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1、实验一实验一 生物显微镜的使用生物显微镜的使用 和细胞形态学观察和细胞形态学观察一、实验目的一、实验目的熟悉普通光学显微镜的主要结构和基本性能。熟悉普通光学显微镜的主要结构和基本性能。掌握低倍镜、高倍镜和油镜的正确使用方法。掌握低倍镜、高倍镜和油镜的正确使用方法。初步了解光学显微镜的维护方法初步了解光学显微镜的维护方法。二、显微镜的基本构造二、显微镜的基本构造目镜目镜：安装在镜筒上端。在目镜上方刻有：安装在镜筒上端。在目镜上方刻有5 5、1010、2020等为放大等为放大倍数。倍数。从外表上看，目镜镜头越长放大倍数越低。从外表上看，目镜镜头越长放大倍数越低。 物镜物镜：由数组透镜组成，安装在转
2、换器上。每台显微镜上常备：由数组透镜组成，安装在转换器上。每台显微镜上常备有几个不同倍数的物镜，物镜上所刻有几个不同倍数的物镜，物镜上所刻8 8、1010、4040等就是放等就是放大倍数，习惯上把大倍数，习惯上把10102020倍的叫做低倍物镜；倍的叫做低倍物镜；40406060倍的叫做倍的叫做高倍物镜；高倍物镜；9090100100倍的叫做油镜。倍的叫做油镜。物镜越长，放大倍数越高。物镜越长，放大倍数越高。 放大倍数放大倍数= =物镜物镜目镜目镜二、显微镜的基本构造二、显微镜的基本构造镜座镜座镜柱镜柱载物台载物台镜筒镜筒物镜转换器物镜转换器准焦螺旋：使镜筒上升或下降准焦螺旋：使镜筒上升或下降
3、粗准焦螺旋：转动一圈粗准焦螺旋：转动一圈, ,镜筒升降镜筒升降1010毫米毫米细准焦螺旋：转动一圈，镜筒升降细准焦螺旋：转动一圈，镜筒升降0.10.1毫米毫米二、实验原理二、实验原理-成像原理成像原理从成象的原理看，物镜在成象过程中起主要作用。因此，从成象的原理看，物镜在成象过程中起主要作用。因此，物镜质量的优劣直接影响成象的清晰程度，目镜只不过物镜质量的优劣直接影响成象的清晰程度，目镜只不过是放大物镜所成的象，而不能增加成象的清晰度。是放大物镜所成的象，而不能增加成象的清晰度。1. 1. 眼球眼球 2. 2. 晶状体晶状体 3. 3. 目镜目镜 4. 4. 物镜物镜 5. 5. 样品样品 6
4、. 6. 虚像虚像三、材料、试剂和仪器三、材料、试剂和仪器普通光学显微镜普通光学显微镜擦镜纸擦镜纸人血涂片人血涂片香柏油香柏油二甲苯二甲苯 四、显微镜的使用步骤四、显微镜的使用步骤1 1、左手握住镜臂，右手托住镜座，小心地把显微镜从左手握住镜臂，右手托住镜座，小心地把显微镜从柜子内取出，轻轻放在实验桌上。柜子内取出，轻轻放在实验桌上。2 2、先用低倍镜找到清晰的物像。先用低倍镜找到清晰的物像。3 3、将需要观察的部分移到视野的中央。将需要观察的部分移到视野的中央。4 4、眼睛从侧面注视着物镜，用手移动转换器，换高倍眼睛从侧面注视着物镜，用手移动转换器，换高倍镜。镜。5 5、眼睛向目镜内观察，同
5、时转动眼睛向目镜内观察，同时转动细准焦螺旋细准焦螺旋，直至视，直至视野内看到清晰的物像为止。野内看到清晰的物像为止。四、显微镜的使用步骤四、显微镜的使用步骤油镜油镜油镜在使用时，载玻片与物镜之间不是空气，而是充油镜在使用时，载玻片与物镜之间不是空气，而是充满香柏油一类的油质。满香柏油一类的油质。用粗准焦螺旋上提镜筒约用粗准焦螺旋上提镜筒约2 2厘米，将油镜头转至正下方，厘米，将油镜头转至正下方，对准通光孔。对准通光孔。在载玻片上标本的观察部位，滴加镜油在载玻片上标本的观察部位，滴加镜油1 1滴（用香柏油滴（用香柏油或液体石蜡）。或液体石蜡）。然后用肉眼从侧面注视，使用粗准焦螺旋慢慢将镜筒向然后
6、用肉眼从侧面注视，使用粗准焦螺旋慢慢将镜筒向下旋转，直至油镜头浸入油滴，并几乎与标本接触。镜下旋转，直至油镜头浸入油滴，并几乎与标本接触。镜筒向下旋转时，必须小心谨慎，切不可将油镜头压到标筒向下旋转时，必须小心谨慎，切不可将油镜头压到标本上，以免损坏镜头和压碎标本。本上，以免损坏镜头和压碎标本。四、显微镜的使用步骤四、显微镜的使用步骤油镜油镜调节焦距。从目镜内注视视野，用粗准焦螺旋调节调节焦距。从目镜内注视视野，用粗准焦螺旋调节将镜筒将镜筒慢慢上提慢慢上提，当视野中出现模糊的标本形象时，改用细准焦，当视野中出现模糊的标本形象时，改用细准焦螺旋继续调节焦距，直至物象清晰为止。螺旋继续调节焦距，直
7、至物象清晰为止。如果油镜头已离开油面仍未见到物象，应重新按上述步骤如果油镜头已离开油面仍未见到物象，应重新按上述步骤操作。操作。使用后擦拭镜头。油镜头使用后，必须用擦镜纸将镜头上使用后擦拭镜头。油镜头使用后，必须用擦镜纸将镜头上的油擦去，然后再用擦镜纸沾一点的油擦去，然后再用擦镜纸沾一点二甲苯二甲苯擦拭镜头，最后擦拭镜头，最后用擦镜纸擦干。若用液体石蜡则可免去使用二甲苯这一步用擦镜纸擦干。若用液体石蜡则可免去使用二甲苯这一步骤，直接用擦镜纸擦拭镜头即可。骤，直接用擦镜纸擦拭镜头即可。五、使用练习五、使用练习观察显微镜下的气泡观察显微镜下的气泡在载玻片上滴一滴稀胶水，用解剖针搅拌使产生小的气泡，
8、加盖玻片后在显微镜下观察。在显微镜下看到的气泡，其外围为一黑圈，中间为明亮部分。五、使用练习五、使用练习每个小组一张人血涂片，先用每个小组一张人血涂片，先用低倍镜低倍镜，高倍镜高倍镜观察，再练观察，再练习用习用油镜油镜观察。观察。注意比较三种物镜的放大倍数和分辨率有何不同。练习分注意比较三种物镜的放大倍数和分辨率有何不同。练习分辨辨红细胞红细胞、白细胞白细胞和和淋巴细胞淋巴细胞。练习擦洗油镜头和标本片。练习擦洗油镜头和标本片。六、生物绘图法六、生物绘图法1.1.观察观察 绘图前要对被画的对象绘图前要对被画的对象( (植物细胞、组织、器植物细胞、组织、器官以及外形等官以及外形等) )做细心观察，
9、选择有代表性的、典型做细心观察，选择有代表性的、典型的部位起稿。的部位起稿。2.2.起稿起稿 起稿是勾画轮廓的过程：注意位置、大小。起稿是勾画轮廓的过程：注意位置、大小。将绘图纸放在显微镜的右方，左眼观察显微镜图像，将绘图纸放在显微镜的右方，左眼观察显微镜图像，右眼看绘图纸绘图。绘图起草时先用较软的右眼看绘图纸绘图。绘图起草时先用较软的铅笔铅笔(HB)(HB)，将所观察对象的整体和主要部分轻轻描绘在，将所观察对象的整体和主要部分轻轻描绘在绘图纸上，下笔要轻尽量少改不擦。绘图纸上，下笔要轻尽量少改不擦。3.3.定稿定稿 对照所观察的实物，全面检查起稿的草图，对照所观察的实物，全面检查起稿的草图，
10、进行修正和补充，再用进行修正和补充，再用硬铅笔硬铅笔(2H(2H或或3H3H）将草图画出）将草图画出来，之后可将草图擦去。来，之后可将草图擦去。六、生物绘图法六、生物绘图法1.1.线条的要求：线条要均匀、不可时粗时细；线条边缘要线条的要求：线条要均匀、不可时粗时细；线条边缘要圆润、光滑，不可有深浅和虚实的区别。圆润、光滑，不可有深浅和虚实的区别。2.2.点的要求：点的要求：“点点衬阴点点衬阴”法可显示图像的立体感，更富法可显示图像的立体感，更富有形象相生动性。有形象相生动性。粗密点粗密点用来表示背光、凹陷或色彩浓用来表示背光、凹陷或色彩浓重的部位；重的部位；细疏点细疏点用来表示受光面或色彩淡的
11、部位。点用来表示受光面或色彩淡的部位。点点要圆，用笔尖垂直向下打点，根据明暗需要掌握点的点要圆，用笔尖垂直向下打点，根据明暗需要掌握点的疏密变化，切忌采用艺术画的写生画法，不可用涂抹表疏密变化，切忌采用艺术画的写生画法，不可用涂抹表示。示。3.3.植物细胞的生物绘图要求：细胞壁要用平行的双线表示植物细胞的生物绘图要求：细胞壁要用平行的双线表示出原生质体内的结构出原生质体内的结构( (如细胞质、细胞核等如细胞质、细胞核等) )要用不同要用不同疏密的小点表示。一般情况下不要用颜色铅笔或普通铅疏密的小点表示。一般情况下不要用颜色铅笔或普通铅笔涂抹代替小点。细胞与其它细胞相连接处要画出一些笔涂抹代替小
12、点。细胞与其它细胞相连接处要画出一些来，以表示所画的细胞不是孤立的。来，以表示所画的细胞不是孤立的。洋葱鳞片表皮细胞结构简图洋葱鳞片表皮细胞结构简图七、显微镜的图像七、显微镜的图像点对称点对称“b b”“q q”八、思考题八、思考题1.1.安装显微镜时为什么要先装目镜，后装物镜安装显微镜时为什么要先装目镜，后装物镜？2.2.为什么使用高倍镜和油镜时，必须从低倍镜为什么使用高倍镜和油镜时，必须从低倍镜开始？开始？3.3.若在显微镜下观察到细胞质的流动方向是逆若在显微镜下观察到细胞质的流动方向是逆时针方向，则其实际流动的方向应是怎样的时针方向，则其实际流动的方向应是怎样的？4.4.简述使用显微镜的注意事项。简述使用显微镜的注意事项。5.5.绘图示人血涂片的细胞分布。绘图示人血涂片的细胞分布。
