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1、刺激强度、频率与骨骼肌收缩的关系,心肌收缩记录与心肌特性邮箱：密码：123456实验二实验目的实验目的实验原理实验原理实验材料实验材料实验内容实验内容注意事项注意事项基本内容实验目的1.坐骨神经腓肠肌标本的制备坐骨神经腓肠肌标本的制备2.观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系。掌握阈刺激，阈下刺激，阈上刺激，最大刺激的概念。3.观察用不同频率的最大刺激刺激坐骨神经对腓肠肌收缩形式的影响，了解和掌握单收缩、复合收缩、强直收缩特征和形成的基本原理。4.观察心肌收缩的特点并与骨骼肌比较。实验原理1. 1. 阈下刺激阈下刺激 阈强度阈强度 阈上刺激阈上刺激 最大刺激最大刺激2. 2. 单收缩单收缩 不完全强
2、直收缩不完全强直收缩- -描记曲线为锯齿形描记曲线为锯齿形 完全强直收缩。完全强直收缩。3.3.心肌心肌- -具有较长的不应期具有较长的不应期 期前收缩期前收缩 代偿间歇代偿间歇蟾蜍、蛙板、手术剪、蟾蜍、蛙板、手术剪、敷料镊、刺针、丝线、玻敷料镊、刺针、丝线、玻璃分针、烧杯、锌铜弓、璃分针、烧杯、锌铜弓、任氏液、滴管、任氏液、滴管、RM6240RM6240信信号采集系统、刺激电极。号采集系统、刺激电极。实验材料一坐骨神经腓肠肌标本制备（第21页）破坏中枢神经系统：将探针自枕骨大孔破坏中枢神经系统：将探针自枕骨大孔( (枕骨大孔定位：以脊柱正中线为纵线，枕骨大孔定位：以脊柱正中线为纵线，两侧眼后
3、毒腺的连线为横线，两线交汇两侧眼后毒腺的连线为横线，两线交汇的凹陷处即为枕骨大孔的凹陷处即为枕骨大孔) )插入，先左右横插入，先左右横断脊髓，再向前搅毁脑，然后再将探针断脊髓，再向前搅毁脑，然后再将探针撤回，反向插入脊椎管破坏脊髓。检查撤回，反向插入脊椎管破坏脊髓。检查蟾蜍四肢全身肌肉完全松驰。蟾蜍四肢全身肌肉完全松驰。 实验内容剪断脊柱：用粗剪刀自剪断脊柱：用粗剪刀自胸部剪断脊柱。胸部剪断脊柱。 剪除前肢及内脏剪除前肢及内脏去皮肤去皮肤 一坐骨神经腓肠肌标本制备分离左右下肢：用粗剪刀沿脊柱中线把标本分离左右下肢：用粗剪刀沿脊柱中线把标本分为左右两半。注意勿损伤神经。分为左右两半。注意勿损伤神
4、经。 分离坐骨神经：大腿背面股二头肌和半膜肌分离坐骨神经：大腿背面股二头肌和半膜肌的夹缝中分离出坐骨神经。的夹缝中分离出坐骨神经。 分离肌肉：分离腓肠肌的跟腱，用线结紧，分离肌肉：分离腓肠肌的跟腱，用线结紧，自跟腱的附着点剪断。提起跟腱将腓肠肌剥自跟腱的附着点剪断。提起跟腱将腓肠肌剥离出来，并将小腿其余部分剪掉，保留一小离出来，并将小腿其余部分剪掉，保留一小段段( (约约1.5cm)1.5cm)股骨，股骨， 一坐骨神经腓肠肌标本制备一坐骨神经腓肠肌标本制备二.刺激强度对肌肉收缩的影响刺激强度对肌肉收缩的影响 1.1.标本与仪器的连接标本与仪器的连接股股骨骨断断端端固固定定于于肌肌槽槽的的插插孔
5、孔中中，神神经经干干搭搭在在刺刺激激电电极极上上，腓肠肌肌腱上的线与换能器相连，换能器与腓肠肌肌腱上的线与换能器相连，换能器与RM6240RM6240相连。相连。 点点击击“实实验验”菜菜单单，选选择择“刺刺激激强强度度对对骨骨骼骼肌肌收收缩缩的的影影响响”，仪仪器器参参数数：通通道道模模式式为为张张力力，采采样样频频率率400Hz-400Hz-1kHz1kHz，扫扫描描速速度度1s/div1s/div，灵灵敏敏度度10-30g10-30g，时时间间常常数数：直直流，滤波频率流，滤波频率100Hz100Hz。1.1.标本与仪器的连接标本与仪器的连接2.2.观察项目：观察项目：刺激方式单刺激，刺
6、激幅度刺激方式单刺激，刺激幅度0.1-3V0.1-3V可调，刺激波可调，刺激波宽宽0.1ms0.1ms。记录阈刺激和最大刺激值。记录阈刺激和最大刺激值。测量每一刺激强度所对应的肌肉收缩张力；测量测量每一刺激强度所对应的肌肉收缩张力；测量最大刺激时肌肉的收缩期和舒张期时间。最大刺激时肌肉的收缩期和舒张期时间。三三. .刺激频率对肌肉收缩的影响刺激频率对肌肉收缩的影响 1.1.点击点击“实验实验”菜单，选择菜单，选择“刺激频率对骨骼肌收缩刺激频率对骨骼肌收缩的影响的影响”，仪器参数：通道模式为张力，采样频率，仪器参数：通道模式为张力，采样频率400Hz-1kHz400Hz-1kHz，扫描速度，扫描
7、速度1s/div1s/div，灵敏度，灵敏度10-30g10-30g，时，时间常数：直流，滤波频率间常数：直流，滤波频率100Hz100Hz。2.2.系统采用频率递增，刺激幅度：最大刺激强度，波系统采用频率递增，刺激幅度：最大刺激强度，波宽宽0.1ms0.1ms，采用自动频率方式，起始频率，采用自动频率方式，起始频率1Hz1Hz，结束，结束频率频率30Hz30Hz，步长，步长1Hz1Hz，串间隔大于，串间隔大于5s5s。刺激频率按。刺激频率按1Hz1Hz，2Hz2Hz，3Hz3Hz，4Hz4Hz，5Hz5Hz30Hz30Hz逐渐增加，连续逐渐增加，连续记录不同频率时的肌肉收缩曲线。记录不同频率
8、时的肌肉收缩曲线。3.3.观察测量各刺激频率所对应的肌肉收缩最大张力。观察测量各刺激频率所对应的肌肉收缩最大张力。 四四. .蛙心收缩记录及心肌特性（蛙心收缩记录及心肌特性（3939页）页）1.1.破坏蟾蜍脑和脊髓，暴露心脏，打开心包膜。破坏蟾蜍脑和脊髓，暴露心脏，打开心包膜。 用用带带有有丝丝线线的的蛙蛙心心夹夹夹夹住住心心尖尖，将将丝丝线线连连在在张张力力换换能能器器上上，再再将将换换能能器器固固定定于于铁铁架架台台上上，调调整整丝丝线线高高度度，并并将将丝丝线线拉拉紧紧。将将刺刺激激电电极极安安放放在在心心室室外外壁壁，使使之之既既不不影影响响心心搏搏又又能能同同心心室室接接触良好。触良
9、好。2.2.张力换能器接张力换能器接RM6240RM6240系统第一通道（也可选择系统第一通道（也可选择其它通道），刺激电极与其它通道），刺激电极与RM6240RM6240刺激输出相连，刺激输出相连，作刺激标记。作刺激标记。 3. 3. 点击点击“实验实验”菜单，选择菜单，选择“期前收缩期前收缩- -代偿间歇代偿间歇”，系统进入实验信号记录状态。仪器参数：第一通，系统进入实验信号记录状态。仪器参数：第一通道，时间常数：直流。滤波频率：道，时间常数：直流。滤波频率：10Hz10Hz，灵敏度，灵敏度3g3g，采样频率，采样频率400Hz400Hz，扫描速度，扫描速度1s/div1s/div，单刺激
10、模式，单刺激模式，阈上刺激强度阈上刺激强度2-5V2-5V，刺激波宽，刺激波宽5ms5ms。四四. .蛙心收缩记录及心肌特性蛙心收缩记录及心肌特性仪器连接仪器连接在制备标本时，避免过度牵拉神经，避免用在制备标本时，避免过度牵拉神经，避免用手或金属器械触碰神经干。手或金属器械触碰神经干。避免动物皮肤分泌物（蟾酥、血液等）污染避免动物皮肤分泌物（蟾酥、血液等）污染神经和肌肉；不要用水冲洗，以免影响组织神经和肌肉；不要用水冲洗，以免影响组织机能。机能。制备标本时，要随时用任氏液润湿神经和肌制备标本时，要随时用任氏液润湿神经和肌肉，防止干燥。肉，防止干燥。分离神经时，要把周围结缔组织剥离干净。分离神经
11、时，要把周围结缔组织剥离干净。实验要迅速，以免时间过长影响标本活性实验要迅速，以免时间过长影响标本活性 注意事项注意事项 注意事项注意事项肌肉与换能器的连接松紧适当。肌肉与换能器的连接松紧适当。给予刺激时，在按刺激器手动开关的同时，按给予刺激时，在按刺激器手动开关的同时，按下记录仪的下记录仪的“标记标记”，记录刺激标记，用于计，记录刺激标记，用于计算肌肉收缩的潜伏期。算肌肉收缩的潜伏期。每改变一次刺激频率后，应休息每改变一次刺激频率后，应休息0.5-1 min, 0.5-1 min, 每每次刺激不要超过次刺激不要超过3-4 3-4 秒，以免标本疲劳。秒，以免标本疲劳。实验过程中应常用任氏液润湿
12、标本，以免影响实验过程中应常用任氏液润湿标本，以免影响神经和肌肉活性。神经和肌肉活性。 NaCl NaCl 6.5 g 6.5 g KCl KCl 0.14 g 0.14 g CaCl CaCl2 2 0.12 g 0.12 g NaHCO NaHCO3 3 0.2 g 0.2 g NaH NaH2 2POPO4 4 0.01 g 0.01 g Glc( Glc(可不加可不加可不加可不加) ) 2.0 g 2.0 g H H2 2OO 至至至至1000 mL1000 mL任氏液配方：任氏液配方：刺激强度对肌肉收缩的影响刺激强度对肌肉收缩的影响 刺激频率对肌肉收缩的影响刺激频率对肌肉收缩的影响
