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1、实验一染色体玻片标本的制作实验一染色体玻片标本的制作与染色体观察与染色体观察一、实验原理一、实验原理 植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间天都有分裂高峰时间(am9, pm3)，此时把，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。各时期的细胞和染色体。 图图1-1 大蒜的培养大蒜的培养 （二）（二）（二）（二）固定及保存：固定及保存：固定及保存：固定及保存：经过前处理的根尖，再放到经过前处理的根尖，再放到经过前处理的根尖，
2、再放到经过前处理的根尖，再放到卡诺固定液中固定卡诺固定液中固定卡诺固定液中固定卡诺固定液中固定2424小时。固定材料可以转入小时。固定材料可以转入小时。固定材料可以转入小时。固定材料可以转入7070酒精中，在酒精中，在酒精中，在酒精中，在44冰箱中保存，保存时间最好不超冰箱中保存，保存时间最好不超冰箱中保存，保存时间最好不超冰箱中保存，保存时间最好不超过二个月。过二个月。过二个月。过二个月。 （三）（三）（三）（三）解离解离解离解离( (酸解酸解酸解酸解) )：从固定液中取出大蒜根尖，用从固定液中取出大蒜根尖，用从固定液中取出大蒜根尖，用从固定液中取出大蒜根尖，用蒸馏水漂洗，再放到蒸馏水漂洗，
3、再放到蒸馏水漂洗，再放到蒸馏水漂洗，再放到0.1mol/LHCl0.1mol/LHCl中，在中，在中，在中，在6060水浴水浴水浴水浴中解离中解离中解离中解离8-108-10分钟，用蒸馏水漂洗后，放在染色板分钟，用蒸馏水漂洗后，放在染色板分钟，用蒸馏水漂洗后，放在染色板分钟，用蒸馏水漂洗后，放在染色板上，加上几滴改良石碳酸品红染色液，根尖着色上，加上几滴改良石碳酸品红染色液，根尖着色上，加上几滴改良石碳酸品红染色液，根尖着色上，加上几滴改良石碳酸品红染色液，根尖着色后即可压片观察。后即可压片观察。后即可压片观察。后即可压片观察。 （四）（四）（四）（四）压片：压片：压片：压片：把染色后的根尖放
4、在清洁的载玻片上，用解剖针把染色后的根尖放在清洁的载玻片上，用解剖针把染色后的根尖放在清洁的载玻片上，用解剖针把染色后的根尖放在清洁的载玻片上，用解剖针把根冠及延长区部分截去，加上少量染色液，并盖上盖玻片。把根冠及延长区部分截去，加上少量染色液，并盖上盖玻片。把根冠及延长区部分截去，加上少量染色液，并盖上盖玻片。把根冠及延长区部分截去，加上少量染色液，并盖上盖玻片。一个解离良好的材料，只要用镊子尖轻轻的敲打盖玻片，分生一个解离良好的材料，只要用镊子尖轻轻的敲打盖玻片，分生一个解离良好的材料，只要用镊子尖轻轻的敲打盖玻片，分生一个解离良好的材料，只要用镊子尖轻轻的敲打盖玻片，分生组织细胞就可铺展
5、成薄薄的一层，再用毛边纸把多余的染色液组织细胞就可铺展成薄薄的一层，再用毛边纸把多余的染色液组织细胞就可铺展成薄薄的一层，再用毛边纸把多余的染色液组织细胞就可铺展成薄薄的一层，再用毛边纸把多余的染色液吸干，经显微镜检查后，选择理想的分裂细胞，再在这个细胞吸干，经显微镜检查后，选择理想的分裂细胞，再在这个细胞吸干，经显微镜检查后，选择理想的分裂细胞，再在这个细胞吸干，经显微镜检查后，选择理想的分裂细胞，再在这个细胞附近轻轻敲打，使重叠的染色体渐渐分散，就能得到理想的分附近轻轻敲打，使重叠的染色体渐渐分散，就能得到理想的分附近轻轻敲打，使重叠的染色体渐渐分散，就能得到理想的分附近轻轻敲打，使重叠的
6、染色体渐渐分散，就能得到理想的分裂相，要达到这个目的，必需掌握以下几点：裂相，要达到这个目的，必需掌握以下几点：裂相，要达到这个目的，必需掌握以下几点：裂相，要达到这个目的，必需掌握以下几点： 1. 1. 压片材料要少，避免细胞紧贴在一起，细胞和染色体没有伸压片材料要少，避免细胞紧贴在一起，细胞和染色体没有伸压片材料要少，避免细胞紧贴在一起，细胞和染色体没有伸压片材料要少，避免细胞紧贴在一起，细胞和染色体没有伸展的余地。展的余地。展的余地。展的余地。 2. 2. 用镊子敲打盖玻片时，用力要均匀，若在压片时稍不留意，用镊子敲打盖玻片时，用力要均匀，若在压片时稍不留意，用镊子敲打盖玻片时，用力要均
7、匀，若在压片时稍不留意，用镊子敲打盖玻片时，用力要均匀，若在压片时稍不留意，使个别染色体丢失，而被迫放弃一个良好的分裂相的细胞。使个别染色体丢失，而被迫放弃一个良好的分裂相的细胞。使个别染色体丢失，而被迫放弃一个良好的分裂相的细胞。使个别染色体丢失，而被迫放弃一个良好的分裂相的细胞。 （五）（五）（五）（五）封片：封片：封片：封片：把压好的玻片标本，放在干冰或冰箱结冰器里冻结。把压好的玻片标本，放在干冰或冰箱结冰器里冻结。把压好的玻片标本，放在干冰或冰箱结冰器里冻结。把压好的玻片标本，放在干冰或冰箱结冰器里冻结。然后用刀片迅速把盖玻片和载玻片分开，用电吹风把玻片吹干然后用刀片迅速把盖玻片和载玻
8、片分开，用电吹风把玻片吹干然后用刀片迅速把盖玻片和载玻片分开，用电吹风把玻片吹干然后用刀片迅速把盖玻片和载玻片分开，用电吹风把玻片吹干后，滴上油派胶加上盖玻片封片，或经二甲苯透明后，滴中性后，滴上油派胶加上盖玻片封片，或经二甲苯透明后，滴中性后，滴上油派胶加上盖玻片封片，或经二甲苯透明后，滴中性后，滴上油派胶加上盖玻片封片，或经二甲苯透明后，滴中性树胶，加盖玻片封片，做成永久封片。树胶，加盖玻片封片，做成永久封片。树胶，加盖玻片封片，做成永久封片。树胶，加盖玻片封片，做成永久封片。七、结果七、结果拍摄并绘制根尖染色体的各分裂相。拍摄并绘制根尖染色体的各分裂相。图图1-2 有丝分裂模式图有丝分裂模式图图图图图1-3 1-3 低倍镜下低倍镜下低倍镜下低倍镜下大蒜根尖细胞大蒜根尖细胞大蒜根尖细胞大蒜根尖细胞有丝分裂各期有丝分裂各期有丝分裂各期有丝分裂各期 图图图图1-4 1-4 大蒜根尖细胞有丝分裂后、末期大蒜根尖细胞有丝分裂后、末期大蒜根尖细胞有丝分裂后、末期大蒜根尖细胞有丝分裂后、末期八、作业八、作业1. 绘制大蒜根尖细胞有丝分裂各时期图象。绘制大蒜根尖细胞有丝分裂各时期图象。2. 说明某一影响制片效果因素的方法、目说明某一影响制片效果因素的方法、目的和原理。的和原理。结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！17
