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1、实验一无菌技术及培养基的配制实验一无菌技术及培养基的配制宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验主要参考资料微生物学实验指导:黄秀梨微生物学实验指导:黄秀梨,高等教育出版社,高等教育出版社,2002微生物学实验教程:杨革微生物学实验教程:杨革,科学出版社,科学出版社微生物学教程(第微生物学教程(第2版):周德庆版):周德庆,高等教育出版社,高等教育出版社,2000工业微生物实验操作手册,诸葛健,轻工出版社,工业微生物实验操作手册,诸葛健,轻工出版社,1997。伯杰士细菌系统发育手册、真菌鉴定手册、伯杰士细菌系统发育手册、真菌鉴定手册、酵母鉴定手册、放线菌鉴定手册等工具书酵母
2、鉴定手册、放线菌鉴定手册等工具书宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业微微
3、生生物物与与育育种种学学实实验验(2)培养基制备的一般程序)培养基制备的一般程序调配调配过滤过滤矫正矫正pH分装过滤分装过滤灭菌(一般灭菌(一般121.3,20-30min)鉴定是否有菌鉴定是否有菌放入冰箱冷藏备用放入冰箱冷藏备用鉴定是否有菌可将培养基置于鉴定是否有菌可将培养基置于37 培养培养24小时,然小时,然后观察后观察宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验培养基:培养基:液体培养基;液体培养基;固体培养基;固体培养基;半固体培养基;半固体培养基;宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验固体培养基;固体培养基;半固体培养基;半固体培养基;琼脂琼脂
4、宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验实验室常用培养基实验室常用培养基肉膏蛋白胨培养基:肉膏蛋白胨培养基: 牛肉膏牛肉膏3g3g,蛋白胨,蛋白胨10g10g,NaCl5gNaCl5g,琼脂,琼脂15-20g15-20g,水,水1000ml1000ml,pH7.0-7.2pH7.0-7.2;淀粉琼脂培养基(高氏淀粉琼脂培养基(高氏1 1号培养基):号培养基): 可溶性淀粉可溶性淀粉20g20g,KNOKNO3 31g1g,NaCl0.5gNaCl0.5g,K K2 2HPOHPO4 40.5g0.5g,FeSOFeSO4 40.01g0.01g,琼脂,琼脂20g20g,水,
5、水1000ml1000ml,pH7.0-7.2;pH7.0-7.2;PDAPDA培养基:培养基: 马铃薯(去皮)马铃薯(去皮)200g200g,蔗糖或葡萄糖,蔗糖或葡萄糖15g15g,琼脂,琼脂15-20g15-20g,水,水1000ml;1000ml;宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验因高压之后因高压之后pH值会下降值会下降0.1左右,所以矫正左右,所以矫正pH时应比所需的时应比所需的pH高高宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验e.加棉塞,包装。加棉塞,包装。宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业
6、微微生生物物与与育育种种学学实实验验待分离的微生物生长,其它微生物的生长被抑制t 高温下培养:分离嗜热细菌;t 培养基中不含N:分离固氮菌;t 培养基加抗生素:分离抗性菌;(3)选择培养基宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验富集培养从自然界中分离到所需的特定微生物特定的环境条件仅适应于该条件的微生物旺盛生长待分离微生物在群落中的数量大大增加宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验营养和生理条件几乎可无穷尽组合营养和生理条件几乎可无穷尽组合根据微生物的特殊要求,分离特定已知微生物种类;根据微生物的特殊要求,分离特定已知微生物种类;分离培养在特定环境中能生长的微生物;分离培养在特定环境中能生长的微生物;宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验二元培养物t 病毒和宿主细胞;t 纤毛虫、变形虫和粘细菌捕食细菌等;蛭弧蛭弧菌菌结束语结束语谢谢大家聆听!谢谢大家聆听!25