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1、选修选修3考纲导学 1植植物物的的组组织织培培养养。2.动动物物的的细细胞胞培培养养与与体体细细胞胞克克隆隆。3.细细胞胞融融合合与单克隆抗体。与单克隆抗体。专题专题2细胞工程细胞工程微知识小题练微知识小题练 微考点大讲堂微考点大讲堂 微考场大收获微考场大收获 微知识小题练微知识小题练 夯基固本基础自测夯基固本基础自测 微知识一细胞工程的概念1原理和方法：应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法。2操作水平：_水平或细胞器水平。3目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得_。4分类：根据操作对象的不同，分为植物细胞工程和动物细胞工程。知识梳理知识梳理 细胞细胞细胞产品细胞产品细胞的全能性细胞
2、的全能性全部遗传信息全部遗传信息离体离体激素激素脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织再分化再分化纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶聚乙二醇聚乙二醇杂种细胞再生出细胞壁杂种细胞再生出细胞壁不同生物远缘杂交不亲和的障碍不同生物远缘杂交不亲和的障碍染色体变异染色体变异优良品种的遗传特性优良品种的遗传特性分生区分生区愈伤组织愈伤组织胰蛋白酶胰蛋白酶原代原代传代传代抗生素抗生素血清或血浆血清或血浆培养液的培养液的pH动物细胞核具有全能性动物细胞核具有全能性灭活病毒灭活病毒(2)单克隆抗体制备过程选择选择杂交瘤细胞杂交瘤细胞腹水腹水特异性强特异性强诊断试剂诊断试剂运载药物运载药物1植物的每个细胞在植物体内和体外都能
3、表现出细胞的全能性。( )2愈伤组织是外植体脱分化和再分化后形成的。( )3再生出细胞壁是植物体细胞原生质体融合成功的标志。( )4在25的实验条件下可顺利完成大鼠神经细胞的培养。( )5动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶。( )6动物细胞核移植的受体细胞必须是卵细胞。( )7克隆动物的性状与供体动物完全相同。( )8在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞。( )9经植物组织培养得到的胚状体用人工薄膜包装后可得到人工种子。( )基础自测基础自测 微考点大讲堂微考点大讲堂 考点例析对点微练考点例析对点微练 (一)植物组织培养1细胞的全能性(1)全能性的基础：生
4、物体的每一个细胞都含有本物种的全套遗传物质，都有发育成完整个体的全套基因。微考点一微考点一 植物细胞工程植物细胞工程 (2)全能性实现的条件：离体；提供营养物质；植物激素及其他适宜条件。(3)体现全能性能力大小的比较：受精卵卵细胞体细胞；植物体细胞动物体细胞；胚胎干细胞其他干细胞体细胞。2胡萝卜的组织培养技术(1)实验原理：离体的植物组织、器官、细胞表现出植物细胞的全能性，发育成新个体。(2)实验流程：制备外植体接种脱分化培养再分化培养移栽培养成正常植株。(3)注意事项：选材：根尖、茎尖、形成层等最容易诱导脱分化的部分。无菌：培养基一旦污染，迅速生长的各种杂菌不仅会与培养物争夺营养，而且还会产
5、生大量对培养物有害的物质。光照：脱分化形成愈伤组织的过程不需要光，再分化过程需要光，因为愈伤组织利用有机物营养成分，而试管苗需要进行光合作用。激素的使用：a生长素类的量细胞分裂素类的量：诱导植物组织脱分化和根原基形成；b生长素类的量细胞分裂素类的量：诱导植物组织再分化和芽原基形成；c赤霉素类：促进分化的丛芽和小植株快速生长。(二)植物组织培养与植物体细胞杂交的比较名称名称植物组织培养植物组织培养植物体细胞杂交植物体细胞杂交选材选材选取根尖、茎尖，形选取根尖、茎尖，形成层部位最容易诱导成层部位最容易诱导脱分化脱分化不同植物细胞不同植物细胞技术操作技术操作脱分化、再分化等脱分化、再分化等除脱分化、
6、再分化外，还要用酶解除脱分化、再分化外，还要用酶解法去除细胞膜，用一定的方法诱导法去除细胞膜，用一定的方法诱导细胞融合细胞融合关系关系植物组织培养是植物体细胞杂交的基础，植物体细胞杂交植物组织培养是植物体细胞杂交的基础，植物体细胞杂交所用的技术更复杂所用的技术更复杂【例1】下图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图。有关叙述正确的是()A过程中都会发生细胞的增殖和分化B在利用多倍体育种法培育无子西瓜的过程中，不经过愈伤组织阶段C此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性D利用此过程获得的试管苗一定为纯合子解解析析：过过程程分分别别为为脱脱分分化化和和再再分分化化，中中不不会会
7、发发生生细细胞胞的的分分化化；此此过过程程依依据据的的生生物物学学原原理理是是细细胞胞全全能能性性；此此过过程程为为无无性性生生殖殖，获获得得的的试试管管苗苗基基因因与与母母本本相相同同，不不一一定定为为纯纯合合子子；在在利利用用多多倍倍体体育育种种法法培培育育无无子子西西瓜瓜的的过过程程中中没没有有用用到到植植物物组组织织培培养养，所所以以也也没没有有经经过过愈愈伤伤组组织织阶阶段。段。答案：答案：B对点微练1下列关于运用植物组织培养技术产生新个体的叙述错误的是()A属于无性生殖，主要理论依据是植物细胞具有全能性B愈伤组织可作为基因工程的受体，其细胞特点是排列疏松、无规则、高度液泡化C整个培
8、养过程都不需要光照的条件D人工培养基中含植物生长发育所需的全部营养物质，包括矿质元素、糖、维生素等解解析析：植植物物组组织织培培养养属属于于无无性性生生殖殖，依依据据的的理理论论基基础础为为细细胞胞的的全全能能性性；在在培培养养基基中中含含有有植植物物细细胞胞发发育育所所需需要要的的全全部部营营养养物物质质；组组织织培培养养的脱分化阶段不需要光，但是再分化阶段需要光。的脱分化阶段不需要光，但是再分化阶段需要光。答案：答案：C对点微练2花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗
9、传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题：(1)过程所需的酶是_。(2)过程后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的_存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_。原生质体经过_再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。(4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和_植株的根尖，通过_、_、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶 叶绿体叶绿体 保持原生质体完整性保持原生质体完整性 细胞壁细胞壁 双亲双亲(
10、或花椰菜和黑芥或花椰菜和黑芥) 解离解离 漂洗漂洗 (5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株14进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株14中一定是杂种植株的有_。(6)对杂种植株进行_接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。黑腐病菌黑腐病菌 1、2、4 解析：(1)过程是获得黑芥叶肉细胞的原生质体和花椰菜根细胞的原生质体，该过程需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。(2)供体细胞为黑芥叶肉细胞含有叶绿体，而受体花椰菜的根细胞无叶绿体，因此可以根据叶绿体的有无初步筛选出杂种细胞。(3)加入甘露醇以保持渗
11、透压，是为了维持原生质体的完整性，防止原生质体吸水涨破。原生质体再生出细胞壁，经过脱分化形成愈伤组织。(4)若分析再生植株的染色体变异类型，需将再生植株细胞的染色体与亲本即黑芥和花椰菜的染色体进行比较；观察染色体的形态和数目需在有丝分裂中期观察，因此需要经过解离、漂洗、染色、制片等过程制成装片。(5)杂种植株需含有双亲的遗传物质，分析图形可知，再生植株1、2、3、4均含有花椰菜的DNA，其中1含有黑芥的全部DNA,2、4含有黑芥的部分DNA，而3不含有黑芥的DNA，因此1、2、4一定是杂种植株。(6)为培育具有抗黑腐病的杂种植株，需对得到的杂种植株进行黑腐病菌接种实验，观察其是否患病，不患病的
12、即为高抗性的杂种植株。1.区别微考点二微考点二植物组织培养、动物细胞培养和核移植植物组织培养、动物细胞培养和核移植 【例2】动物细胞培养和植物组织培养的主要区别是()A动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同B动物细胞培养是培养单个细胞，植物组织培养是培养组织C动物细胞培养可以传代培养，而植物组织培养不能传代培养D动物细胞培养过程中可发生遗传物质的改变，而植物组织培养不能解解析析：动动物物细细胞胞培培养养通通常常用用液液体体培培养养基基，成成分分中中糖糖类类用用葡葡萄萄糖糖，还还必必须须含含有有动动物物血血清清；植植物物组组织织培培养养通通常常用用固固体体培培养养基基，成成分分中中含含有有蔗
13、蔗糖、植物激素等物质。糖、植物激素等物质。答案：答案：A解解析析：图图示示甲甲过过程程是是进进行行动动物物细细胞胞培培养养的的第第一一步步获获取取动动物物组组织织，为为了了避避免免杂杂菌菌的的污污染染，应应进进行行消消毒毒处处理理；乙乙过过程程为为获获取取单单个个动动物物细细胞胞，可可用用胰胰蛋蛋白白酶酶消消化化；丙丙过过程程得得到到的的细细胞胞系系通通常常为为有有限限细细胞胞系系，遗遗传传物物质质和和染染色色体体数数未未发发生生变变化化，大大多多数数不不具具有有异异倍倍体体核核型型；未未经经克克隆隆化化培培养养的的细胞系具有异质性。细胞系具有异质性。答案：答案：C对点微练4下图是某实验室做的
14、通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题。(1)X、Y、Z细胞的名称分别是_、_、_。(2)过程类似于植物组织培养技术中的_过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较_。过程的实质是_。(3)过程中需用到的生物诱导剂是_。骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 抗原刺激过的抗原刺激过的(效应效应)B细胞细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 脱分化脱分化 高高 基因的选择性表达基因的选择性表达 灭活的病毒灭活的病毒 (4)处需要筛选，其目的是_。(5)若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，能测到放射性32P的细胞器是_、_。解析：(1)X、Y、Z细胞的名称分别是骨髓瘤细胞、抗原刺激过的B细胞、
15、杂交瘤细胞。(2)过程是将甲小鼠的纤维母细胞诱导成诱导干细胞，相当于植物组织培养技术中的脱分化过程，与纤维母细胞相比诱导干细胞的全能性较高。过程是诱导干细胞分化成各种体细胞，细胞分化的实质是基因选择性表达。(3)诱导动物细胞融合，需用到的生物诱导剂是灭活的病毒。(5)核苷酸是核酸的基本组成单位，动物细胞中线粒体含有少量DNA，核糖体是由蛋白质和rRNA构成的。因此用32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，则在线粒体和核糖体中能检测到32P。筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 核糖体核糖体 线粒体线粒体 1.植物体细胞杂交与动物细胞融合比较微考点三微考点三动物细胞
16、融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体 植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合实质内容实质内容改变遗传物质、产生新的性状，获得细胞产品改变遗传物质、产生新的性状，获得细胞产品(使后代具有双使后代具有双亲的特性亲的特性)理论基础理论基础细胞膜的流动性、植物细胞细胞膜的流动性、植物细胞的全能性的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖细胞膜的流动性、细胞增殖细胞工程细胞工程植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合诱导手段诱导手段物理法：离心、振动、电激物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇化学法：聚乙二醇物理法：电激物理法：电激化学法：聚乙二醇化学法：聚乙二醇生物法：灭活病毒生
17、物法：灭活病毒植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合过程过程去细胞壁去细胞壁(纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶酶)原生质体融合原生质体融合(获得杂种原获得杂种原生质体生质体)植物细胞的筛选和植物细胞的筛选和培养培养(得到植株得到植株)获得分离的单个动物细胞获得分离的单个动物细胞(胰蛋胰蛋白酶处理白酶处理)诱导融合形成杂交诱导融合形成杂交细胞细胞动物细胞培养动物细胞培养(细胞产品细胞产品)细胞工程细胞工程植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合应用应用白菜白菜甘蓝等杂种植物甘蓝等杂种植物单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备(杂交瘤细胞杂交瘤细胞)意义和用途意义和用途克服远缘杂
18、交不亲和的障克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展杂交亲本的组碍，大大扩展杂交亲本的组合范围合范围克服有性杂交的母系遗传克服有性杂交的母系遗传的局限性，获得细胞质基因的局限性，获得细胞质基因的杂合子，研究细胞质遗传的杂合子，研究细胞质遗传制备单克隆抗体制备单克隆抗体诊断、治疗、预防疾病，如诊断、治疗、预防疾病，如单克隆抗体诊断盒、单克隆抗体诊断盒、“生物导生物导弹弹”治疗癌症治疗癌症2.单克隆抗体的制备(1)制备过程：(2)关键点分析：细胞融合完成的标志：细胞核融合成一个核；制备单克隆抗体时选用一种经抗原处理的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，筛选出杂交瘤细胞，它兼有两个亲本细胞的特性在体外
19、培养条件下能不断增殖，同时能产生具有某种特异性的抗体；获取单克隆抗体的场所：若在培养基中进行杂交瘤细胞培养，则从培养液中提取；若在小鼠或其他动物腹腔中培养，则从腹水中提取。【例3】下列有关利用动物细胞工程生产单克隆抗体的叙述，错误的是()A单克隆抗体制备使用的主要生物材料是骨髓瘤细胞和浆细胞B单克隆抗体制备的原理之一是一个浆细胞可以产生多种特异性抗体C筛选能分泌所需抗体的杂交瘤细胞运用了抗原抗体特异性反应原理D单克隆抗体具有纯度高、产量大、灵敏度高等优点解解析析：单单克克隆隆抗抗体体制制备备使使用用的的主主要要生生物物材材料料是是骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞和和已已免免疫疫的的B细细胞胞；一一个个浆浆
20、细细胞胞只只能能产产生生一一种种抗抗体体；抗抗体体的的本本质质是是免免疫疫球球蛋蛋白白，抗抗体体可可以以和和抗抗原原进进行行特特异异性性结结合合，所所以以筛筛选选抗抗体体时时可可以以使使用用抗抗原原抗抗体体特特异异性性反反应应原原理理；单单克克隆隆抗抗体体的的特特点点是是：特特异异性性强强、灵灵敏敏度度高高，可可以以大大量制备。量制备。答案：答案：B对点微练5人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题。(1)制备单克隆抗体过程中要用到_和_技术。动物细胞培养动物细胞培养
21、动物细胞融合动物细胞融合 (2)制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于_，使小鼠产生分泌相应_的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的_免疫。(3)在细胞内DNA的合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的_成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_。(4)此过程生产的单克隆抗体可以与_特异性结合，从而诊断早孕。抗原抗原 抗体
22、抗体 体液体液 氨基嘌呤氨基嘌呤 能无限增殖并分泌特异性抗体能无限增殖并分泌特异性抗体 人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素(CHG) 解析：图解表示了制备抗HCG单克隆抗体的过程。(1)制备单克隆抗体的过程要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。(2)给小鼠注射的HCG相当于抗原，使小鼠产生分泌相应抗体的淋巴细胞，此过程为体液免疫。(3)根据题目信息HAT培养基中添加氨基嘌呤可以阻断骨髓瘤细胞的DNA合成，而筛选出杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体。对点微练6单纯疱疹病毒型(HSV1)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV1的单克隆抗体可快速检测HSV1。回答下列
23、问题：(1)在制备抗HSV1的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSV1蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗_的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了_反应，再从小鼠的_中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的_细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是_。HSV1蛋白蛋白 体液免疫体液免疫 脾脏脾脏(其他合理答案也可其他合理答案也可) 骨髓瘤骨髓瘤 无限增殖且产生专一抗体无限增殖且产生专一抗体(其他合理答案也可其他合理答案也可) (2)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的_中使其增殖，再从_中提取、纯化获得。(3)通过上述方法得到的单
24、克隆抗体可准确地识别这种HSV1蛋白，其原因是该抗体具有_和_等特性。解析：(1)制备单克隆抗体时，需要先给小鼠注射特定抗原(HSV1蛋白)，当小鼠血清中抗HSV1蛋白的抗体检测呈阳性时，就可从小鼠脾脏中获取B淋巴细胞，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经过筛选和克隆化培养，最终获得既能无限增殖又能产生专一抗体的杂交瘤细胞。(2)单克隆抗体的获取有两条途径，一是从体外细胞培养液中提纯获得，二是将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖，再从腹水中提取、纯化获得。(3)单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、纯度高等特性。腹腔腹腔 腹水腹水 纯度高纯度高 特异性强特异性强(其他合理答案也可其他合理答案也可)
25、细胞具有全能性与脱分化和再分化(1)细胞全能性的原因：生物体的每个细胞都具有发育成完整个体所必需的全部基因。(2)细胞全能性的比较：受精卵生殖细胞体细胞；植物细胞动物细胞；分化程度低的细胞分化程度高的细胞。微提升微提升(3)细胞全能性的实现：植物细胞在离体、一定的营养物质、激素和其他外界条件下，经脱分化和再分化可实现其全能性，发育为完整个体。离体的动物体细胞，全能性受到限制，但其核仍具有全能性，但需借助卵细胞的细胞质才能表现出来。 微考场大收获微考场大收获 加固训练练透考点加固训练练透考点 1(2014浙江高考)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是()A连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型B某些
26、癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞C由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆D未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状解解析析：连连续续细细胞胞系系的的细细胞胞大大多多数数具具有有异异倍倍体体核核型型；癌癌细细胞胞仍仍能能逆逆转转为为正正常常细细胞胞，如如小小鼠鼠畸畸胎胎癌癌能能分分化化为为各各种种正正常常体体细细胞胞；由由一一个个共共同同的的祖祖细细胞胞培培养养形形成成的的细细胞胞群群为为一一个个克克隆隆；未未经经克克隆隆化化培培养养的的细细胞胞系系具具有有异异质性。质性。答案：答案：B(1)选用新生营养芽为外植体的原因是_，诱导外植体形成PLBs的过程称_。(2)与黑暗条件下相比，PLBs在
27、光照条件下生长的优势体现在_，_，_。(3)脱落酸(ABA)能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案时探讨了以下问题：ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基_后按比例加入。新生营养芽的细胞分化程度较低，分裂旺盛新生营养芽的细胞分化程度较低，分裂旺盛 脱分化脱分化 生长速度快生长速度快 有利于叶绿素的形成有利于叶绿素的形成 进行光合作用制造有机物进行光合作用制造有机物 灭菌冷却灭菌冷却 实验进
28、程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品(PLBs)称重(g/瓶)后再测定生物碱含量。如初始(第0天)数据已知，实验过程中还需测定的样品数为_。依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品(重复样)的_时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。75 生物碱含量平均值最高生物碱含量平均值最高 解析：(1)新生营养芽的细胞分化程度低，细胞分裂旺盛，易培养。PLBs类似于愈伤组织，由新生营养芽培养到愈伤组织的过程称为脱分化。(2)从坐标曲线可知，与黑暗条件下相比，光照条件下的PLBs生长速度快，原因可能是光照有利于叶绿素的形成，有利于细胞进行光合作用制造有机物
29、。(3)由于ABA受热易分解，故应将液体培养基先灭菌冷却后，再按一定的比例加入ABA母液。据题意可知，该实验共设置4个实验组和1个对照组，共5组；实验50天完成，每10天取样，初始数据已知，只需测5次，故5组样品重复3次，共需测定的样品数为25375。依据实验目的探究“添加适量的ABA可提高生物碱产量”可知，当某3个样品的“生物碱含量平均值最高”时，其对应的ABA浓度为最适浓度。3(2014全国卷)某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞，需取免
30、疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：(1)制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上，则小鼠最少需要经过_次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是_小鼠，理由是_。(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有_ _，体系中出现多种类型细胞的原因是_。(3)杂交瘤细胞中有_个细胞核，染色体数目最多
31、是_条。(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是_。4 Y Y小鼠的血清抗体效价最高小鼠的血清抗体效价最高 B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合细胞融合是随机的，且融合率达不到细胞融合是随机的，且融合率达不到100% 形成的细胞形成的细胞1 100 (经免疫的经免疫的B淋巴细胞是高度分化的细胞淋巴细胞是高度分化的细胞)不能无限增殖不能无限增殖 解析：(1)由图可知，小鼠至少经过4次免疫后，免疫小鼠的血清抗体效价可达到16 000以上，其中Y小鼠的血清抗体效价最高。(2)由于细胞融合是随机的，且并不是所有细胞都能参与融合
32、，融合体系中含有五种细胞：未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞、B淋巴细胞相互融合形成的细胞。(3)两个细胞的细胞核融合成一个细胞核标志着融合的完成，杂交瘤细胞中有一个细胞核；细胞融合过程中染色体会发生丢失，所以染色体数量最多为两者之和，即100条。(4)未融合的B淋巴细胞不能无限增殖，经多次传代培养后都不能存活。4(2015安徽铜陵期末)人工种子是人们模仿天然种子的结构制造出来的生命有机体，它能像天然种子一样萌发生长。人工种子的核心部分是胚状体，其培育过程如图所示。请回答下列有关问题。(1)制作人工种子依据的原理是_；制作过程的关键是确保无菌操作，
33、其原因是_。细胞全能性细胞全能性 细菌等微生物代谢旺盛，在消耗营养物质的同时，产生大量有害产物，细菌等微生物代谢旺盛，在消耗营养物质的同时，产生大量有害产物，毒害组织细胞毒害组织细胞 (2)表示脱分化的过程，其实质是_；表示再分化的过程，其实质是_。培养基中生长素和细胞分裂素的浓度、_、_影响过程的进行。(3)从保证人工种子正常的生命力以及生态系统的物质循环上来看，人造种皮应具有半透性(透水、透气性)和_的特点。(4)某二倍体植物的基因型为DdTt，利用花药离体培养的方法，可培育成“花粉胚”，也可制成人工种子，这种种子萌发形成的个体称为_，从生殖方式看属于_生殖。使不分裂的细胞恢复分裂能力使不
34、分裂的细胞恢复分裂能力 基因的选择性表达基因的选择性表达 比例比例 使用顺序使用顺序 易被微生物降解易被微生物降解 单倍体单倍体 有性有性 解析：理解种子的结构、植物组织培养、生物的生殖以及单倍体育种等知识是解题的关键。(1)制作人工种子的原理是细胞的全能性。(2)脱分化的实质是使不分裂的细胞恢复分裂能力；再分化的实质是使分裂的细胞在形态、结构和功能上再次发生变化，这种变化是基因选择性表达的结果。培养基中生长素和细胞分裂素的浓度、比例和使用顺序将影响脱分化和再分化过程。(3)种子萌发的过程中，需要从外界吸收大量的水分和氧气进行有氧呼吸，因此，人工种皮应该具有透水、透气性；从物质循环的角度来看，人工种皮应该能被微生物降解。(4)通过花药离体培养获得的植株属于单倍体，基因型为DdTt的植物能产生基因组成为DT、Dt、dT和dt的四种花粉，这种通过有性生殖细胞产生后代的生殖方式，属于有性生殖。
