医学微生物学细菌各论PPT课件

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1、医学微生物学医学微生物学细菌学各论细菌学各论山西医科大学微生物教室研山西医科大学微生物教室研王根维王根维1第第9章章球菌球菌(coccus)(coccus)G+:G+:葡萄球菌属,链球菌属葡萄球菌属,链球菌属, ,肠球菌属肠球菌属G-:G-:脑膜炎奈瑟菌,淋病奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌,淋病奈瑟菌化脓性球菌化脓性球菌(pyogenic (pyogenic coccus)coccus)2第一节第一节葡萄球菌属葡萄球菌属 (Staphylococcus) 一一. .金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌( (一一) )、生物学性状、生物学性状1 1、 形态与染色:形态与染色:G+G+球球菌菌,固固体体培培养养基基中

2、中为为典典型型排排列列方方式式:葡葡萄萄串串状状,脓脓汁汁或或液液体体培培养养基基中中可可为为双双球球或或短短链链状状,在在体体内内可可形成荚膜形成荚膜. .3452 2培养特性培养特性营养要求一般营养要求一般, ,需氧或兼性厌氧需氧或兼性厌氧. .普通培养基生长良好普通培养基生长良好. .菌菌落落:中中等等大大小小(1-21-2mmmm),圆圆形形,光光滑滑,不透明,不透明,各种脂溶性色素各种脂溶性色素. .血血琼琼脂脂平平板板上上生生长长繁繁茂茂并并形形成成全全透透明明溶溶血环(血环(溶血)溶血). .3 3生生化化反反应应:触触酶酶阳阳性性(可可与与链链球球菌菌鉴鉴别别),致病菌分解甘露

3、醇致病菌分解甘露醇64.4.抗原构造抗原构造(1)(1)葡萄球菌葡萄球菌A A蛋白蛋白(staphylococcal (staphylococcal protein A, SPA):90%protein A, SPA):90%金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌, ,功能与作用功能与作用: :与人或豚鼠、小鼠等哺乳动与人或豚鼠、小鼠等哺乳动物物IgGIgG的的FcFc段非特异结合段非特异结合. .形成的复合物形成的复合物的作用的作用: :a a 协同凝集试验协同凝集试验: :检测抗原检测抗原( (体外体外) )b b 抗吞噬抗吞噬、促细胞分裂、破坏血小板、促细胞分裂、破坏血小板、引起超敏反应引起超敏反

4、应.(体内体内)7(2)(2)荚膜多糖荚膜多糖: :粘附作用粘附作用. .(3)(3)多糖抗原多糖抗原: :存在于细胞壁,为磷壁存在于细胞壁,为磷壁酸中的组分,分为两群酸中的组分,分为两群A A群群金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌B B群群表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌5 5分分类类:根根据据色色素素,生生化化反反应应等等不不同同类类型型,分为三种:分为三种:8主要性状主要性状 金黄色葡金黄色葡萄球菌萄球菌 表皮葡萄表皮葡萄球菌球菌 腐生葡萄腐生葡萄球菌球菌 菌落色素菌落色素 金黄色金黄色 白色白色 白色或柠白色或柠檬色檬色 血浆凝固血浆凝固酶酶 +-溶血素溶血素 +-SPA +-甘露醇发甘露醇发酵酵

5、+-致病性致病性 强强弱弱无无9( (2)2)根据根据血浆凝固酶分型血浆凝固酶分型:血浆凝固酶阳血浆凝固酶阳性与血浆凝固酶阴性性与血浆凝固酶阴性.血浆凝固酶阳性的血浆凝固酶阳性的又可根据噬菌体分又可根据噬菌体分4群群2323型型. .(3)(3)根据核酸分析的遗传学分型根据核酸分析的遗传学分型: : 据据16srRNA16srRNA分为分为4848个种与亚种个种与亚种. .6.6.抵抗力抵抗力: :较强较强抵抗干燥,热(抵抗干燥,热(8080,3030minmin),),盐盐(10-1510-15)10碱性染料敏感(结晶紫,龙胆紫)碱性染料敏感(结晶紫,龙胆紫)耐药菌株迅速增多耐药菌株迅速增多

6、( (二二).).致病性致病性1.1.致病物质致病物质(1)(1)凝凝固固酶酶( (coagulase)coagulase):能能使使含含有有枸枸橼橼酸酸钠钠或或肝肝素素抗抗凝凝剂剂的的人人或或兔兔血血浆浆发发生生凝凝固固的的酶酶类类物物质质。是是鉴鉴别别葡葡萄萄球球菌菌有有无无致致病性的重要指标。病性的重要指标。11分类:分类:a.a.游离凝固酶游离凝固酶 ( (free free coagulase)coagulase):分分泌泌至至菌菌体体外外的的蛋蛋白白质质,作作用用类类似似于于凝凝血血酶酶原原物物质质,使使血血浆发生凝固(用试管法测定)浆发生凝固(用试管法测定) b.b.结合凝固酶结

7、合凝固酶 ( (clumping clumping factor) factor) :结结合合于于菌菌体体表表面面,是是菌菌株株的的表表面面纤纤维维蛋蛋白白原原受受体体(用用玻玻片片法测定)使菌体凝集。法测定)使菌体凝集。12作用:作用:a. a. 抗抗吞吞噬噬,保保护护病病菌菌不不受受血血清清中中杀杀菌菌物物质的破坏质的破坏b. b. 刺刺激激机机体体产产生生抗抗体体,具具有有一一定定的的保保护护作用。作用。(2)(2)葡葡萄萄球球菌菌溶溶素素 ( (staphylolysin)staphylolysin):损损伤伤细细胞胞膜膜的的细细胞胞毒毒素素,分分为为、等等。 溶溶素素为为不不耐耐热热

8、的的蛋蛋白白质质;对对多多种种哺哺乳乳动动物物红红细细胞胞有有溶溶血血作作用用;. .对对有有吞吞噬噬作作用用的的细细胞胞及及多多种种组组织织细细胞胞有有损损伤作用伤作用13(3)(3)杀杀白白细细胞胞素素(leukocindinleukocindin):由由快快与与慢慢两两部部分分组组成成, ,联联合合发发挥挥作作用用. .攻攻击击中中性性粒粒细细胞胞和和巨巨噬噬细细胞胞, ,作作用用部部位位: :细细胞胞膜膜. .(4) (4) 肠肠毒毒素素 ( (enterotoxin)enterotoxin):引引起起急急性性肠肠胃胃炎炎(食食物物中中毒毒). .热热稳稳定定的的可可溶溶性性蛋蛋白白,

9、耐耐热热1001000 0 C,30minC,30min: 抵抵抗抗胃胃肠肠液中蛋白酶的水解作用液中蛋白酶的水解作用(5)(5)表表 皮皮 剥剥 脱脱 毒毒 素素 ( (exfoliative exfoliative toxin, toxin, exfoliatin) exfoliatin) 所所致致疾疾病病:烫烫伤伤样皮肤综合征(剥脱性皮炎)样皮肤综合征(剥脱性皮炎)14(6)(6)毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素-1-1(TSST-1TSST-1)所致疾病:多个器官系统功能紊乱所致疾病:多个器官系统功能紊乱毒性休克综合征(毒性休克综合征(TSSTSS)(6)(6)其其他他:菌菌体体表表

10、面面结结构构(SPA.(SPA.荚荚膜膜) )、耐热核酸酶、耐热核酸酶、透明质酸酶、脂酶等透明质酸酶、脂酶等. .152.所致疾病所致疾病(1)(1)侵袭性疾病:局部感染与全身感侵袭性疾病:局部感染与全身感染染. .皮肤皮肤. .各种器官各种器官. .全身的化浓性感染全身的化浓性感染. .特点特点: :浓汁金黄色浓汁金黄色, ,黏稠黏稠, ,病灶局限病灶局限, ,界限清楚界限清楚. .1617182 2毒素性疾病:毒素性疾病:(1 1)食物中毒)食物中毒(2 2)烫伤样皮肤综合征)烫伤样皮肤综合征(3 3)毒性休克综合征()毒性休克综合征(TSSTSS)(4 4)假膜性肠炎)假膜性肠炎1920

11、21( (三三).).免疫性免疫性天然免疫力,患病后也可获得一定的免疫力天然免疫力,患病后也可获得一定的免疫力( (四四) )、微生物学检查法、微生物学检查法样品采集:痰(上呼吸道感染)样品采集:痰(上呼吸道感染) 血(骨髓炎,心内膜炎)血(骨髓炎,心内膜炎) 食物,排泄物,呕吐物食物,排泄物,呕吐物 中段尿(膀胱炎)中段尿(膀胱炎) 脑脊液(脑膜炎)脑脊液(脑膜炎)1 1 涂片、染色、镜检(初步诊断)涂片、染色、镜检(初步诊断)2 2 分离培养和鉴定分离培养和鉴定3 3 药敏试验药敏试验4 4 肠毒素检查和动物试验肠毒素检查和动物试验22鉴别葡萄球菌要点:鉴别葡萄球菌要点:1)产生金黄色色素

12、产生金黄色色素.2)菌落周围有透明溶血环菌落周围有透明溶血环.3)血浆凝固酶阳性血浆凝固酶阳性.4)耐热核酸酶阳性耐热核酸酶阳性.5)分解甘露醇产酸分解甘露醇产酸.23( (五五).).防治原则防治原则1. 皮肤创伤的及时处理皮肤创伤的及时处理2.防止医院感染防止医院感染:医务人员手部充分消毒医务人员手部充分消毒3.选用敏感药物选用敏感药物4.复发作疖病患者,可用自身疫苗疗法。复发作疖病患者,可用自身疫苗疗法。24二:凝固酶阴性葡萄球菌(二:凝固酶阴性葡萄球菌(CNSCNS)( (一一) )生物学性状生物学性状1 1致病性:细胞壁外黏质物致病性:细胞壁外黏质物 血溶素(血溶素()2 2所致疾病

13、:所致疾病:泌尿系感染泌尿系感染-急性膀胱炎急性膀胱炎细菌性心内膜炎细菌性心内膜炎败血症败血症术后及医疗器械引起的感染术后及医疗器械引起的感染3 3. .检查与防治检查与防治25第二节链球菌属第二节链球菌属 ( (streptococcusstreptococcus) ) 链球菌分类:链球菌分类:1 1根据溶血现象分类:根据溶血现象分类:甲甲 型型 溶溶 血血 性性 链链 球球 菌菌 ( (-hemolytic -hemolytic streptococcusstreptococcus)-)-产产生生甲甲型型溶溶血血(溶溶血血),草绿色溶血环,条件致病菌草绿色溶血环,条件致病菌乙乙 型型 溶溶

14、 血血 性性 链链 球球 菌菌 ( (-hemolytic -hemolytic streptococcusstreptococcus)-)-产产生生乙乙型型溶溶血血(溶溶血血),透明无色溶血环,致病菌透明无色溶血环,致病菌丙型链球菌丙型链球菌 ( (- streptococcus- streptococcus)-)-无溶血环,一般不致病无溶血环,一般不致病26272 2. .根根据据链链球球菌菌细细胞胞壁壁中中的的多多糖糖抗抗原原不不同同分群分群 A-KA-K,K-V20K-V20群群对人致病者对人致病者90%90%属属A A群,多数产生群,多数产生溶血溶血3 3 根根据据对对氧氧的的需需要

15、要分分为为:需需氧氧,兼兼性厌氧,厌氧性链球菌性厌氧,厌氧性链球菌28一、一、 A A群链球菌群链球菌(一)生物学性状(一)生物学性状1 1。形态与染色。形态与染色G+G+球球菌菌,链链状状排排列列,无无芽芽孢孢,鞭鞭毛毛,早早期有荚膜期有荚膜. .29302 2培养特性:培养特性:兼性或专性厌氧,温度、兼性或专性厌氧,温度、pH pH 无特殊要求无特殊要求培培养养基基:营营养养要要求求较较高高,普普通通培培养养基基生生长长不不良良,需补充血液,血清,葡萄糖等。需补充血液,血清,葡萄糖等。菌菌落落:微微小小菌菌落落(直直径径0.5-0.70.5-0.7mmmm),灰灰白白色色,表面光滑,表面光

16、滑,溶血溶血3.3.生化反应生化反应: :不分解菊糖不分解菊糖, ,不被胆汁溶解不被胆汁溶解,(,(区别区别甲链与肺炎链球菌甲链与肺炎链球菌).).不产生触酶不产生触酶.(.(区别链球菌与葡萄球菌区别链球菌与葡萄球菌) )314抗原结构抗原结构 1 1)多多糖糖抗抗原原(C C抗抗原原):细细胞胞壁壁多多糖糖组分,群特异性,分群基础组分,群特异性,分群基础 2 2)蛋蛋白白质质抗抗原原(表表面面抗抗原原):型型特特异异性,性,A A 群链球菌群链球菌M M蛋白与致病性有关蛋白与致病性有关33)核核蛋蛋白白抗抗原原(P P抗抗原原):无无特特异性异性5.5.抵抗力抵抗力不耐热,耐干燥,少有耐药菌

17、株不耐热,耐干燥,少有耐药菌株. . 3233(二)致病性(二)致病性1.1.致病物质:致病物质:(1)(1)细胞壁成分,细胞壁成分,1 1)粘粘附附素素: :脂脂磷磷壁壁酸酸(LTALTA)与与F F蛋蛋白白:围围绕绕在在M M蛋蛋白白外外层层,增增强强细细菌菌对对敏敏感感细细胞的黏附性胞的黏附性2 2)M M蛋蛋白白 ( (M M protein)protein):抗抗吞吞噬噬,抵抵抗抗吞吞噬噬细细胞胞内内的的杀杀菌菌作作用用,引引起起某某些些超超敏敏反应性疾病反应性疾病3)3)肽肽聚聚糖糖: :发发热热. .溶溶解解血血小小板板. .提提高高血血管管通透性与诱导实验性关节炎通透性与诱导实

18、验性关节炎3435(2).(2).外毒素类外毒素类1)1)致热外毒素(致热外毒素(pyrogenic exotoxinpyrogenic exotoxin)性质:性质:a.a.由带有溶原性噬菌体的由带有溶原性噬菌体的A A群链群链球菌产生球菌产生 b.b.人类猩红热的主要毒性物质人类猩红热的主要毒性物质 c.c.热稳定蛋白质热稳定蛋白质 d.d.具超抗原作用具超抗原作用2 2)链球菌溶素)链球菌溶素 ( (streptolysin)streptolysin)溶解红细胞,破坏白细胞,血小板溶解红细胞,破坏白细胞,血小板36链球菌溶素链球菌溶素O O(SLOSLO) 链球菌溶素链球菌溶素S S(S

19、LSSLS) 有有- -SHSH基团,对基团,对O2O2敏感敏感 O2O2-SH -SH S-S S-S 失失去溶血活性去溶血活性 对对O2O2稳定稳定 对中性粒细胞有破坏作用,对中性粒细胞有破坏作用,对血小板、巨噬细胞、神对血小板、巨噬细胞、神经细胞等有毒性作用经细胞等有毒性作用 。溶解红细胞慢于溶解红细胞慢于SLO SLO 抗原性强抗原性强无免疫原性无免疫原性 37(2).(2).侵袭性酶类:侵袭性酶类:1)1)透透明明质质酸酸酶酶 ( (hyaluronidase)hyaluronidase):分分解透明质酸,有利于病菌扩散解透明质酸,有利于病菌扩散2 2)链链激激酶酶(SKSK):耐耐

20、热热,溶溶解解血血块块或阻止血浆凝固,有利于病菌扩散或阻止血浆凝固,有利于病菌扩散3 3)链链道道酶酶(SDSD):降降解解脓脓液液中中的的DNADNA,有利于病菌扩散有利于病菌扩散382.2.所致疾病:主要由所致疾病:主要由A A群链球菌引起群链球菌引起 1 1、化化脓脓性性感感染染:病病菌菌侵侵入入并并引引起起化化脓脓性性感感染染,脓脓液液稀稀薄薄,感感染染易易扩扩散散(与与葡葡萄萄球菌化脓性感染的不同点)球菌化脓性感染的不同点)2 2、中中毒毒性性疾疾病病:与与外外毒毒素素有有关关,如如猩猩红红热热3 3 超超敏敏反反应应性性疾疾病病:与与M M蛋蛋白白有有关关,如如风风湿热与急性肾小球

21、肾炎湿热与急性肾小球肾炎394041(三)免疫性(三)免疫性感感染染后后可可获获得得抗抗M M蛋蛋白白抗抗体体,抗抗SPESPE抗抗体体-特异性体液免疫特异性体液免疫M M蛋白诱生蛋白诱生-IFN-IFN-细胞免疫细胞免疫(四)微生物检查法(四)微生物检查法1.1.采集标本,采集标本,2.2.直接涂片染色(初步诊断),直接涂片染色(初步诊断),3.3.分离培养与分离培养与鉴定鉴定4.4.血血 清清 学学 实实 验验 : 抗抗 O O试试 验验 ( ASO ASO testtest)-风湿热的辅助诊断风湿热的辅助诊断. .5.PYR5.PYR试验试验: A: A群链球的氨基肽酶群链球的氨基肽酶4

22、2(五)防治原则(五)防治原则传染源:病人,带菌者传染源:病人,带菌者首选药物:青霉素首选药物:青霉素G G43二二. .肺炎链球菌肺炎链球菌 (S. pneumoniaeS. pneumoniae) (一)(一) 生物学性状生物学性状1 1. .形态与染色形态与染色G+G+球球菌菌,菌菌体体矛矛头头状状,成成对对排排列列,无鞭毛,芽孢,无鞭毛,芽孢,有荚膜有荚膜4445462 2. .培养特性培养特性营养要求较高营养要求较高( (血平板血平板 ) ) 菌菌落落:-溶溶血血,光光滑滑(有有毒毒株株),后后期期呈脐状(稳定期产生自溶酶)呈脐状(稳定期产生自溶酶)3.3.生化反应生化反应分解多种糖

23、分解多种糖, ,胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验(+)(+)4.4.抗原构造与分型抗原构造与分型(1)(1)荚膜多糖抗原荚膜多糖抗原: :47(2)(2)菌体抗原菌体抗原: :C C多糖多糖: :与与CRPCRP结合结合. .检测检测CRPCRP M M蛋白蛋白: :5.5.抵抗力:对消毒剂敏感,抗干燥(荚抵抗力:对消毒剂敏感,抗干燥(荚膜)膜)48(二)二) 致病性致病性1 1致病物质致病物质荚膜:抗吞噬荚膜:抗吞噬肺肺炎炎链链球球菌菌溶溶素素O O (pneumolysin (pneumolysin O):O):溶解红细胞溶解红细胞, ,激活补体引起炎症激活补体引起炎症. .脂磷壁酸:黏附脂磷壁酸

24、:黏附神神经经氨氨酸酸酶酶:有有利利于于肺肺炎炎链链球球菌在粘膜上定植、扩散菌在粘膜上定植、扩散492 2所致疾病所致疾病成人及儿童大叶性肺炎成人及儿童大叶性肺炎气管炎气管炎(三)(三)免疫性免疫性荚膜多糖型特异抗体荚膜多糖型特异抗体, ,免疫力牢固免疫力牢固. .(四)微生物学检查法(四)微生物学检查法1 1标本采集标本采集2 2涂片染色(初步诊断)涂片染色(初步诊断)3 3分离培养分离培养504 4鉴定鉴定( (与甲链鉴别与甲链鉴别) )胆汁溶菌,胆汁溶菌,菊糖发酵,菊糖发酵,普托辛普托辛 ( (Optochin)Optochin)试验试验荚膜肿胀试验荚膜肿胀试验动物毒力试验动物毒力试验(

25、五)防治原则(五)防治原则荚膜多糖疫苗荚膜多糖疫苗 51第三节第三节 肠球菌属肠球菌属一一. . 生物学性状生物学性状( (一一) )分类分类粪粪肠球菌、肠球菌、屎屎肠球菌等肠球菌等.(二二)形态与染色形态与染色链状排列的革兰阳性球菌链状排列的革兰阳性球菌.营养要求高营养要求高.溶血性溶血性52二二.致病性致病性( (一一) )致病物质致病物质1.1.碳水化合物黏附素碳水化合物黏附素2.2.聚合物因子聚合物因子3.3.细胞溶素细胞溶素4.4.多形核白细胞趋化因子多形核白细胞趋化因子53( (二二) )所致疾病所致疾病1.1.尿路感染尿路感染2.2.腹腔腹腔、盆腔感染、盆腔感染3.败血症败血症4

26、.心内膜炎心内膜炎三三.防治原则防治原则54第四节第四节 奈瑟菌属奈瑟菌属 ( (NeisseriaNeisseria) ) 一、脑膜炎奈瑟菌一、脑膜炎奈瑟菌 (N. meningitides) (一)生物学性状(一)生物学性状1、形态与染色形态与染色肾形,肾形,G-双球菌,有荚膜,菌毛双球菌,有荚膜,菌毛2、培养特性培养特性专性需氧,培养基:巧克力培养基,专性需氧,培养基:巧克力培养基,5%CO2菌落:光滑,透明,不溶血菌落:光滑,透明,不溶血553.生化反应生化反应4.抗原结构与分类抗原结构与分类1)荚膜多糖荚膜多糖:群特异性群特异性,分崩离析分崩离析13群群,致致疾菌主要为疾菌主要为A.

27、B.C群群,我国以我国以A群多见群多见.2)外膜蛋白抗原外膜蛋白抗原:型特异性型特异性.3)脂寡糖抗原脂寡糖抗原(LOS).主要抗原主要抗原5.抵抗力抵抗力对干燥,热力,消毒剂均敏感对干燥,热力,消毒剂均敏感5657(二)(二)致病性致病性1致病物质致病物质1)荚膜荚膜 :2)菌毛菌毛 : 3)脂寡糖抗原脂寡糖抗原(LOS):主要致病物质:主要致病物质4)IgA14)IgA1蛋白酶蛋白酶2所致疾病所致疾病 流流脑脑,人人是是其其唯唯一一易易感感宿宿主主.病病人人与与带带菌者为传染源菌者为传染源,飞沫传播飞沫传播. 三三种种临临床床类类型型:普普通通型型,爆爆发发型型,慢慢性败血病型性败血病型5

28、8(三)(三)免疫性:以体液免疫为主免疫性:以体液免疫为主(四)(四)微生物学检查法微生物学检查法1标本采集标本采集2涂片染色镜检涂片染色镜检3分离培养与鉴定分离培养与鉴定4快速诊断法快速诊断法(五)(五)防治原则防治原则 流流脑脑荚荚膜膜多多糖糖疫疫苗苗,治治疗疗首首选选青青霉霉素素G59二淋病奈瑟菌二淋病奈瑟菌 (N. gonorrhoeae) (一)一)生物学性状:类似于脑膜炎奈瑟菌生物学性状:类似于脑膜炎奈瑟菌(二)(二)致病性致病性1致病物质致病物质菌毛:黏附,抗吞噬菌毛:黏附,抗吞噬外膜蛋白:破坏中性粒细胞膜外膜蛋白:破坏中性粒细胞膜脂多糖脂多糖IgA1蛋蛋白白酶酶:破破坏坏黏黏膜

29、膜表表面面特特异异性性IgA1抗体抗体2所所致致疾疾病病:淋淋病病(性性病病), 淋淋球球菌菌性性结结膜炎(婴儿)膜炎(婴儿)(三)(三)微生物学检查法微生物学检查法、防治原则防治原则 60第第10章章 肠杆科菌肠杆科菌大群居住在人和动物肠道中生物学性状大群居住在人和动物肠道中生物学性状近似的革兰阴性杆菌近似的革兰阴性杆菌属于肠杆菌科属于肠杆菌科, ,至少有至少有3030个菌属,个菌属,120120个个以上的菌种以上的菌种多数是肠道的正常菌群,少数为致病菌,多数是肠道的正常菌群,少数为致病菌,是人类肠传染病的最重要病原菌是人类肠传染病的最重要病原菌61肠杆菌科中与医学有关的常见菌族和菌属肠杆菌

30、科中与医学有关的常见菌族和菌属菌属菌属 代表种代表种埃希菌属埃希菌属 大肠杆菌大肠杆菌 志贺菌属志贺菌属 痢疾志贺菌痢疾志贺菌 沙门菌属沙门菌属 伤寒沙门菌伤寒沙门菌 变形杆菌属变形杆菌属 普通变形杆菌普通变形杆菌62共同特性共同特性1. 形态结构:具有相似的形态染色,形态结构:具有相似的形态染色, 中中等大小,等大小,G 杆菌,无芽胞,多数有动杆菌,无芽胞,多数有动力(鞭毛)力(鞭毛)2. 培养条件:营养要求不高,兼性厌氧培养条件:营养要求不高,兼性厌氧/需氧。需氧。3. *活泼的生化反应活泼的生化反应:乳糖发酵试验乳糖发酵试验.初步初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌鉴别肠道致病菌和肠道非致病

31、菌634.抗原构造复杂抗原构造复杂鞭毛抗原(鞭毛抗原(H)菌体抗原(菌体抗原(菌体抗原(菌体抗原(OO)KK或或或或ViVi抗原抗原抗原抗原荚膜荚膜荚膜荚膜/ /包膜抗原包膜抗原包膜抗原包膜抗原645 5、抵抗力:、抵抗力:不强不强6 6、易变异、易变异溶源性转换溶源性转换生化反应性变异生化反应性变异通过通过通过通过引起引起引起引起耐药性变异耐药性变异毒力性变异毒力性变异转导转导接合接合65第一节、埃希菌第一节、埃希菌 (Escherichia) 一、一、生物学性状生物学性状1形态与染色形态与染色 :G-杆菌,有菌毛,鞭毛杆菌,有菌毛,鞭毛2培养:普通琼脂培养基上生长良好培养:普通琼脂培养基上

32、生长良好3生化反应(活跃而复杂)生化反应(活跃而复杂)麦康克培养基:红麦康克培养基:红色菌落色菌落EMB(伊伊红红-亚亚甲甲兰兰)培培养养基基:紫紫黑黑色色,金金属属光泽光泽(IMViC)试验:试验:+-糖发酵试验糖发酵试验 6614、抗原结构:血清学分型基础、抗原结构:血清学分型基础(1)O抗抗原原-特特异异多多糖糖(脂脂多多糖糖组组分),大于分),大于170种种(2)H抗原抗原-鞭毛抗原,大于鞭毛抗原,大于56种种(3)K抗抗原原-O抗抗原原外外层层,多多糖糖,大于大于100种种大大 肠肠 埃埃 希希 菌菌 分分 型型 命命 名名 举举 例例 ::O111:K58(B4):H267二、致病

33、性二、致病性 (一)(一)致病物质致病物质.侵袭力:侵袭力:1、荚膜荚膜2、黏黏附附素素:使使细细菌菌黏黏着着在在泌泌尿尿道道和和肠肠道道细细胞胞上上,有有高特异性高特异性( 1) 定定 植植 因因 子子 抗抗 原原 , , ( CFA/, CFA/,CFA/)(2)菌毛:菌毛:.毒素:毒素:1内毒素内毒素2外毒素:外毒素:(1)志贺毒素志贺毒素和和(Stx-,Stx-)(2)耐热肠毒素耐热肠毒素a,b(STa,STb)(3)不耐热肠毒素不耐热肠毒素和和(LT-,LT-)(4)溶血素)溶血素A(Hly A) 68(二二)所致疾病所致疾病1肠道外感染肠道外感染多多数数大大肠肠埃埃希希菌菌在在肠肠

34、道道内内不不致致病病,但但如如移移位位至至肠肠道道外外引引起起肠肠外外感感染染。(机机会会感感染,内源性感染染,内源性感染)(1)泌泌尿尿道道感感染染:常常见见。上上行行感感染染,90% 由本菌引起由本菌引起(2)化脓性感染化脓性感染(3)败血症败血症(4)新生儿脑膜炎新生儿脑膜炎69 2肠肠胃胃炎炎(外外源源性性感感染染,某某些些特特殊殊血血清型的清型的大肠埃希菌大肠埃希菌引起)引起)( 1) 肠肠 产产 毒毒 素素 性性 大大 肠肠 埃埃 希希 菌菌 (enterotoxingenic E. coli, ETEC)致致病物质病物质a.定定植植因因子子:使使细细菌菌黏黏附附到到小小肠肠上上皮

35、皮细细胞上胞上b.肠毒素肠毒素70 B亚亚单单位位与与肠肠粘粘膜膜上上皮皮细细胞胞表表面面GM1神神经经节节苷苷脂脂结结合合 A亚亚单单位位穿穿过过细细胞胞膜膜 作作用用于于腺腺苷苷环环化化酶酶 cAMP增增高高 肠肠粘粘膜膜细细胞胞内内水水、氯氯、碳碳酸酸氢氢钾钾过过度度分分泌至腹腔,钠吸收减少泌至腹腔,钠吸收减少 腹泻腹泻2)所所致致疾疾病病:5岁岁以以下下婴婴幼幼儿儿和和旅旅游游者腹泻者腹泻71( 1) 肠肠 侵侵 袭袭 性性 大大 肠肠 埃埃 希希 菌菌 (enteroinvasive E. coli, EIEC)1)不不产产肠肠毒毒素素,侵侵袭袭结结肠肠粘粘膜膜上上皮皮细胞,与志贺菌

36、相似。细胞,与志贺菌相似。细细菌菌侵侵入入结结肠肠上上皮皮细细胞胞细细胞胞生生长长复复制制空空泡泡结结肠肠上上皮皮细细胞胞 杀杀死死感感染染细细胞胞 导致组织破坏和炎症发生导致组织破坏和炎症发生2)所致疾病:侵犯较大儿童,成人,)所致疾病:侵犯较大儿童,成人,症状类似菌痢症状类似菌痢 72( 3) 肠肠 致致 病病 性性 大大 肠肠 埃埃 希希 菌菌(enteropathogenic E. coli, EPEC)致致病病原原因因:无无肠肠毒毒素素及及其其他他外外毒毒素素,无无侵袭力侵袭力病病菌菌在在十十二二指指肠肠,空空肠肠和和回回肠肠上上段段黏黏膜膜表表面面大量繁殖,造成一系列损伤大量繁殖,

37、造成一系列损伤所致疾病:婴幼儿腹泻,严重可致死所致疾病:婴幼儿腹泻,严重可致死(4)肠肠出出血血性性大大肠肠埃埃希希菌菌(enterohemorrhagic E.coli, EHEC)致病原因:致病原因:产产志志贺贺毒毒素素Stx-,Stx-, 破破坏坏肠肠绒绒毛毛结结构(干扰蛋白质合成)构(干扰蛋白质合成)所所致致疾疾病病:出出血血性性结结肠肠炎炎,溶溶血血性性尿尿毒毒综综合症(合症(5岁以下儿童易感)岁以下儿童易感)73三、微生物学检查法:三、微生物学检查法:(一)(一)临床标本的检查临床标本的检查1标本采集:中段尿,血,脓,脑脊液,粪便等标本采集:中段尿,血,脓,脑脊液,粪便等2分离培养

38、与鉴定分离培养与鉴定肠肠 道道 外外 感感 染染 : 涂涂 片片 染染 色色 , 分分 离离 培培 养养 , 鉴鉴 定定 :IMVic(+-),生化反应生化反应肠肠道道内内感感染染:粪粪便便接接种种鉴鉴别别培培养养基基 ELISA,核核酸酸杂交,杂交,PCR (二二)卫生细菌学检查卫生细菌学检查大大肠肠菌菌群群数数:饮饮水水小小于于3个个/升升,果果汁汁小小于于5个个100ml四、防治原则四、防治原则1耐药性普遍,需做药敏试验耐药性普遍,需做药敏试验2减少院内交叉感染,严格无菌操作减少院内交叉感染,严格无菌操作水,食品严格消毒水,食品严格消毒 74第二节志贺菌第二节志贺菌 (shigella)

39、 一、一、 生物学性状生物学性状1形态染色:形态染色:G-杆菌,无鞭毛,有菌毛杆菌,无鞭毛,有菌毛培养特性:普通琼脂平板即可生长。培养特性:普通琼脂平板即可生长。2生化反应生化反应(1)乳糖发酵乳糖发酵-:EMB平板:无色菌落平板:无色菌落(2)糖发酵试验糖发酵试验(3)IMViC:-753抗原结构:抗原结构:(1)O抗原:分类,分群,分型抗原:分类,分群,分型(2)K抗原:在分类上无意义抗原:在分类上无意义二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性感感染染只只限限于于肠肠道道,不不入入血血,人人是是唯唯一一自自然状态宿主然状态宿主(一)致病物质(一)致病物质1侵袭力侵袭力(1)菌毛菌毛(2)型分泌

40、系统型分泌系统762、内毒素内毒素(1)作作用用:使使肠肠粘粘膜膜通通透透性性增增高高,破坏肠粘膜破坏肠粘膜作作用用于于肠肠壁壁自自主主神神经经系系统统,使使肠肠功功能能紊乱紊乱(2)症症状状:发发热热,休休克克,炎炎症症,腹腹痛痛,里急后重里急后重3外外毒毒素素:由由A群群志志贺贺菌菌型型和和型型产生(产生(Stx和和Stx)作用:作用: 上皮细胞损伤上皮细胞损伤77(二)(二)所致疾病所致疾病1传染源:病人,带菌者传染源:病人,带菌者2所致疾病:细菌性痢疾所致疾病:细菌性痢疾急性细菌性痢疾急性细菌性痢疾潜潜伏伏(1-3d) 腹腹痛痛,水水样样腹腹泻泻 发发热热,不不适适 脓脓血血粘粘液液便

41、便,腹腹痛痛,里里急急后后重重 2-5d自发消退自发消退慢性慢性细菌性痢疾细菌性痢疾病程两个月以上病程两个月以上(三)(三)免疫性免疫性 消消化化道道黏黏膜膜表表面面分分泌泌型型IgA(SIgA),免免疫疫期短期短78一、一、微生物学检查法微生物学检查法1标本:粪便脓血,黏液,肛拭标本:粪便脓血,黏液,肛拭2分离培养与鉴定分离培养与鉴定 37鉴鉴别别/选选择择培培养养基基 可可疑疑菌菌落落 生化、血清学实验生化、血清学实验 18-24hr3毒力实验毒力实验(1)侵袭力:侵袭力:Sereny实验实验(2)ST实实验验:Hera/Vero细细胞胞,PCR技技术术4快速诊断法快速诊断法(1)免免疫疫

42、染染色色法法(2)免免疫疫荧荧光光球球菌菌法法(3)协协同同凝凝集集实实验验(4)分分子子生生物物学学方方法法:PCR技术,基因探针技术,基因探针79四、四、防治原则防治原则1及时治疗、隔离病人及时治疗、隔离病人2水、食物、牛奶卫生监测水、食物、牛奶卫生监测 3、减毒活疫苗减毒活疫苗 80第三节第三节沙门菌沙门菌 (salmonella) 一、一、生物学性状生物学性状1、形形态态染染色色:G-有有菌菌毛毛,周周身身鞭鞭毛毛,无无荚荚膜膜、芽芽孢孢2培培养养特特性性:普普通通琼琼脂脂平平板板即即可可生生长长、3生生化化反反应应:P168表表4抗原构造抗原构造O抗抗原原:LPS中中特特异异性性多多

43、糖糖,耐耐热热,用用于于沙沙门门菌菌分组分组H抗抗原原:鞭鞭毛毛蛋蛋白白,不不耐耐热热,分分为为两两相相,可可用用于沙门菌分型于沙门菌分型Vi抗原:存在于菌表面,与细菌毒力有关。抗原:存在于菌表面,与细菌毒力有关。 5抵抗力:较弱,抵抗力:较弱,65,15-30min杀死;杀死;对胆盐,煌绿等化学物质抵抗力强于其他肠道菌对胆盐,煌绿等化学物质抵抗力强于其他肠道菌81一、致病性与免疫性一、致病性与免疫性(一)(一)致病物质致病物质1侵袭力侵袭力(1)菌毛:与菌毛:与M细胞结合细胞结合(2)型型分分泌泌系系统统(沙沙门门菌菌致致病病岛岛、) (3)耐酸应答基因耐酸应答基因(4)Vi抗抗原原:有有微

44、微荚荚膜膜功功能能,抗抗吞吞噬噬,阻阻挡抗体补体作用挡抗体补体作用2内毒素:内毒素:发热,中毒症状发热,中毒症状3肠肠毒毒素素:个个别别沙沙门门菌菌产产生生,类类似似ETEC产的肠毒素产的肠毒素82(二)(二)所致疾病所致疾病1肠热症肠热症病程特点:二次菌血症,超敏反应病程特点:二次菌血症,超敏反应侵侵入入M细细胞胞 巨巨噬噬细细胞胞吞吞噬噬 肠肠系系膜膜淋淋巴巴结结大大量量繁繁殖殖 进进入入血血流流(第第一一次次菌菌血血症症) 随随血血进进入入肝肝、脾脾、肾肾、胆胆等等器器官官 再再次次入入血血(第第二二次次菌菌血血症症) 再再次次进进入入肠肠壁壁淋淋巴巴组组织织(超超敏敏反反应应) 局局部

45、部组组织织坏坏死溃疡死溃疡2胃胃肠肠炎炎(细细菌菌性性食食物物中中毒毒):最最常常见见的的沙沙门门菌菌感感染染(1)致病机制:细菌侵袭肠粘膜,释放内毒素致病机制:细菌侵袭肠粘膜,释放内毒素(2)症状:发热,呕吐,腹泻症状:发热,呕吐,腹泻3败血症败血症4无症状带菌者无症状带菌者指指在在症症状状消消失失后后一一年年或或更更长长的的时时间间内内仍仍可可在在其其粪粪便便中中有相应沙门菌。病菌滞留于胆囊或尿道中。有相应沙门菌。病菌滞留于胆囊或尿道中。83(三)(三)免疫性免疫性主要防御机制:特异性细胞免疫主要防御机制:特异性细胞免疫一、一、微生物学检查法微生物学检查法1标本:病程不同,采取不同标本标本

46、:病程不同,采取不同标本2分离培养与鉴定分离培养与鉴定(1)传统方法:传统方法:血液、骨髓液血液、骨髓液 增菌增菌 生化反应生化反应 肠道鉴别培养基肠道鉴别培养基 可疑菌落可疑菌落粪粪便便、尿尿 离离心心 玻玻片片凝凝集集试验试验 (2)近期发展:近期发展:新新的的免免疫疫学学方方法法,分分子子生生物物学学方方法法,Vi噬噬菌菌体体分分型型 843血清学诊断:肥达试验血清学诊断:肥达试验(1)概概念念:是是用用已已知知伤伤寒寒沙沙门门菌菌菌菌体体(O)抗抗原原和和鞭鞭毛毛(H)抗抗原原,以以及及引引起起副副伤伤寒寒的的甲甲型型副副伤伤寒寒沙沙门门菌菌、肖肖式式沙沙门门菌菌和和希希氏氏沙沙门门菌

47、菌H抗抗原原的的诊诊断断菌菌液液与与受受检检血血清清做做试试管管或或微微孔孔板板凝凝集集试试验验,测测定定受受检检血血清清中中有有无无相相应应抗抗体及其效价的试验。体及其效价的试验。(2)结果)结果正正常常值值:伤伤寒寒沙沙门门菌菌O凝凝集集效效价价小小于于1:80,H效效价价小小于于1:160,引引起起副副伤伤寒寒沙沙门门菌菌H效价小于效价小于1:80动态观察:逐周复查动态观察:逐周复查O与与H抗体的诊断意义抗体的诊断意义其他其他85第第1111章章 弧菌属弧菌属第一节霍乱弧菌第一节霍乱弧菌(V.cholerae) 一、生物学性状一、生物学性状(一一).形态与染色形态与染色G-.弧弧形形,无

48、无芽芽孢孢,有有菌菌毛毛、单单鞭鞭毛毛,运动活泼运动活泼,鱼群状鱼群状(二二)培养特性与生化反应培养特性与生化反应碱碱性性培培养养基基(PH:8。8 -9.6)生生长长良良好,好, 86(三三).抗原构造与分型抗原构造与分型O抗抗原原:耐耐热热,有有群群特特异异性性(155个个学学清清群群),O1,O139群群引引起起霍霍乱乱. O1群群根根据据其其3种种抗抗原原因因子子A.B.C,又又可可分分为为小小川川型型,稻稻叶叶型型,彦彦岛岛型型三三个个血血清清型型,每每型型还还可可分分为为古古典典生生物物型型与与ElTor生生物型物型. O1与与O139群在抗原方面无交叉群在抗原方面无交叉H抗原:不

49、耐热,无特异性抗原:不耐热,无特异性(四四)抵抗力抵抗力水中存活水中存活1-3w,耐低温、碱,耐低温、碱, 对热、干燥对热、干燥. 酸敏感。酸敏感。 87二、致病性二、致病性(一一)致病物质致病物质(1)霍乱肠毒素霍乱肠毒素 (cholera toxin,CT)B亚单位(亚单位(5个):抗原性强,结合亚个):抗原性强,结合亚单位,与小肠粘膜上皮细胞单位,与小肠粘膜上皮细胞GM1神经神经节苷脂受体结合节苷脂受体结合 。A亚亚单单位位(A1、A2):抗抗原原性性弱弱,毒毒性性部部位位,进进入入细细胞胞, 使使细细胞胞内内cAMP升升高高,肠肠细细胞胞分分泌泌增增强强,导导致致水水、电电解解质大量流

50、失产生剧烈腹泻质大量流失产生剧烈腹泻.(2)鞭毛鞭毛.菌毛及其他毒力因子菌毛及其他毒力因子88(二二)所致疾病:霍乱所致疾病:霍乱(1)病程:病程:病病菌菌被被食食入入 胃胃 黏黏附附至至小小肠肠上上皮皮细细胞胞 繁繁殖殖 产产生生霍霍乱乱肠肠毒毒素素 细细胞胞内内cAMP浓浓度度上上升升 肠肠细细胞胞分分泌泌机机制制紊紊乱乱 呕呕吐吐,腹泻(米泔水样)腹泻(米泔水样)(2)特点:特点:病人每天可失水病人每天可失水10-15升升迅迅速速失失水水,代代谢谢酸酸中中毒毒,休休克克等等,12-24小小时死亡时死亡米米泔泔水水样样腹腹泻泻物物:有有黏黏膜膜,上上皮皮细细胞胞,大大量量弧菌构成弧菌构成病

51、愈后可在胆囊短期带菌病愈后可在胆囊短期带菌8990( (三三) )免疫性免疫性(1)非特异性免疫:胃酸非特异性免疫:胃酸(2)特特异异性性抗抗体体:抗抗产产毒毒素素抗抗体体,抗抗菌菌体体抗抗体,肠腔中体,肠腔中SIgA(黏膜免疫黏膜免疫)(3)对同群霍乱弧菌有牢固免疫力对同群霍乱弧菌有牢固免疫力三、三、微生物学检查法微生物学检查法1快速诊断快速诊断 悬滴法观察悬滴法观察(运动性)(运动性)米泔水样便米泔水样便 涂片涂片 革兰氏染色革兰氏染色2分离培养分离培养 碱性蛋白胨水,碱性蛋白胨水,37,6-8小时小时 3鉴定:玻片凝集试验,生化反应鉴定:玻片凝集试验,生化反应91四、防治原则四、防治原则

52、1、疫苗、疫苗肌注死疫苗,口服疫苗,基因工程疫苗肌注死疫苗,口服疫苗,基因工程疫苗2、对病人及时补充液体和电解质、对病人及时补充液体和电解质92第第12章章螺杆菌属螺杆菌属幽门螺杆菌幽门螺杆菌 (Helicobacter pylori)一、一、生物学性状生物学性状1G-螺杆菌,有鞭毛,运动活泼螺杆菌,有鞭毛,运动活泼2微需氧,培养需动物血清,微需氧,培养需动物血清,PH6.0-7.0二、二、致病性与免疫性致病性与免疫性1感染非常普遍感染非常普遍2传染途径:粪传染途径:粪-口口3相相关关疾疾病病:慢慢性性胃胃炎炎,十十二二指指肠肠溃溃疡疡,胃胃腺腺癌癌,胃黏膜相关胃黏膜相关B细胞淋巴瘤(细胞淋巴

53、瘤(MALT)致病物质:鞭毛,黏附素,尿素酶,蛋白酶,空泡毒素,致病物质:鞭毛,黏附素,尿素酶,蛋白酶,空泡毒素,内毒素等内毒素等 三、微生物学检查三、微生物学检查四、防治原则:无有效预防措施,治疗用抗菌疗法四、防治原则:无有效预防措施,治疗用抗菌疗法 93第第13章章 厌氧性细菌厌氧性细菌 厌氧性细菌厌氧性细菌 (anaerobic bacteria):是是一群必须在无氧环境下才能生长繁殖的一群必须在无氧环境下才能生长繁殖的细菌。细菌。 分类:分类: 厌氧芽孢梭菌(厌氧芽孢梭菌(G+ 杆菌)杆菌) 无无芽芽孢孢厌厌氧氧菌菌(多多种种,G+,G-球球菌,菌,G+,G-杆菌)杆菌)94第一节第一

54、节 厌氧芽孢梭菌属厌氧芽孢梭菌属厌氧芽孢梭菌厌氧芽孢梭菌 (Clostridum):是一群革兰氏是一群革兰氏染色阳性,能形成芽孢的大杆菌。对热、干染色阳性,能形成芽孢的大杆菌。对热、干燥和消毒剂有强大的抵抗力。少数为致病菌,燥和消毒剂有强大的抵抗力。少数为致病菌,如破伤风梭菌,产气荚膜梭菌,肉毒梭菌等。如破伤风梭菌,产气荚膜梭菌,肉毒梭菌等。一、一、破伤风梭菌破伤风梭菌 (C. tetani)(一)一)生物学性状生物学性状1.形形态态:G+杆杆菌菌,有有周周生生鞭鞭毛毛,无无荚荚膜膜,芽孢正圆,位于菌体顶端,成鼓槌状芽孢正圆,位于菌体顶端,成鼓槌状2. 培养:血平板,培养:血平板,-溶血,薄膜

55、状菌落溶血,薄膜状菌落抵抗力:芽孢,抵抗力:芽孢,100,1小时破坏,小时破坏,干燥土干燥土壤中可存活数十年壤中可存活数十年 959697(二)(二)致病性与免疫性致病性与免疫性1致病条件致病条件 伤口深窄,有泥土伤口深窄,有泥土伤口伤口+芽孢芽孢/菌体菌体 坏死组织坏死组织 同时有需氧菌或兼性厌同时有需氧菌或兼性厌氧菌感染氧菌感染2致病物质致病物质(1)破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素 (tenanospasmin)性质性质:a.不不 耐耐 热热 蛋蛋 白白 质质 ( 65, 30min) ,150kDa,由由A,B两链构成两链构成b.极强的神经毒素极强的神经毒素c.免疫源性强,可获抗毒素和类毒

56、素免疫源性强,可获抗毒素和类毒素983、致病机制、致病机制 芽芽孢孢 繁繁殖殖体体 局局部部生生长长繁繁殖殖 分分泌泌破破伤伤风风痉痉挛挛毒毒素素 经经局局部部神神经经细细胞胞吸吸收收或或经经淋淋巴巴、血血液液到到达达中中枢枢神神经经系系统统 运运动动神神经经元元, 阻阻止止抑抑制制性性神神经经介介质质释释放放 骨骨骼骼肌肌强强烈痉挛。烈痉挛。4临床表现临床表现(1)局部肌肉痉挛:牙关紧闭,苦笑面容局部肌肉痉挛:牙关紧闭,苦笑面容(2进行性肌肉痉挛:角弓反张,呼吸障碍进行性肌肉痉挛:角弓反张,呼吸障碍2免疫性:免疫性:中和抗体中和抗体破伤风抗毒素破伤风抗毒素人工免疫人工免疫破伤风类毒素,抗毒素

57、破伤风类毒素,抗毒素99100101102(一)微生物学检查法(一)微生物学检查法 一般不用采集标本培养一般不用采集标本培养(二(二防治原则防治原则1主动免疫方法:主动免疫方法: 白百破三联疫苗白百破三联疫苗2、被被动动免免疫疫方方法法: 破破伤伤风风抗抗毒毒素素(TAT),),早期,足量应用早期,足量应用3、伤口清创扩创、伤口清创扩创 103二、肉毒梭菌二、肉毒梭菌 (C. botulinum)(一)生物学特性:一)生物学特性:1形形态态:G+杆杆菌菌,芽芽孢孢粗粗于于菌菌体体,位位于次极端,于次极端,有鞭毛,无荚膜有鞭毛,无荚膜2分分组组分分型型:4组组,7型型;,组组引引起人类疾病,起人

58、类疾病,C型毒素毒性最大型毒素毒性最大3抵抵抗抗力力:肉肉毒毒素素不不耐耐热热(煮煮沸沸20min破坏)破坏); 芽孢芽孢,100,3-5hr104二、致病性二、致病性1致病物质:肉毒毒素(神经毒)致病物质:肉毒毒素(神经毒)与破伤风外毒素的相似点:与破伤风外毒素的相似点:毒性强,人致死量为毒性强,人致死量为1-2g结构,功能,致病机制与破伤风外毒素相似结构,功能,致病机制与破伤风外毒素相似与破伤风外毒素的区别:与破伤风外毒素的区别:对酸、蛋白酶抵抗力强,导致肌肉麻痹对酸、蛋白酶抵抗力强,导致肌肉麻痹不沿神经纤维传导,留在神经肌肉接头处不沿神经纤维传导,留在神经肌肉接头处C,D型毒素由噬菌体编

59、码型毒素由噬菌体编码 2所致疾病所致疾病(1)食物中毒:罐头,香肠,豆制品食物中毒:罐头,香肠,豆制品症状:少见肠胃道症状,主要为神经末梢麻痹症状:少见肠胃道症状,主要为神经末梢麻痹(2)创伤感染中毒创伤感染中毒(3)婴儿肉毒中毒:主要由蜂蜜引起婴儿肉毒中毒:主要由蜂蜜引起 105(一)(一)微生物学检查法微生物学检查法检测肉毒毒素:检测肉毒毒素:(二)(二)防治原则防治原则1低温保存食品低温保存食品280,20min加热食品加热食品3 、中毒病人尽早注射抗毒素、中毒病人尽早注射抗毒素 106107第二节第二节无芽孢厌氧菌无芽孢厌氧菌一、一、生物学性状生物学性状(一一)革革兰兰氏氏阴阴性性厌厌

60、氧氧杆杆菌菌:8个个属属,有有荚荚膜膜,菌菌毛毛,不运动不运动 类杆菌属类杆菌属脆弱类杆菌脆弱类杆菌(二)(二)革兰氏阴性厌氧球菌:革兰氏阴性厌氧球菌:3个属个属 韦荣菌属,混合感染菌,咽喉部韦荣菌属,混合感染菌,咽喉部(三)(三)革兰氏阳性厌氧球菌:革兰氏阳性厌氧球菌:5个属个属 消化链球菌属,寄居于阴道,混合感染菌消化链球菌属,寄居于阴道,混合感染菌(四)(四)革兰氏阳性厌氧杆菌:革兰氏阳性厌氧杆菌:7个属个属1丙酸杆菌属:痤疮丙酸杆菌丙酸杆菌属:痤疮丙酸杆菌2双歧杆菌属:多形态,有分枝,属益生菌类双歧杆菌属:多形态,有分枝,属益生菌类108二、二、致病性致病性(一)(一)致病条件致病条件

61、1宿主免疫力低下宿主免疫力低下2寄居部位改变寄居部位改变3局部厌氧微环境局部厌氧微环境4菌群失调菌群失调(二)(二)细菌毒力细菌毒力1菌毛,荚膜菌毛,荚膜2多种毒素,胞外酶,可溶性代谢物多种毒素,胞外酶,可溶性代谢物3、改变自身对氧的耐受性、改变自身对氧的耐受性 109(三)三)感染特征感染特征1、内源性、内源性 感染感染2无特定病型无特定病型3分泌物或脓液分泌物或脓液4使用氨基糖苷类抗生素长期无效使用氨基糖苷类抗生素长期无效5、标本用普通方法培养无厌氧菌生长、标本用普通方法培养无厌氧菌生长(四)(四)所致疾病所致疾病1腹腔感染腹腔感染2女性生殖道和盆腔感染女性生殖道和盆腔感染3口腔感染口腔感

62、染4呼吸道感染呼吸道感染5败血症败血症6。中枢神经系统感染。中枢神经系统感染 110三、微生物学检查法三、微生物学检查法1标本采集标本采集2直接涂片镜检直接涂片镜检3分离培养与鉴定分离培养与鉴定培养:牛心脑浸液血平板,厌氧培养培养:牛心脑浸液血平板,厌氧培养鉴鉴定定:生生化化反反应应,气气液液相相色色谱谱检检测测代代谢谢终产物,分子生物学方法终产物,分子生物学方法四、四、防治原则防治原则1外科处理外科处理2。抗生素(药敏试验)。抗生素(药敏试验) 111第第14章章分枝杆菌属分枝杆菌属 第第一一节节结结核核分分枝枝杆杆菌菌 (Mycobacterium tuberculosis)分枝杆菌属分枝

63、杆菌属 (Mycobacterium):是一类细是一类细长略弯曲的杆菌,因繁殖时有分枝生长长略弯曲的杆菌,因繁殖时有分枝生长趋势而得名,又称抗酸杆菌。包括结核趋势而得名,又称抗酸杆菌。包括结核分枝杆菌,麻风分枝杆菌等分枝杆菌,麻风分枝杆菌等 112一、一、生物学性状生物学性状(一一)形态与染色形态与染色(1)细细长长略略弯弯,有有时时呈呈分分枝枝状状,无无芽芽孢孢,鞭鞭毛毛,荚荚膜膜(2)抗酸染色抗酸染色 红色(抗酸菌红色(抗酸菌)(3)细胞壁厚,结构复杂,富含脂质细胞壁厚,结构复杂,富含脂质113(二二)培养及生化特性培养及生化特性培养基:罗氏培养基,专性需氧培养基:罗氏培养基,专性需氧 菌

64、菌落落:生生长长缓缓慢慢,代代时时18-24小小时时,2-4周周可可见见菌菌落落生生长长;不不透透明明,颗颗粒粒,结结节或菜花状菌落节或菜花状菌落(三三)抵抗力抵抗力1抗抗干干燥燥(干干痰痰中中存存活活6-8月月),抗抗酸酸、碱,抗低浓度染料碱,抗低浓度染料2对对酒酒精精、湿湿热热、紫紫外外线线敏敏感感;对对利利福福平平、环丝氨酸、链霉素等抗结核药物敏感环丝氨酸、链霉素等抗结核药物敏感114115(三三)变异性:形态、菌落、毒力、耐药性变异性:形态、菌落、毒力、耐药性BCG毒毒力力变变异异株株,是是将将有有毒毒的的牛牛型型结结核核分分枝枝杆杆菌菌培培养养于于含含甘甘油油、胆胆汁汁、马马铃铃薯薯

65、的的培培养养集集中中,经经13年年230次次传传代代而而获获得得的的减减毒毒活活菌菌株株,现现广广泛泛用用于于人人类类结核病的预防。结核病的预防。116一、致病性和免疫性一、致病性和免疫性(一)(一)致病物质致病物质1.脂质脂质 (lipid):占细胞壁干重的占细胞壁干重的60%(1)索索状状因因子子 (cord factor):分分枝枝菌酸菌酸+海藻糖海藻糖破坏线粒体膜,影响细胞呼吸破坏线粒体膜,影响细胞呼吸抑制白细胞游走抑制白细胞游走引起慢性肉芽肿引起慢性肉芽肿(2)磷磷脂脂 (phosphatide):刺刺激激单单核核细胞增生形成结核结节及干酪样坏死细胞增生形成结核结节及干酪样坏死117

66、(3)蜡蜡质质D (wax-D):分分枝枝菌菌酸酸+肽肽糖糖脂脂,引起动物迟发型超敏反应,具佐剂作用引起动物迟发型超敏反应,具佐剂作用(4)硫硫酸酸脑脑苷苷酯酯 (sulfatide):抑抑制制吞吞噬噬细细胞中的吞噬体与溶酶体融合胞中的吞噬体与溶酶体融合2.蛋白质蛋白质:结核菌素结核菌素(1)与蜡质与蜡质D结合引发迟发型超敏反应结合引发迟发型超敏反应 (2)有抗原性,可刺激机体产生相应抗体有抗原性,可刺激机体产生相应抗体3.多糖多糖 (polysaccharide)4.荚膜荚膜118(二)所致疾病二)所致疾病1肺部感染肺部感染(1)原原发发感感染染:结结核核分分枝枝杆杆菌菌出出次次感感染染在在

67、肺肺内形成病灶,称为原发性肺结核。内形成病灶,称为原发性肺结核。结结核核分分枝枝杆杆菌菌 肺肺泡泡 吞吞噬噬细细胞胞 繁繁殖殖释释放放 肺肺泡泡渗渗出出性性炎炎症症(原原发发灶灶) 肺门淋巴结肺门淋巴结 淋巴结肿大淋巴结肿大 纤维化纤维化(2)继继发发感感染染:原原发发灶灶内内结结核核分分枝枝杆杆菌菌或或外源结核分枝杆菌再次引起的感染。外源结核分枝杆菌再次引起的感染。菌菌体体(内内源源、外外源源) 再再次次感感染染 发发炎炎 干酪样坏死干酪样坏死1192肺外感染肺外感染经经血血液液、淋淋巴巴液液扩扩散散, 脑脑、肾肾、骨骨、关关节节、生殖器官结核生殖器官结核消化道消化道: 肠结核,结核性腹膜炎

68、肠结核,结核性腹膜炎破损皮肤破损皮肤: 皮肤结核皮肤结核120121三免疫性与超敏反应三免疫性与超敏反应1主要免疫机制:主要免疫机制: 细胞免疫细胞免疫2特特异异性性抗抗体体:仅仅对对细细胞胞外外细细菌菌发发挥挥作用作用3感感染染免免疫疫:免免疫疫力力随随结结核核分分枝枝杆杆菌菌或其成分在体内存在而存在或其成分在体内存在而存在4.细胞免疫与迟发型超敏反应同时存在细胞免疫与迟发型超敏反应同时存在5.迟迟发发型型超超敏敏反反应应由由结结核核菌菌素素蛋蛋白白与与蜡蜡质质D共同刺激产生共同刺激产生122(四)结核菌素试验(四)结核菌素试验1概概念念:是是用用结结核核菌菌素素来来测测定定机机体体能能否否

69、引引起起皮皮肤肤迟迟发发型型超超敏敏反反应应的的一一种种试试验验,以以判判断断机机体体对结核分枝杆菌有无免疫力。对结核分枝杆菌有无免疫力。2结核菌素试剂结核菌素试剂:(1)OT(2)PPD(PPD-C,BCG-PPD)3、方法、方法PPD-C(5U)48-72小时小时注射前臂注射前臂观察结果观察结果BCG-PPD(5U) 1234、结果与分析结果与分析(1)大大于于5mm,阳阳性性.机机体体已已感感染染过过结核分枝杆菌或卡介苗接种成功结核分枝杆菌或卡介苗接种成功 (2)大大于于15mm,强强阳阳性性,表表明明可可能能有活动性结核病有活动性结核病(3)阴阴性性:未未感感染染过过结结核核分分枝枝杆

70、杆菌菌或或未未接接种过卡介苗种过卡介苗;细胞免疫功能低下细胞免疫功能低下 124125.应用应用 (1)选择BCG接种对象及测定接种效果,结核菌素反应阴性者应接种BCG;(2)结核菌素试验对婴幼儿可做诊断结核病之用;(3)可在未接种BCG的人群中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查;(4)可借用其测定肿瘤病人的细胞免疫功能。126三、微生物学检查三、微生物学检查1标本:痰,尿,脑脊液,血液等标本:痰,尿,脑脊液,血液等2集菌:集菌:痰痰 4%NaOH/3%HCL/6%H2SO4,30min 中中和和 离离心心 沉沉淀淀接接种种培培养基养基 3-4周周3染色镜检染色镜检4动物实验:注射豚鼠腹股沟皮下

71、动物实验:注射豚鼠腹股沟皮下5细菌核酸检测:细菌核酸检测:PCR检测,早期,快速检测,早期,快速四、防治原则四、防治原则1预防接种:预防接种:BCG127第二节第二节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 (Corynebacterium. diphtheriae) 一、生物学性状一、生物学性状1形态与染色形态与染色G+杆菌,无荚膜,鞭毛,芽孢,美兰染色可见异染颗粒杆菌,无荚膜,鞭毛,芽孢,美兰染色可见异染颗粒 2培养特征与生化反应培养特征与生化反应(1)培养:培养:培养基:培养基:吕氏培养基吕氏培养基 温度:温度:34-37 需氧或兼性厌氧需氧或兼性厌氧菌落:灰白,光滑,湿润小菌落菌落:灰白,光滑,湿润

72、小菌落(2)生化反应生化反应 亚碲酸钾亚碲酸钾 碲碲1变异:形态,菌落,毒力,溶源转换变异:形态,菌落,毒力,溶源转换2抵抗力抵抗力(1)抗干燥,日光抗干燥,日光(2)对湿热,消毒剂敏感对湿热,消毒剂敏感(3)对青霉素,红霉素敏感对青霉素,红霉素敏感128二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性(一)致病物质一)致病物质1白喉毒素白喉毒素 (diphtherotoxin)(1)产产毒毒过过程程:-棒棒状状杆杆菌菌噬噬菌菌体体侵侵袭袭无无毒毒白白喉喉棒棒状状杆杆菌菌 tox基基因因与与宿宿主主染染色色体体整整合合 溶溶源源转转换换 产产白白喉毒素喉毒素(2)毒素物质)毒素物质毒性强,抗原性强毒性强,

73、抗原性强由由A,B两两条条肽肽链链组组成成,A链链是是毒毒性功能区,性功能区,B链是结合转位区链是结合转位区1293)作用机制:作用机制:B链链受受体体结结合合区区与与细细胞胞表表面面受受体体结结合合 转位区协助转位区协助A链进入细胞链进入细胞 催催化化EF-2与与ADPR结结合合失失活活 抑抑制制蛋白质合成蛋白质合成2索索状状因因子子 (cord factor):糖糖脂脂,破坏动物细胞线粒体破坏动物细胞线粒体3、K抗原:糖蛋白,抗吞噬抗原:糖蛋白,抗吞噬 130(二)所致疾病:白喉(二)所致疾病:白喉 传染源:患者,带菌者传染源:患者,带菌者 外外毒毒素素入入血血 与与易易感感细细胞(心肌细

74、胞、)结合胞(心肌细胞、)结合细菌侵染细菌侵染 潜伏(潜伏(2-7d) 形形成成假假膜膜(渗渗出出纤纤维维素素、白白细细胞胞、坏坏死死组组织织) 假假膜膜脱脱落落呼呼吸吸道道阻阻塞塞 (三)免疫性:主要依靠抗毒素的中和作用(三)免疫性:主要依靠抗毒素的中和作用(四)锡克试验:(四)锡克试验: 概念:调查人群对白喉是否有免疫力的概念:调查人群对白喉是否有免疫力的试验,其原理是皮内毒素和抗毒素中和反应。试验,其原理是皮内毒素和抗毒素中和反应。 131三三、微生物学检查法微生物学检查法1标本:鼻咽拭子标本:鼻咽拭子2涂片染色镜检:初步诊断涂片染色镜检:初步诊断3分离培养:吕氏血清斜面分离培养:吕氏血

75、清斜面4鉴定:鉴定:(1)生化反应生化反应(2)毒力实验毒力实验体内法:豚鼠体内法:豚鼠体外法:琼脂体外法:琼脂Elek平板毒力实验平板毒力实验四、四、防治原则防治原则1人工主动免疫:白百破三联疫苗人工主动免疫:白百破三联疫苗2人工被动免疫:注射白喉抗毒素人工被动免疫:注射白喉抗毒素3抗菌治疗:青霉素,红霉素抗菌治疗:青霉素,红霉素132第三节第三节 嗜肺军团菌嗜肺军团菌 (Legionella. Pneumophila) 一、生物学性状一、生物学性状1形态染色形态染色G-杆杆菌菌,菌菌体体形形态态易易变变,有有鞭鞭毛毛,菌菌毛毛,微微荚荚膜,无芽孢膜,无芽孢2培养及生化反应培养及生化反应培培

76、养养基基:活活性性炭炭-酵酵母母浸浸出出液液琼琼脂脂培培养养基基(BCYE),),专性需氧,少量专性需氧,少量CO2可促生长可促生长温温度度:35 PH:6.4-7.2 菌菌落落:1-2mm,灰白,灰白,S型型抗原组成:抗原组成:O抗原,抗原,H抗原抗原 1334抵抗力抵抗力(1)存存在在于于水水源源中中,喜喜湿湿,以以气气溶溶胶胶方式传播方式传播(2)与与原原虫虫、微微生生物物形形成成共共生生关关系系,耐耐36-70热水热水(3)对氯、酸有一定抗性对氯、酸有一定抗性(4)对对常常用用化化学学消消毒毒剂剂、干干燥燥、紫紫外外线敏感线敏感二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 134(一)致病物质

77、(一)致病物质1酶酶类类,细细胞胞毒毒素素:抑抑制制吞吞噬噬体体与与溶溶酶酶体体融合融合2菌毛,微荚膜:黏附,抗吞噬菌毛,微荚膜:黏附,抗吞噬3内毒素内毒素(一)(一)所致疾病:军团菌病所致疾病:军团菌病感染型:感染型:1流感样型:轻症感染(旁地亚克热)流感样型:轻症感染(旁地亚克热)2肺炎型:军团病肺炎型:军团病3肺外感染型:继发性感染肺外感染型:继发性感染(二)(二)免疫性:细胞免疫免疫性:细胞免疫135(一)(一)免疫性:细胞免疫免疫性:细胞免疫一一、微微生生物物学学检检查查:细细菌菌学学检检查查,血血清学实验,清学实验,PCR技术等技术等二、二、防治原则防治原则1无特异性疫苗无特异性疫

78、苗2加强水源管理加强水源管理3、药物治疗:红霉素、药物治疗:红霉素 136第第16章章 动物源性细菌动物源性细菌概念:以动物作为传染源,能引起动物概念:以动物作为传染源,能引起动物和人类发生人兽共患病的病原菌称为动和人类发生人兽共患病的病原菌称为动物源性菌。主要包括布氏菌、炭疽芽孢物源性菌。主要包括布氏菌、炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶氏菌等杆菌、鼠疫耶氏菌等。 137第第 一一 节节 炭炭 疽疽 芽芽 孢孢 杆杆 菌菌 (Bacillus. Anthracis)属于芽孢杆菌属属于芽孢杆菌属 (Bacillus)一、生物学性状一、生物学性状1形态与染色形态与染色G+粗粗大大杆杆菌菌,两两端端截截平平,竹

79、竹节节样样排排列列,无无鞭鞭毛毛,芽芽孢孢位位于于菌菌体体中央,可形成荚膜中央,可形成荚膜2培养特性培养特性培养基:普通琼脂培养基上即可生长,需氧或兼性厌氧培养基:普通琼脂培养基上即可生长,需氧或兼性厌氧温度:温度:30-35 菌落:灰白,粗糙,不溶血菌落:灰白,粗糙,不溶血3抗原结构抗原结构(1)炭炭疽疽毒毒素素复复合合物物:由由保保护护性性抗抗原原,致致死死因因子子,水水肿肿因因子子组成,有抗吞噬作用及免疫源性组成,有抗吞噬作用及免疫源性(2)荚膜多肽抗原:据抗吞噬作用荚膜多肽抗原:据抗吞噬作用(3)芽孢抗原:免疫原性,血清诊断芽孢抗原:免疫原性,血清诊断(4)菌体多糖抗原:与毒力无关,耐

80、热,菌体多糖抗原:与毒力无关,耐热,Ascoli热沉淀反应热沉淀反应1384抵抗力抵抗力(1)芽芽孢孢抗抗干干燥燥,抗抗化化学学消消毒毒剂剂,对对碘碘及氧化剂较敏感及氧化剂较敏感(2)高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌,121,15min杀灭杀灭菌体对青霉素、红霉素、氯霉素等敏感菌体对青霉素、红霉素、氯霉素等敏感 139二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性1致病物质致病物质(1)荚膜:抗吞噬荚膜:抗吞噬(2)炭炭疽疽毒毒素素:损损伤伤微微血血管管内内皮皮细细胞胞,增增加加血血管管通透性,形成水肿通透性,形成水肿2所致疾病:人、动物炭疽病所致疾病:人、动物炭疽病(1)皮皮肤肤炭炭疽疽:皮皮肤肤小小伤伤口口

81、侵侵入入 小小疖疖 小小疱疱、脓疮脓疮 黑色焦痂黑色焦痂(2)肠炭疽:食入污染食物)肠炭疽:食入污染食物症状:呕吐,肠麻痹,血便,毒血症症状:呕吐,肠麻痹,血便,毒血症 (3)肺炭疽:吸入含芽孢尘埃)肺炭疽:吸入含芽孢尘埃症状:呼吸道症状,全身中毒症状症状:呼吸道症状,全身中毒症状3免疫性:感染后可获持久免疫力免疫性:感染后可获持久免疫力140三、微生物学检查三、微生物学检查1标本标本皮肤炭疽:水泡、脓疱内容物,血液皮肤炭疽:水泡、脓疱内容物,血液肠炭疽:粪便,血液,畜肉肠炭疽:粪便,血液,畜肉肺炭疽:痰,病灶渗出液,血液肺炭疽:痰,病灶渗出液,血液2直接涂片镜检直接涂片镜检革兰氏染色,特异性

82、荧光抗体染色革兰氏染色,特异性荧光抗体染色3分离培养与鉴定分离培养与鉴定血琼脂平板,碳酸氢钠琼脂平板血琼脂平板,碳酸氢钠琼脂平板青霉素串珠试验,噬菌体裂解试验青霉素串珠试验,噬菌体裂解试验四、四、防治原则防治原则1控制家畜感染和牧场污染控制家畜感染和牧场污染2预防预防炭疽减毒活疫苗炭疽减毒活疫苗治疗治疗青霉素,强力霉素青霉素,强力霉素 141第二节第二节 鼠疫耶氏菌鼠疫耶氏菌 (Yersinia. Pestis) 一、一、生物学性状生物学性状1形态与染色形态与染色G-短短杆杆菌菌,两两端端钝钝圆圆,两两级级浓浓染染,有有荚荚膜膜,无无鞭毛、芽孢鞭毛、芽孢2培养特性培养特性培养基:含血液或组织液

83、培养基,兼性厌氧培养基:含血液或组织液培养基,兼性厌氧温度:温度:27-30 PH:6.9-7.2菌落:细小,粘稠,粗糙型菌落:细小,粘稠,粗糙型液体培养特征:絮状沉淀液体培养特征:絮状沉淀 菌膜(钟乳石状菌膜(钟乳石状下沉)下沉) 1423抗原结构抗原结构(1)F1抗抗原原:荚荚膜膜抗抗原原,不不耐耐热热糖糖蛋蛋白白,抗抗原原性性强,抗吞噬强,抗吞噬(2)V/W抗抗原原:V抗抗原原(胞胞质质,可可溶溶性性蛋蛋白白),W抗原(菌体表面,脂蛋白)抗原(菌体表面,脂蛋白)抗吞噬作用,使细菌可在细胞内存活抗吞噬作用,使细菌可在细胞内存活(3)外膜蛋白:数种,突破宿主防御机制外膜蛋白:数种,突破宿主防

84、御机制(4)鼠毒素:外毒素,抗原性强,可制成类毒素鼠毒素:外毒素,抗原性强,可制成类毒素(5)内毒素:类似于肠道杆菌内毒素内毒素:类似于肠道杆菌内毒素4、抵抗力:对理化因素抵抗力弱,在蚤粪、土壤中、抵抗力:对理化因素抵抗力弱,在蚤粪、土壤中可存活可存活1年年 5变异性:变异性:变异性强:生化特性,毒力,耐药性,抗原构造变异性强:生化特性,毒力,耐药性,抗原构造R S 毒力减弱毒力减弱143二、二、致病性与免疫性致病性与免疫性1致病物质:致病物质:(1)F1抗原抗原(2)V/W抗原抗原(3)外膜抗原外膜抗原(4)鼠毒素鼠毒素2所致疾病所致疾病传播媒介:鼠蚤传播媒介:鼠蚤(1)腺鼠疫:急性淋巴结炎

85、腺鼠疫:急性淋巴结炎(2)肺肺鼠鼠疫疫(黑黑死死病病):,高高热热寒寒颤颤,咳咳嗽嗽,胸胸痛,咳血痛,咳血(3)败血症型鼠疫:高热,休克,败血症型鼠疫:高热,休克,DIC3免疫性免疫性感染后可获得牢固免疫力(感染后可获得牢固免疫力(F1,V/W抗体抗体 144三、微生物学检查法三、微生物学检查法1标本:专用实验室检测标本:专用实验室检测2直接涂片镜检直接涂片镜检3分离培养与鉴定分离培养与鉴定 固体培养:观察菌落形态固体培养:观察菌落形态培养培养 液体培养:液体培养:48hr,“钟乳石钟乳石”现象现象鉴定:涂片镜检,生化试验,血清凝集试验鉴定:涂片镜检,生化试验,血清凝集试验4血血清清学学试试验验:检检测测人人或或动动物物血血清清中中的的鼠鼠疫疫抗抗体体滴滴度度5检测核酸:检测核酸:PCR技术技术四、四、防治原则防治原则1灭鼠灭蚤灭鼠灭蚤2活菌疫苗活菌疫苗145

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