇 ATP检测产品其他手持式ATP检测产品操作简单，无需繁琐设置界面复杂，操作人员需经过培训检测结果稳定，重现性高检测结果不稳定仪器背景噪音低仪器背
19、景噪音高试剂保质期长，可耐受一定的温差变化保质期相对较短，对运输保存温度要求较高一体化的便携检测箱设计手持、放置均可使用无便携箱设计，只可手持检测金属外壳防氧化，抗老化性强，增加使用年限塑料外壳防氧化，抗老化性弱，缩短使用年限特殊材质避光设计无附加避光设计，且机盖为塑料材质，容易老化降低避光性上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第33页/共40页第三十三页，共41页。检测(jinc)结果稳定1.检测窗位于检测池底部，检测结果( jigu)不受仪器手持和放置角度的影响。检测(jin c)窗口其他手持式ATP检测仪检测窗口I-Genie
20、TM ATP检测仪上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司检测窗口第34页/共40页第三十四页，共41页。检测结果(jigu)稳定2.CleanSenseTM与其他试剂盒重现(zhnxin)性的比较CleanSense TM表面(biomin)洁净度检测试剂盒其他ATP检测试剂上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司CV =8.4%第35页/共40页第三十五页，共41页。仪器背景(bijng)噪音低铝制外壳(wik)，密封避光效果更好，上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第36页/共40页第三十六页，共41页。ATP荧
21、光(ynggung)检测系统的质控比较ATP阳性物对照检测校准检查校准原理特点原理特点I-GenieATP阳性对照品外置功能（发光二极管）1.波长与荧光相同2.不定期人工操作，节省用户时间3.对人体无害利用ATP荧光与实际光完全一致HygienaBiocontrolATP阳性对照品额外耗材（同位素放射棒）1.波长与荧光不同2.定期人工操作3.对人有伤害同位素放射棒波长与荧光不同上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第37页/共40页第三十七页，共41页。总结ATP检测(jinc)的是物体表面的总菌数。ATP检测(jinc)可以立即告知物
22、体表面的洁净度状况。ATP检测(jinc)可以作为即时预警，弥补传统方法的不足，但又与传统培养法相互补充。根据ATP检测(jinc)数据趋势掌控清洗卫生状况。ATP检测(jinc)的可重复性是衡量其性能的最重要指标。上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第38页/共40页第三十八页，共41页。谢谢(xixie)！上海乐宇生物科技有限公司上海乐宇生物科技有限公司(yu xin n s)(yu xin n s)第39页/共40页第三十九页，共41页。感谢您的观赏(gunshng)！第40页/共40页第四十页，共41页。内容(nirng)总结ATP:Adenosine-5-tripholsphate。ATP:Adenosine-5-tripholsphate。ATP生物发光技术无法分辨微生物细胞的种类，只可检测微生物总数。ATP发光值不能严格对应微生物数量，发光值对于微生物数量为正相关(xinggun)。重新评估清洁人员的清洁工作，整改措施。取出冷藏中的试剂盒后需在环境中放置10分钟后再使用，否则结果会不准确（偏低）。2128下可以保存8周，请注意避光保存第四十一页，共41页。
