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1、圆环病毒临床感染特点和综合控制方案圆环病毒-分类p圆环病毒科、圆环病毒属，单链环状DNA。p是兽医学上已知动物病毒中最小的病毒，无囊膜，直径17-22nm，含有1.76-2.3kbp根据PCV的致病性、抗原性及核苷酸序列，分为PCV-1和PCV-2两个型圆环病毒-抗逆性p抗热性；在70时可以存活15min,56不能将其灭活p常用消毒剂如福尔马林、碘酒和酒精作用10分钟后，病毒滴度会下降。p抵抗酸性环境。PH=3时长时间存活。p对氯仿不敏感。垫料和发酵床猪场垫料和发酵床猪场二、圆环病毒感染特点-慢！ 口、鼻感染扁桃体和淋巴结全身各组织持续增值和带毒局部增值初级淋巴组织全身淋巴组织和器官07天71
2、4天14天后案例：案例：2010-6湖北（爆发）湖北（爆发）p基本情况基本情况(600头母猪场）。头母猪场）。该场建于该场建于2008年，年，2009年引种，原在一个种猪场引种年引种，原在一个种猪场引种150头头后，再引第二批时引种猪场发病。后，再引第二批时引种猪场发病。2009-6-18宜阳种猪场引种，到场后备猪发病，粪便有潜血，宜阳种猪场引种，到场后备猪发病，粪便有潜血，经磺胺类药物治疗后恢复。经磺胺类药物治疗后恢复。第一批生产从第一批生产从2009年底到现在，半年来，生产成绩优越，哺乳年底到现在，半年来，生产成绩优越，哺乳仔猪成活率达仔猪成活率达98%，保育成活率，保育成活率99%，育肥
3、成活率，育肥成活率99%。案例：发病情况案例：发病情况p2010-6-18，因天热消毒，并，因天热消毒，并淋浴降温公猪舍淋浴降温公猪舍和没使用和没使用零排放的种猪舍零排放的种猪舍。p2010-6-19，公猪舍，公猪舍7头公猪全部发病，体温头公猪全部发病，体温41.5,个别个别42，嗜睡，体表发红，嗜睡，体表发红，3-4天后皮天后皮肤发红消失，毛孔有黄色的渗出物，鼻分泌物较多，有些咳血。肤发红消失，毛孔有黄色的渗出物，鼻分泌物较多，有些咳血。p初诊断为流感。治疗用青霉素初诊断为流感。治疗用青霉素+VC输液治疗，有一头实验性加地塞米松，输液治疗，有一头实验性加地塞米松，3天后死亡。病程天后死亡。病
4、程57天时个别猪出现呕吐，粪便普遍带血，后期发黄，天时个别猪出现呕吐，粪便普遍带血，后期发黄，p在后期在后期15天天-22天天，大量的黏膜脱落，包裹在粪便排除，这些猪开始采食，逐渐耐过康复。，大量的黏膜脱落，包裹在粪便排除，这些猪开始采食，逐渐耐过康复。p母猪舍发病情况与公猪类似，母猪舍发病情况与公猪类似，淋水后第二天发病淋水后第二天发病，发酵床没淋浴，发病稍晚。妊娠后期表现严，发酵床没淋浴，发病稍晚。妊娠后期表现严重，死亡率也较高，胎儿死亡，不易排出。重，死亡率也较高，胎儿死亡，不易排出。p整栋传播较慢，需整栋传播较慢，需10天左右，第天左右，第34天达到高峰，天达到高峰，一个星期后达到死亡
5、高峰，不死的一个星期后达到死亡高峰，不死的20多天多天开始康复，开始康复，死亡率达死亡率达50%。p育肥猪，出上述症状外，拉稀，粪便褐色有潜血或黄色，拉稀可达育肥猪，出上述症状外，拉稀，粪便褐色有潜血或黄色，拉稀可达30%，10%的后肢瘫痪，的后肢瘫痪，10%呕吐，呕吐，保育死亡率已达保育死亡率已达50%，现仍没康复。，现仍没康复。案例：治疗情况案例：治疗情况p治疗治疗1：林可：林可+大观，复合制剂可能含强效解热剂酚制剂，注射大观，复合制剂可能含强效解热剂酚制剂，注射后采食维持一天，预后不良。后采食维持一天，预后不良。p治疗治疗2：穿心莲：穿心莲+多西环素，治疗六头，虽然反弹，但三头轻微，多西
6、环素，治疗六头，虽然反弹，但三头轻微，另三头也未见加重。另三头也未见加重。p治疗治疗3：磺胺：磺胺+多西环素多西环素+中药针剂，已注射就吃料，一停针就中药针剂，已注射就吃料，一停针就不食。不食。p目前：目前：2010-7-11只有只有3040头母猪康复头母猪康复鼻孔分泌物鼻孔分泌物鼻孔分泌物鼻孔分泌物 武汉亚博特动物健康管理武汉亚博特动物健康管理(中美合资中美合资)有限公司有限公司 Wuhan Yabote Animal Health Management CO.,LTD 皮肤发紫皮肤发紫气管内分泌物气管内分泌物间质性肺炎间质性肺炎胸腔积液和粘连、肺脏坏死胸腔积液和粘连、肺脏坏死喉头出血点喉头
7、出血点腹腔积液和肠鼓气腹腔积液和肠鼓气膀胱出血膀胱出血脾脏充血、梗阻脾脏充血、梗阻肾盂出血肾盂出血心脏冠状沟出血点心脏冠状沟出血点胆汁反流胆汁反流肾点状出血肾点状出血扁桃体充血和出血扁桃体充血和出血结果结果定量定量定性定性定量定量定性定性蓝耳蓝耳10阴性阴性26.49*104弱阳弱阳31.74*106阳性42.42*108强阳强阳53.16*108强阳强阳圆环圆环10阴性阴性25.04*1010阳性阳性32.80*109强阳强阳43.31*107阳性阳性56.72*108强阳强阳PCR备注备注PCR备注备注猪瘟猪瘟1阴性2阴性3阴性阴性4阴性5阴性流感流感1阴性H1H32阴性H1H33阴性H1
8、H34阴性H1H35阴性H1H3p菌检测结果如下：菌检测结果如下：检测项目检测项目结果结果药敏结果药敏结果敏感药物敏感药物链球菌链球菌阳性阳性阿莫西林、氟苯尼考、头孢噻呋钠阿莫西林、氟苯尼考、头孢噻呋钠多杀性巴多杀性巴氏杆菌氏杆菌阳性阳性阿莫西林、氟苯尼考、强力霉素、阿莫西林、氟苯尼考、强力霉素、恩诺沙星、头孢噻呋钠、恩诺沙星、头孢噻呋钠、支气管波支气管波氏杆菌氏杆菌阳性阳性阿莫西林、氟苯尼考、强力霉素、阿莫西林、氟苯尼考、强力霉素、恩诺沙星、四环素、恩诺沙星、四环素、圆环病毒攻毒实验中国兽医杂志2009-7司兴奎、郭鑫、杨汉春p15头38日龄的长白猪pPCV-2PRRSVPPVPRVSIVC
9、SFV及JEV经PCR和RT-PCR检测为阴性，同时PCV-2和PRRS用ELISA抗体检测为阴性。p40日龄10头实验组接种pcv-2BF株，口服2ml同时滴鼻1.5ml含毒量为107.25/0.3ml;对照组5头同样的方法接种培养基。 质料来源：中国兽医杂志2009-7司兴奎、郭鑫、杨汉春 感染后天数101421283542ORF2抗体1.90.21.80.33.32.14.33.110.35.811.43.8阳性率1/41/44/42/22/22/2注：接种3、7天抗体检测为阴性。s/p2.0为阳性攻毒实验-血清抗体阳性率（资料来源：中国兽医杂志2009-7司兴奎、郭鑫、杨汉春） （资料
10、来源：（资料来源：中国兽医杂志中国兽医杂志2009-7 司兴奎、郭鑫、杨汉春）司兴奎、郭鑫、杨汉春）（资料来源：中国兽医杂志2009-7司兴奎、郭鑫、杨汉春） （资料来源：中国兽医杂志2009-7司兴奎、郭鑫、杨汉春） 感染后天数7天14天21天42天带毒组织扁桃体、腹股沟淋巴结扁桃体除胰脏外所有组织中组织病毒持续增值带毒-持续感染（资料来源：中国兽医杂志2009-7司兴奎、郭鑫、杨汉春）最好的采样部位？和采样时间 圆环病毒流行病学-场内循环（年龄）p2000年郎洪武等京、冀、鲁、豫、津、赣、吉7省22个群559份血清抗体年龄20日1-2月育肥后备经产总样本数5813996141125559阳
11、性数0234961107240阳性率016.5%51%43.3%85.6%42.9%注：12月龄消瘦9头血清学阴性；45月龄6头消瘦猪均阳性感染特点-要注意哪些问题p潜伏期长，持续带毒普遍。p抗体产生慢。-不适合紧急普免p很难净化，存在范围广。p危害大，长期破坏猪群的免疫状态。保育期带毒状态非常普遍，与蓝耳病毒感染相互协同。三、圆环病毒流行病学-场内循环（年龄）p2000年郎洪武等京、冀、鲁、豫、津、赣、吉7省22个群559份血清抗体年龄20日1-2月育肥后备经产总样本数5813996141125559阳性数0234961107240阳性率016.5%51%43.3%85.6%42.9%注：1
12、2月龄消瘦9头血清学阴性；45月龄6头消瘦猪均阳性流行病学场内循环-年龄p2003年，琚春梅等豫、鄂、赣、沪、湘5省1257份送检血清抗体年龄仔猪育肥母猪公猪总阳性率30.83%64.93%71.5%70.27%57.28%流行病学场内循环-结论p随着年龄的增长阳性率增加，说明感染持续，隐性感染普遍存在。p评价圆环病毒感染状态，由于抗体产生较慢，血清学检测意义不大。p定量检测抗原必要性，标准105以上应采取控制措施 后备猪免疫程序-美国后备母猪免疫种类疫苗剂量方式入场当周回肠炎、大肠杆菌和沙门氏菌Enterisol+Sal,E.coliWater MedicatorOral第二周蓝耳病活病毒阳
13、性血清混合稀释IM第三周 支原体、圆环、流感 circumuwent,Myco,respiFlu3,Wolf-Flu4mlIM第15和16周细小、钩端螺旋体和猪丹毒LEP+B5mlIM第16和19周蓝耳和油皮病Wolf PRRS+Greasy4mlIM第17和20周支原体和流感Mycohault Wolf SIV+Respiflu33mlIM四、流行病学-其他病原关系pPRRSVpSIVpPPApAPPpMHpSSHSPpBIOPMpSAM PCV-2相关疾病蓝耳病病毒和圆环病毒相关性五、症状五、症状-PCV2相关的疾病相关的疾病断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWSPMWS ）猪皮炎肾病综合征（
14、PDNSPDNS） PCV2 PCV2 PCV2 PCV2猪呼吸道病复合征（PRDCPRDC）A2型先天性震颤（CTCT）繁殖障碍？繁殖障碍？繁殖障碍？繁殖障碍？猪增生性和坏死性肺炎（PNPPNP）1、PMWS简介ppPMWSPMWS主要侵害主要侵害6-126-12周龄的周龄的 仔猪仔猪pp发病率一般为发病率一般为5%-30%5%-30%，病死率可达，病死率可达50%-100%50%-100%pp进行性消瘦、呼吸困难、发育障碍、皮肤苍白、共济失调及突然死亡，造成患猪免进行性消瘦、呼吸困难、发育障碍、皮肤苍白、共济失调及突然死亡，造成患猪免疫机能下降，生长性能降低，给养猪业带来很大损失疫机能下降
15、，生长性能降低，给养猪业带来很大损失p腹股沟淋巴结显著肿大，其外部皮肤呈淡蓝色。腹内侧和腹下有弥散性芝麻粒至绿豆大小的淡蓝色皮下出血点。乳头尤其是后两对乳头呈淡蓝色。p少数猪出现顽固性腹泻，腹泻物呈黄色或灰褐色。p个别猪眼睑肿胀，结膜潮红，p病猪初期体温升高到4041，后期体温正常，甚至降低，最后衰竭死亡。ppPMWSPMWS很可能是很可能是PCV-2PCV-2与与PPVPPV、PRRSVPRRSV及其它一些病原产生的结果及其它一些病原产生的结果 2、先天性震颤（CT）主要见于新生仔猪全身骨骼肌痉挛性收缩，表现头部、肋部和四肢震颤，站立不稳，行走困难，吮吸不住乳头。在卧地和睡眠时震颤消失，但在
16、睡醒和站立地震颤复现。大多数病仔猪震颤随日龄增加逐渐减弱或消失。一般于2030日龄痊愈，愈后无复发现象。 MOV08916.MPG3、猪皮炎肾病综合症（PDNS）pPDNSPDNS是一种以系统血管炎为特征的，主要侵害猪体皮肤和肾脏是一种以系统血管炎为特征的，主要侵害猪体皮肤和肾脏的一种传染病。该病首次在英国报道（的一种传染病。该病首次在英国报道（19931993）症状：）症状：p主要见于生长猪和保育猪，主要见于生长猪和保育猪，体温微高或正常体温微高或正常；p突出的症状是腹部、背部和四肢皮肤上出现。突出的症状是腹部、背部和四肢皮肤上出现。p圆形或不规则形状的圆形或不规则形状的隆起隆起，初期呈红色
17、或紫红色，中后期变为，初期呈红色或紫红色，中后期变为黑色，形成斑块状的黑色痂皮。黑色，形成斑块状的黑色痂皮。p病猪痒感不明显，如无继发感染，一般可病猪痒感不明显，如无继发感染，一般可自行恢复自行恢复。pCreshamCresham等等20012001报道了报道了PMWSPMWS和和PDNSPDNS之间具有一定的相关性。之间具有一定的相关性。 4、猪呼吸道复合症（PRDC）p猪呼吸道复合症是一种严重危害生长、育肥猪的疾病，猪呼吸道复合症是一种严重危害生长、育肥猪的疾病，该病主要发生于该病主要发生于6 62222周龄的猪。周龄的猪。p临床症状：生长缓慢；饲料报酬降低；嗜睡、厌食、临床症状：生长缓慢
18、；饲料报酬降低；嗜睡、厌食、发热、咳嗽，以及呼吸困难。发热、咳嗽，以及呼吸困难。p亚健康状态，应激或天气变化反应明显，治疗机会增亚健康状态，应激或天气变化反应明显，治疗机会增大。大。 5、相关繁殖障碍母猪的表现母猪的表现繁殖障碍繁殖障碍p引起后备母猪和母猪的临床症状，后备母猪和母猪食欲下降引起后备母猪和母猪的临床症状，后备母猪和母猪食欲下降p偶尔发生流产主要引起死胎和木乃伊胎偶尔发生流产主要引起死胎和木乃伊胎p现在，很多情况下不表现明显的流产现在，很多情况下不表现明显的流产胎盘感染胎盘感染p母猪和后备母猪不表现临床症状母猪和后备母猪不表现临床症状p新生弱仔带毒新生弱仔带毒 易与其它疾病混淆易与
19、其它疾病混淆p猪细小病毒猪细小病毒p猪蓝耳病毒猪蓝耳病毒p猪流感猪流感p乙型脑炎乙型脑炎6、肠炎54六、病理变化肾脏百色结节脾脏坏死 腹股沟淋巴结肿大 七、圆环病毒病-发病模式p急性感染哺乳仔猪感染保育仔猪感染育肥仔猪感染全群爆发感染 圆环病毒隐形感染-模型1p隐形感染种猪群保育1保育2保育3保育4保育5保育65w6w7w8w9w空栏哺乳1哺乳2哺乳3哺乳4哺乳5哺乳60w1w2w3w4w哺乳2哺乳3保育1保育2保育3保育4保育5哺乳4哺乳5哺乳6哺乳2哺乳3哺乳2哺乳3哺乳4哺乳5哺乳6哺乳2哺乳3哺乳2保育1保育2保育3保育4保育5哺乳4哺乳5哺乳6哺乳3育肥区p多见于管理和设施好的猪场p
20、其他病原控制较好，应激因素少p血清学检测，随着年龄增长阳性率升高，但整个猪群各阶段阳性率均在50%以下。p病原学分离率低，抗原含量也低，在105以下。p通过管理措施控制，不需要免疫控制 圆环病毒感染-模型2p哺乳期感染种猪群保育1保育2保育3保育4保育5保育65w6w7w8w9w空栏哺乳1哺乳2哺乳3哺乳4哺乳5哺乳60w1w2w3w4w哺乳2哺乳3保育1保育2保育3保育4保育5哺乳4哺乳5哺乳6哺乳2哺乳3哺乳2哺乳3哺乳4哺乳5哺乳6哺乳2哺乳3哺乳2保育1保育2保育3保育4保育5哺乳4哺乳5哺乳6哺乳3育肥区示例2010-8-11广西猪场基本情况基本情况：老长扩建，相距300米。以前比较
21、稳定，近段出现个别母猪流产。哺乳仔猪出现不稳定。实例：2010-8-11广西武宣县送样继发的细菌感染临床表现2p猪群存在免疫抑制性疾病，（主要是蓝耳病病毒活跃或注射蓝耳病弱毒苗).-激发圆环病毒也活跃p哺乳仔猪蓝耳病感染也明显，圆环病毒分离率高，但病毒含量通常处于105以下。p继发感染严重，抗生素治疗效果差，死亡率高。p圆环病毒血清学检测哺乳仔猪阴性，保育猪阳性率升高，消瘦比例大，生长不良；育肥猪血清学阳性率60%以上p母猪群添加两个周替米考星逐步使蓝耳病稳定下来（使用本厂特制蓝耳病毒苗加速蓝耳病毒稳定），需要对母猪群强化圆环苗免疫，在此基础上处理有母源抗体保护的仔猪 圆环病毒感染-模型3p保
22、育临床感染种猪群保育1保育2保育3保育4保育5保育65w6w7w8w9w空栏哺乳1哺乳2哺乳3哺乳4哺乳5哺乳60w1w2w3w4w哺乳2哺乳3保育1保育2保育3保育4保育5哺乳4哺乳5哺乳6哺乳2哺乳3哺乳2哺乳3哺乳4哺乳5哺乳6哺乳2哺乳3哺乳2保育1保育2保育3保育4保育5哺乳4哺乳5哺乳6哺乳3育肥区2010-9-29天津送样-基本情况：1200头母猪种猪场p主要发病阶段在断奶后3540日龄，发病率在30%左右，死亡率在10%。p蓝耳病免疫，母猪用蓝耳病灭活疫苗免疫，仔猪15日龄左右注射海利的弱毒苗。p母猪群及其他阶段猪群表现正常。p本次采样是发病7天左右40-45日龄的仔猪全肺。实
23、例：2010-9-20送样p多伴随蓝耳病毒活跃，破坏免疫系统的基础上感染逐步加重，p一般6周龄多发，也有部分推迟到810周龄。p临床表现为PMWS.发病和死亡850%。p抗原分离阳性率高，但只有部分达到强阳性，取样时可同时病程稍长消瘦猪。p母猪群特制蓝耳苗处理，强化蓝耳苗苗免疫和圆环苗p保育舍采取部分清群方案。-多点式生产。 圆环病毒感染-模型3p保育亚临床感染-育肥早期感染出现。种猪群保育1保育2保育3保育4保育5保育65w6w7w8w9w空栏哺乳1哺乳2哺乳3哺乳4哺乳5哺乳60w1w2w3w4w哺乳2哺乳3保育1保育2保育3保育4保育5哺乳4哺乳5哺乳6哺乳2哺乳3哺乳2哺乳3哺乳4哺乳
24、5哺乳6哺乳2哺乳3哺乳2保育1保育2保育3保育4保育5哺乳4哺乳5哺乳6哺乳3育肥区实例：河南2009-12-18送样p一些管理较好的规模化场，哺乳舍和保育舍严格的全进全出。p蓝耳病感染程度也轻微或毒株毒力弱。p进入育肥舍与保育舍条件差别大，转群应激等因素。死亡率1015%。p检测蓝耳病病原有一定分离率，部分圆环病毒强阳性。采样-p处理意见。强化圆环病毒苗的免疫，同时找到相关病原和环境因素。 圆环病毒感染-模型5p全群爆发前，隐形地感染状态-急性爆发种猪群保育1保育2保育3保育4保育5保育65w6w7w8w9w空栏哺乳1哺乳2哺乳3哺乳4哺乳5哺乳60w1w2w3w4w哺乳2哺乳3保育1保育
25、2保育3保育4保育5哺乳4哺乳5哺乳6哺乳2哺乳3哺乳2哺乳3哺乳4哺乳5哺乳6哺乳2哺乳3哺乳2保育1保育2保育3保育4保育5哺乳4哺乳5哺乳6哺乳3育肥区实例：2010-9-18采样-基本情况p该场2009-8-16日引进第一批种猪，到2010-2-14先后共引进种猪四批次，母猪群注射勃林格公司蓝耳病弱毒苗，每年普防三此，最后一次普防在2010-6-25。仔猪不注射蓝耳苗p伪狂犬疫苗母猪普防勃林格伪狂犬弱毒苗，每年普防三次，最后一次普防在2010-7-25.p2010-8-28之前生产成绩很好，保育成活率接近100%，p8月28日育肥舍开始发病，9月10日后出现神经症状，表现神经症状突然发
26、生，抽搐，神经症状占发病比例5060%，死亡快，体温41左右，随后保育仔猪发病，开始注射勃林格蓝耳病疫苗，注射后23天发病。母猪个别出现流产，流产一胎猪比例大一些，母猪产前厌食和不食较多，产出死胎和弱仔，个别单元产死胎和弱仔比例达20-25%。p根据发病特点和临床表现，重点定量分离蓝耳病病毒和圆环病病毒，兼顾PCR检测疑是的伪狂犬病毒，附带PCR检测猪瘟病毒。同时对细菌全面分离和药敏实验。p确定采样方案，因大部分发病仔猪注射过蓝耳病弱毒苗，故选用没注射蓝耳病弱毒苗挑出30日龄的弱猪，编号为1-1、1-2、1-3定量检测蓝耳病毒；因圆环病毒在体内增值较慢，感染后20多天组织中的病毒才能达到较高的
27、水平，故选用病程较长有消瘦表现的100日龄育肥猪，编号为3-1、3-2、3-3用于定量分离圆环病毒；选三头发病比例最多典型病例（2-3是一头已死亡猪没做检测）编号为2-1、2-2、2-3用于PCR检测猪瘟和伪狂犬。p九头采样猪剖检最明显的症状是间质性肺炎和纤维素性心包炎、胸腔炎及多发性关节炎，一头打开颅腔，脑部水肿，并没有明显的伪狂犬症状和猪瘟症状，腹股沟淋巴结肿大明显，临床上有明显的呕吐症状。初步诊断蓝耳病和圆环病毒感染，继发严重的副猪嗜血杆菌，神经症状主要有副猪嗜血杆菌引起。p多见于新建厂p多伴随蓝耳病的爆发p病程长，损失大，死亡率高，高热病表现p发病期间建议根据药敏实验防继发感染和维持疗
28、法。p做好较长治疗期的用药准备，p康复后做好母猪群的封群和驯化处理，并使用特制蓝耳苗和圆环苗免疫，稳定以后的生产 u长期威胁猪群健康。u垂直感染越来越突出。u免疫抑制对整个防病体系影响严重。u免疫是必需的和必要控制措施。u管理、硬件设施和营养提出更高的要求。 PCV2对未来养猪生产的影响水性佐剂：勃林格油性佐剂：梅里亚、哈兽研、普莱柯、大北农、成都天邦、科前、海利、南农高科八、免疫和疫苗的选择国内市场现有产品目前国产圆环病毒苗现状目前国产圆环病毒苗现状p目前国内圆环病毒苗仍然是全病毒苗为主。目前国内圆环病毒苗仍然是全病毒苗为主。圆环病毒苗最大技术瓶颈圆环病毒苗最大技术瓶颈-病毒培养滴度不高。病
29、毒培养滴度不高。质量控制上质量控制上-批次间不稳定。批次间不稳定。p全病毒苗的缺陷。全病毒苗的缺陷。抗原含量达不到较高的水平。抗原含量达不到较高的水平。培养中使用血清，血清残留副反应大。培养中使用血清，血清残留副反应大。圆环病毒抵抗力强，灭活不全的风险存在。圆环病毒抵抗力强，灭活不全的风险存在。武汉中博猪圆环病毒疫苗中博圆环疫苗的优势p中美技术合作，微载体无血清悬浮培养，质量稳定p抗原含量高，免疫原性好，进口佐剂，无应激p可与喘泰克混注，协同效应明显p产品性价比高毒株佐剂灭活剂抗原含量接种方案WH株进口复乳佐剂BEI107.0、108.0所有猪只均可PCV2b基因型，国内主要流行毒株具有缓释及
30、抗原递呈作用、通针性好抗原结构完整微载体悬浮培养，无血清，纯度高只需一次免疫，操作便捷中博圆环疫苗的特征进口细胞在微载体上生长：悬浮培养3h24h96h细胞生长密度可达1107cells/ml病毒培养滴度可达1108TCID50-IFA一次培养产能相当于600个转瓶培养的产量、疫苗批间质量稳定全自动化操作，减少人为误差及劳动强度抗原处理设备进口Millipore超滤浓缩纯化系统抗原含量108.0TCID50/ml纯化后的VLPs（Cap蛋白）BEI(二乙烯亚胺)灭活快速彻底灭活，不损害免疫原性严格灭活验证，确保疫苗安全严格的分析化学检测，确保BEI无残留BEI灭活剂不同佐剂的免疫效果比较分分组
31、组猪号猪号免前免前ODOD免疫免疫1 1周周免疫免疫2 2周周免疫免疫3 3周周免疫免疫4 4周周猪号猪号进进进进口复合佐口复合佐口复合佐口复合佐剂剂剂剂160.2880.2390.2280.1950.7550.75516550.140.1390.1361.3732.2542.25455610.1620.1340.1651.9612.4132.41361680.2210.1420.1520.3511.2431.24368710.220.1450.1760.3191.0221.02271铝铝胶胶420.1260.090.1140.2850.4520.45242470.1310.0950.1130
32、.7240.9480.94847570.2290.1880.1880.6331.1491.14957640.2430.260.2610.2630.1770.17764720.1860.1410.1430.2140.7150.71572白油白油50.1390.0940.1361.5872.3812.381570.0920.0820.2341.7762.2692.2697130.2820.2040.1970.1550.5390.53913380.1210.1120.1371.8012.3722.37238490.1520.0970.111.3972.3462.34649空白空白对对照照100.09
33、40.0730.0810.0750.0850.08510150.2330.1930.1570.0870.180.1815180.2760.2160.2190.1660.1360.13618240.2510.1790.2080.1710.1530.15324410.1560.0840.090.1550.0850.08541Elisa+Elisa+对对照照2.2512.3212.2592.3562.3722.372Elisa-Elisa-对对照照0.0620.0670.0610.0660.0810.081进口复乳佐剂1、进口复乳佐剂、无免疫应激反应、缓释效果好、抗体持续时间长2、无胶冻现象、通针性
34、良好3、快速诱导机体免疫反应、免疫持续期长免疫效果分析（产品对比）猪号猪号平均日增重平均日增重 免前抗体免前抗体 免后免后1 1周周免后免后2 2周周免后免后3 3周周免后免后4 4周周ChopperChopper圆环圆环高端苗高端苗（圆环圆环力康）力康）280.5070.150.081.4911.8482.412320.0710.0620.1281.2542.034440.0950.0620.3421.7782.407470.1010.0780.3361.5642.294480.0990.0830.0970.2841.809680.1210.0740.080.9822.116ChopperC
35、hopper圆环圆环浓缩浓缩苗苗250.4960.0890.0640.0670.1302.069390.1070.0990.0770.1110.924410.0930.0770.0760.120.598600.1720.0910.080.361.200670.1110.0710.2040.9752.004770.1970.0870.1720.3121.001某国某国产产苗苗190.4670.1110.0670.0740.0750.413330.1030.0760.0640.0820.645420.1090.0620.0740.1160.758610.1170.0710.0760.0991.40
36、4650.1330.0910.1030.2471.256工艺过程及关健质控点病毒含量检测病毒含量检测：病毒含量检测：IPMA-TCIDIPMA-TCID5050、IFA-TCIDIFA-TCID5050ELISAELISA：以标准品为内控、指导疫苗配制：以标准品为内控、指导疫苗配制IFAIPMAELISA97支原体检测-荧光染色法支原体污染无支原体污染98外源病毒检测PCV1PPVPRVHCVJEVPRRSVTGEVPEDV99PCV-2的防控的防控参考免疫程序参考免疫程序参考免疫程序参考免疫程序后备后备后备后备 ：配种前配种前5 5周首免，配种前周首免，配种前3 3周二免，周二免，2ml/2
37、ml/次次种猪种猪种猪种猪 ： 建议每年建议每年建议每年建议每年3434次普防或跟胎免疫（次普防或跟胎免疫（次普防或跟胎免疫（次普防或跟胎免疫（产后两周免疫产后两周免疫2ml2ml）仔猪仔猪仔猪仔猪母猪免过圆环苗，母源抗体可以保护到母猪免过圆环苗，母源抗体可以保护到母猪免过圆环苗，母源抗体可以保护到母猪免过圆环苗，母源抗体可以保护到5 5周周周周 龄，小猪可以在龄，小猪可以在龄，小猪可以在龄，小猪可以在2 2周周周周龄接种。龄接种。龄接种。龄接种。两周龄免疫两周龄免疫2ml2ml或首免或首免1ml1ml间隔两周二免间隔两周二免1ml1ml；混注：支（双针型）；混注：支（双针型）1ml1ml、圆
38、、圆1ml1ml二合一首免，间隔二合一首免，间隔2-32-3周二免。周二免。中博：中博：中博：中博：喘泰克喘泰克喘泰克喘泰克+ +圆环圆环圆环圆环最佳组合免疫最佳组合免疫最佳组合免疫最佳组合免疫市场现有产品免疫成本约10-28.9元/头；平均死亡率降低8个百分点，最高15个百分点；平均提早出栏时间：7天；综合用药量减少70%左右；投入回报比高于1:9；每头猪综合经济效益达150元以上。经济效益分析八、使用中常见的问题-兽医不好当，免疫程序没问题？p免疫程序没问题。p仅作参考。p我们该怎么做？示例1-2010年11月18日湖北恩施p基本情况p母猪群体：700头，种猪来源湖北鄂美PIC场。p母猪前
39、一段部分流产，一胎母猪占比例稍大一些，p现在哺乳仔猪在20天以后个别窝开始发病，发热、精神差、食欲下降、消瘦。p仔猪断奶后拉稀和呼吸道疾病，发病率达50%。p育肥猪生长发育不好，整齐度差，20%左右的弱小猪，主要是保育舍疾病损失的延续。p使用普莱柯和南农圆环苗免疫，越免越差，也试用进口圆环苗，越免死亡率越高。p2010年11月18日，送了4份病料，4份血样，马总要求检测蓝耳、圆环、猪瘟抗原、伪狂犬抗原，细菌全套及药敏实验，分析原因p母猪群感染严重，垂直感染仔猪。p仔猪胎儿期感染，初生带毒状态。p这样的猪群，尽量减少仔猪的免疫。p强化仔猪的抗生素保健和哺乳舍环境条件改善。p最终解决问题-从母猪群
40、开始。该场我们申请了2000头份圆环病毒试验苗赠送，用于母猪群免疫，最终猪群改善，生产恢复。如何检测胎盘胎儿是否感染如何检测胎盘胎儿是否感染p选取选取20个不同的仔猪血清个不同的仔猪血清p初乳前检测初乳前检测p出生时检测。采集颈静脉血。注意：一定是初乳前的血液。出生时检测。采集颈静脉血。注意：一定是初乳前的血液。p检测猪圆环病毒抗体检测猪圆环病毒抗体pPCR检测病毒：将每检测病毒：将每4份血液混成份血液混成1份，份，20份样缩减为份样缩减为5份。份。p如果检测阳性则采更多的血来检测如果检测阳性则采更多的血来检测p妊娠后期（妊娠后期（70天后）仔猪可产生主动免疫天后）仔猪可产生主动免疫，仔猪产生
41、抗体仔猪产生抗体，仔猪出生后仔猪出生后带有抗体带有抗体免疫母猪免疫母猪（在仔猪免疫的情况下）（在仔猪免疫的情况下）p免疫母猪的好处免疫母猪的好处p提高母猪和后备母猪的抗体水平提高母猪和后备母猪的抗体水平p减少母猪和后备母猪的病毒血症减少母猪和后备母猪的病毒血症p减轻蓝耳病的感染压力和影响减轻蓝耳病的感染压力和影响p减少死胎或弱仔减少死胎或弱仔示例示例2-河南河南500母猪猪场母猪猪场已有15年以上的历史，小规模场逐步扩建，设备和布局均受的一定的影响，舍间距离35米。目前存栏母猪500头左右。p2009年年11月下旬开始发病（去年也在入冬天气转冷时发月下旬开始发病（去年也在入冬天气转冷时发病，时
42、间大致与今年差不多）。病，时间大致与今年差不多）。p1520日龄发病，死亡率达日龄发病，死亡率达60%以上，出现问题的已有以上，出现问题的已有五单元，损失仔猪五单元，损失仔猪1500多头仔猪。多头仔猪。p表现为哺乳舍仔猪发热，打颤，发病后表现为哺乳舍仔猪发热，打颤，发病后7-8天开始死亡，天开始死亡，使用进口的头孢喝辉瑞的瑞可欣也没有太多的治疗效果。使用进口的头孢喝辉瑞的瑞可欣也没有太多的治疗效果。p母猪没出现流产和其他异常，仔猪保育期逐渐病愈恢复，母猪没出现流产和其他异常，仔猪保育期逐渐病愈恢复，90100日龄后生长良好。日龄后生长良好。没垂直感染的猪群，哺乳仔猪能免疫吗？蓝耳病感染的类流感
43、症状蓝耳病感染的类流感症状不健康的猪群，不能免疫-怎么办p采血猪的选择要求。u根据本场疾病种类，和该病的流行特点，选择有针对性病原感染的康复猪只，一般选择无价值的淘汰母猪，康复时间根据病的种类有差别，一般康复30天左右最好。（也可用本场病原人工控制感染复制采血猪）。u采血猪只健康状况良好，没有其他病原（目标病原以外的病原）明显感染，并完全康复一定时间。自家血清制备p采血：达到放血完全，应选择前腔动脉或静脉放血，注意放血部位的消毒和器具的消毒。p析出血清，采用静置自然析出方法，将析出的血清收集到经消毒的生理盐水瓶内，一般装到生理盐水瓶容量的三分之二，为了更完全的分离血清，过夜后还会有血清析出，继
44、续收集。自家血清制备p杀灭病毒的处理：将收集好的血清，瓶口向上放入水浴锅56水浴2小时，病毒经高温后失活，而在该温度时，抗体效价不下降。p杀灭细菌，每毫升加2000单位的链霉素和2000单位的青霉素，充分摇均，封口即可使用。自家血清制备和使用p存放，不立即使用时，应冷冻保存p使用：为提高效果，建议在发病早期使用，用量，12ml/5公斤体重，1次/天，连用三天，个别严重的可增加注射次数，用血清治疗的同时，应配合抗生素治疗。p注意事项，分装时，应根据一次使用量分装，避免反复冻融，引起效价下降。示例3-免疫时间推迟p一、基本情况。300母猪群，2011.2.28p2000年建场，10年场龄，以前情况
45、很好。2010-3月份引进后备猪，2010-10发生口蹄疫。没有大的疫情。p2010-10开始出现出现明显的疫情。主要表现在，母猪产仔正常，仔猪20日龄左右开始发病，发热、被毛粗乱、耳朵和腹下发紫，病程23天死亡，死亡时不消瘦，死亡率达80%以上。p存留下来的个别仔猪，断奶后体质较差，保育期有10%的死亡率。p前一段保育猪打自家组织苗有一定效果，后改用勃林格的圆环病毒苗，打苗后发病p母猪免疫程序：猪瘟、丹毒+肺疫二联、蓝耳病灭活苗（政府发放）普防2次/年。乙脑春季普防一次。口蹄疫普免+产前免。母猪产前辉瑞的大肠杆菌苗p仔猪免疫程序：猪瘟超免、20日龄二免、5060日龄三免。蓝耳灭活苗（政府苗）
46、-10日龄免疫一次。口蹄疫苗20日龄免疫。p2010-10月份使用韩国的圆环病毒疫苗免疫后出现猪群发病，随后波及整个猪群。p病料采集情况：1、4、5、6是保育50日龄仔猪，病程1015天；2、3是20日龄哺乳仔猪，病程2-3天。总结：p由于猪群健康状态不好，哺乳期就有蓝耳病毒感染。p保育期蓝耳病毒和圆环协同感染，处于亚临床状态。p免疫应在感染点，提前28天免疫。p35日龄以后免疫，风险增大。隐性感染状态免疫风险示例4-免疫了-出现斑疹区别传染能力和发病率。早期表现。体温变化上。晚期表现总结：影响圆环苗免疫效果的因素p蓝耳病毒比较活跃的猪群-包括普免蓝耳病弱毒疫苗的疫苗毒。p保育舍不能全进全出，
47、病原循环严重的猪群。p发酵床结构的猪舍，圆环病毒感染压力大。p保育舍保温条件差或密度较大。p品种差异：地方品种对圆环病毒更易感。九、圆环苗使用效果评价（一）、圆环病毒感染模型PCV2PCV2淋巴凋亡淋巴凋亡+ 组织感染组织感染PCV2临床发病临床发病死亡死亡亚临床状态亚临床状态周围淋巴组织感染低病毒血症血清学转阳感染清除病毒猪全身扩散高病毒血症+白血球减少血清学转阳（二）、评价蓝耳和圆环病毒效果的采样平时检测采样选有临床症状的猪仍可以检出高的病毒感染。血样检测量大，病毒血症结束猪仍在排毒，仅血液检测，很好评价。那种采样，均需要定量PCR检测。棉绳，吸水性好采样需要20-30分钟，4毫升最佳。每栋舍采样2-3份。唾液样本采集过程唾液样本采集过程（三）、圆环病毒使用效果评价-案例p成活率对比：武汉中博混合免疫组合97.59%勃林格圆环+冨道支原体97.21%BI92.39%.p试验期单头增重和日增重对比：单头增重：B+F,24.67中博混合免疫21.43BI,18.33试验期日增重：B+F,446.44中博混合免疫418.72BI,365.37p试验期整体评价。保育14（中博），猪群健康状况最好。p疫苗投入：ZB,23元/头BI,33元/头B+F,33.3元/头p混合免疫：节省劳动成本，减少猪的应激。效益分析校正后数据
