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1、实验实验4 4微生物菌落的观察微生物菌落的观察目 的 要 求l学会观察、识别各种不同的微生物菌落的方法。学会观察、识别各种不同的微生物菌落的方法。 l掌握平板菌落计数的方法,运用所学的知识详细的描述掌握平板菌落计数的方法,运用所学的知识详细的描述所分离平板上的各种微生物菌落。所分离平板上的各种微生物菌落。l学习并掌握斜面接种的操作技术。学习并掌握斜面接种的操作技术。 酵母菌酵母菌啤酒酵母啤酒酵母菌落菌落一般较细菌菌落大且一般较细菌菌落大且厚,表面湿润,粘稠,易厚,表面湿润,粘稠,易被挑起,多为乳白色、土被挑起,多为乳白色、土黄色,少数呈红色。黄色,少数呈红色。 l常见的酵母菌的菌落常见的酵母菌
2、的菌落菌落形态较大,质地一般比放线菌疏松,外观干燥,菌落形态较大,质地一般比放线菌疏松,外观干燥,不透明,呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状;不透明,呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状;菌落与培养基的连接紧密,不易挑取,菌落正反面菌落与培养基的连接紧密,不易挑取,菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致等的颜色和边缘与中心的颜色常不一致等。霉菌霉菌霉菌的菌落青霉属青霉属 毛霉属毛霉属 l定义定义:根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征而设计的计数方由一个单细胞繁殖而成这一培养特征而设计的计数方法,即法,即一个菌
3、落代表一个单细胞一个菌落代表一个单细胞。统计菌落数目,即。统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。 l对土壤中的微生物进行计数对土壤中的微生物进行计数,将结果填入表将结果填入表2中。中。实实 验验 程程 序序(平板菌落计数)(平板菌落计数)表表2土壤中微生物计数结果土壤中微生物计数结果 稀稀释度度10-510-61g样品活菌数品活菌数12平均平均12平均平均细菌菌菌落菌落数数霉菌霉菌菌落菌落数数计数方法计数方法:每克土壤的菌数每克土壤的菌数=同一同一稀释度
4、稀释度几次重复的菌落平均数几次重复的菌落平均数10稀释倍数稀释倍数 计算结果时,常按下列标准从接种后的计算结果时,常按下列标准从接种后的3个稀释度中选择一个合适的稀释度,求出每个稀释度中选择一个合适的稀释度,求出每克菌剂中的含菌数。克菌剂中的含菌数。(1)同一稀释度各个重复的菌数相差不太悬殊。)同一稀释度各个重复的菌数相差不太悬殊。(2)细菌、放线菌、酵母菌以每皿)细菌、放线菌、酵母菌以每皿30300个菌落为宜,霉菌以每皿个菌落为宜,霉菌以每皿10100个菌个菌落为宜。落为宜。选择好计数的稀释度后,即可统计在平板上长出的菌落数,统计结果按下式计算。选择好计数的稀释度后,即可统计在平板上长出的菌
5、落数,统计结果按下式计算。实实 验验 程程 序序(无菌操作技术(无菌操作技术 ) 在酒精灯火焰旁操作,将所给的两种菌种无在酒精灯火焰旁操作,将所给的两种菌种无菌操作,转接到大试管斜面,并贴标签,培养。菌操作,转接到大试管斜面,并贴标签,培养。点燃酒精灯点燃酒精灯左手夹住两试管:斜面向上,左手夹住两试管:斜面向上,45450 0度角。度角。灼烧接种环灼烧接种环右手拔棉塞,管口过火右手拔棉塞,管口过火取菌取菌标记标记培养培养l将观察到的菌落特征填入表将观察到的菌落特征填入表1中。中。l将平板菌落计数的结果填入表将平板菌落计数的结果填入表2中。中。l斜面接种要注意那些问题?斜面接种要注意那些问题?结果与思考题