实验动物安全知识.PPT

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1、实验动物安全知识实验动物安全知识实验室安全培训(实验室安全培训(实验室安全培训(实验室安全培训(Safety Training in LaboratorySafety Training in Laboratory)赵勇赵勇 1实验动物实验动物是从事科学研究、教学、生产、检定的重要支撑条件,广泛应用于医药研发、教学实验、药品生产、生物检定等方面。实验动物为人类健康和社会进步作出了巨大贡献。全国一年繁殖实验动物约全国一年繁殖实验动物约1300万只,实际用量在万只,实际用量在1000万只左右,其中万只左右,其中46%为药学实验所消耗。为药学实验所消耗。由于药学领域的大量实验不能直接用人体进行,实验动

2、物具有不可替代性。药学研究常用的实验动物有大、小白鼠,猫、狗、兔子以及非人灵长类,如恒河猴等。引引 言言2引引 言言但是,实验动物在生产、使用过程中,存在但是,实验动物在生产、使用过程中,存在感染、繁殖病原体的可能以及向环境扩散的危险,感染、繁殖病原体的可能以及向环境扩散的危险,产生生物安全问题。产生生物安全问题。3实验动物实验动物:指经人工饲养、繁育,对其携带的微生物及寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚的,应用于科学研究、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。如大白鼠、小白鼠、裸鼠、豚鼠、家兔、比格犬、恒河猴、小型猪等。4KM小鼠C57小鼠裸鼠SD大鼠新西兰兔Hartely豚鼠5概念

3、生物安全生物安全是指对基因修饰生物、病原微生物、是指对基因修饰生物、病原微生物、外来有害生物等生物体可能产生的潜在风险或外来有害生物等生物体可能产生的潜在风险或现实危害的防范和控制。现实危害的防范和控制。换句话说,生物安全是指人们对于由动物、植物、微生物等生物体对人类健康、社会稳定和赖以生存的自然环境可能造成危害的防范。广义上讲生物安全问题生物安全问题是指是指与生物有关的各与生物有关的各种因素种因素对社会、经济、人类健康及生态环境所对社会、经济、人类健康及生态环境所产生的危害或潜在风险。产生的危害或潜在风险。 6“与生物有关的各种因素与生物有关的各种因素”:一是天然的生物因子一是天然的生物因子

4、,主要包括动物、植物和微生物,主要包括动物、植物和微生物。其中由微生物特别是致病性微生物所导致的安全问题,如生物武器、生物恐怖、重大传染病的暴发流行等,是人类社会所面临的最重要、最现实的生物安全问题。二是转基因产品二是转基因产品,主要包括转基因动物、转基因植物和转基因微生物。三是生物科学研究开发应用三是生物科学研究开发应用。科学家为预防控制疾病而进行微生物和生物医学研究时,或人们利用生物技术进行其它研究时,如果防范措施不严,就有可能出现意想不到的安全问题。另外,生物技术的滥用对人类健康、生态环境以及社会、经济都可能造成严重危害。概念7实实验验动动物物生生物物安安全全是对对实验动物可可能能产产生

5、生的的潜潜在风险或现实危害的防范和控制。在风险或现实危害的防范和控制。由实验动物造成的各种风险和危害包括:生产和使用实验动物中的各个环节,如实验动物的引种、保种、繁育、运输、进出口,使用实验动物(包括感染和非感染实验动物)进行动物实验、从事科研活动等过程中实验动物造成的各种危害。概念8实验动物生物安全实验动物生物安全我国对实验动物生物安全实验动物生物安全问题有严格的管理要求,特别是SARS流行之后,我国对从事动物生产、动物实验或利用实验动物进行病原微生物研究,利用实验动物进行转基因、克隆、重组基因等不同级别的感染性实验必须在符合相应等级的生物安全实验室内进行,未经许可的实验室不得开展相关实验。

6、同时,制定了不同级别的生物安全实验室的建筑规范、运行管理规范等一系列认证标准。9我国主要实验动物管理法规我国主要实验动物管理法规1、实验动物管理条例实验动物管理条例2、实验动物质量管理办法实验动物质量管理办法3、实验动物许可证管理办法(试行)实验动物许可证管理办法(试行)4、实验动物种子中心管理办法实验动物种子中心管理办法5、省级实验动物质量检测机构技术审查准省级实验动物质量检测机构技术审查准则则10我国主要实验动物标准我国主要实验动物标准1实验动物微生物等级及监测实验动物微生物等级及监测2实验动物寄生虫等级及监测实验动物寄生虫等级及监测3实验动物环境及设施实验动物环境及设施4哺乳类实验动物的

7、遗传质量控制哺乳类实验动物的遗传质量控制5实验动物配合饲料通用质量标准实验动物配合饲料通用质量标准6实验动物配合饲料卫生标准实验动物配合饲料卫生标准11实验动物分为四级:一级为普通级;二级为清洁级;实验动物分为四级:一级为普通级;二级为清洁级;三级为无特定病原体(三级为无特定病原体(SPF)级;四级为无菌级(包级;四级为无菌级(包括悉生动物)。括悉生动物)。目前比格犬、恒河猴、小型猪等大动物多为普通级,大、小鼠均为清洁级以上,豚鼠、家兔等既有普通级,又有清洁级、SPF级。实验动物设施分为三级:一级为开放系统;二级为屏实验动物设施分为三级:一级为开放系统;二级为屏障系统;三级为隔离系统障系统;三

8、级为隔离系统。实验动物及其设施的等级12隔离系统(Insulationsystem)是以隔离器(Isolator)为主体及其附属装置组成的饲养系统。用作饲养无菌动物和已知菌动物。屏障系统(Barriersystem)这是清洁级、SPF级动物生产或实验的设施。人、实验动物、饲料、饮水、垫料、空气及其它物品均需进行严格的微生物控制。开放系统(Opensystem)只能进行普通级实验动物的生产与实验。实验动物及其设施的等级13实验动物许可证制度近年来,全国已逐步实行实验动物许可证制度:实验动物生产许可证适用于从事实验动物繁育和商业性经营的单位。实验动物使用许可证适用于从事动物实验和利用实验动物生产药

9、品、生物制品的单位。实验动物生产和使用许可证制度是实验动物生物安全的重要保障。实验动物质量合格证明实验动物质量合格证明 + 动物实验设施使用证明动物实验设施使用证明14实验动物生产实验动物生产实验动物生产,包括实验动物的引种、保种、繁育、运输、进出口等过程。实验动物生产的生物安全:实验动物生产的生物安全: 实验动物生产过程中,对实验动物可能造成的各种风险和危害的防范和控制。15实验动物生产的生物安全实验动物生产的生物安全生产许可证生产许可证实验动物引种实验动物引种:实验动物种子来源于国家实验动物保种中心,遗传背景清楚,质量符合国家标准。实给动物保种实给动物保种和繁育繁育:必须由国家或行业主管部

10、门认可的单位进行。实验动物运输实验动物运输:运输实验动物时,所使用的转运工具和笼器具,应当符合所运实验动物的微生物和环境质量控制标准。不同品种、品系、性别和等级的实验动物,不得在同一笼盒内混合装运。16适用于SPF无菌动物饲养或运输适用于SPF/无菌动物饲养或运输小鼠饲养笼大鼠饲养笼17实验动物使用(动物实验)的生物安全实验动物使用(动物实验)的生物安全 一、非感染实验动物使用(动物实验)的生物安全一、非感染实验动物使用(动物实验)的生物安全 是对由非感染实验动物使用过程中造成各种风险和危害的防范与控制。二、感染实验动物使用(动物实验)的生物安全感染实验动物使用(动物实验)的生物安全 是对由感

11、染实验动物使用过程中造成各种风险和危害的防范与控制。18 感染动物实验室潜在的生物危害感染动物实验室潜在的生物危害:1对人员的潜在危害:对人员的潜在危害:人畜共患病的传染实验动物的攻击性:咬伤、抓伤、踢伤等过敏原:动物尿液、唾液、毛发、皮屑等2对环境的潜在危害:对环境的潜在危害:废气:气溶胶、臭氧废水:洗刷用水、手术用水、其它用水废物:垫料、动物尸体或组织、一次性物品等3意外事故。意外事故。191、使用许可证、使用许可证 2、实验相关因素:、实验相关因素:动物:动物实验中所使用的实验动物必须由动物供应部门提供实验动物质量合格证明,严禁从无实验动物质量合格证明的单位或从农贸市场购买动物作为实验动

12、物。实验动物使用(动物实验)的生物安全实验动物使用(动物实验)的生物安全202、实验相关因素:、实验相关因素:环境环境:动物实验环境设施应当符合相应实验动物等级标准的要求,使用合格的饲料、笼具、垫料等用品。屏障环境进行SPF级、清洁级的大、小鼠等小动物实验(配备饲养室及操作室)。普通环境主要进行兔、猫、狗、猴等大动物实验饲养(配备饲养室及操作室)。涉及传染性、中毒性、放射性、致癌性、致突致畸及致死性实验等应有特殊要求的动物实验室,应根据生物安全防护的要求进行建筑或改造,按照有关规定执行。实验动物使用(动物实验)的生物安全实验动物使用(动物实验)的生物安全21不同品种、不同等级和互有干扰的动物实

13、验,不得在同一实验间进行饲养,同一来源、相同品种、品系而用于不同实验目的动物实验饲养,也不得在同一实验间进行。不得将普通级动物带进屏障环境中进行实验,如将实验动物带离屏障环境进行实验,不得再带回屏障环境中进行饲养、实验。 实验动物使用(动物实验)的生物安全实验动物使用(动物实验)的生物安全22实实验验操操作作因因素素:实验人员实验操作过程中做好防护,穿戴好工作衣、帽、口罩、手套,严格按操作规程进行。实验动物使用(动物实验)的生物安全实验动物使用(动物实验)的生物安全23个人防护个人防护实验前的准备:实验前的准备: 1、实验设计过程:、实验设计过程:3R原则原则Reduction 是指在科学研究

14、中使用较少量的动物获取同样多的试验数据是指在科学研究中使用较少量的动物获取同样多的试验数据或使用一定数量的动物能获得更多试验数据的方法。或使用一定数量的动物能获得更多试验数据的方法。Replacement 是指使用其它方法而不用动物所进行的试验或其他研究是指使用其它方法而不用动物所进行的试验或其他研究课题达到某一试验目的。或者说是使用没有知觉的试验材料代替以课题达到某一试验目的。或者说是使用没有知觉的试验材料代替以往使用神志清醒的活的脊椎动物进行试验的一种科学方法。往使用神志清醒的活的脊椎动物进行试验的一种科学方法。Refinement 是指通过改进和完善实验程序减轻或减少给动物造成的疼是指通

15、过改进和完善实验程序减轻或减少给动物造成的疼痛和不安,提高动物福利的方法。痛和不安,提高动物福利的方法。 2、实验器具准备、实验器具准备实验过程中注意实验过程中注意实验结束后清理实验结束后清理实验总结实验总结24个人防护个人防护实验室所用任何个人防护装备应符合国家有关标准的要求。实验室对个人防护装备的选择、使用、维护应有明确的书面规定、程序和使用指导。25实验室防护服实验室应确保具备足够的有适当防护水平的清洁防护服可供使用。不用时,只应将清洁的防护服置于专用存放处。污染的防护服应于适当标记的防漏袋中放置并搬运。每隔适当的时间应更换防护服以确保清洁,当知道防护服已被危险材料污染应立即更换。离开实

16、验室区域之前应脱去防护服。个人防护个人防护26当具潜在危险的物质极有可能溅到工作人员时,应使用塑料围裙或防液体的长罩服。在这种工作环境中,如必要,还应穿戴其它的个人防护装备,如手套、防护镜、面具、头部面部保护罩等。个人防护个人防护27个人防护个人防护面部及身体保护处理样本的过程中,如可产生含生物因子的气溶胶,应在适当的生物安全柜中操作。在处理危险材料时应有许可使用的安全眼镜、面部防护罩或其他的眼部面部保护装置可供使用。28手套手套应在实验室工作时可供使用,以防生物危险、化学品、辐射污染,冷和热,产品污染,刺伤、擦伤和动物抓咬伤等。手套应按所从事操作的性质符合舒服、合适、灵活、握牢、耐磨、耐扎和

17、耐撕的要求,并应对所涉及的危险提供足够的防护。应对实验室工作人员进行选择手套,使用前及使用后的配戴及摘除等培训。应保证:1)所戴手套无漏损;2)戴好手套后可完全遮住手及腕部,如必要,可覆盖实验室长罩服或外衣的袖子;3)在撕破、损坏或怀疑内部受污染时更换手套;4)手套为实验室工作专用。在工作完成或中止后应消毒、摘掉并安全处置。个人防护个人防护29个人防护个人防护鞋鞋应舒适,鞋底防滑。推荐使用皮制或合成材料的不渗液体的鞋类。在从事可能出现漏出的工作时可穿一次性防水鞋套。在实验室的特殊区域(例如有防静电要求的区域)或BSL-3和BSL-4实验室要求使用专用鞋(例如一次性或橡胶靴子)。30呼吸防护当要

18、求使用呼吸防护装备(如面具、个人呼吸器、正压服等)时,其使用和维护的作业指导书应包括在相应活动的安全操作程序手册中。呼吸器应只能按照作业指导书及培训的要求使用。应安排工作场所监控、医学评估和对呼吸器使用者的监督,以确保其始终正确使用该类装备。应对呼吸器作个体适合性测试。进行容易产生高危害气溶胶的操作时,要求同时使用适当的个人防护装备、生物安全柜和/或其它物理防护设备。个人防护个人防护31洗手清除手部污染处理生物危害性材料时,只要可能均必须戴合适的手套。但是这并不能代替实验室人员需要经常地、彻底地洗手。处理完生物危害性材料和动物后以及离开实验室前均必须洗手。大多数情况下,用普通的肥皂和水彻底冲洗

19、对于清除手部污染就足够了。但在高度危险的情况下,建议使用杀菌肥皂。手要完全抹上肥皂,搓洗至少10秒钟,用干净水冲洗后再用干净的纸巾或毛巾擦干(如果有条件,可以使用暖风干手器)。推荐使用脚控或肘控的水龙头。如果没有安装,应使用纸巾或毛巾来关上水龙头,以防止再度污染洗净的手。如果没有条件彻底洗手或洗手不方便,应该用酒精擦手来清除双手的轻度污染。个人防护个人防护32实验动物操作在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前,必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练

20、准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物,使动物少受痛苦。33一、小鼠小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。实验动物操作34实验小鼠的抓取35二、大鼠大鼠的门齿很长,在抓取方法不当而受到惊吓或激怒时易将操作者手指咬伤

21、,所以,不要突然袭击式地去抓它,取用时应轻轻抓住其尾巴后提起,置于实验台上,用玻璃钟罩扣住或置于大鼠固定盒内,这样即可进行尾静脉取血或注射。如要作腹腔注射或灌胃等操作时,实验者应戴上棉纱手套,右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉,但要避免抓其尖端,以防尾巴尖端皮肤脱落,左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤,并将大鼠固定在左手中,右手即可进行操作。实验动物操作36实验大鼠的抓取37三、家兔家兔比较驯服,不会咬人,但脚爪较尖,应避免家兔在挣扎时抓伤皮肤。常用的抓取方法是先轻轻打开笼门,勿使其受惊,随后手伸入笼内,从头前阻拦它跑动。然后一只手抓住兔的颈部皮毛,将兔提起,用另一只手托其臀,或用手抓住背部皮肤提起来,放

22、在实验台上,即可进行采血、注射等操作。因家兔耳大,故人们常误认为抓其耳可以提起,或有人用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。在实验工作中常用兔耳作采血、静脉注射等用,所以家兔的两耳应尽量保持不受损伤。家兔的固定方法有盒式固定和台式固定。盒式固定适用于采血和耳部血管注射,台式固定适用于测量血压、呼吸和进行手术操作等实验动物操作38实验兔的抓取与给药39四、豚鼠豚鼠胆小易惊,抓取时必须稳、准、迅速。先用手掌扣住鼠背,抓住其肩胛上方,将手张开,用手指环握颈部,另一只手托住其臀部,即可轻轻提起、固定。五、蟾蜍抓取蟾蜍时,可先在蟾蜍体部包一层湿布,用左手将其背部贴紧手掌固定,把后肢拉直,并用左手的中指、

23、无名指及小指夹住,前肢可用拇指及食指压住,右手即可进行实验操作。抓取蟾蜍时不要挤压两侧耳部突起的毒腺,以免蟾蜍将毒液射到使用者眼睛里。需要长时间固定时,可将蟾蜍麻醉或毁脑脊髓后,用大头针钉在蛙板上。实验动物操作40六、狗用狗做实验时,为防止其咬伤操作人员,一般先将狗嘴绑住。对实验用狗,如毕格狗或驯服的狗,绑嘴时操作人员可从其侧面靠近并轻轻抚摸颈部皮毛,然后迅速用布带绑住狗嘴;对家养的笨狗或未经驯服的狗,先用长柄捕狗夹夹住狗的颈部,将狗按倒在地,再绑嘴。如果实验需要麻醉,可先使动物麻醉后再移去狗夹。当狗麻醉后,要松开绑嘴布带,以免影响呼吸。实验动物操作41实验狗的抓取固定42实验动物咬伤救治在伤

24、口上方扎止血带,然后用高猛酸钾或双氧水冲洗伤口,并用5石炭酸或硝酸烧灼腐蚀伤处。43标本处理: 动物血液及组织标本立即按实验要求进行分离、冻存或固定等处理后存放。标本及废弃物的处理标本及废弃物的处理44废弃物处理废弃物处理废弃物废弃物是指将要丢弃的所有物品。在实验室内,废弃物最终的处理方式与其污染被清除的情况是紧密相关的。废弃物处理的首要原则是所有感染性材料必须在实验室废弃物处理的首要原则是所有感染性材料必须在实验室内清除污染、高压灭菌或焚烧。内清除污染、高压灭菌或焚烧。动物的尸体(包括冰冻切片检查后的组织)、使用过的垫料、粪便、污水及其它排泄物等不得随意丢弃,应当经过初步处理如包裹或焚烧后再

25、放置在由主管部门(如学校爱卫会、实验动物中心等)指点的地点,统一进行无害化处理。45污染性材料和废弃物的处理污染性材料和废弃物的处理要对感染性物质及其包装物进行鉴别并分别进行处理,相关工作要遵守国家和国际规定。废弃物可以分成以下几类:1、可重复或再使用,或按普通家庭废弃物丢弃的非污染、可重复或再使用,或按普通家庭废弃物丢弃的非污染(非感染性)废弃物。(非感染性)废弃物。2、污染(感染性)锐器、污染(感染性)锐器皮下注射用针头、手术刀、刀皮下注射用针头、手术刀、刀子及破碎玻璃;这些废弃物应收集在带盖的不易刺破的容子及破碎玻璃;这些废弃物应收集在带盖的不易刺破的容器内,并按感染性物质处理。器内,并

26、按感染性物质处理。 3、通过高压灭菌和清洗来清除污染后重复或再使用的污染、通过高压灭菌和清洗来清除污染后重复或再使用的污染材料。材料。4、高压灭菌后丢弃的污染材料。、高压灭菌后丢弃的污染材料。5、直接焚烧的污染材料。、直接焚烧的污染材料。46清除污染:清除污染:1、高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌是清除污染时的首选方法。需是清除污染时的首选方法。需要清除污染并丢弃的物品应装在容器中(如根要清除污染并丢弃的物品应装在容器中(如根据内容物是否需要进行高压灭菌而采用不同颜据内容物是否需要进行高压灭菌而采用不同颜色标记的可以高压灭菌的塑料袋)。色标记的可以高压灭菌的塑料袋)。高压灭菌过的废弃物可以在其他地方焚

27、烧后处理,或在指定垃圾场掩埋处理。废弃物处理废弃物处理47 大多数情况下,下列组合可以确保正确装载大多数情况下,下列组合可以确保正确装载的高压灭菌器的灭菌效果:的高压灭菌器的灭菌效果:1、134、3min2、126、10min3、121、15min4、115、25min废弃物处理废弃物处理48对于高压灭菌后重复使用的污染(有潜在感对于高压灭菌后重复使用的污染(有潜在感染性)材料:染性)材料:任何高压灭菌后重复使用的污染(有潜在感任何高压灭菌后重复使用的污染(有潜在感染性)材料不应事先清洗,任何必要的清洗、染性)材料不应事先清洗,任何必要的清洗、修复必须在高压灭菌或消毒后进行。修复必须在高压灭菌

28、或消毒后进行。废弃物处理废弃物处理49清除污染:清除污染:2、消毒剂消毒剂:应在每个工作台上放置盛放废弃物的容器、盘子或广口瓶,最好是不易破碎的容器(如塑料制品)。当使用消毒剂时,应使废弃物充分接触消毒剂(即不能有气泡阻隔),并根据所使用消毒剂的不同保持适当接触时间。盛放废弃物的容器在重新使用前应高压灭菌并清洗。废弃物处理废弃物处理50含氯消毒剂的推荐使用浓度废弃物处理废弃物处理51清除污染:清除污染: 3 3、焚烧焚烧:在处理那些经过或事先未经清除污:在处理那些经过或事先未经清除污染的动物尸体以及解剖组织或其他实验室废染的动物尸体以及解剖组织或其他实验室废弃物时,焚烧是一种有效的方法。弃物时

29、,焚烧是一种有效的方法。只有在实验室可以控制焚烧炉的条件下,才只有在实验室可以控制焚烧炉的条件下,才能用焚烧代替高压灭菌来处理感染性物质。能用焚烧代替高压灭菌来处理感染性物质。废弃物处理废弃物处理52 废弃的污染(有潜在感染性)材料在丢弃前应放置在防渗漏的容器(如有颜色标记的可高压灭菌塑料袋)中高压灭菌。高压灭菌后,物品可以放在运输容器中运送至焚烧炉。如果实验室中配有焚烧炉,则可以免去高压灭菌:污染材料应放在指定的容器(如有颜色标记的袋子)内直接运送到焚烧炉中。运输用的容器应是防渗漏的,有密闭的盖子。如要重复使用,这些容器在送回实验室再次使用前,应进行消毒清洁。 污染材料的焚烧必须得到公共卫生

30、、环保部门以及实验室的批准。废弃物处理废弃物处理53用以处理潜在感染性微生物或动物组织的所有的实验室物品,在被丢弃前应考虑的主要问题:1、是否已采取规定程序对这些物品进行了有效的清除污染或消毒?2、如果没有,他们是否以规定的方式包裹,以便就地焚烧或运送到其他有焚烧设施的地方进行处理?3、丢弃已清除污染的物品时,是否会对直接参与丢弃的人员,或在设施外可能接触到丢弃物的人员造成任何潜在的生物学或其他方面的危害?废弃物处理废弃物处理54清除表面污染时可以使用次氯酸钠(NaOCl)溶液:含有1有效氯的溶液适于普通的环境卫生设备。处理高危环境时,建议使用高浓度(5g/L)溶液。3过氧化氢溶液也可以作为漂

31、白剂的代用品。可以通过加热多聚甲醛或煮沸福尔马林所产生的甲醛蒸气熏蒸来清除房间和仪器的污染。这是一项需要由专门培训的专业人员来进行的、非常危险的操作。产生甲醛蒸气前,房间的所有开口(如门窗等)都应用密封带或类似物加以密封。熏蒸应当在室温不低于21且相对湿度70%的条件下进行。清除局部环境的污染清除局部环境的污染55 生产和使用的实验动物,必须严格按照国国家家标标准准GB GB 14922.2-200114922.2-2001实实验验动动物物微微生生物物学学等等级级及及监监测测的要求进行检疫和传染病控制。 从饲养室和实验室外引入实验动物时,必须实行隔离检疫。经检疫合格的,才可繁养、使用;从境外引

32、进实验动物时,应当遵守中华人民共和国进出境动植物检疫法和中华人民共和国进出境动植物检疫法实施条例。不得从具有人畜共患传染病的疫区引进动物。实验动物的检疫和传染病控制实验动物的检疫和传染病控制561、隔离饲养,防止交叉感染。2、引进动物要严格检疫:从可信赖的单位引进动物;按国家标准严格检测。3、坚持卫生消毒制度:定期对动物房舍和饲养用具进行消毒。4、饲养管理人员要定期做健康检查。实验动物的检疫原则实验动物的检疫原则575、自繁自养多级保种,提高自我更新能力。6、对实验动物进行免疫接种,提高其防病治病能力;定期检查,发现患病或可疑动物,立即隔离。7、严格防止野生动物进入实验动物场所,对死亡动物进行

33、无害化处理。实验动物的检疫原则实验动物的检疫原则581、人畜共患病毒性疾病:、人畜共患病毒性疾病:流行性出血热、埃博拉病毒感染、马堡病毒疾病、汉坦病毒疾病、淋巴性脉络丛脑膜炎病毒感染、灵长类痘病毒病、麻疹、鸡新城疫、A型肝炎、猴免疫缺陷综合征、狂犬病、流感、节肢动物携带性病毒感染。2、人畜共患立克次氏体病:、人畜共患立克次氏体病:Q热、猫抓热。3、人畜共患细菌性疾病:、人畜共患细菌性疾病:李斯特菌、猴结核病、鸚鹉热、鼠咬热、鼠疫、布氏杆菌病、钩端螺旋体病、沙门氏菌病、志贺氏菌病、肠炎耶森氏菌病。4、人畜共患病原虫性疾病:、人畜共患病原虫性疾病:弓形虫病、黎形虫病、隐孢子虫病、阿米巴原虫病、大肠

34、纤毛虫病。重要的人畜共患病重要的人畜共患病591、病原体:汉坦病毒。传染源带病毒黑线姬鼠和褐家鼠,实验大鼠也偶尔传播。2、传播途径污染尘埃飞扬形成气溶胶吸入感染。带病毒的血、尿污染人皮肤破损处,也使人患病。(一)流行性出血热(肾综合征出血热(一)流行性出血热(肾综合征出血热HFRSHFRS)603、易感者人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔。4、症状潜伏期14天;动物无明显症状;人感染后出现高热、出血、休克、肾功能受损和循环衰竭,严重者死亡。(一)流行性出血热(肾综合征出血热(一)流行性出血热(肾综合征出血热HFRSHFRS)61(二)淋巴细胞性脉络丛脑膜炎淋巴细胞性脉络丛脑膜炎1、传染源淋巴细胞性脉络丛

35、脑膜炎病毒。带病毒野小鼠或实验小鼠为传染源。2、传播途径带病毒小鼠的分泌物、排泄物污染,吸血昆虫传播,胎盘垂直传播。623、易感者人,小鼠、猴、豚鼠、大鼠、地鼠、兔、狗、鸡等。4、症状人感染后表现类似流感样症状,有三种表现:大脑型、内脏型、迟发型。(二)淋巴细胞性脉络丛脑膜炎淋巴细胞性脉络丛脑膜炎63基因修饰动物与生物安全基因修饰动物与生物安全基因修饰技术在很大程度上能对医学、农业生产、药物研究产生很大的促动,现代生物技术可以将无关联的生物品种,包括植物、动物和微生物中的遗传材料相互转移(并且可以指定要转移的基因),并且可以做到突变实验动物的任何一个基因,一段大的DNA序列(包括染色体的倒位和

36、异位),甚至突变一个碱基,有可能产生出新型的动物。 实验动物科学研究中应用基因工程对DNA进行体外操作,添加或删除一个特殊的DNA序列,然后导入早期的胚胎细胞中,产生遗传结构得以修饰的动物。目前利用基因修饰技术已建立了许多理想的人类疾病动物模型。64转基因动物和“基因敲除”动物 携带外源性遗传信息的动物(转基因动物)应当在适合外源性基因产物特性的防护水平下进行操作。特定基因被有目的地删除的动物(“基因敲除”动物)一般不表现特殊的生物危害。 那些表达病毒受体的转基因动物一般不会感染该种系病毒。如果这种动物从实验室逃离并将转移基因传给野生动物群体,那么理论上可以产生储存这些病毒的动物宿主。基因修饰

37、动物与生物安全基因修饰动物与生物安全65脊髓灰质炎病毒的转基因小鼠 由不同实验室获得的表达人脊髓灰质炎病毒受体的转基因小鼠,它们对不同接种途径的脊髓灰质炎病毒的感染都很敏感,所产生的疾病在临床和组织病理学上也与人脊髓灰质炎相类似。但小鼠模型与人不同的是,在口腔接种脊髓灰质炎病毒后,肠道内的病毒复制不充分或没有发生。因此,如果这种转基因小鼠逃到野外,几乎不可能产生脊髓灰质炎病毒新的宿主动物。_ 对于每一种新的转基因动物,应当通过详细研究来确定动物的感染途径、感染所需的病毒接种量以及感染动物传播病毒的范围。此外,应当采取一切措施以确保对受体转基因小鼠的严密防护。基因修饰动物与生物安全基因修饰动物与

38、生物安全66遗传修饰生物体的危险度评估:对与遗传修饰生物体(GMOs)有关的工作进行危险度评估时,应考虑供体和受体宿主生物体的特性。所需考虑的特性包括以下几方面:1、插入基因(供体生物)所直接引起的危害2、与受体宿主有关的危害3、现有病原体性状改变引起的危害:“超级细菌”基因修饰动物与生物安全基因修饰动物与生物安全67插入基因(供体生物)所直接引起的危害: 当已经知道插入基因产物具有可能造成危害的生物学或药理学活性时,则必须进行危险度评估:1、毒素;2、细胞因子;3、激素;4、基因表达调节剂5、毒力因子或增强子;6、致瘤基因序列;7、抗生素耐药性;8、变态反应原。基因修饰动物与生物安全基因修饰

39、动物与生物安全68与受体宿主有关的危害:1、宿主的易感性2、宿主菌株的致病性,包括毒力、感染性和毒素产物3、宿主范围的变化4、接受免疫状况5、暴露后果。基因修饰动物与生物安全基因修饰动物与生物安全69现有病原体性状改变引起的危害许多遗传修饰并不涉及那些产物本身有害的基因,但由于现有非致病性或致病性特征发生了变化,导致可能出现不利的反应。正常的基因修饰可能改变生物体的致病性。为了识别这些潜在的危害,应考虑下列几点(但不限于以下几点):1、感染性或致病性是否增高?2、受体的任何失能性突变是否可以因插入外源基因而克服?3、外源基因是否可以编码其他生物体的致病决定簇?4、如果外源DNA确实含有致病决定

40、簇,那么是否可以预知该基因能否造成GMO的致病性?5、是否可以得到治疗?6、GMO对于抗生素或其他治疗形式的敏感性是否会受遗传修饰结果的影响?7、是否可以完全清除GMO?基因修饰动物与生物安全基因修饰动物与生物安全70实验动物福利实验动物福利实验动物福利与伦理并非新鲜事物,但真正引起实验动物科学家的重视却是近几年的事情。实验动物作为人类的替身,承受了难以想象的痛苦,甚至为人类的健康事业贡献出生命。从伦理学的角度看,它们应该得到人类的尊重、照顾和感谢;从科学的角度看,善待动物与其说是人道主义,还不如说是我们科学实验的需要。动物实验中不恰当的处理,小到抓取动物,大到绳索捆绑、电击,都可能给动物以刺

41、激,产生应激反应,导致实验结果不可靠。所以,实验动物生命的全过程都应当得到良好的照顾,保持实验动物稳定的心理、生理状态,使科学实验得到理想的结果。713R研究,即Replacement(替代)、Reduction(减少)和Refinement(优化),是实验动物伦理学的重要内容。在实验动物替代方面,利用离体培养的器官、组织和细胞代替整体动物,在单克隆抗体产生、病毒疫苗制备、效力和安全试验、细胞膜研究等项目中已广泛使用。还有用低等动物代替高等动物,用物理、化学和信息技术方法代替动物实验,这些替代方法的研究和应用,都减少了实验动物用量。在减少动物用量方面的措施还有:合并使用动物,如利用死亡的动物进

42、行外科手术实验,利用病理解剖实验摘取动物的器官等;改进统计学设计,以少量动物获得大量统计学资料;使用高质量的实验动物,同样可以起到以质量代替数量的作用等。在动物实验的优化方面,通过改良仪器设备,减少动物的痛苦;改善实验室条件,减少对动物的刺激,避免应激反应;优化实验方法,尽量减少实验动物用量。实验动物福利实验动物福利72善待实验动物,就是善待我们自己善待实验动物,就是善待我们自己实验动物为人类的健康和福祉做出了杰出的贡献。为了人类的利益、千千万万实验动物奉献了生命,国外看到的动物“慰灵碑”一直被认为是道德文化的标志。生物多样性正是人类生存与进化不可缺少的环境,保护动物正是为了保护人类。善待动物,就是要给予动物以舒适的居住环境、足够营养的饲料、清洁的饮水、必要的镇静剂、麻醉剂,给予动物人道处死、施行安死术。在科学实验中对待实验动物要温和保定、善良抚慰,减少应激反应。善待实验动物,对于科学工作者来讲就是要让动物处于最佳心理和生理状态,使科学实验在动物身上得到最真实地反映;对于普通百姓来讲,善待动物,动物就会成为我们的朋友,为人们分忧解愁;对于食品行业来讲,人道地宰杀动物,动物的肉质就会鲜美,否则动物会在临终前向肉中释放对人体有害的化学物质。因此,善待动物就是善待我们自己。7374

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