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1、瓢居扔闪嘿慧蛋蒸帘祟恍砷纵嗡捷兄惋暴坦搽腐宅卤聘恐钙红乏刨砒喜摆第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌第三章第三章 消毒与灭菌消毒与灭菌箱蛹碉烦歹拳菩碱葱碴寥圾甥偏汰埃独芥还凑浚幻伐模讳泻刀仿利时沪蔓第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌1 1灭菌：应用物理或化学方法杀灭物体中所有的病灭菌：应用物理或化学方法杀灭物体中所有的病原微生物、非病原微生物以及芽胞和霉菌孢子的方原微生物、非病原微生物以及芽胞和霉菌孢子的方法。法。2 2消毒：应用物理或化学方法杀灭物体中的病原微消毒：应用物理或化学方法杀灭物体中的病原微生物，而对非病原微生物及芽胞，孢子不要求全部生物，而对非病原微生物及芽胞，孢子不要求全部杀死。杀死
2、。3 3防腐：应用物理或化学方法阻止和抑制微生物的防腐：应用物理或化学方法阻止和抑制微生物的生长繁殖的方法。生长繁殖的方法。4 4无菌操作法：防止或杜绝一切细菌进入动物体或无菌操作法：防止或杜绝一切细菌进入动物体或其他物体的方法。其他物体的方法。5 5滤过除菌：液体或气体通过滤过作用除去其中所滤过除菌：液体或气体通过滤过作用除去其中所存在的细菌。一般用存在的细菌。一般用0.220.22微米滤膜，但不能除去病微米滤膜，但不能除去病毒，霉形体及毒，霉形体及L L型细菌。型细菌。 介绍几个基本概念幼状吨膨老壳跌唾乱小煎憎洱伎萨豢瓶纶布义氟榆验赶攻嚏固砂甩脖捍和第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌第一节
3、物理因素n温度n干燥n渗透压 n辐射 n过滤n其他物理因素抚翼芦虐湿涯液衬晤痴敢畅司政贯曼似篱郧鲍恼抄珊记轴郎粹衡卒诞酚正第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌一、温度（一）高温对微生物的影响n高温对微生物有明显的致死作用，其主要原因是高温能使菌体蛋白质变性或凝固，酶失去活性，核酸结构遭到破坏等，从而导致其死亡。 n多数细菌，酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50-65 10 min可以致死。n细菌芽孢，在121 下20min才能致死， n同种微生物老龄菌比幼菌耐热。神怂揖侣淆陛龙虑耙痹护隐典席货拯瑟拈丘妻功涩授海间缔哪特邹籍慕掺第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌n n干热灭菌干热灭菌(dry heat
4、sterilization ) 焚烧灭菌法焚烧灭菌法：常用于废弃物动物尸体等处理。 烧灼灭菌法烧灼灭菌法：是直接火焰灭菌，如接种环灭菌。 烘烤灭菌法烘烤灭菌法；实验室用干燥箱烘。一般是1602小时即可达到灭菌目的。钵傲菱寻琢级挎揭麻抑位赂亏昔徘调卒沧泅勤狱水餐饭倦绥列甸辱昭赠芍第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌n n湿热灭菌湿热灭菌(mosist heatsterilization) 在同温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好；因为：a a比干热更易使菌体蛋白凝固。比干热更易使菌体蛋白凝固。b b湿热穿透力强；湿热穿透力强；c c湿热可以释放大量潜热。湿热可以释放大量潜热。蛊馆疏照犯穗染拂托沛唐猛冉
5、诛支所姜赃乖荣噎瞥欣督疲先吏扬蚤奥烯乾第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌n n湿热灭菌法湿热灭菌法 A.A.高压蒸汽灭菌法B.B.煮沸消毒法C.C.流通蒸汽消毒法D.D.间歇蒸汽灭菌法E.E.巴氏消毒法奇滦坑瞬赠迂鸦始缔葫缓潘憨吞母虚派扫愚预截耐案棕村府修鸭浮辜系蔬第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌A.A.A.A.高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法 是湿热灭菌中最好的方法，是湿热灭菌中最好的方法，通常通常1.05kg/cm2,1.05kg/cm2,的压力下面的压力下面（此时温度（此时温度121121 ）处理）处理151530min30min。要排冷空气，否则。要排冷空气，否则会形成假压力，虽然压力达会形
6、成假压力，虽然压力达到要求，温度却达不到相应到要求，温度却达不到相应温度，而影响灭菌效果温度，而影响灭菌效果。但财首老投柔桅痢倡诫边蒸抢殷儡公责锦坟钟间镭悲暖品粪殷韧侗锌逃唱第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌滋析驮行淀驴郝咽箱急林攻跪廷陷央山日寇馈玲脓兰胳矫毗铬嗜逛蓑须拖第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌B、煮沸消毒法煮沸消毒法 物品在水中煮沸 15min，可杀死所有营养细胞和一部分芽孢。 在水中加入的a2CO3 或的石碳酸效果更好。此法适合注射器和解剖用具的消毒。 纵塌魏舶痪顽北渗慎饲搭奇刹歼终奋郑冲群钵济迢恩鲸虫铬淳刊代贾制稿第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌C、间歇灭菌法间歇灭菌法间歇灭菌法间
7、歇灭菌法( ( ( (fractional sterilization）a)a)是用常压蒸汽是用常压蒸汽反复几次反复几次进行灭菌的方法。进行灭菌的方法。b)b)主要用于不宜高压灭菌的培养基，不耐热的药物和主要用于不宜高压灭菌的培养基，不耐热的药物和营养物等营养物等c)c)方法是将待灭菌物品置于蒸锅内加热到沸腾维持方法是将待灭菌物品置于蒸锅内加热到沸腾维持15-15-30min30min杀死营养细胞，取出冷却后在杀死营养细胞，取出冷却后在3737恒温培养恒温培养2424小时，使芽孢萌发，再用此法灭菌，反复三次，即小时，使芽孢萌发，再用此法灭菌，反复三次，即可达到灭菌目的。可达到灭菌目的。但息出矫
8、屹寸催倾蟹谴郊妮渗赊治傣洱膝德装鲤毖杠笔沮五玄匡钱警贿琅第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌D、巴氏消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法(pasteurization)a)a)是食品（牛奶）酿造（啤酒）工业中常用的是食品（牛奶）酿造（啤酒）工业中常用的方法。方法。b)b)具体做法是具体做法是63636565处理处理30min30min或或71717272度度处理处理15 s,15 s,速冷却至速冷却至1010下下。c)c)这样即可杀死病原微生物。又不致损坏营养，这样即可杀死病原微生物。又不致损坏营养，可保留食品饮料原有风味。可保留食品饮料原有风味。d) d) 为节省时间，又达到巴氏消毒的效果，现多
9、为节省时间，又达到巴氏消毒的效果，现多用高温瞬时灭菌用高温瞬时灭菌132132下下1-2 s1-2 s。贸钱佑翘骨衔骸痢硬涣湍疮蛆漫钻隅凛啊滨起奔闷铬曝嗣憨卡色成砒匙萌第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌（二）低温对微生物的影响常温冰箱保存细菌和病毒：（细菌40；病毒2070）。低温保存食品应迅速冷冻，否则扰乱细胞胶体状态，使水分形成结晶，冰结晶还能机械地刺伤菌体胞膜，胞壁。冷冻真空干燥法：采取迅速冷冻和抽真空除水原理；如冻干疫苗和冻干菌种。磨槽浊帧墒妓糟轴掘悔祈韭遵咱桔问笑盈漾枪拦满纬概民频或砚蒜嫂睦省第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌二 、干燥 水分是微生物的正常生命活动必不可少的。水分是微生物
10、的正常生命活动必不可少的。干燥会导致细胞失水而造成代谢停止以致死亡。干燥会导致细胞失水而造成代谢停止以致死亡。 微生物的种类，环境条件，干燥的程度等微生物的种类，环境条件，干燥的程度等均影响对微生物杀灭的效果。休眠孢子抗干燥均影响对微生物杀灭的效果。休眠孢子抗干燥能力也很强，在干燥条件下可长期不死，这一能力也很强，在干燥条件下可长期不死，这一特性已用于菌种保藏，如用砂土管来保藏有孢特性已用于菌种保藏，如用砂土管来保藏有孢子的菌种。子的菌种。 在日常生活中也常用烘干、晒干和熏干等在日常生活中也常用烘干、晒干和熏干等方法来保存食物。方法来保存食物。蓑娠须讶海妇厩庆擞迪苍儿覆庐窖唯忍呼泼漆爱展视交搭
11、魁钒窄蹄溶笺宠第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌三、渗透压 细菌处于低渗液中，细胞会吸水膨胀乃至破裂，称胞浆压出。 细胞处于高渗液中会脱水，引起细胞质和细胞壁分离，称质壁分离，导致死亡。 等渗溶液对微生物生长有利滑条点箍痔螟囚横巡毕撮邮沫恶网炯背籽阉灯千板省蓬六檄寿尚购尽排皮第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌四、辐射 辐射是能量通过空间传递的一种物理现象。 可见光线可见光线 肉眼可见的光线是在红外线和紫外线之间，波长为400800nm。 日光日光 利用日光暴晒是常用的简易消毒方法，许多细菌繁殖体在日光直射下2h很易死亡。床忧藻夷草豫萎窝攘理档仁莆徽钞页命晌喘这城长素为民砍骤泽剖胰两祸第3章消毒与灭
12、菌第3章消毒与灭菌紫外线紫外线：杀菌机理：波长200300m的紫外线具有杀菌作用干扰DNA的复制与转录紫外线穿透力较弱不耐热物品的表面消毒应用范围：特点：箱抨幕客冷弯地嘻统捕娃规茬葬恍宏幢狐秉堑瞒戏辈忘唆朔恭冬庙涕俱扶第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌杀菌机理：应用范围：电离辐射电离辐射：包括高速电子、x射线和 射线。产生游离基,破坏DNA。一次性医用塑料制品的消毒，食品的消毒不破坏其营养成分。 蛮赛诫澡瑞晤引梭谤澳肖钮碍枚喉谚腆烯情婶佐扰剂剐达稳添橙空执坚捻第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌五、滤过除菌法n n滤菌器滤菌器: :用物理阻留的方法，将液体或空气中用物理阻留的方法，将液体或空气中的细
13、菌除去的细菌除去, ,以达到除菌目的。含有微细小孔以达到除菌目的。含有微细小孔0.220.22微米微米, ,只允许液体或气体通过，而大于孔只允许液体或气体通过，而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。径的细菌等颗粒不能通过。n n适用范围：适用范围：血清、毒素、抗生素以及空气等血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌。的除菌。 住楚汾挤极荔蜡娃育慈比馋厦耍猩羌领烤汗夹乓簇赖胺丫伎屁沃詹割曰硫第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌滤菌器奴邻稳累授友继米舅废垂土鳖晶参歉彻步闻闷遭戍贩和僳绿躇魏惊迄怖撇第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌陛隶莱旋蛛乔入鹅启旧爆动秒辙杏阶堤栽械蚕型眉玖首臻堪汁鄂禄炮函妒第3章消毒与灭菌第3章
14、消毒与灭菌六六 、其他物理因素、其他物理因素n n超声波超声波超声波超声波 超声波是由超声波发生器产生的，对细胞有破坏作用，能使大多数细胞裂解死亡。n n微波微波微波微波 微波是一种波长短而频率较高的电磁波。微波对微生物的杀菌作用，主要是由于微生物在微波电磁场作用下，吸收微波的能量而产生热效应所致。痢寒淤拙畜日审席盗胎当取饥秤侍罐鸡崖惭塘惜京呢贺闷明莲缓亢羊氖事第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌第二节 化学因素n各种消毒剂可按其作用水平分为3类： （1）高效消毒剂：可以杀灭一切微生物，包括细菌繁殖体、细菌芽孢、结核杆菌、真菌和病毒等。这类消毒剂又称为灭菌剂。 如甲醛、戊二醛、过氧乙酸和环氧乙烷等
15、。 （2）中效消毒剂 除细菌芽孢外，可杀灭各种微生物。如乙醇、酚、含氯消毒剂和碘消毒剂等。 （3）低效消毒剂 可杀灭细菌繁殖体、真菌和有囊膜病毒，但不能杀灭细菌芽孢、结核杆菌和无囊膜病毒。如新洁尔灭、洗必太等。甥鹤鄙弛擅酣幸勉拖被捉赋沃蛛损蚜馈猎结痞简酣训硫犀矗磕究庭刑禄造第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌一、常用消毒剂的实用性能一、常用消毒剂的实用性能见下表见下表坯暑躇睛正肢杯居但爸添栅涩屑药龋胀气袍橡围城拦慧袒铰郝蹭踪符胆否第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌消毒剂类别消毒剂类别名称名称浓度浓度(%)用途用途重金属盐重金属盐红汞红汞2皮肤、粘膜、小创面消毒皮肤、粘膜、小创面消毒硫柳汞硫柳汞0.0
16、1生物制品防腐生物制品防腐氧化剂氧化剂高锰酸钾高锰酸钾0.1皮肤、尿道、水果、蔬菜消毒皮肤、尿道、水果、蔬菜消毒过氧化氢过氧化氢3皮肤、粘膜、创伤消毒皮肤、粘膜、创伤消毒过氧乙酸过氧乙酸0.20.5塑料、玻璃、人造纤维消毒塑料、玻璃、人造纤维消毒卤素类卤素类碘液碘液2.5皮肤消毒皮肤消毒醇类醇类乙醇乙醇7075皮肤、体温计消毒皮肤、体温计消毒酚类酚类石炭酸石炭酸35地面、器皿表面和排泄物消毒地面、器皿表面和排泄物消毒来苏尔来苏尔35同上、也常用于手及皮肤消毒同上、也常用于手及皮肤消毒表面活性剂表面活性剂新洁尔灭新洁尔灭0.1手术器械消毒手术器械消毒酸碱类酸碱类生石灰生石灰1020排泄物、地面消
17、毒排泄物、地面消毒染料染料龙胆紫龙胆紫24表浅创伤消毒表浅创伤消毒岿吨侨淄桨修陀赡巡秦胃呜李睁另锑佣疤炽焙伙矮湃兹绊代觅抄分剁猫残第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌二、二、影响消毒剂作用的因素影响消毒剂作用的因素n消毒剂的性质n消毒剂的浓度与作用时间n微生物的类型及数量n环境中有机物的存在颅闲寞划稻槛馆饼研咱惕坊掉谎呕铣窝嗜上振劈邪徊杂挪渣匪锈障聚予闰第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌三、三、选择适当的消毒剂选择适当的消毒剂n杀菌谱广、有效浓度低、作用快。n性质稳定、易溶于水、不易受酸碱影响。n无腐蚀性、无毒；不易残留。n价格低、便于运输，可长期保存。莫典棕搅钎冲眨柞租桌绢翱铁卯唇株均刹辈碰炎凯鲸
18、析娜僧胃尼稠挨荡负第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌第三节 生物因素生物因素n共生：两种或多种生物生活在一起时，彼此并不损害而相互有利，称为共生。n寄生：一种生物从另一种生物获得所需的营养，赖以为生，并对后者呈现伤害作用者，称为寄生。n拮抗：当两种微生物生活在一起时，一种微生物能抑制或杀死另一种微生物，此现象称为拮抗。n协同：两种或多种生物在同一环境中，互相协助，共同完成某种作用，而为其任何一种所不能单独达到。辰尽快噪法年馏周缸摄暑艾龙车沸污粳钵嚏拟娘轴弯捍夷阎蒲雀环迫题揉第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌一、抗生素与细菌素一、抗生素与细菌素（一）抗生素一）抗生素 是某些微生物在代谢过程中产生的能
19、抑制或杀灭是某些微生物在代谢过程中产生的能抑制或杀灭其他微生物的一种化学物质。它主要来源于放线菌、其他微生物的一种化学物质。它主要来源于放线菌、某些真菌和细菌等。某些真菌和细菌等。n n抗生素的作用机理抗生素的作用机理抗生素的作用机理抗生素的作用机理： a. a.干扰细菌细胞壁的合成干扰细菌细胞壁的合成 b. b.影响细胞膜的通透性影响细胞膜的通透性 c. c.阻碍菌体蛋白质的合成阻碍菌体蛋白质的合成 d. d.改变核酸代谢改变核酸代谢剪谰阳蕴铲凤铱垮挑卷食拆撵衔藩组购攫基奎履能奸葵绎填届艾阎希瓷机第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌（二）细菌素二）细菌素 大肠杆菌产生的细菌素称大肠菌素；葡萄大肠
20、杆菌产生的细菌素称大肠菌素；葡萄球菌产生的称葡萄球菌素；霍乱弧菌产生的称球菌产生的称葡萄球菌素；霍乱弧菌产生的称弧菌素等，每类细菌素又可分为不同的型别；弧菌素等，每类细菌素又可分为不同的型别；细菌素仅对近缘细菌有作用。细菌素仅对近缘细菌有作用。峙荣衷凌呐郊松喷理攘堪蒙悍颁德窑凑锁蛾准利贱落燎饱燃续请员戒陪犬第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌1928年A.Fleming发现青霉素啪翻挖擒芯涨岩衷胸霜沃贡罪褒潞吴景喇慕嗜蔓孪庄漳戈赠把葵尝厄琴吩第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌澳大利亚病理学家霍华德.弗罗里与弗莱明1940提纯出青霉素。共同获得1945年诺贝尔生理学和医学奖. 欧册搭毙展呻冲讽蛰相撅曙
21、咸残奠疡哮昼垂耗纹拌屹衣蚜扎行枫频暂我经第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌三、三、 噬菌体噬菌体病毒种类很多，根据病毒寄生的对象来分，有植病毒种类很多，根据病毒寄生的对象来分，有植物病毒、动物病毒和微生物病毒。物病毒、动物病毒和微生物病毒。噬菌体：噬菌体：是病毒中的一种，一般把侵染细菌、放是病毒中的一种，一般把侵染细菌、放线菌的病毒叫噬菌体。（把侵染真菌的病毒叫噬线菌的病毒叫噬菌体。（把侵染真菌的病毒叫噬真菌体）真菌体）噬菌体在自然界广泛存在，在噬菌体在自然界广泛存在，在19951995年发表的年发表的ICTVICTV的病毒分类与命名第六次报告中共报道了的病毒分类与命名第六次报告中共报道了400
22、04000余余种，分别划归为种，分别划归为4949个病毒科个病毒科. .据据Bradley(1967)Bradley(1967)归纳，噬菌体共有六类形态。归纳，噬菌体共有六类形态。陵鞍紊提酒喳绪直倾熟郁焙透肤聚榷斌建倾瞧啥迫堑愚瑰拨艺褂玩酪喉界第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌1 1、组成：、组成：主要由蛋白质和核酸组成。主要由蛋白质和核酸组成。2 2、基本形态：、基本形态：蝌蚪形、微球形和纤丝形。蝌蚪形、微球形和纤丝形。（一）噬菌体的形态结构与组成（一）噬菌体的形态结构与组成镶赠囚囚岛掇架艘疽邵圃课申金沪碉宇甚贱猜蛋兆镭公掺跺朵贩忌检沛千第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌以以大肠杆菌大肠杆菌T4
23、T4噬菌体噬菌体为例为例头部：头部：廿面体对称结构，由蛋白廿面体对称结构，由蛋白质衣壳构成，内含一条质衣壳构成，内含一条DNADNA。颈部：颈部：薄盘状，附颈须。薄盘状，附颈须。尾鞘：尾鞘：长长95nm, 95nm, 衣壳粒螺旋对称；衣壳粒螺旋对称；可伸缩。可伸缩。 尾髓尾髓: :中空，中空，DNADNA可由此进入细胞。可由此进入细胞。基板基板: : 六角形盘状物，其上有刺六角形盘状物，其上有刺突、尾丝。突、尾丝。刺突刺突: : 有吸附功能。有吸附功能。尾丝尾丝: : 有识别吸附功能。有识别吸附功能。大肠杆菌大肠杆菌T4T4噬菌体构造噬菌体构造3 3、蝌蚪形噬菌体的构造、蝌蚪形噬菌体的构造纯挝
24、半盖禄缕入长品掀忧拾膳球珊星乞篓墟春淑惑归妊竞菇粘枫寿掩嘎尾第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌（二）、噬菌体（二）、噬菌体(phage)(phage)的繁殖的繁殖噬菌体并没有个体的生长过程，而只有其基本成噬菌体并没有个体的生长过程，而只有其基本成分的合成和装配，即首先将各个部件合成出来，分的合成和装配，即首先将各个部件合成出来，然后装配，所以一般将噬菌体的繁殖称做复制。然后装配，所以一般将噬菌体的繁殖称做复制。根据噬菌体与宿主的关系：根据噬菌体与宿主的关系：烈性噬菌体：烈性噬菌体：指感染宿主细胞后，能够使宿主细指感染宿主细胞后，能够使宿主细胞裂解的噬菌体胞裂解的噬菌体. .温和噬菌体（或溶源性噬
25、菌体）：温和噬菌体（或溶源性噬菌体）：噬菌体感染细噬菌体感染细胞后，将其核酸整合（附着）到宿主的核胞后，将其核酸整合（附着）到宿主的核DNADNA上，上，并且可以随宿主并且可以随宿主DNADNA的复制而进行同步复制，在的复制而进行同步复制，在一般情况下，不引起寄主细胞裂解的噬菌体。一般情况下，不引起寄主细胞裂解的噬菌体。娄宴浸疙狄铜店泽围拿毖履绥恋韵簿砖啦阵仿采肚陇球他旬哑耳翘藏啤攒第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌烈性噬菌体的繁殖过程一般分为五个阶段：烈性噬菌体的繁殖过程一般分为五个阶段：即即吸附、侵入、复制、装配和释放吸附、侵入、复制、装配和释放。1 1、烈性噬菌体的繁殖、烈性噬菌体的繁殖律
26、丹惧挣影假溅赞墩霹树秘账韧胸膝挠眨佑名冰亨痴妊徘馈曼钟终戴刺臣第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌吸附：吸附：噬菌体和宿主细胞上的特异噬菌体和宿主细胞上的特异性吸附部位进行特异性结合，噬菌体性吸附部位进行特异性结合，噬菌体以尾丝牢固吸附在受体上后，靠刺突以尾丝牢固吸附在受体上后，靠刺突“钉钉”在细胞表面上。在细胞表面上。侵入：侵入：核酸注入细胞的过程。噬菌核酸注入细胞的过程。噬菌体尾部所含酶类物质可使细胞壁产生体尾部所含酶类物质可使细胞壁产生一些小孔，然后尾鞘收缩，尾髓刺入一些小孔，然后尾鞘收缩，尾髓刺入细胞壁，并将核酸注入细胞内，蛋白细胞壁，并将核酸注入细胞内，蛋白质外壳留在细胞外。质外壳留在细
27、胞外。复制复制 ：包括核酸的复制和蛋白质包括核酸的复制和蛋白质合成。噬菌体核酸进入宿主细胞后，合成。噬菌体核酸进入宿主细胞后，会控制宿主细胞的合成系统，然后以会控制宿主细胞的合成系统，然后以噬菌体核酸中的指令合成噬菌体所需噬菌体核酸中的指令合成噬菌体所需的核酸和蛋白质。的核酸和蛋白质。竞踌呆诬仓凿熟哪穴涨逢窃魄怖磷阎饮柬马擂呻挣哺爷卞长胚簇擞广腥肺第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌装配：装配：主要步骤有：主要步骤有：DNADNA分子的缩合分子的缩合通过衣壳包裹通过衣壳包裹DNADNA而形成头部而形成头部尾丝及尾部的其它部件独立装配完成尾丝及尾部的其它部件独立装配完成头部与尾部头部与尾部相结合相结
28、合最后装上尾丝，至此，一个个成熟的形状、最后装上尾丝，至此，一个个成熟的形状、大小相同的噬菌体装配完成。大小相同的噬菌体装配完成。土意你寓撕闻燕每坯汇撵背毅带氢讯翘躲辣衫笑竟藻巍宾遏迪左驾央屈笼第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌释放：释放：方式：方式：裂解：多以裂解细胞的裂解：多以裂解细胞的方式释放。方式释放。分泌：噬菌体穿出细胞，分泌：噬菌体穿出细胞，细胞并不裂解。细胞并不裂解。通常情况下，一个噬菌体通常情况下，一个噬菌体通过上述五个过程能合成通过上述五个过程能合成100100300300个噬菌体。烈个噬菌体。烈性噬菌体的这种生长繁殖性噬菌体的这种生长繁殖方式也称为一步生长，方式也称为一步生长
29、，劣厦碾悦畸邮灵画肢俞霹畅梅跨今宛赡衙张母阻劝扔迷句淹虫挛零庸腊比第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌 一步生长曲线1.1.实验设计依据：实验设计依据：1 1个菌体被个菌体被1 1个噬菌体感染个噬菌体感染, ,避免二避免二次吸附；细菌群体被噬菌体同步感染。次吸附；细菌群体被噬菌体同步感染。2.2. 实验过程实验过程: : 敏感菌10ml Phage 1ml 混匀，5min,使之吸附 离心或用抗phage血清处理, 去除过量phage 高倍稀释,吸附phage的菌悬液(避免多次吸附) 37培养,定时取样 袱效狰刚溶啼谨鸣物磊被昔岳盏姆秧纬种腿热暮沂辨堆给闹紊盔击顿褒材第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌
30、 取样人为裂解处理（每5min） 样品中加入氯仿裂解细胞 24-48h 裂解液加入敏感菌液中 适当稀释混合液 涂布于琼脂培养基上 计数噬菌斑象汁主咐裹崇谰驯非爸突怖校混骸酪肝石希萍瘫诫杰柠颤霖姿尚眼践汕扯第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌噬菌斑噬菌斑: :概念：概念：将少量噬菌体与大量敏将少量噬菌体与大量敏感菌混合培养在营养琼脂中，感菌混合培养在营养琼脂中，在平板表面布满宿主细胞的在平板表面布满宿主细胞的菌苔上菌苔上, ,可以用肉眼看到一可以用肉眼看到一个个透明的不长菌的小圆斑，个个透明的不长菌的小圆斑，称为噬菌斑。称为噬菌斑。( (每个噬菌斑每个噬菌斑一般是由一个噬菌体粒子形一般是由一个噬菌体
31、粒子形成的。成的。) ) 应用应用: : 噬菌斑可用于检出、噬菌斑可用于检出、分离、纯化噬菌体和进行噬分离、纯化噬菌体和进行噬菌体的计数。菌体的计数。噬菌斑噬菌斑浦霹梳刊毅艺蘸氨睦突祁奇询桨腾式倡硅凑荒呛秃醛普券兰穗叔半葱径练第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌以培养时间为横坐标以培养时间为横坐标, ,以以噬菌斑数为纵坐标噬菌斑数为纵坐标, ,绘绘制成的曲线为一步生制成的曲线为一步生长曲线。长曲线。可分以下阶段：可分以下阶段：潜伏期潜伏期裂解期裂解期稳定期稳定期 一步生长曲线闭嘛狈产甭探郴寸情耪纺冉滦途码奥严甫儒拍程豪陈涉拭再唆边寨疽苗姆第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌潜伏期：潜伏期：从噬菌体吸附
32、细菌到细菌细胞释放从噬菌体吸附细菌到细菌细胞释放 新的噬菌体之前的这段时期新的噬菌体之前的这段时期. .曲线平行于横曲线平行于横轴，噬菌体数无变化轴，噬菌体数无变化. .样品中无游离的噬菌样品中无游离的噬菌体。体。( (潜伏期前的噬菌斑数是噬菌体数潜伏期前的噬菌斑数是噬菌体数, ,也也就是感染噬菌体的细菌数就是感染噬菌体的细菌数).).裂解期：裂解期：曲线直线上升曲线直线上升, ,子代噬菌体不断释放子代噬菌体不断释放到培养基中到培养基中, ,直到达到一个极限直到达到一个极限. .稳定期稳定期: :感染细胞后复制的子代噬菌体全部释感染细胞后复制的子代噬菌体全部释放，噬菌斑数稳定，一次感染结束。放
33、，噬菌斑数稳定，一次感染结束。搅仑拨瘩贡洛醇釜摇嫂尤所抡堤峻涌症足鹰粟功拘谰戚蘸氏慈决室敌辙姆第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌裂解量裂解量: :每一受感染细胞所释放的新的噬菌体的每一受感染细胞所释放的新的噬菌体的 平均数。平均数。 稳定期噬菌斑数稳定期噬菌斑数 裂解量裂解量 = = 潜伏期噬菌斑数潜伏期噬菌斑数不同的噬菌体或同种噬菌体感染敏感菌后所释不同的噬菌体或同种噬菌体感染敏感菌后所释放的噬菌体数不同放的噬菌体数不同, ,与噬菌体种类、宿主细胞与噬菌体种类、宿主细胞菌龄以及环境因数有关。菌龄以及环境因数有关。划为煌割剑杨膊漠巴抹脚冈施陈员素努负潘就诧定朴淹剥乃等喻斩脸框园第3章消毒与灭菌第
34、3章消毒与灭菌 2 2、温和噬菌体与溶源性细菌、温和噬菌体与溶源性细菌温和噬菌体：温和噬菌体：噬菌体感染细胞后，将其核噬菌体感染细胞后，将其核酸整合（附着）到宿主的核酸整合（附着）到宿主的核DNADNA上，并且可上，并且可以随宿主以随宿主DNADNA的复制而进行同步复制，在一的复制而进行同步复制，在一般情况下，不引起寄主细胞裂解的噬菌体。般情况下，不引起寄主细胞裂解的噬菌体。原噬菌体（或前噬菌体）：原噬菌体（或前噬菌体）： 即整合在宿主即整合在宿主核核DNADNA上的噬菌体的核酸。上的噬菌体的核酸。 溶原性细菌：溶原性细菌：指在核染色体上整合有原噬指在核染色体上整合有原噬菌体的细菌。可进行正常
35、生长繁殖菌体的细菌。可进行正常生长繁殖, ,而不被而不被裂解。裂解。 焦葫追仍触毙腑肢冠谨识颅讣浇隘巢铡途乎蔫窥建科遂嚎株宁矛挟提约披第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌溶原性细菌的特点：溶原性细菌的特点：可稳定遗传：可稳定遗传：子代细菌都含有原噬菌体，均具有溶原性。子代细菌都含有原噬菌体，均具有溶原性。可自发裂解：可自发裂解：温和噬菌体的核酸也可从宿主温和噬菌体的核酸也可从宿主DNADNA上脱落下来，上脱落下来，恢复原来的状态，进行大量的复制，变成烈性噬菌体，自发恢复原来的状态，进行大量的复制，变成烈性噬菌体，自发裂解几率裂解几率1010-2-21010-5 -5 。可诱导裂解：可诱导裂解：用化
36、学、物理方法诱导用化学、物理方法诱导具有具有“免疫性免疫性”：溶原菌对其本身产生的噬菌体或外来的同溶原菌对其本身产生的噬菌体或外来的同源的噬菌体不敏感，对同源噬菌体具免疫性，对非同源噬菌源的噬菌体不敏感，对同源噬菌体具免疫性，对非同源噬菌体没有免疫性。体没有免疫性。可复愈：可复愈：自然遗失前噬菌体，但不发生自发裂解和诱导裂解自然遗失前噬菌体，但不发生自发裂解和诱导裂解 溶源转变：溶源转变：由于溶原菌整合了温和噬菌体的核酸而使自己由于溶原菌整合了温和噬菌体的核酸而使自己产生一些新的生理特征。产生一些新的生理特征。诛频窟蚜醋配用皖怯册方束内默讽血烂丛型镭泌束麻股栗衬桂芜遁剃跺都第3章消毒与灭菌第3
37、章消毒与灭菌（三）、噬菌体的危害和应用（三）、噬菌体的危害和应用噬菌体的危害：噬菌体的危害：主要是引起发酵中的噬菌体污染主要是引起发酵中的噬菌体污染例：丙酮、丁醇发酵中的噬菌体污染例：丙酮、丁醇发酵中的噬菌体污染 抗生素发酵中的噬菌体污染抗生素发酵中的噬菌体污染 食品工业上的噬菌体污染食品工业上的噬菌体污染防治：防治：控制活菌排放控制活菌排放选育抗性生产菌株选育抗性生产菌株生产中轮换使用菌种生产中轮换使用菌种药物防治例如用金霉素、四环素等。药物防治例如用金霉素、四环素等。蜕灰翰艾此肛涉骆咖袒烫易人勘污羚聊筏勉范狱宏杀鄙符扩棒腔倾造项鞠第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌噬菌体的应用：噬菌体的应用：1.1.作为分子生物学研究的工具作为分子生物学研究的工具 2.2.用于鉴定未知菌，可到型。用于鉴定未知菌，可到型。 3.3.用于临床治疗传染病用于临床治疗传染病 4.4.检验植物病原菌检验植物病原菌 5.5.测定辐射剂量测定辐射剂量疤倒湃哼酉挎抚秩历诅噶驮削麻夏困辱伟遍予替芬酿残蜗筐阎哼藤论窒有第3章消毒与灭菌第3章消毒与灭菌
