《基因工程框架复习PPT课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《基因工程框架复习PPT课件（18页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、基因工程核心内容复习1考情分析考情分析命题重点：基因工程的工具与操作程序 基因工程的原理和应用考查频度：高考高频考点,5年19考 如2016年全国1卷和3卷考查方向：多以最新基因工程成果为载体，结合其他工程技术进行综合考查2基因工程复习目标一、基因工程的操作工具和具体步骤（熟悉掌握）二、明确解题思路3基因工程的操作工具4下列关于限制性核酸内切酶的叙述，错误的是( )A限制性核酸内切酶可从原核生物中提取B 同一种限制酶切割不同的DNA分子产生的末端能够进行碱基互补配对C 限制酶能任意切割DNA分子，从而产生大量的DNA片段D每一种限制性核酸内切酶只能识别特定的核苷酸序列5限制性核酸内切酶限制性核
2、酸内切酶1. 来源：原核细胞2.简称限制酶（限制酶（没有其他简称没有其他简称）3.是酶就具有酶的特性（是酶就具有酶的特性（受温度、受温度、PH影响）影响）4.能识别双链能识别双链DNA分子的分子的某种特定的某种特定的核苷酸序核苷酸序列（列（不能识别不能识别RNA序列序列）5.作用部位：磷酸二酯键作用部位：磷酸二酯键6.DNA切割的结果：切割的结果：产生黏性产生黏性末端末端或平末端或平末端7.相同限制酶切出的末端相同限制酶切出的末端一定相同，一定相同，不不 同限制同限制酶切出的末端酶切出的末端也可能相同也可能相同6已知限制酶I的识别序列和切点是G GATCC限制酶的识别序列和切点是 GATC。请
3、问这两种酶切出的黏性末端能否相连？7DNA连接酶连接酶作用部位：磷酸二酯键磷酸二酯键E.coliDNA连接酶连接酶只能连黏性末端只能连黏性末端T4 DNA连接酶既能连连接酶既能连黏性黏性末端末端也能也能连平末端连平末端比较：比较：限制酶限制酶ECOR1切出的是切出的是黏性末端Sma1切出的是切出的是平末端平末端8运载体运载体作为运载体必备的条件1.在受体细胞中能复制并稳定保存（让目的基因能一起复制2.有一 个至多个限制酶切割位点(供外源基因插入)3.具有标记基因(鉴别受体细胞中是否含有目的基因)-最常用的载体最常用的载体质粒（大肠杆菌质粒（大肠杆菌Ti质粒含质粒含T-DNA）噬菌体的衍生物噬菌
4、体的衍生物动植物病毒动植物病毒9基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序1 1、目的基因的获取、目的基因的获取2 2、基因表达载体的构建、基因表达载体的构建3 3、将目的基因导入受体细胞、将目的基因导入受体细胞4 4、目的基因的检测与鉴定、目的基因的检测与鉴定10步骤一步骤一 获取目的基因获取目的基因1 1、人工合成、人工合成2 2 2 2、从基因文库中获取、从基因文库中获取、从基因文库中获取、从基因文库中获取3 3 3 3、利用、利用、利用、利用PCRPCRPCRPCR技术技术技术技术扩增扩增扩增扩增( ( ( (基因比较小，序列已知基因比较小，序列已知基因比较小，序列已知基因比较小，序
5、列已知) ) ) )基因文库基因文库基因组文库基因组文库部分基因文库如：部分基因文库如：cDNAcDNA文库文库文库文库原理原理:双链双链DNA分子复制分子复制条件：条件：模板、模板、 引物引物 热稳定热稳定DNA聚合酶聚合酶 四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸 能量能量11组成部分组成部分复制原点复制原点（复制起点）（复制起点）启动子启动子（RNA聚合酶识别聚合酶识别和结合的部位和结合的部位）目的基因目的基因（位于启动子和位于启动子和终止子之间终止子之间）终止子终止子（终止转录）（终止转录）标记基因标记基因（如抗生素的抗性基因或荧光基因。构建如抗生素的抗性基因或荧光基因。构建时至少有一个时至少有一
6、个）第二步：第二步： 基因表达载体的构建基因表达载体的构建( (核心核心) )12第三步：将目的基因导入受体细胞第三步：将目的基因导入受体细胞将目的基因导入植物细胞将目的基因导入植物细胞农杆菌转化法、基因枪法，花粉管通道法农杆菌转化法、基因枪法，花粉管通道法将目的基因导入动物细胞将目的基因导入动物细胞显微注射法显微注射法将目的基因导入微生物细胞将目的基因导入微生物细胞感受态细胞法感受态细胞法（ Ca Ca2+2+处理处理）-转化的过程转化的过程13步骤四步骤四 目的基因的检测和鉴定目的基因的检测和鉴定接种实验接种实验接种实验接种实验抗原抗体杂交法抗原抗体杂交法抗原抗体杂交法抗原抗体杂交法分子杂
7、交法分子杂交法分子杂交法分子杂交法DNADNA分子杂交法分子杂交法分子杂交法分子杂交法受体是否具有受体是否具有受体是否具有受体是否具有转基因特征转基因特征转基因特征转基因特征个体个体个体个体水平水平水平水平目的基因是否翻译目的基因是否翻译目的基因是否翻译目的基因是否翻译目的基因是否转录目的基因是否转录目的基因是否转录目的基因是否转录目的基因是否导入目的基因是否导入目的基因是否导入目的基因是否导入受体细胞受体细胞受体细胞受体细胞分子分子分子分子水平水平水平水平方法方法方法方法检测对象检测对象检测对象检测对象14当转基因技术和其他技术综合考查时解题思路：一.明确目的，要获得什么 ？是基因产品、转基
8、因植物还是转基因动物找到目的基因和受体细胞二.细化过程151.获得基因产品：获得含目的基因微生物细胞(一般)-培养微生物-获得产品2.获得转基因植物：将目的基因导入植物细胞-进行植物组织培养-获得转基因植物3.获得转基因动物：将目的基因导入动物受精卵（或通过核移植获得）-早期胚胎培养-胚胎移植-获取转基因动物16重度呼吸综合征是有 一 种新型冠状病毒（MERS-CoV）引起的病毒性呼吸道疾病，科学家利用大肠杆菌大量生产病毒蛋白，以探究其作为MERS疫苗的可能性，结合所学知识回答下列相关问题：（1）研究初期，科学家首先分离出病毒RNA分子，在_酶的作用下，以_为原料，获得DNA分子。（2）在构建表达载体的过程所使用的限制酶一般来自_生物体内，构建好的表达载体包括_、_、启动子和终止子。其中启动子是_酶的结合位点（3）基因工程获得细胞产品的时候经常采用大肠杆菌、枯草杆菌等微生物作受体细胞其好处是_(4)为了验证大肠杆菌是否产生病毒蛋白质，常采用的方法是_17谢谢大家！18
