药理学动物实验基本方法ppt课件

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1、药理学动物实验基本方法药理学动物实验基本方法药学院药理学科组药学院药理学科组Contents实验动物的捉持与给药实验动物的捉持与给药1实验动物的编号和分组实验动物的编号和分组2实验动物的麻醉实验动物的麻醉34实验动物的采血实验动物的采血2大鼠大鼠豚鼠豚鼠家兔家兔犬犬一、捉持与给一、捉持与给一、捉持与给一、捉持与给药药药药小鼠小鼠3小鼠的捉持小鼠的捉持1 1 1 1、用右手拇指、用右手拇指、用右手拇指、用右手拇指和食指捏住小鼠和食指捏住小鼠和食指捏住小鼠和食指捏住小鼠尾巴中部将小鼠尾巴中部将小鼠尾巴中部将小鼠尾巴中部将小鼠提起，放在饲养提起，放在饲养提起，放在饲养提起，放在饲养合的面罩上。合的面

2、罩上。合的面罩上。合的面罩上。用左手拇指和用左手拇指和用左手拇指和用左手拇指和食指迅速、准食指迅速、准食指迅速、准食指迅速、准确地捏住小鼠确地捏住小鼠确地捏住小鼠确地捏住小鼠的两耳后及颈的两耳后及颈的两耳后及颈的两耳后及颈背部的皮肤，背部的皮肤，背部的皮肤，背部的皮肤，将小鼠提起。将小鼠提起。将小鼠提起。将小鼠提起。翻翻翻翻转转转转左左左左手手手手掌掌掌掌，以以以以左左左左手手手手掌掌掌掌心心心心和和和和中中中中指指指指夹夹夹夹小小小小鼠鼠鼠鼠背背背背部部部部的的的的皮皮皮皮肤肤肤肤，使使使使小小小小鼠鼠鼠鼠整整整整个个个个呈呈呈呈一一一一条直线。条直线。条直线。条直线。用左手拇指和用左手拇指

3、和用左手拇指和用左手拇指和食指迅速、准食指迅速、准食指迅速、准食指迅速、准确地捏住小鼠确地捏住小鼠确地捏住小鼠确地捏住小鼠的两耳后及颈的两耳后及颈的两耳后及颈的两耳后及颈背部的皮肤，背部的皮肤，背部的皮肤，背部的皮肤，将小鼠提起。将小鼠提起。将小鼠提起。将小鼠提起。4大鼠的捉持大鼠的捉持首先戴好防护手首先戴好防护手首先戴好防护手首先戴好防护手套套套套用右手拇指和用右手拇指和用右手拇指和用右手拇指和食指抓住大鼠食指抓住大鼠食指抓住大鼠食指抓住大鼠尾巴中部将大尾巴中部将大尾巴中部将大尾巴中部将大鼠提起，放在鼠提起，放在鼠提起，放在鼠提起，放在大鼠饲养盒的大鼠饲养盒的大鼠饲养盒的大鼠饲养盒的面罩上。

4、面罩上。面罩上。面罩上。 左手顺势按、左手顺势按、左手顺势按、左手顺势按、卡在大鼠躯干卡在大鼠躯干卡在大鼠躯干卡在大鼠躯干背部，稍加压背部，稍加压背部，稍加压背部，稍加压力向头颈部滑力向头颈部滑力向头颈部滑力向头颈部滑行。行。行。行。以左手拇指和以左手拇指和以左手拇指和以左手拇指和食指捏住大鼠食指捏住大鼠食指捏住大鼠食指捏住大鼠两耳后部的头两耳后部的头两耳后部的头两耳后部的头颈皮肤，其余颈皮肤，其余颈皮肤，其余颈皮肤，其余三指和手掌握三指和手掌握三指和手掌握三指和手掌握住大鼠背部皮住大鼠背部皮住大鼠背部皮住大鼠背部皮肤，完成抓取肤，完成抓取肤，完成抓取肤，完成抓取固定。固定。固定。固定。5豚鼠

5、的捉持豚鼠的捉持先用左手轻轻扣、先用左手轻轻扣、先用左手轻轻扣、先用左手轻轻扣、按住豚鼠背部。按住豚鼠背部。按住豚鼠背部。按住豚鼠背部。顺势抓紧其肩顺势抓紧其肩顺势抓紧其肩顺势抓紧其肩胛上方皮肤，胛上方皮肤，胛上方皮肤，胛上方皮肤，拇指和食指环拇指和食指环拇指和食指环拇指和食指环箍其颈部。箍其颈部。箍其颈部。箍其颈部。用右手轻轻托用右手轻轻托用右手轻轻托用右手轻轻托住其臀部，住其臀部，住其臀部，住其臀部，即可将豚鼠抓即可将豚鼠抓即可将豚鼠抓即可将豚鼠抓取固定。取固定。取固定。取固定。6兔的捉持兔的捉持用右手抓住兔颈用右手抓住兔颈用右手抓住兔颈用右手抓住兔颈部的被毛和皮肤，部的被毛和皮肤，部的被

6、毛和皮肤，部的被毛和皮肤，轻轻把兔提起。轻轻把兔提起。轻轻把兔提起。轻轻把兔提起。用左手托住兔用左手托住兔用左手托住兔用左手托住兔的臀部的臀部的臀部的臀部家兔的固定方家兔的固定方家兔的固定方家兔的固定方式有腹卧式和式有腹卧式和式有腹卧式和式有腹卧式和仰卧式两种仰卧式两种仰卧式两种仰卧式两种 7犬的捉持犬的捉持实验者先抚摩，实验者先抚摩，实验者先抚摩，实验者先抚摩，逐步接近，勿使逐步接近，勿使逐步接近，勿使逐步接近，勿使其惊恐或将其激其惊恐或将其激其惊恐或将其激其惊恐或将其激怒。怒。怒。怒。 用粗棉绳兜住用粗棉绳兜住用粗棉绳兜住用粗棉绳兜住狗的下颌，并狗的下颌，并狗的下颌，并狗的下颌，并在上颌打

7、结在上颌打结在上颌打结在上颌打结（勿太紧）。（勿太紧）。（勿太紧）。（勿太紧）。 如犬不合作，如犬不合作，如犬不合作，如犬不合作，则先用一根特则先用一根特则先用一根特则先用一根特制长柄狗头夹，制长柄狗头夹，制长柄狗头夹，制长柄狗头夹，从后面夹住犬从后面夹住犬从后面夹住犬从后面夹住犬颈，限制犬头颈，限制犬头颈，限制犬头颈，限制犬头部活动，再按部活动，再按部活动，再按部活动，再按上述方法捆住上述方法捆住上述方法捆住上述方法捆住犬嘴。犬嘴。犬嘴。犬嘴。 实验动物的捉拿.MPG8灌胃给药灌胃给药大小鼠大小鼠1 1 1 1、将灌胃针连将灌胃针连将灌胃针连将灌胃针连接在注射器上，接在注射器上，接在注射器上

8、，接在注射器上，吸入一定量的药吸入一定量的药吸入一定量的药吸入一定量的药液。液。液。液。左手捉持动物，左手捉持动物，左手捉持动物，左手捉持动物，使头部向上。使头部向上。使头部向上。使头部向上。右手持针，把右手持针，把右手持针，把右手持针，把灌胃针头的前灌胃针头的前灌胃针头的前灌胃针头的前端放进动物的端放进动物的端放进动物的端放进动物的口腔，顺着上口腔，顺着上口腔，顺着上口腔，顺着上腭部插入咽部，腭部插入咽部，腭部插入咽部，腭部插入咽部，顺咽后壁轻轻顺咽后壁轻轻顺咽后壁轻轻顺咽后壁轻轻往下推。往下推。往下推。往下推。用右手食指将用右手食指将用右手食指将用右手食指将针栓慢慢往下针栓慢慢往下针栓慢慢

9、往下针栓慢慢往下压，将注射器压，将注射器压，将注射器压，将注射器中的药液灌入中的药液灌入中的药液灌入中的药液灌入动物的胃中。动物的胃中。动物的胃中。动物的胃中。剂量：小鼠约剂量：小鼠约剂量：小鼠约剂量：小鼠约0.1-0.5ml0.1-0.5ml10g10g体重。最大体积为体重。最大体积为体重。最大体积为体重。最大体积为1.0ml/1.0ml/只只只只 大鼠约大鼠约大鼠约大鼠约1-2 ml1-2 ml100g100g体重，最大体积为体重，最大体积为体重，最大体积为体重，最大体积为1.0ml/1.0ml/只只只只9灌胃给药灌胃给药兔兔将兔放进固将兔放进固将兔放进固将兔放进固 定架定架定架定架内，灌

10、胃者用左内，灌胃者用左内，灌胃者用左内，灌胃者用左手拇指和中指挤手拇指和中指挤手拇指和中指挤手拇指和中指挤压兔两颊，将下压兔两颊，将下压兔两颊，将下压兔两颊，将下颌挤开使兔被动颌挤开使兔被动颌挤开使兔被动颌挤开使兔被动张口。张口。张口。张口。 右手将开口器右手将开口器右手将开口器右手将开口器从一侧口角插从一侧口角插从一侧口角插从一侧口角插入口腔并固定。入口腔并固定。入口腔并固定。入口腔并固定。胃管经开口器胃管经开口器胃管经开口器胃管经开口器的孔插入，向的孔插入，向的孔插入，向的孔插入，向前推进约前推进约前推进约前推进约15cm15cm，可达胃内。，可达胃内。，可达胃内。，可达胃内。在插管时应将

11、在插管时应将在插管时应将在插管时应将胃管另一端泡胃管另一端泡胃管另一端泡胃管另一端泡在水中确认没在水中确认没在水中确认没在水中确认没有冒气泡，即有冒气泡，即有冒气泡，即有冒气泡，即可用注射器经可用注射器经可用注射器经可用注射器经 胃管注入药胃管注入药胃管注入药胃管注入药液。液。液。液。豚鼠灌胃同豚鼠灌胃同家兔家兔10皮下注射给药皮下注射给药大小鼠大小鼠颈背部、腋下、颈背部、腋下、颈背部、腋下、颈背部、腋下、腹侧和后肢的皮腹侧和后肢的皮腹侧和后肢的皮腹侧和后肢的皮下下下下注射针头取一注射针头取一注射针头取一注射针头取一锐角角度锐角角度锐角角度锐角角度刺入刺入刺入刺入皮下。皮下。皮下。皮下。将针头

12、轻轻向将针头轻轻向将针头轻轻向将针头轻轻向左右左右左右左右 摆动，摆动，摆动，摆动，易易易易摆动摆动摆动摆动则表示已则表示已则表示已则表示已 刺入皮下。刺入皮下。刺入皮下。刺入皮下。再轻轻再轻轻再轻轻再轻轻抽吸抽吸抽吸抽吸， 如无回血，如无回血，如无回血，如无回血，可缓慢地将可缓慢地将可缓慢地将可缓慢地将 药物注入皮下药物注入皮下药物注入皮下药物注入皮下11静脉注射给药静脉注射给药大小鼠大小鼠将大小鼠放在金将大小鼠放在金将大小鼠放在金将大小鼠放在金属笼或小鼠固定属笼或小鼠固定属笼或小鼠固定属笼或小鼠固定器器器器 中，通过金属中，通过金属中，通过金属中，通过金属笼或笼或笼或笼或大小鼠固定大小鼠固

13、定大小鼠固定大小鼠固定器器器器的孔拉出鼠尾的孔拉出鼠尾的孔拉出鼠尾的孔拉出鼠尾巴巴巴巴用左手捏住鼠用左手捏住鼠用左手捏住鼠用左手捏住鼠尾巴中下部，尾巴中下部，尾巴中下部，尾巴中下部，用用用用7575 酒精棉球反酒精棉球反酒精棉球反酒精棉球反复擦拭尾部复擦拭尾部复擦拭尾部复擦拭尾部注射时，以左注射时，以左注射时，以左注射时，以左手拇指和中指手拇指和中指手拇指和中指手拇指和中指捏住鼠尾两侧，捏住鼠尾两侧，捏住鼠尾两侧，捏住鼠尾两侧，用食指从下面用食指从下面用食指从下面用食指从下面托起尾，托起尾，托起尾，托起尾，右手持右手持右手持右手持4 4号针号针号针号针头的注射器，头的注射器，头的注射器，头的注

14、射器，使针头与使针头与使针头与使针头与 静脉平行静脉平行静脉平行静脉平行（小于（小于（小于（小于3030度角）度角）度角）度角）大鼠亦可用大鼠亦可用舌下静脉注舌下静脉注射射12静脉注射给药静脉注射给药犬犬前肢皮下头静脉前肢皮下头静脉前肢皮下头静脉前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉或后肢小隐静脉或后肢小隐静脉或后肢小隐静脉注射注射注射注射 。先将注射部位毛先将注射部位毛先将注射部位毛先将注射部位毛剪去剪去剪去剪去 。在静脉血管的在静脉血管的在静脉血管的在静脉血管的近心端，用乳近心端，用乳近心端，用乳近心端，用乳胶管扎紧肢体，胶管扎紧肢体，胶管扎紧肢体，胶管扎紧肢体，使血管充盈，使血管充盈，使血管充盈，

15、使血管充盈，注射器针头向注射器针头向注射器针头向注射器针头向静脉血管的近静脉血管的近静脉血管的近静脉血管的近心端方向穿刺心端方向穿刺心端方向穿刺心端方向穿刺 。回抽注射器针回抽注射器针回抽注射器针回抽注射器针栓，如有回血，栓，如有回血，栓，如有回血，栓，如有回血，则证明针尖在则证明针尖在则证明针尖在则证明针尖在血管内，即可血管内，即可血管内，即可血管内，即可推注药液。推注药液。推注药液。推注药液。 13静脉注射给药静脉注射给药兔兔兔放在固定架内，兔放在固定架内，兔放在固定架内，兔放在固定架内，酒精消毒并揉搓酒精消毒并揉搓酒精消毒并揉搓酒精消毒并揉搓血管，使兔的耳血管，使兔的耳血管，使兔的耳血管

16、，使兔的耳缘静脉充盈。缘静脉充盈。缘静脉充盈。缘静脉充盈。 用左手食指和中用左手食指和中用左手食指和中用左手食指和中指夹住兔的耳缘指夹住兔的耳缘指夹住兔的耳缘指夹住兔的耳缘静脉的近端，拇静脉的近端，拇静脉的近端，拇静脉的近端，拇指绷紧静脉的远指绷紧静脉的远指绷紧静脉的远指绷紧静脉的远端，无名指和小端，无名指和小端，无名指和小端，无名指和小指放在耳郭下作指放在耳郭下作指放在耳郭下作指放在耳郭下作垫。垫。垫。垫。右手拿注射器，右手拿注射器，右手拿注射器，右手拿注射器，针尖的斜面朝针尖的斜面朝针尖的斜面朝针尖的斜面朝上，将针上，将针上，将针上，将针 头从远心端插头从远心端插头从远心端插头从远心端插入

17、血管入血管入血管入血管回抽有血即可回抽有血即可回抽有血即可回抽有血即可注射，拔针后注射，拔针后注射，拔针后注射，拔针后用棉球止血用棉球止血用棉球止血用棉球止血豚鼠可用足豚鼠可用足背静脉注射背静脉注射实验动物的实验动物的给药给药.MPG14u二、实验动物的采血二、实验动物的采血 5 52 23 31 1尾尖采血尾尖采血尾尖采血尾尖采血眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血断头采血断头采血断头采血断头采血腹主动脉采血腹主动脉采血4 4心脏采血心脏采血心脏采血心脏采血腹主动脉采血腹主动脉采血腹主动脉采血腹主动脉采血6 6静脉采血静脉采血静脉采血静脉采血15方法：方法：固定动物并露出

18、鼠尾，将尾部在45的温水中浸泡数分钟（或以二甲苯棉球涂擦），使尾部血管扩张。将鼠尾擦干，用锐器切去尾尖0.30.5cm，让血液滴入盛器或直接以血红蛋白吸管吸取。对象：对象：大、小鼠特点：特点：小量采血，可以多次采血。 1尾尖采血尾尖采血16方法：方法：用左手捉鼠，拇指及中指抓住头颈部皮肤，食指按于眼后，使眼球轻度突出，眼底球后静脉丛淤血。右手持取内径为取内径为1.0-1.5mm1.0-1.5mm的玻璃毛细管（临用前折断成的玻璃毛细管（临用前折断成1-1.5cm1-1.5cm长的毛细管长的毛细管段，浸入段，浸入1 1肝素溶液中，干燥后用）肝素溶液中，干燥后用）刺入深度小鼠23mm，大鼠45mm。

19、当感到有阻力时再稍后退，得到所需要的血量后，拔出。 对象：对象：大、小鼠等。特点：特点：中等血量（0.20.3ml，小鼠；0.51.0ml，大白鼠），避免动物死亡。2眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血17方法：方法：左手以拇指和食指保持动物的头颈部，使其头略下倾，右手持剪刀猛力剪断鼠颈，让血液滴入盛器。 对象：对象：大、小鼠等。特点：特点：需要血量较大（小白鼠可采血0.81.0ml，大白鼠可采血5.08.0ml） ，且不需要继续保存动物生命时用本法。3断头采血断头采血 18方法：方法：动物要麻醉后进行，用针管在腹主动脉分叉处，与血管平行刺入。对象：对象：大、小鼠等。特点：

20、特点：需要血量较大，且不需要继续保存动物生命时用本法。4腹主动脉采血腹主动脉采血腹主动脉采血腹主动脉采血19方法：方法：将动物背位固定，在左胸第2至第4肋间剪毛一块，用碘酒和酒精消毒。然后用配有7号针头的10ml注射器，在心跳最明显处作穿刺。针头刺入心脏后即见血液流入注射器；或边刺边抽，直至血液流入注射器。取得所需血量后，迅速将针头拔出，这样心肌上的穿刺孔较易闭合。 对象：对象：兔、豚鼠等。特点：特点：采血量较大，继续保存动物生命。5心脏采血心脏采血20方法：方法：将家兔放在固定箱内，剪去拟采血耳壳上的毛，用电灯照射加热或用二甲苯棉球涂擦耳壳，使耳部血管扩张。用粗针头刺破耳缘静脉或以刀片在血管

21、上切一小口，让血液自然流出，滴入已放有抗凝剂的盛器中。采血完毕，用干棉球压住出血口，以待止血。如一时不易止血，可用木夹夹住耳壳1020分钟。 对象：对象：犬在前肢静脉、后肢小隐静脉采血；小型猪为耳大静脉、后肢静脉特点：特点：采血量较大，继续保存动物生命。6静脉采血静脉采血21三、实验动物编号与分组三、实验动物编号与分组（一）编号（一）编号： 1 1、单单色色涂涂染染法法：在在每每组组动动物物不不超超过过l0l0只只或或一一个个实验不超过实验不超过4040只的情况下适用。只的情况下适用。 实验动物：大鼠、小鼠。实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色常用染色剂：3-53-5苦味酸溶液，苦味酸溶液， 可染

22、成黄色。可染成黄色。22 方法步骤：方法步骤： (1)(1)涂染原则：从左到右、从上到下。涂染原则：从左到右、从上到下。 (2)(2)左前肢为左前肢为l l号、左侧腹部号、左侧腹部2 2号、号、 左后肢左后肢3 3号。号。 (3)(3)两耳后部两耳后部4 4号、背中部号、背中部5 5号、号、 后肢背部后肢背部6 6号。号。 (4)(4)右前肢右前肢7 7号、号、 右侧腹部右侧腹部8 8号、号、 右后肢右后肢9 9号。号。 (5)(5)尾巴根尾巴根为1010号。号。（6 6）额部部为2020号号23 2 2、双色涂染法：、双色涂染法： 在每组动物不超过在每组动物不超过100100只的情况下用。只

23、的情况下用。 实验动物：大鼠、小鼠。实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色剂常用染色剂： (1)3-5(1)3-5苦味酸溶液苦味酸溶液，可染成黄色。，可染成黄色。 作为作为“个个”位数。位数。 (2) 0.5%(2) 0.5%中性中性红或品或品红溶液溶液，可染，可染 成成红色。色。作作为“十十”位数。位数。 24方法步骤：方法步骤： (1) (1) 用两种颜色同时进行染色标记。用两种颜色同时进行染色标记。 (2) (2) 用苦味酸用苦味酸( (黄色黄色) )染色染色标记作作为个位数。个位数。(3) (3) 用品红用品红( (红色红色) )染色标记作为十位数，染色标记作为十位数，（4 4）左前肢为）左

24、前肢为1010号、号、 左侧腹部左侧腹部2020号、号、 左后肢左后肢3030号，号， 两耳后部两耳后部4040号、号、 背部背部5050号、号、 后肢背部后肢背部6060号，号， 右前肢右前肢7070号、号、 右右侧腹部腹部 8080号、号、 右后肢右后肢9090号号 第第100100号不作染色号不作染色标记。 253 3、穿耳孔法、穿耳孔法 用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺口表示一定号码的方法，口表示一定号码的方法，原则是：左耳代表十位，右耳代原则是：左耳代表十位，右耳代表个位。表个位。实验动物：兔、犬、猪实验动物：兔、犬、猪4 4、标牌

25、法、标牌法 一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上或一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上或 实验动物：犬、猴实验动物：犬、猴5 5、烙印法、烙印法6 6、剪毛法、剪毛法26三、实验动物编号与分组三、实验动物编号与分组（二）分组（二）分组：1 1、组别的要求：、组别的要求： 正常对照组正常对照组 模型组模型组 阳性药组阳性药组 药物不同剂量组药物不同剂量组27（1 1）正常对照组）正常对照组 要求不加任何处理，指在正常条件下进行观察和对照，给药组如是灌胃给药，对照组应用灌胃溶剂。 目的对比观察模型是否成功；观察被试药能否使病理改变恢复正常。（2 2）阳性药对照组）阳性药对照组 要求所选药必须是药典所有的或国家

26、批准的药，如用西药，则采用公认的，疗效可靠的。 目的说明所用方法的可靠性；对比新药的优劣和特点。（3 3）模型对照组）模型对照组 要求除不用药外，其他处理同给药组，模型要符合中医证或病的模型。 目的对比观察受试药的药理作用。28（4 4）药物组）药物组一般应设三个剂量组，大动物，操作特殊困难者可设两个剂量组；能够测出LD50的受试药物，动物试验给药剂量一般为1/101/5 LD50；很多中药制剂毒性甚小，无法测出LD50者，一般常用人用剂量（g或mg生药/kg体重）来折算动物用量；正式实验时常以等效剂量作为中剂量或小剂量，大、中、小剂量差以23的等比级数为宜； 2930完全随机分组完全随机分组

27、 完完全全随随机机分分组组时时将将试试验验对对象象完完全全按按随随机机原原则则分分组组。它它的的设设计计、分组、和统计处理都比较简单，但试验效率较低。分组、和统计处理都比较简单，但试验效率较低。 例：将例：将3030只只SD SD 大鼠随机分配到甲、乙、丙大鼠随机分配到甲、乙、丙3 3组。组。 使用使用excelexcel对试验对象完全随机分组的操作步骤如下对试验对象完全随机分组的操作步骤如下: : （二）分组的方法（二）分组的方法311.1.在在单单元元格格A1A1、B1B1、C1C1中中分分别别键键入入编编号号、随随机机号号、分分组组号号，随随后后在在A2A2、A3A3中中分分别别键键入入

28、1 1、2 2，然然后后拖拖动动鼠鼠标标利利用用excelexcel的自动填充功能完成的自动填充功能完成1 13030的编号。的编号。 2.2.在在B2B2单单元元格格键键入入“=RAND()=RAND()”后后回回车车产产生生一一个个随随机机数数字字，然然后后同同样样利利用用其其自自动动填填充充功功能能在在B2B2B31B31生生成成一一列列随随机机数数。需需注注意意的的是是这这里里产产生生的的随随机机数数是是会会随随着着单单元元格格的的操操作作而而变变化化的的。故故需需选选中中“B2B2”至至“B31B31”单单元元格格区区域域, ,复复制制所选中的区域所选中的区域, ,并以数据格式进行选

29、择性粘贴。并以数据格式进行选择性粘贴。 323.3.选选中中A A 列列、B B 列列, ,单单击击菜菜单单栏栏“数数据据”“排排序序”, ,在在弹弹出出的的对对话话框框中中, ,选选择择以以随随机机数数”为为排排序的序的“主要关键字主要关键字”, ,按按“确定确定”按扭按扭, ,则按则按B B 列随机数字的大小完成列随机数字的大小完成A A 列、列、B B 列的排序。列的排序。 4.4.分分别别在在C2C2C11C11、C12C12C21 C21 和和C22C22C31 C31 单单元元格格中中, ,依依次次键键入入“1 1”、“2 2”、“3 3”; ;用用鼠鼠标标同同时时选选中中A A、

30、B B、C C 列列, ,单单击击菜菜单单栏栏“数数据据”“排排序序”命命令令, ,在在弹弹出出的的“排排序序”对对话话框框中中, ,选选择择以以“编编号号”为排序的为排序的“主要关键字主要关键字”, ,这样就可以得到各个实验对象的分组编号。（见表这样就可以得到各个实验对象的分组编号。（见表1 1）33随机区组分组随机区组分组 随随机机区区组组分分组组是是按按照照一一定定条条件件，将将几几个个条条件件相相同同的的试试验验对对象象分分为为一一个个区区组组，然然后后在在每每个个区区组组内内部按随机化原则，将每个对象分配到各组。部按随机化原则，将每个对象分配到各组。 例例：将将SDSD大大鼠鼠323

31、2只只，体体重重180g180g220g,220g,按按体体重重大大小小配配成成8 8 个个单单位位组组, ,每每个个单单位位组组中中的的4 4 只只大大鼠鼠随随机分配接受机分配接受A A、B B、C C、D 4 D 4 种处理种处理, ,试给出随机化分组的结果试给出随机化分组的结果 1.1.在在单单元元格格A1A1、B1B1、C1C1中中分分别别键键入入编编号号、区区组组号号、随随机机号号，随随后后在在A2A3A2A3中中分分别别键键入入1 1、2 2，然然后后拖拖动动鼠标利用鼠标利用excelexcel的自动填充功能完成的自动填充功能完成1 13232的编号。的编号。 2.2.在在C2C2

32、单单元元格格键键入入“=RAND()=RAND()”后后回回车车产产生生一一个个随随机机数数字字，然然后后同同样样利利用用其其自自动动填填充充功功能能在在C2C2C33C33生生成成一一列列随随机机数数。需需注注意意的的是是这这里里产产生生的的随随机机数数是是会会随随着着单单元元格格的的操操作作而而变变化化的的。故故需需选选中中“C2C2”至至“C33C33”单元格区域单元格区域, ,复制所选中的区域复制所选中的区域, ,并以数据格式进行选择性粘贴。并以数据格式进行选择性粘贴。 343.3.选选中中A A、B B、C C 列列, ,单单击击菜菜单单栏栏“数数据据”“排排序序”, ,在在弹弹出出

33、的的“排排序序”对对话话框框中中, ,选选择择以以“区区组组”为为“主主要要关关键键字字”排排序序“, , 随随机机数数”为为“次次要要关关键键字字”排排序序, ,然然后后, ,单单击击“确确定定”按按钮钮, ,即即完完成成以以区区组单位的随机数字排序组单位的随机数字排序4.4.分分别别在在C2C2C11C11、C12C12C21 C21 和和C22C22C31 C31 单单元元格格中中, ,依依次次键键入入“1 1”、“2 2”、“3 3”; ;用用鼠鼠标标同同时时选选中中A A、B B、C C 列列, ,单单击击菜菜单单栏栏“数数据据”“排排序序”命命令令, ,在在弹弹出出的的“排排序序”

34、对对话话框框中中, ,选选择择以以“编编号号”为排序的为排序的“主要关键字主要关键字”, ,这样就可以得到各个实验对象的分组编号。这样就可以得到各个实验对象的分组编号。5. 5. 在在“D1D1”中中键键入入“分分组组号号”, ,在在“D2D2”、“D3D3”、“D4D4”和和“D5D5”中中分分别别依依次次键键入入“1 1”、“2 2”、“3 3”和和“4 4”, ,对对余余下下的的各各个个区区组组, ,同同样样依依次次输输入入“1 1”、“2 2”、“3 3”和和“4 4”, ,作作为为同同一一区区组组内内4 4 对象的分组号。对象的分组号。35 6. 6. 单单击击菜菜单单栏栏“数数据据

35、”“排排序序”, ,在在弹弹出出的的对对话话框框中中, ,选选择择“编编号号”为为排排序序的的“主主要要关关键键字字”, ,单单击击“确定确定”按钮按钮, ,这样就可以得到各个实验对象的分组编号。（见表这样就可以得到各个实验对象的分组编号。（见表2 2）36分层分组法：分层分组法：将动物先按雌雄分层，然后分别称体重，将体重相同的放在一起，不同体重的动物放在不同的动物盒中，按实验设计要求分别放在各组动物盒中，使每只动物都有相同的机会分配到各组，如此分组的结果，各实验组动物平均体重基本一致。 37抽签法：抽签法：如有小鼠如有小鼠4040只，要随机分为四组，可将小鼠从只，要随机分为四组，可将小鼠从1

36、-401-40编号，将准备的号编号，将准备的号签也编签也编1-401-40号，然后将号签充分混合后，随机各抽号，然后将号签充分混合后，随机各抽1010个号，然后对号个号，然后对号将小鼠分配到各个组去；将小鼠分配到各个组去； 38摸球法：摸球法：如实验所需设四组，即可用如实验所需设四组，即可用4040只雌雄各半的小鼠，将小鼠按体重大小只雌雄各半的小鼠，将小鼠按体重大小排列，雄性鼠编为排列，雄性鼠编为1-201-20号，雌性鼠编为号，雌性鼠编为21-4021-40号，然后用红、黄、蓝、号，然后用红、黄、蓝、绿四种彩球表示甲、乙、丙、丁四组，将数量相等四种颜色的球放入绿四种彩球表示甲、乙、丙、丁四组

37、，将数量相等四种颜色的球放入一个口袋里，充分混合后，每次摸取都要彻底混合，每次摸出一个，一个口袋里，充分混合后，每次摸取都要彻底混合，每次摸出一个，然后放回袋中，若第一次摸出是红球，就将第一鼠放入甲组，第二次然后放回袋中，若第一次摸出是红球，就将第一鼠放入甲组，第二次摸出的绿球，就将第二号放入丁组，第三次摸出的又是红球，因已出摸出的绿球，就将第二号放入丁组，第三次摸出的又是红球，因已出现过红球，可不计再放回口袋，重新摸取，第四次摸出的篮球，将第现过红球，可不计再放回口袋，重新摸取，第四次摸出的篮球，将第三号鼠放入丙组，第四号鼠不必再摸球决定，剩下的乙组就是第四号三号鼠放入丙组，第四号鼠不必再摸

38、球决定，剩下的乙组就是第四号鼠，如此类推，将鼠分配完毕。鼠，如此类推，将鼠分配完毕。 39四、实验动物的麻醉四、实验动物的麻醉动物麻醉是消除动物手术疼痛，便于实验操作，保证动物动物麻醉是消除动物手术疼痛，便于实验操作，保证动物安全，为手术创造良好的条件。安全，为手术创造良好的条件。动物全身麻醉分四期：动物全身麻醉分四期：1.1.第一期：随意兴奋期，出现运动与运动失调；第一期：随意兴奋期，出现运动与运动失调；2.2.第二期：不随意兴奋期，由意识完全丧失至规则的自动第二期：不随意兴奋期，由意识完全丧失至规则的自动呼吸开始时止。呼吸开始时止。3.3.第三期：外科麻醉期，第三期：外科麻醉期，4.4.第

39、四期：延髓麻醉期，进入此期，麻醉已严重过量。第四期：延髓麻醉期，进入此期，麻醉已严重过量。40麻醉方法与麻醉药麻醉方法与麻醉药麻醉方法：全身麻醉和局部麻醉，通过吸入、注射（静脉、麻醉方法：全身麻醉和局部麻醉，通过吸入、注射（静脉、皮下、肌肉、腹腔）、口服、灌胃等方法使动物麻醉。皮下、肌肉、腹腔）、口服、灌胃等方法使动物麻醉。常用麻醉药物：乙醚（吸入），戊巴比妥钠、硫贲妥钠、常用麻醉药物：乙醚（吸入），戊巴比妥钠、硫贲妥钠、氯胺酮（静脉），普鲁卡因、利多卡因（局麻）氯胺酮（静脉），普鲁卡因、利多卡因（局麻）41常用麻醉药的剂量及注射途径种类种类戊巴比妥戊巴比妥硫贲妥钠硫贲妥钠盐酸氯胺酮盐酸氯胺酮

40、水合氯醛水合氯醛乌拉坦乌拉坦mg/kgmg/kg途径途径mg/kgmg/kg途径途径mg/kgmg/kg途径途径mg/kgmg/kg途径途径mg/kgmg/kg小鼠小鼠35355050IVIVIPIP25255050I.V.I.V.IPIP22-4422-44IMIM400400IPIP- - -大鼠大鼠25255050IVIVIPIP20204040IVIVIPIP22-4422-44IMIM300300IPIP0.750.75IPIP豚鼠豚鼠30304040IVIVIPIP20205555IVIVIPIP22-4422-44IMIM200-200-300300IPIP1.51.5IPIP家

41、兔家兔30304040IVIVIPIP2020IVIV22-4422-441.01.0IVIVIPIP狗狗3030IVIV2525IVIV125125IVIV1.01.0IVIV猪猪45kg45kg30-2030-201515IVIVIVIV10-910-95 5IVIVIVIV10-1510-1510-1510-15IMIMIMIM42麻醉注意事项麻醉注意事项麻醉前应准确称体重；麻醉前应准确称体重；注意麻醉剂量，麻醉剂量与动物品种、健康状况有关；注意麻醉剂量，麻醉剂量与动物品种、健康状况有关；麻醉过程中注意观察动物的反应情况；麻醉过程中注意观察动物的反应情况；注意保温，在寒冷冬季，麻醉剂在注

42、射前应加热至动物体温水平；注意保温，在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平；静脉注射时，速度要均匀，不宜太快。注射速度过快是引起动物死亡静脉注射时，速度要均匀，不宜太快。注射速度过快是引起动物死亡的重要因素之一；的重要因素之一；如麻醉深度不够，必须经过一定时间后，才能补充麻醉剂，如戊巴比如麻醉深度不够，必须经过一定时间后，才能补充麻醉剂，如戊巴比妥钠至少须在第妥钠至少须在第1 1次注射次注射5 5分钟以后，苯巴比妥钠至少须经过分钟以后，苯巴比妥钠至少须经过3030分钟以分钟以上。一般情况下，补加剂量上。一般情况下，补加剂量1 1次不得超过原注射量的次不得超过原注射量的1.41.41.51.5。43Thank you44