肾素检测的最新发展情况课件

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1、肾素检测的最新发展情况肾素检测的最新发展情况1肾素检测的最新发展情况几个问题为什么传统上肾素检测活性?为什么现在肾素要变为测浓度?2肾素检测的最新发展情况肾素前体由肾素前体由肾素前体由肾素前体由406406个氨基酸组成,其个氨基酸组成,其个氨基酸组成,其个氨基酸组成,其中包含两个前片段,分别为中包含两个前片段,分别为中包含两个前片段,分别为中包含两个前片段,分别为2020和和和和4646个氨基酸。成熟的肾素包含个氨基酸。成熟的肾素包含个氨基酸。成熟的肾素包含个氨基酸。成熟的肾素包含340340个氨基酸,分子量为个氨基酸,分子量为个氨基酸,分子量为个氨基酸,分子量为37KD37KD。肾素肾素3肾

2、素检测的最新发展情况 肾素原,肾素与活性肾素的异同肾素原,肾素与活性肾素的异同肾素原,肾素与活性肾素的异同肾素原,肾素与活性肾素的异同 肾素活性与活性肾素的区别肾素活性与活性肾素的区别肾素活性与活性肾素的区别肾素活性与活性肾素的区别 活性肾素在体内的意义活性肾素在体内的意义活性肾素在体内的意义活性肾素在体内的意义肾素检测的几个基本概念肾素检测的几个基本概念无活性的肾素原无活性的肾素原无活性的肾素原无活性的肾素原有活性的肾素原有活性的肾素原有活性的肾素原有活性的肾素原肾素肾素肾素肾素肾素原肾素原肾素原肾素原活性肾素活性肾素活性肾素活性肾素4肾素检测的最新发展情况传统肾素检测试剂传统肾素检测试剂肾

3、素活性检测肾素活性检测 试剂盒组分试剂盒组分试剂盒组分试剂盒组分:l l抗抗抗抗Ang IAng I多抗包被管多抗包被管多抗包被管多抗包被管ll125125I I标记的标记的标记的标记的Ang I Ang I l l校准品(校准品(校准品(校准品(6 6个)个)个)个)l l质控品质控品质控品质控品l l酶抑制剂酶抑制剂酶抑制剂酶抑制剂l l洗液洗液洗液洗液检测步骤检测步骤Ang I 转化转化将预冷的200ul酶抑制剂加入200ul血浆样本中,混合均匀后,分为两份,分别置于冰水浴和37度中孵育1小时,孵育后将37度的样本置于冰水浴中迅速冷却备用。放免竞争法检测放免竞争法检测Ang I加样孵育检

4、测在多抗包被管中加入:l校准品、质控品、待测 样本各50ul。l加入125I标记的Ang I 200ul。l充分混匀室温(18-25C)振荡孵育2小时将包被管用洗液洗两次后,检测。根据标准曲线计算出样本中的Ang I浓度结果转换结果转换肾素检测肾素检测-PRA vs PRC5肾素检测的最新发展情况肾素检测肾素检测-PRA vs PRC血管紧张素原血管紧张素原肾素肾素血管紧张素血管紧张素I I降解片段降解片段血管紧张素血管紧张素IIII血管紧张素原酶血管紧张素原酶微生物污染微生物污染血管紧张素转化酶血管紧张素转化酶6肾素检测的最新发展情况目前PRA检测存在的问题各实验室之间差异较大,无法标准化各

5、实验室之间差异较大,无法标准化操作复杂,重复性差,结果无互通性操作复杂,重复性差,结果无互通性除此之外无国际标准品可参照无国际标准品可参照体外的孵育条件和体内状态差异较大体外的孵育条件和体内状态差异较大加入酶抑制剂放置血管紧张素加入酶抑制剂放置血管紧张素I I降解降解肾素检测肾素检测-PRA vs PRC7肾素检测的最新发展情况PRA带给临床最大的困扰重复性差周期长依赖外送8肾素检测的最新发展情况如何做到活性肾素的检测?如何做到活性肾素的检测?关键在于那一个关键的抗体。关键在于那一个关键的抗体。关键在于那一个关键的抗体。关键在于那一个关键的抗体。关键抗体关键抗体关键抗体关键抗体一般的肾素抗体一

6、般的肾素抗体一般的肾素抗体一般的肾素抗体肾素检测肾素检测-PRA vs PRC9肾素检测的最新发展情况肾素检测肾素检测-PRA vs PRCPerschel et al. Clin Chem. 200410肾素检测的最新发展情况美国内分泌学会原醛症指南美国内分泌学会原醛症指南该指南同时推荐了肾素活性和浓度应用于该指南同时推荐了肾素活性和浓度应用于ARR实验,同时给出了基于美国人群的不实验,同时给出了基于美国人群的不同方法学同方法学ARR的的cut-off值值11肾素检测的最新发展情况美国Quest实验室集团肾素浓度检测(Renin, Direct),使用化学发光法检测浓度,当天反馈结果,85%

7、。肾素活性检测放弃了RIA法,改用LC-MS法,一周后出结果,15%。美国目前肾素检测的应用美国目前肾素检测的应用12肾素检测的最新发展情况安图安图PRC和和Aldosterone诊断效力研究诊断效力研究中山大学附属第一医院中山大学附属第一医院-曹教授曹教授放免放免RIA 与化学发光与化学发光CLIA测醛固酮浓度呈正相关测醛固酮浓度呈正相关(r=0.967)放免放免RIA 肾素活性与化学发光肾素活性与化学发光CLIA肾素浓度呈正相关(肾素浓度呈正相关(r=0.905)放放免免RIARIA法法醛醛固固酮酮肾肾素素活活性性比比值值 ARRARR以以3030为为切切点,灵敏度为点,灵敏度为9090.

8、2% .2% ,特异度为,特异度为9292.6% .6% ;化化学学发发光光CLIACLIA法法 醛醛固固酮酮肾肾素素浓浓度度比比值值AARRAARR以以2525为为切切点点,灵灵敏敏度度为为95.1%95.1%,特特异异度度为为83.3%83.3%;两两种种方方法法检检测测结结果果计计算算所所得得醛醛固固酮酮/ /肾肾素素比比值值的的ROCROC曲曲线线下下面面积积分分别别为为0.940.94和和0.920.92,ROCROC曲曲线线下下面面积积比比较较差差异异无无统统计计学学意意义义(P=0.52P=0.52)。)。13肾素检测的最新发展情况已开展PRC的医院北大人民 北京阜外 北京同仁上海中山 上海华山 上海曙光中山一、二、三附院 广医三附院山东省立 中南湘雅 四川省医 郑大一附院 武汉同济14肾素检测的最新发展情况

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