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1、第五章第五章药物代物代谢第五章第五章 药物代物代谢 本章要求本章要求n掌握掌握药物代物代谢的主要途径、部位的主要途径、部位n熟悉主要熟悉主要药物代物代谢酶混合功能氧化混合功能氧化酶的性的性质和代和代谢条件条件n熟悉影响熟悉影响药物代物代谢的因素的因素n了解运用了解运用药物代物代谢酶性性质进行制行制剂设计的方法的方法Chapter5DrugMetabolismI.IntroductionII.DrugMetabolismEnzyme&SiteIII.FirstPassEffect&HepaticExtractionIV.MetabolismReactionV.EffectsonDrugMetab
2、olismVI.DrugMetabolism&PreparationDesignVII.StudyTechnique（了解）（了解）I. Introduction1. 1. 概念：概念： Drug metabolism Biotransformation苯甲酸苯甲酸马尿酸尿酸第一个人体代第一个人体代谢试验:1841年，年，Dr. Alexander Ure盐酸普酸普鲁卡因卡因百浪多息百浪多息氯丙丙嗪非那西丁非那西丁扑扑热息痛息痛异烟异烟肼体内主要代体内主要代谢途径途径2.Drugmetabolismandeffect：失活失活(pharmacologicaldeactivation)或降低或降
3、低活化活化(pharmacologicalactivation)或增或增强产生毒性代生毒性代谢物物(toxication)或作用改或作用改变Introduction肝肝脏的功能：的功能：（1 1）代）代谢功能功能 （2 2）胆汁生成和排泄功能）胆汁生成和排泄功能（3 3）解毒作用）解毒作用 （4 4）血液凝固功能）血液凝固功能（5 5）免疫功能）免疫功能 （6 6）其他功能）其他功能 DrugMetabolismEnzymeandSite肝肝细胞内胞内质网（网（endoplasmicreticulum)：（1）粗面内）粗面内质网网：蛋白：蛋白质合成合成（2）滑面内）滑面内质网：肝微粒体网：肝微
4、粒体(microsome)糖原合成与分解糖原合成与分解脂肪代脂肪代谢激素代激素代谢药物代物代谢胆汁合成胆汁合成DrugMetabolismSite其他部位：其他部位：胃胃肠道：道：CYP450、葡萄糖、葡萄糖醛酸酸转移移酶、磺基磺基转移移酶、N-乙乙酰基基转移移酶、谷胱甘、谷胱甘肽S-转移移酶、酯酶、环氧化物水解氧化物水解酶及及乙醇脱乙醇脱氢酶。CYP4503A4在人在人类小小肠壁壁中也有中也有较高水平的表达。高水平的表达。另外少数代另外少数代谢反反应亦可在血亦可在血浆、肺、肺、肾、鼻粘膜、鼻粘膜、脑和其他和其他组织中中进行。行。 DrugMetabolismSite DrugMetaboli
5、smenzyme微粒体微粒体酶系系统与与细胞色素胞色素P450非微粒体非微粒体酶系系肝微粒体肝微粒体酶系系统与与细胞色素胞色素P450肝微粒体（肝微粒体（microsome）是肝）是肝组织匀匀浆除去除去细胞核、胞核、线粒体后粒体后经超速离心沉淀下来的超速离心沉淀下来的细胞内胞内质网囊泡碎片，属网囊泡碎片，属亚细胞成分。几乎所胞成分。几乎所有有药物的物的相反相反应及及相中的葡萄糖相中的葡萄糖醛酸酸结合、甲基化等合、甲基化等药物代物代谢酶都存在于肝都存在于肝细胞的胞的微粒体中。微粒体中。 DrugMetabolismenzyme微粒体混合功能氧化微粒体混合功能氧化酶系系统（Mixed-functi
6、onoxidases,MFOs）:CYP450、NADPH-CYP450reductase、黄素蛋白、黄素蛋白、NADPH,O2。 DrugMetabolismenzyme微粒体混合功能氧化微粒体混合功能氧化酶NADPH + H+ + O2+ RHNADP+ + H2O + ROHCYP450细胞色素胞色素P450（cytochromeP450,CYP450)：分子量分子量45000-55000Da1958年年OmuraT证明微粒体中的一种色素，是催明微粒体中的一种色素，是催化化药物代物代谢的活性成分。的活性成分。 DrugMetabolismenzymeCYP450的命名：的命名：根据其氨基
7、酸序列，以及底物根据其氨基酸序列，以及底物专一性和可一性和可诱导性，各种同工性，各种同工酶可被分可被分为不同的家族不同的家族40%以上相同序列以上相同序列为一族，一族，1，2，3;55%以上相同序列以上相同序列为一一亚族，族，A,B,C,D,E。对于外源性物于外源性物质代代谢有重要意有重要意义:CYP1、CYP2和和CYP3三个族。其中包括一三个族。其中包括一些主要的些主要的药物代物代谢酶如如CYP2E1，2C19，2C9，2D6，3A4等，等，3A4是人体中分布最是人体中分布最广的广的CYP450，2D6和和2C19与代与代谢多多态性有性有关。关。OtherCYP3ACYP2E1CYP2D6
8、CYP2CCYP1A2CYP2A6CYP2B6ConcentrationRelevancetodrugmetabolismCYP450CYP2D6CYP3ACYP2E1CYP2CCYP1A2CYP2D6 DrugMetabolismenzyme非微粒体非微粒体酶: :线粒粒体体：单胺胺氧氧化化酶、脂脂肪肪族族芳芳香香化化酶及及一一些些内内源源性性物物质代代谢的的混混合合功功能能氧氧化化酶、氨氨基基酸酸结合反合反应。细胞胞浆：醇醇、醛脱脱氢酶，黄黄嘌呤呤氧氧化化酶及及硫硫氧氧化化物物和和氮氮氧氧化化物物的的还原原酶等等，谷谷胱胱苷苷肽结合合、硫酸硫酸结合、乙合、乙酰化等。化等。血血浆：酰胺胺酶、
9、磷酸、磷酸酶、胆碱、胆碱酯酶等。等。药物代谢酶药物代谢酶存在部位存在部位参与的代谢反应参与的代谢反应混合功能氧化酶混合功能氧化酶系系肝内质网（微粒体酶）肝内质网（微粒体酶）大多数药物的氧化、还原反应大多数药物的氧化、还原反应醇脱氢酶醇脱氢酶肝、肠细胞浆肝、肠细胞浆醇氧化反应醇氧化反应单胺氧化酶单胺氧化酶肝、肾、肠和神经细胞肝、肾、肠和神经细胞中线粒体中线粒体各种内源性胺类如儿茶酚胺各种内源性胺类如儿茶酚胺5-5-羟羟色胺及外源性胺如酪胺等氧化脱色胺及外源性胺如酪胺等氧化脱胺生成醛胺生成醛 酯酶和酰胺酶酯酶和酰胺酶肝、血浆及其他组织肝、血浆及其他组织酯、硫酯和酰胺的水解酯、硫酯和酰胺的水解葡萄糖
10、醛酸转移葡萄糖醛酸转移酶酶肝内质网（微粒体酶）肝内质网（微粒体酶）葡萄糖醛酸结合反应葡萄糖醛酸结合反应磺酰基转移酶、磺酰基转移酶、谷胱甘肽谷胱甘肽S S- -转移转移酶、甲基转移酶、酶、甲基转移酶、乙基转移酶乙基转移酶肝细胞浆、内质网、线肝细胞浆、内质网、线粒体以及许多器官组织粒体以及许多器官组织的细胞浆的细胞浆形成硫酸酯、形成硫醚氨酸、氧形成硫酸酯、形成硫醚氨酸、氧或氮原子的甲基化、氮原子的乙或氮原子的甲基化、氮原子的乙酰化酰化相反相反应及及相中的葡萄糖苷酸相中的葡萄糖苷酸结合、合、甲基化等甲基化等药物代物代谢酶主要存在于肝主要存在于肝细胞胞的微粒体中。的微粒体中。氨基酸氨基酸结合等合等线粒
11、体中粒体中进行。行。谷胱苷谷胱苷肽结合、硫酸合、硫酸结合、乙合、乙酰化化细胞胞浆中。中。 DrugMetabolismenzymeFirstPassEffect&HepaticExtraction1,2Stability+Solubility3Passive+ActiveTrans.4Pgpefflux+CYP3A45-Hepaticfirstpasseffect肝首肝首过：肝肝ER越高，受肝血流量影响越大，首越高，受肝血流量影响越大，首过效效应显著著肝肝ER越低，受肝血流量影响越小，首越低，受肝血流量影响越小，首过效效应不不显著著肝肝ER中等，受肝血流量和血中等，受肝血流量和血浆蛋白蛋白结合
12、率的影响合率的影响FirstPassEffect&HepaticExtraction 代代谢反反应类型型I相反相反应（phase I）：）：引入官能引入官能团反反应，一，一般般为药物的氧化、物的氧化、还原、水解、异构化等，原、水解、异构化等，生成含有生成含有-OH，-NH2，-SH，-COOH等基等基团的代的代谢物，物，为二相反二相反应做准做准备。II相反相反应（phase II）：）：结合反合反应，一相反，一相反应生成的代生成的代谢物的极性基物的极性基团与内源性物与内源性物质生成生成结合物，是合物，是药物的去毒化物的去毒化过程，使程，使药物的水物的水溶性增大，以利于排泄。溶性增大，以利于排泄
13、。第一相反第一相反应氧化反氧化反应还原反原反应水解反水解反应氧化反氧化反应1、非微粒体、非微粒体酶系的系的药物氧化物氧化醇醇醛的氧化的氧化嘌呤呤类的氧化作用的氧化作用胺的氧化作用胺的氧化作用2、微粒体、微粒体酶系的系的药物氧化物氧化侧链烷基的氧化基的氧化O、N、S-烷基的氧化基的氧化芳芳环、非芳、非芳环的的羟化化N-氧化、氧化、S-氧化氧化脱氨基化脱氨基化脱硫作用脱硫作用CH3NHCH3COCH2NC2H5C2H5CH3NHCH3COCH2NC2H5C2H5OH芳香芳香环羟基化基化利多卡因利多卡因脂肪脂肪链羟基化基化 戊巴比妥戊巴比妥 环氧化氧化 苯并芘苯并芘 N-去去烷基化基化安定安定O-去
14、去烷基基非那西丁非那西丁 N-氧化氧化苯海拉明苯海拉明 非微粒体非微粒体酶系参与的氧化反系参与的氧化反应 醇、醇、醛氧化氧化麦酚生（麦酚生（肌肉松弛药-麦酚生,醇被氧化成羧酸）醇脱醇脱氢酶嘌呤氧化呤氧化 茶碱茶碱 黄黄嘌呤氧化呤氧化酶 R-CH2NH2R-CHO + NH3醛脱脱氢酶单胺氧化（胺氧化（单胺氧化酶和二胺氧化酶作用下氧化脱胺，并进一步氧化成羧酸） 还原反原反应（ Reduction）羰基化合物可通基化合物可通过醇脱醇脱氢酶和胞和胞浆中的中的醛酮脱脱氢酶还原原为醇。（醇。（由非微粒体由非微粒体酶催化）催化）偶氮化合物由微粒体催化偶氮化合物由微粒体催化还原原为两个伯胺。两个伯胺。 （由
15、微粒体（由微粒体酶催化）催化） 硝基化合物由微粒体催化硝基化合物由微粒体催化还原原为相相应的伯胺。的伯胺。 （由微粒体（由微粒体酶催化）催化） 水解反水解反应（Hydrolysis）酯类水解：可水解：可发生在血生在血浆和肝微粒体中，由胆和肝微粒体中，由胆碱碱酯酶、拟胆碱胆碱酯酶和其它和其它酯酶催化，分解催化，分解为羧酸和醇。酸和醇。酰胺胺类水解：水解：较酯慢，可被血慢，可被血浆中中酯酶水解，水解，也受肝微粒体中的也受肝微粒体中的酰胺胺酶催化。如普催化。如普鲁卡因卡因酰胺胺经肝微粒体肝微粒体酶水解水解酰胺胺键而被代而被代谢。酰肼的水解的水解普普鲁卡因胺卡因胺结合反合反应（Conjugation）
16、反应反应催化酶催化酶功能基团功能基团葡萄糖醛酸结葡萄糖醛酸结合合UDP-葡萄糖醛酸转移酶葡萄糖醛酸转移酶 -OH-COOH-NH2-SH葡萄糖结合葡萄糖结合UDP-葡萄糖转移酶葡萄糖转移酶-OH-COOH-SH硫酸结合硫酸结合磺基转移酶磺基转移酶-NH2-SO2NH2-OH甲基化甲基化甲基转移酶甲基转移酶-OH-NH2乙酰化乙酰化乙酰基转移酶乙酰基转移酶-NH2-SO2NH2-OH谷胱苷肽结合谷胱苷肽结合 谷胱苷肽谷胱苷肽-S-转移酶转移酶过氧化物过氧化物有机卤化物有机卤化物硝酸甘油的代硝酸甘油的代硝酸甘油的代硝酸甘油的代谢谢有机硝酸有机硝酸酯还原原酶的作用下，先生成二硝酸甘油的作用下，先生成
17、二硝酸甘油酯M1和和M2，再，再继续代代谢为单硝酸甘油硝酸甘油酯M3和和M4，最，最终生成甘油生成甘油M5。硝酸甘油的血管舒硝酸甘油的血管舒张作用作用强度分度分别约为二硝酸甘油二硝酸甘油酯和和单硝硝酸甘油酸甘油酯的的10倍和倍和1000倍。倍。地西泮的代地西泮的代地西泮的代地西泮的代谢谢去甲地西泮去甲地西泮M1有有药理活性，在一些国家是注册理活性，在一些国家是注册药品品 影响因素影响因素( (Effects on Drug Metabolism) 生理因素生理因素 药物因素物因素 生理因素生理因素l种族与个体差异种族与个体差异种种属属差差异异(Speciesdifferences)：哺哺乳乳动
18、物物的的代代谢要要比比非非哺哺乳乳动物物快快。羟基基保保泰泰松松代代谢速速度度人人与与狗狗慢慢140倍倍。苯苯丙丙胺胺在在大大鼠鼠体体内内羟基基化化，兔兔脱脱氨氨基反基反应，人以原形和脱氨基化物从尿中排泄。，人以原形和脱氨基化物从尿中排泄。种族差异种族差异(Ethicaldefferences):白人、黄种人、白人、黄种人、黑人黑人个体差异个体差异(individualdifferences):遗传因素因素遗传多多态性性(Pharmcogenetic polymorphism)：人体内缺乏：人体内缺乏维持生命非必需的代持生命非必需的代谢酶，或其，或其活性低等，或具有异常蛋白活性低等，或具有异常
19、蛋白质组分。分。CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9存在存在遗传多多态性。性。20%的的亚裔人几乎完全缺乏裔人几乎完全缺乏CYP2C19。异。异喹胍的胍的4-羟基化代基化代谢，存在，存在强代代谢型（型（extensivemetabolism，EM）和弱代）和弱代谢型（型（poormetabolism，PM）两种人群，）两种人群，PM可能与可能与CYP2D6的肝内缺乏及其基因突的肝内缺乏及其基因突变有关。有关。年年龄（Age）：）：新生儿：葡萄糖苷酸新生儿：葡萄糖苷酸转移移酶出生出生时才开始生成才开始生成，约3岁时达正常水平，故新生儿的葡萄糖苷达正常水平，故新生儿的葡萄糖苷酸化反酸化反应能
20、力有限，易能力有限，易发生黄疸。肝中内生黄疸。肝中内质网网发育不完全，育不完全，CYP450和和NADPH-CYP450还原原酶活性活性约为成年人的成年人的50%，药物的氧化代物的氧化代谢速度速度较慢。慢。老老年年人人：老老年年人人肝肝血血流流量量降降低低，肝肝功功能能细胞胞减减少少，由由此此也也使使生生物物转化化速速度度下下降降。多多数数情情况况下下，老老年年人人代代谢较慢慢，药物物半半衰衰期期延延长，相相同同剂量下血量下血药浓度度较高。高。性性别（Gender）：）：一般雄性一般雄性动物代物代谢较雌性雌性动物快。在物快。在药物代物代谢研究中，如没有特殊需要，一般研究中，如没有特殊需要，一般
21、选用雄性用雄性动物物作作为实验对象。象。老老龄性性别差异不明差异不明显疾病（疾病（Disease）：）：肝肝脏发生病生病变会明会明显导致生物致生物转化能力降低。化能力降低。肝硬化病从服用肝硬化病从服用氯霉素后，其半衰期可增加霉素后，其半衰期可增加4倍。倍。肾脏功能影响功能影响药物及其代物及其代谢物的排泄。若物的排泄。若药物物的代的代谢物在体内物在体内过量蓄量蓄积，可干，可干扰母体母体药物与物与血血浆蛋白的蛋白的结合，改合，改变药物的分布特性，物的分布特性，结合合型代型代谢物不能及物不能及时排泄，会排泄，会导致致结合物的分解、合物的分解、形成形成肠肝循肝循环等。等。饮食因素食因素(diet)：限
22、制蛋白限制蛋白摄取取时，导致致药物代物代谢能力的降低。能力的降低。微量微量营养素养素对药物代物代谢有一定影响。有一定影响。维生素生素类是合成蛋白和脂是合成蛋白和脂质的必需成分，后两者又的必需成分，后两者又是是药物代物代谢酶系系统的重要的重要组成，成，维生素缺乏生素缺乏往往使代往往使代谢降低。降低。微量元素如微量元素如铁、锌、钙、镁、铜、硒和碘等、硒和碘等缺乏会缺乏会导致致药物代物代谢能力的下降。能力的下降。葡萄柚汁：葡萄柚汁：CYP3A4酶抑制抑制剂 药物因素物因素 药物的物的给药途径、途径、剂量：量： 给药途径主要与口服途径主要与口服给药首首过效效应有关。有关。剂量与量与饱和和现象有关。如硫
23、酸和甘氨酸象有关。如硫酸和甘氨酸结合在合在较低低剂量量时就能达到就能达到饱和。水和。水杨酰胺在人体内胺在人体内主要是葡萄糖苷酸主要是葡萄糖苷酸结合和硫酸合和硫酸结合，合，剂量增大量增大时硫酸硫酸结合就会达到合就会达到饱和，随和，随剂量的增大，硫量的增大，硫酸酸结合物的比例逐合物的比例逐渐减少。人口服不同减少。人口服不同剂型水型水杨酸酸酰胺：尿中硫酸胺：尿中硫酸酯量，溶液量，溶液29.729.7，混，混悬剂31.831.8，颗粒粒剂73.0%73.0%。药物代物代谢酶的的诱导： 很多化学异物（包括很多化学异物（包括药物），特物），特别是在肝中滞留是在肝中滞留时间长、脂溶性好的化合物，能、脂溶性好
24、的化合物，能够使某些使某些药物代物代谢酶过量生成，从而促量生成，从而促进自身或其它自身或其它药物的代物的代谢，这种作用称种作用称为酶诱导，又称，又称为促促进代代谢。苯巴比妥苯巴比妥类能使内能使内质网加速增生，使肝重和网加速增生，使肝重和CYP450含量含量显著增加著增加，特，特别是是CYP4502B及葡及葡萄糖苷酸萄糖苷酸转移移酶和和环氧化物水解氧化物水解酶。甲基胆蒽在几小甲基胆蒽在几小时内可加速内可加速CYP1A和谷胱甘和谷胱甘肽-S-转移移酶的活性，内的活性，内质网和肝重有少量增加。网和肝重有少量增加。 药物代物代谢酶的抑制的抑制 ：很多很多药物能抑制物能抑制酶的活性，从而能使其它的活性，
25、从而能使其它药物物代代谢减慢，作用减慢，作用时间延延长、强度提高或毒副作度提高或毒副作用增用增强。引起。引起药物相互作用。物相互作用。 机理：一是机理：一是酶抑制抑制剂能使内能使内质网网酶分解加速、分解加速、合成减少或使之破坏，另一种是合成减少或使之破坏，另一种是酶抑制抑制剂与其与其它它药物物竞争争酶的的键合部位，合部位，导致致药物代物代谢的的竞争性抑制。如安非他明、氨苯争性抑制。如安非他明、氨苯砜、美沙、美沙酮、红霉素、醋竹桃霉素霉素、醋竹桃霉素 。 光学异构性光学异构性对代代谢的影响的影响 ：美芬妥英：美芬妥英：S-S-型半衰期型半衰期 2.13 h2.13 h R- R-型半衰期型半衰期
26、 76 h76 h奥美拉奥美拉唑：奥美拉奥美拉唑唑左旋异构体埃索美拉左旋异构体埃索美拉唑唑手性对映位点OmeprazoleR/SOmeprazoleR/S代代代代谢谢差异差异差异差异与与R-异构体相比，异构体相比，S-异构体由异构体由CYP2C19代代谢更少更少代代谢物物砜5- - 羟基基5- -氧氧- - 去甲基去甲基27%27%2C193A446%94%4%3A42C19R- -异构体异构体2%Clint = 14.6 L/min/mgClint = 42.5 L/min/mgS-异构体异构体药物代物代谢与制与制剂设计前体前体药物（物（prodrug)：在体内代：在体内代谢为活性形式，活性
27、形式，发挥疗效。效。1958年提出概念。年提出概念。乌洛托品：洛托品：1899年引入年引入临床，在体内水解床，在体内水解为甲甲醛，抗尿路感染，第一个前体，抗尿路感染，第一个前体药物；物；百浪多息：百浪多息：为磺胺的前体磺胺的前体酞氨氨苄青霉素：胃酸青霉素：胃酸稳定性增加，在定性增加，在肠道被道被酯酶代代谢为氨氨苄青霉素而吸收；青霉素而吸收；左旋多巴：在多巴脱左旋多巴：在多巴脱羧酶的作用下代的作用下代谢为多巴多巴胺而起效；胺而起效；柳柳氮氮磺磺胺胺吡吡啶：磺磺胺胺结合合5-氨氨基基水水杨酸酸后后，在在胃胃肠道道不不被被吸吸收收，到到结肠及及大大肠段段由由微微生生物物将将偶偶氮氮键还原原，释放放出
28、出5-氨氨基基水水杨酸酸和和磺磺胺吡胺吡啶，用于治，用于治疗结肠炎。炎。特特布布他他林林：支支气气管管扩张药，口口服服吸吸收收占占剂量量的的25-80%，经肝肝首首过性性硫硫酸酸结合合69%，生生物物利利用用度度仅为7-26%；首首过结合合均均为分分子子中中间苯苯二二酚酚的的酚酚羟基基，在在酚酚羟基基上上成成酯，提提高高系系统前前的的水水解解稳定定性性，并并保保证体体内内较快地快地转化化为活性形式活性形式发挥疗效。效。班班布布特特罗：特特布布他他林林的的前前体体，选择性性抑抑制制胆胆碱碱酯酶，药物物疗效延效延长。特布他林特布他林班布特班布特罗药物代物代谢的的饱和和现象：利用代象：利用代谢的的饱
29、和特和特别是是胃胃肠道道酶系系统的的饱和来提高和来提高药物的生物利用度。物的生物利用度。左旋多巴：左旋多巴：肠溶性泡溶性泡腾片可使十二指片可使十二指肠脱脱羧酶饱和，和，较普通胶囊生物利用度高。普通胶囊生物利用度高。药物代物代谢与制与制剂设计药物代物代谢酶抑制抑制剂：甲基多巴：甲基多巴肼与左旋多巴；与左旋多巴；伊米配能与西米他丁（伊米配能与西米他丁（ -内内酰胺胺酶抑制抑制剂）氨氨苄青霉素与舒巴坦青霉素与舒巴坦钠（ -内内酰胺胺酶抑制抑制剂）药物代物代谢与制与制剂设计药物代物代谢与与剂型改革：型改革：硝酸甘油舍下片、硝酸甘油舍下片、贴膏膏剂改改变剂型减少首型减少首过效效应药物代物代谢与制与制剂设
30、计 常用常用药物代物代谢研究方法研究方法 在体在体药物代物代谢研究方法研究方法一般是受一般是受试者者给药后，后，测定定药物及其代物及其代谢物物在血在血浆、尿、尿、粪便及胆汁中的便及胆汁中的浓度，度，计算得算得出有关代出有关代谢速度参数，如清除率、生物半衰速度参数，如清除率、生物半衰期及各途径的排泄比率等；从排泄物中分离期及各途径的排泄比率等；从排泄物中分离鉴定可能的代定可能的代谢产物。物。 在体探在体探针药物（物（in vivoprobe）：）：有些有些药物物选择性地性地经某一种同功某一种同功酶代代谢，其，其清除率清除率则可作可作为该同功同功酶的活性指的活性指标。如咖。如咖啡因、茶碱主要啡因、
31、茶碱主要经CYP1A代代谢，美芬妥英主，美芬妥英主要要经CYP2C9代代谢，红霉素霉素经CYP3A代代谢，这些些药物均可作物均可作为相相应同功同功酶的在体探的在体探针药物，用其清除率反映同功物，用其清除率反映同功酶的活性，用于研的活性，用于研究与究与该同功同功酶有关的其它有关的其它药物的代物的代谢。非侵入方法（非侵入方法（Non-invasivemethod）：）：利用某些内源性物利用某些内源性物质及其代及其代谢物的水平物的水平变化，化，反映某些反映某些药物代物代谢酶或代或代谢途径的途径的变化。化。血血浆中胆中胆红素作素作为肝葡萄糖苷酸肝葡萄糖苷酸结合合酶的指的指标，可的松由肝微粒体可的松由肝
32、微粒体CYP3A催化生成催化生成6-羟基可基可的松，的松，经尿排泄，以尿排泄，以6-羟基可的松或以基可的松或以6-羟基可的松基可的松/17-羟基可的松的比基可的松的比值作作为CYP3A的的指指标。 体外体外药物代物代谢研究方法研究方法 整体肝灌流法整体肝灌流法 ：动物在麻醉状物在麻醉状态下，开腹，将肝下，开腹，将肝组织分离移至分离移至体外并保持体外并保持3737。灌流液。灌流液经门静脉插管静脉插管进入肝入肝脏，由出肝静脉插管回到循，由出肝静脉插管回到循环泵中，中，连续循循环。在不同在不同时间取一定量灌流液，取一定量灌流液，测定定药物及其代物及其代谢物的物的浓度。度。动物物实验可同可同时胆管插管
33、，胆管插管，测定定药物及代物及代谢物在胆汁中的排泄情况。物在胆汁中的排泄情况。 肝切片法肝切片法 ：新新鲜肝肝组织先用打孔机制成肝条，再用切片先用打孔机制成肝条，再用切片机切成厚度机切成厚度为 5 mm5 mm的切片，的切片，实验时用肝切片用肝切片与与药物同物同时孵化。孵化。该方法保持了肝功能状方法保持了肝功能状态所需的肝所需的肝细胞胞间的生理的生理连接，但在制接，但在制备过程程中易造成肝中易造成肝细胞的破坏。胞的破坏。肝肝细胞培养法胞培养法 ：该方法保持了完整方法保持了完整细胞的功能，与正常胞的功能，与正常生理状况接近，适合生理状况接近，适合进行行药物代物代谢酶的的诱导等研究，与体内有一定相
34、关性等研究，与体内有一定相关性 ，但，但在在细胞培养胞培养过程中，可能程中，可能丢失某些失某些药物物代代谢酶的活性。的活性。20 000 g20 min4CPrecipitate(mitochondria、cellnucleus)SupernatantPrecipitate105 000 g60 min 4CSupernatant(cytosol)105 000 g60 min4CSupernatantPrecipitate(microsome)Liverhomogenate肝肝亚细胞成分（微粒体）研究方法胞成分（微粒体）研究方法：肝微粒体制肝微粒体制备CYP450含量测定重重组药物代物代谢酶（RecombinantDME）E.coliyeastmammaliancelllinesbaculovirus-infectedinsectcellsPurifiedrecombinantDMEs药物代物代谢研究的目的：研究的目的：药物代谢研究主要包括代谢途径的推断代谢产物的分离鉴定及活性测定代谢速度和程度参与的药物代谢酶确证侯选化合物的高通量筛选
