人类生殖工程

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1、辅辅助助生生殖殖技技术术人工授精、试管婴儿、克隆技术人工授精、试管婴儿、克隆技术培训资料-人类生殖工程辅助生殖技助生殖技术不孕不育不孕不育辅助生殖助生殖研究研究发展史展史第一第一节人工授精人工授精第二第二节体外受精体外受精+胚胎移植胚胎移植第一代第一代试管管婴儿儿第二代第二代试管管婴儿儿第三代第三代试管管婴儿儿第四代第四代试管管婴儿儿第三第三节生殖工程引生殖工程引发的的伦理理问题培训资料-人类生殖工程为什么要什么要进行行辅助生殖?助生殖?培训资料-人类生殖工程生育是人生育是人类的基本生理功能,是人的基本生理功能,是人类的一种本能。的一种本能。 人类生育过程是女性产生的健康卵子和男性产生的健康精

2、子相结合而完成的。精子通过性交进入女性生殖道,如果没有遇到障碍,大概有上百个精子到达输卵管上端与卵子相遇,并完成受精作用,这个过程仅需要16小时就可以完成。正常的生殖正常的生殖过程程培训资料-人类生殖工程 当新生命的起点当新生命的起点受精卵形成后,受精卵形成后,受精卵一边向子宫移动,一边开始卵裂,受精卵一边向子宫移动,一边开始卵裂,最终到达子宫内壁的某处并植入子宫内最终到达子宫内壁的某处并植入子宫内膜,即着床。共经历膜,即着床。共经历270天左右的孕育,天左右的孕育,胎儿分娩出世胎儿分娩出世一个新生命就这样诞一个新生命就这样诞生了。生了。 培训资料-人类生殖工程培训资料-人类生殖工程影响精、卵

3、结合的因素很多,比如排卵后,卵子仅在624小时内保持有受精能力;精子进入女性生殖道内,一般也仅在12天内维持有受精能力;男性每次射出精液量应是34毫升,而每毫升中精子数应在2000万1亿,如果精子过少,受精机会显著下降;精子中必须要有60%以上形态正常,并且有运动能力;精子还必须在阴道、子宫、输卵管内获得能量,方能到达输卵管上端与卵子受精,等等。培训资料-人类生殖工程不孕症不孕症婚后两年、有正常的性生活,未采取任婚后两年、有正常的性生活,未采取任何避孕措施而未曾受孕者。何避孕措施而未曾受孕者。调查显示:生育力正常的夫示:生育力正常的夫妇不避孕不避孕1年年内妊娠率内妊娠率为80%90%;2年的妊

4、娠率年的妊娠率为93%95%。治治疗方法之一:方法之一:辅助生殖技助生殖技术培训资料-人类生殖工程沉重的十字架沉重的十字架不孕不育是一种常不孕不育是一种常见病病培训资料-人类生殖工程据据统计,造成不孕症有,造成不孕症有30%是是男方原因,男方原因,30%是女方原因,是女方原因,还有有40%的原因在男女双方。的原因在男女双方。培训资料-人类生殖工程从女方来看:最常从女方来看:最常见的病因是不排卵,它的病因是不排卵,它可以由生理、病理和内分泌失可以由生理、病理和内分泌失调等原因引起的。等原因引起的。其次,盆腔炎性病其次,盆腔炎性病变,其中有,其中有20%40%盆腔炎盆腔炎可可导致致输卵管堵塞、卵管

5、堵塞、损伤、而不能受孕。第三,、而不能受孕。第三,女性生殖道女性生殖道产生可以生可以杀死精子的抗体。第四,死精子的抗体。第四,由于染色体异常、黄体期缺陷等,或尚不清楚由于染色体异常、黄体期缺陷等,或尚不清楚的原因引起的。的原因引起的。男方方面最重要的原因是不能提供足男方方面最重要的原因是不能提供足够数数量、健康的精子。不孕不育量、健康的精子。不孕不育现象是随年象是随年龄而增而增加。加。培训资料-人类生殖工程不孕症是一种常不孕症是一种常见病。在不同国家和病。在不同国家和不同年代差不同年代差别很大。很大。1988年美国国家中年美国国家中心心统计1544岁育育龄夫夫妇中,不孕症中,不孕症发病率病率为

6、8.4%;到;到20世世纪90年代就上升到年代就上升到10%左右。中国内地左右。中国内地2.3亿育育龄夫夫妇中中约有有5%8%存在不能生育存在不能生育问题,而且每年,而且每年还以以40万万对左右速度增加,并有上升左右速度增加,并有上升趋势。在中国台湾在中国台湾约有有14%夫夫妇由于种种疾病不由于种种疾病不能生育,或在能生育,或在怀孕上存在不可克服的困孕上存在不可克服的困难。培训资料-人类生殖工程不育夫不育夫妇经过各种治各种治疗仍未生育,仍未生育,并且目前尚无治并且目前尚无治疗方法的情况下,方法的情况下,为了了使女方使女方怀孕,就不得不依靠其他方法来孕,就不得不依靠其他方法来达到达到这个目的。个

7、目的。这些方法些方法统称称为辅助生助生殖技殖技术。现行的行的辅助生殖技助生殖技术包括人工包括人工授精、体外受精(授精、体外受精(试管管婴儿)等技儿)等技术。培训资料-人类生殖工程 辅助生殖助生殖发展展简史史 200年前,年前,John Hunter用注射器将一位尿道下裂的丈用注射器将一位尿道下裂的丈 夫的精液注入妻子的阴道内夫的精液注入妻子的阴道内怀孕。孕。 1953年,第一例冷年,第一例冷冻精子人工授精成功,但人工授精精子人工授精成功,但人工授精 技技术一直到一直到70年代才广泛年代才广泛应用于用于临床床 1983年,我国首个利用冷年,我国首个利用冷冻精子人工授精精子人工授精婴儿出生。儿出生

8、。 1978年,世界第一例年,世界第一例试管管婴儿儿Louis Brown在英国在英国剑桥 大学大学诞生,开生,开创体外授精治体外授精治疗不孕新的里程碑。不孕新的里程碑。 1988年,我国第一例年,我国第一例试管管婴儿出生儿出生培训资料-人类生殖工程第一第一节 人工授精人工授精人工授精:收集丈夫或自愿献精者的精液,由医人工授精:收集丈夫或自愿献精者的精液,由医师注入注入 女性生殖道以达到受孕目的的一种技女性生殖道以达到受孕目的的一种技术。解决男性不育的主要方法解决男性不育的主要方法必必须具具备的三个条件:的三个条件: 足足够数量和活力的精子数量和活力的精子 正常的排卵正常的排卵 至少一条至少一

9、条输卵管通卵管通畅和功能正常和功能正常培训资料-人类生殖工程一、分一、分类 依据精液来源分依据精液来源分为:夫精人工授精(夫精人工授精(AIH):):使用丈夫精子使用丈夫精子供精人工授精(供精人工授精(AID):):自愿献精者的精子自愿献精者的精子 依据操作方法:依据操作方法:子子宫人工授精:人工授精:宫腔内授精、腔内授精、宫颈内授精、阴内授精、阴 道内授精道内授精输卵管内精液灌注:是人工授精的一种新方法卵管内精液灌注:是人工授精的一种新方法培训资料-人类生殖工程二、接受人工授精二、接受人工授精妇女的条件女的条件 有有规则的月的月经周期周期 有正常排卵有正常排卵 输卵管必卵管必须通通畅 生殖器

10、官无生殖器官无严重疾患重疾患三、三、供精人工授精(供精人工授精(AID)供精者的)供精者的选择 挑挑选体力和智力俱佳的已婚青壮年男性体力和智力俱佳的已婚青壮年男性 仔仔细检查精液精液质量,排除一切量,排除一切遗传病和性病和性传播性疾病播性疾病 供方与受方不相供方与受方不相识 兼兼顾供者血型、身高、肤色及供者血型、身高、肤色及头发颜色是否与患者丈夫一致色是否与患者丈夫一致培训资料-人类生殖工程四、人工授精治四、人工授精治疗程序程序(一)精液的采集和(一)精液的采集和处理理逆行射精者:采精前每逆行射精者:采精前每4小小时服碳酸服碳酸氢钠1克,使尿液克,使尿液pH值达达 到到7.27.7,排空尿液,

11、冲洗膀胱,排空尿液,冲洗膀胱,诱导排精,排精, 取膀胱内容物,离心取膀胱内容物,离心浓缩至至1ml立即立即进行人工行人工 授精授精 精液量及精子少的患者:多采集几次精液量及精子少的患者:多采集几次浓缩后后进行人工授精行人工授精精液不液化:授精前加糜蛋白精液不液化:授精前加糜蛋白酶或胰蛋白或胰蛋白酶使之液化使之液化精子活力差:加入咖啡因,精子活力差:加入咖啡因,终浓度度为7.2mmol/L, 提高精子活提高精子活 力,提高精子受精能力。力,提高精子受精能力。培训资料-人类生殖工程(二)人工授精的方法(二)人工授精的方法1、子、子宫人工授精人工授精宫腔内授精:腔内授精:处理理过的精子直接送入的精子

12、直接送入宫腔腔宫颈内授精:将精液注入内授精:将精液注入宫颈内内阴道内授精:将精液注入子阴道内授精:将精液注入子宫颈周周围 将将宫颈盖上盖上宫颈杯,将精液注入杯中,杯留杯,将精液注入杯中,杯留 放放24小小时2、输卵管内精液灌注卵管内精液灌注原理:封原理:封闭子子宫颈口后,向口后,向宫腔内注入腔内注入4ml处理理过精子精子悬液,液,利用子利用子宫腔腔压力,使力,使输卵管内口卵管内口张开,精液开,精液进入入输卵管。卵管。培训资料-人类生殖工程曾捐精200余次的鲍比盖拉多特培训资料-人类生殖工程2008年首位怀孕变性人托马斯-比提孕前照片2008年6月日生下了一名漂亮女婴。苏珊2008年月1日再度怀

13、孕培训资料-人类生殖工程变性前照片培训资料-人类生殖工程培训资料-人类生殖工程有的家庭中,丈夫的有的家庭中,丈夫的生殖能力正常,但妻生殖能力正常,但妻子因子因输卵管阻塞而不卵管阻塞而不孕,孕,这样的的问题该怎怎样解决呢?解决呢?现实中的中的问题培训资料-人类生殖工程第二第二节:试管管婴儿的培育方法儿的培育方法第一代第一代试管管婴儿:儿:体外受精体外受精- -胚胎移植胚胎移植术 1978 英国英国 1988 中国中国 第二代第二代试管管婴儿:儿:单精子卵精子卵细胞胞浆内内显微注射授精技微注射授精技术 1992 比利比利时 1996 中国中国 第三代第三代试管管婴儿:儿:胚胎种植前的胚胎种植前的遗

14、传学学诊断断 1990 1999 中国中国第四代第四代试管管婴儿:核移植技儿:核移植技术 1997 英国英国 2002年年 中国中国培训资料-人类生殖工程1978年年7月月25日深夜日深夜时分,英国分,英国曼曼彻斯特郊外的奥德姆斯特郊外的奥德姆总医院里,医院里,一个女一个女婴的啼哭声划破夜空,震撼的啼哭声划破夜空,震撼了世界了世界她就是世界上第一例她就是世界上第一例试管管婴儿儿路易斯路易斯.布朗。布朗。培训资料-人类生殖工程试管婴儿是近余年逐步是近余年逐步发展起来的以体外受展起来的以体外受精胚胎移植精胚胎移植为中心的一系列技中心的一系列技术方法方法及理及理论,使人,使人们能更深入地了解受精及能

15、更深入地了解受精及人体胚胎的人体胚胎的发育机制,并育机制,并为不孕、不育不孕、不育症以及症以及预防防遗传病提供新的途径。病提供新的途径。培训资料-人类生殖工程一、第一代一、第一代试管管婴儿技儿技术 即常即常规的的体外授精体外授精-胚胎移植胚胎移植(IVF-ET) 主要解决女性因素的不育。主要主要解决女性因素的不育。主要应用于:用于: 双双侧输卵卵管缺如或完全阻塞,估管缺如或完全阻塞,估计治治疗效果差或效果差或经治治疗无效者;无效者; 行行宫腔内人工授精腔内人工授精3-6次未受孕者;次未受孕者; 不明原因不孕者;不明原因不孕者; 需要需要赠卵,并有受孕的其它基本条件者。卵,并有受孕的其它基本条件

16、者。此此项技技术于于1976年年创立于英国,世界和中国的第一例立于英国,世界和中国的第一例试管管婴儿分儿分别于于1978年和年和1988年年诞生。生。培训资料-人类生殖工程二、第二代二、第二代试管管婴儿技儿技术 即即单精子卵精子卵细胞胞浆内内显微注射授精技微注射授精技术(ISCI)。 依靠依靠显微注射系微注射系统,选择吸取吸取单个活精子,直接注入卵个活精子,直接注入卵母母细胞内胞内进行人工授精,主要解决男性因素的不育。行人工授精,主要解决男性因素的不育。主要主要应用于:用于: 严重的男性因素不育重的男性因素不育(严重少精症、弱畸精重少精症、弱畸精症、阻塞性无精症、精子成熟障碍症、阻塞性无精症、

17、精子成熟障碍); 常常规的体外授精周期的体外授精周期中,卵子不受精或受精率低下,可用中,卵子不受精或受精率低下,可用该技技术作作为补救手段。救手段。 此此项技技术于于1992年年创立于比利立于比利时,世界和中国的第一例第,世界和中国的第一例第二代二代试管管婴儿分儿分别于于1992年和年和1996年年诞生。它生。它对家畜的育种家畜的育种和珍稀和珍稀动物的拯救也具有重要的物的拯救也具有重要的应用价用价值。培训资料-人类生殖工程三、第三代三、第三代试管管婴儿技儿技术 即即胚胎移植前的胚胎移植前的遗传学学诊断技断技术(PGD) 显微注射技微注射技术虽然提高了然提高了试管管婴儿技儿技术的成功率,但的成功

18、率,但也加大了胎儿畸形的也加大了胎儿畸形的风险。在前两代技。在前两代技术的基的基础上,上,对植植入前的胚胎入前的胚胎进行行筛选,选择健康、正常、无健康、正常、无遗传性疾病性疾病(优生生)的胚胎植入子的胚胎植入子宫内。内。这一技一技术和和显微注射技微注射技术的的联合运合运用,被称用,被称为第三代第三代试管管婴儿技儿技术。主要适。主要适应用于:用于:遗传性性疾病、疾病、遗传高危夫高危夫妇。 世界和中国的第一例第三代世界和中国的第一例第三代试管管婴儿分儿分别于于1990和和1999年年诞生。生。培训资料-人类生殖工程四、第四代四、第四代试管管婴儿技儿技术, 即即核移植技核移植技术 通俗地通俗地讲,就

19、是克隆人。但存在两个,就是克隆人。但存在两个问题:操作:操作时带入入外源外源DNA、受体受体细胞胞线粒体粒体遗传。另外,需要指出的是隆。另外,需要指出的是隆人已人已经不是不是传统意意义上的上的试管管婴儿,它只是男方或女方某一儿,它只是男方或女方某一方的复制品,而不是精子和卵子方的复制品,而不是精子和卵子结合的合的产物。物。 随着国外克随着国外克隆羊隆羊( (多利多利) )的的诞生,生,2002年年2月中国月中国诞生了克生了克隆隆牛。牛。现在,克隆人已在,克隆人已经不存在技不存在技术问题,存在的只是,存在的只是伦理道理道德德问题。美国科学家于。美国科学家于2001年年10月首次成功克隆出早期人月

20、首次成功克隆出早期人类胚胎,立即招来了胚胎,立即招来了许多抨多抨击。国。国际社会社会讨论通通过一一项“关于关于禁止克隆人的国禁止克隆人的国际公公约”,公,公约将将规定除非由于医治某种疾定除非由于医治某种疾病病( (不孕症除外不孕症除外) ),否,否则不能不能进行行克克隆人研究隆人研究培训资料-人类生殖工程一、常一、常规试管管婴儿培养技儿培养技术第一代第一代试管管婴儿儿 体外授精体外授精- -胚胎移植胚胎移植术:体外体外让卵子与精子卵子与精子结合形成受精卵,在体外合形成受精卵,在体外继续培养培养8 8细胞左右,再将胚胎重新移植到母胞左右,再将胚胎重新移植到母亲子子宫中,中,继续发育生育生长直至足

21、月分娩。直至足月分娩。主要解决女性因素的不育主要解决女性因素的不育培训资料-人类生殖工程(一)主要适(一)主要适应症和禁忌症症和禁忌症适适应症:症:输卵管病卵管病变所致不孕:双所致不孕:双侧输卵管缺如或完卵管缺如或完全阻塞;全阻塞;行行宫腔内人工授精腔内人工授精3-6次未受孕者;次未受孕者;不明原因不孕者;不明原因不孕者;子子宫内膜异位症不孕;内膜异位症不孕;培训资料-人类生殖工程适适应症:症: 无排卵或黄素化卵泡未破裂无排卵或黄素化卵泡未破裂综合征;合征; 子子宫颈病病变,阻碍精子,阻碍精子进入;入; 一方生殖一方生殖细胞缺如;胞缺如; 子子宫发育异常或缺如;育异常或缺如; 选择性生育。性生

22、育。禁忌症:禁忌症: 年年龄:4040岁以上不适于以上不适于IVFIVF; 过度肥胖者;度肥胖者; 高催乳素血症造成的不孕;高催乳素血症造成的不孕; 严重的盆腔粘重的盆腔粘连者。者。 培训资料-人类生殖工程(二)卵子的收集(二)卵子的收集1 1、获得可受精卵的方法得可受精卵的方法 自然周期法:自然周期法: 药物物诱发超数排卵法:超数排卵法: 诱发排卵常用排卵常用药物及其作用机制物及其作用机制克克罗米酚、人米酚、人绝经期促性腺激素(期促性腺激素(hMGhMG)、)、人人绒毛膜促性腺激毛膜促性腺激素(素(hCGhCG)、)、FSHFSH2 2、采卵的方法、采卵的方法 腹腔腹腔镜手手术取卵取卵 超声

23、波超声波导向采卵向采卵培训资料-人类生殖工程3 3、卵子成熟度的判定、卵子成熟度的判定 从理从理论上上讲,成熟的卵母,成熟的卵母细胞在排卵前已完成第一次成熟胞在排卵前已完成第一次成熟分裂,第一极体的排出是卵成熟的分裂,第一极体的排出是卵成熟的标志。志。经验性性评估卵母估卵母细胞成熟度的方法胞成熟度的方法 根据卵丘根据卵丘细胞的伸展度胞的伸展度 依据卵泡的大小依据卵泡的大小 根据卵丘根据卵丘细胞内脂肪胞内脂肪颗粒多少粒多少 根据卵根据卵- -放射冠放射冠- -卵丘复合体的特点卵丘复合体的特点 成熟型:成熟型:直径直径35mm或更大,卵丘或更大,卵丘细胞之胞之间距离大,放距离大,放 射冠分散,透明

24、射冠分散,透明带可可见。 未成熟型:直径未成熟型:直径11.5mm,紧密放射冠,看不清透明密放射冠,看不清透明带 培训资料-人类生殖工程成熟的卵母成熟的卵母细胞胞培训资料-人类生殖工程未成熟卵母未成熟卵母细胞胞培训资料-人类生殖工程(三)精子的准(三)精子的准备1 1、精液的采集与人工授精相同、精液的采集与人工授精相同2 2、精液分析、精液分析 形形态、细菌、免疫、菌、免疫、细胞胞遗传学学关于精子受精能力的关于精子受精能力的评价:价: 保持直保持直线性向前运性向前运动能力的精子受精能力能力的精子受精能力强 正常精子多而畸形精子少,受精能力正常精子多而畸形精子少,受精能力强穿卵穿卵实验阳性,受精

25、能力阳性,受精能力强3、精液的加工、精液的加工处理理 目的:洗目的:洗涤精子、去除精精子、去除精浆、增、增强精子活力、精子精子活力、精子获能能培训资料-人类生殖工程穿卵穿卵实验阳性阳性培训资料-人类生殖工程(四)体外授精及体外培养(四)体外授精及体外培养1、孵育卵、孵育卵细胞:使卵母胞:使卵母细胞在体外胞在体外进一步成熟一步成熟2、检查精子活力,精子活力,调节精子精子浓度度3、体外授精:向孵育好的卵、体外授精:向孵育好的卵细胞中加入适量精子胞中加入适量精子 510万万4、换液培养:人工受精后液培养:人工受精后1416h观察,如出察,如出现雌、雄原雌、雄原核,卵周隙有第二极体,表明受精成功,随后

26、将受精核,卵周隙有第二极体,表明受精成功,随后将受精卵卵转移到生移到生长培养基中培养基中继续培养,使其卵裂并培养,使其卵裂并发育,育,以便适以便适时施行胚胎移植。施行胚胎移植。培训资料-人类生殖工程(五)胚胎移植(五)胚胎移植(ET)(ET)与妊娠与妊娠监护 ET是是试管管婴儿儿试验中的最后一步,也是最重要一关中的最后一步,也是最重要一关1、胚胎的移植:、胚胎的移植:216细胞(卵裂球)胞(卵裂球)时移植;移植;24胚胎胚胎/次次2、妊娠、妊娠监护:放射免疫方法:放射免疫方法检测血、尿中血、尿中hCG(促(促绒毛膜性腺激素)毛膜性腺激素) 6天:血中天:血中hCG升高,升高,8天:尿中天:尿中

27、hCG升高升高 3周:超声周:超声检查胚囊位置,胚囊位置,5周:胚胎大小和胎心波周:胚胎大小和胎心波动3、影响、影响ET的因素:的因素: 移植移植时,母体子,母体子宫内膜与胚泡内膜与胚泡发育不同步;育不同步; 穿刺取卵穿刺取卵时黄体受黄体受损,使黄体功能不足;,使黄体功能不足; 移植移植过程中,胚泡程中,胚泡损伤或子或子宫内膜内膜损伤培训资料-人类生殖工程(六)(六)“试管管婴儿儿”的成功率的成功率 1、成功率:体外受精率:、成功率:体外受精率:85%90% 卵裂率(体外培养成功率):卵裂率(体外培养成功率):80% 胚胎移植后妊娠率:胚胎移植后妊娠率:20%25%2、畸形、畸形发生率:生率:

28、19871991年年总计出生出生6248例例试管管婴儿,有儿,有 某种畸形的新生儿某种畸形的新生儿187例,占例,占总数的数的2.8%。 这与自然妊娠分娩的新生儿畸形与自然妊娠分娩的新生儿畸形发生率相生率相当。当。 培训资料-人类生殖工程 如果妻子的生育能力如果妻子的生育能力正常,但因丈夫正常,但因丈夫产生的精生的精子少或精子活力差而造成子少或精子活力差而造成的不孕,的不孕,应该采用什么采用什么辅助生殖技助生殖技术呢?呢?培训资料-人类生殖工程二、胞二、胞浆内内单精注射精注射第二代第二代试管管婴儿儿 主要目主要目标:帮助精子穿:帮助精子穿过透明透明带 单精胞精胞浆注射注射(显微授精技微授精技术

29、) 透明透明带钻孔技孔技术(PZD) 透明透明带下授精(下授精(SUZI) 卵胞卵胞浆内内单精子精子显微注射(微注射(ICSI)针对男性少、弱、畸精症或阻塞性无精症男性少、弱、畸精症或阻塞性无精症培训资料-人类生殖工程(一)(一)显微授精技微授精技术发展展简史史1962年年Hiramoto首次将海胆精子直接注入海胆卵中首次将海胆精子直接注入海胆卵中1966年年Graham将青蛙精子注入未受精的蛙卵中,将青蛙精子注入未受精的蛙卵中,PN形成形成1988年第一个通年第一个通过精子微注射受精的子代精子微注射受精的子代动物(小鼠)物(小鼠)诞生生1988年年lanzendorf等人等人报道人精子直接注

30、入卵胞道人精子直接注入卵胞浆PN形成形成1992年年Palermo等人等人报道卵胞道卵胞浆内内单精子精子显微注射(微注射(ICSI)婴儿儿诞生生1996年我国首例年我国首例ICSI在中山医科大学在中山医科大学获得成功(庄广得成功(庄广伦李蓉)李蓉)培训资料-人类生殖工程(二)胞胞浆内内单精注射精注射IntracytoplasmicSpermInjection(ICSI)定定义:指用:指用显微操作微操作术将将单个精子注入卵胞个精子注入卵胞浆的的过程程适适应症:症:严重精子重精子质量异常量异常既往常既往常规IVF失失败患者患者严重的抗精子抗体患者重的抗精子抗体患者无精子症患者无精子症患者未成熟卵以

31、及冷未成熟卵以及冷冻保存的卵母保存的卵母细胞胞常常规IVF失失败未受精卵母未受精卵母细胞胞培训资料-人类生殖工程ICSI操作程序促排卵和卵子的采集促排卵和卵子的采集卵子体外培养卵子体外培养精子的采集及精子的采集及处理理显微注射微注射精子制精子制动卵胞卵胞浆内精子注入内精子注入放开卵母放开卵母细胞,培养胞,培养1624h48-细胞或囊胚后,移植母体子胞或囊胚后,移植母体子宫中中培训资料-人类生殖工程培训资料-人类生殖工程培训资料-人类生殖工程培训资料-人类生殖工程培训资料-人类生殖工程影响影响ICSIICSI成功的主要因素成功的主要因素ICSI成功与否主要看受精、卵裂及妊娠率,除技成功与否主要看

32、受精、卵裂及妊娠率,除技术因素因素外,径自、卵子状外,径自、卵子状态及卵子激活等都直接影响其成功。及卵子激活等都直接影响其成功。显微操作技微操作技术对ICSI的影响的影响体外操作体外操作过程不超程不超过5分分钟注射注射针内径内径58微米之微米之间固定固定针外径外径120微米,内径微米,内径1540微米微米精子状精子状态对ICSI的影响的影响培训资料-人类生殖工程影响影响ICSIICSI成功的主要因素成功的主要因素卵子卵子对ICSI的影响的影响卵子状卵子状态卵母卵母细胞成熟程度胞成熟程度女性年女性年龄影响卵子影响卵子质量量卵子激活卵子激活以放出第二极体、形成雌雄原核以放出第二极体、形成雌雄原核为

33、标志并最志并最终启启动卵子代卵子代谢的一系列的一系列变化化培训资料-人类生殖工程形形态检查B超超间接接诊断方法断方法检查母体生化指母体生化指标直接直接诊断方法断方法胎儿胎儿细胞胞三、三、 产前前诊断断培训资料-人类生殖工程着床前着床前遗传病病诊断技断技术(PGDPGD)PGD:指指对植入前的胚植入前的胚进行行诊断,排除断,排除遗传病病的一的一项新技新技术.当子代当子代处于可于可遗传的的遗传异常危异常危险中中时,可可应用用PGD对胚胚进行行筛选,应用此用此项技技术诞生的生的婴儿被儿被称称为第三代第三代试管管婴儿儿优点:防止点:防止产前前诊断断终止妊娠止妊娠给患者患者带来的身心痛苦来的身心痛苦培训

34、资料-人类生殖工程PGDPGD发展展简史史1966年年Edwards提出提出PGD的思想的思想1987年年Verlinsky提出提出4-细胞胚胎胞胚胎遗传学学诊断模型断模型1988年年Li对单个精子和体个精子和体细胞胞进行可行可遗传学分析学分析1989年年PCR技技术首先引入首先引入PGD,成功成功鉴定人定人类性性别1990年年对X-连锁隐性性遗传病的夫病的夫妇进行行PGD诞生第一生第一例例经PGD后的健康女后的健康女婴1992年年对单个基因相关个基因相关遗传病病进行行PGD,获成功成功1994年年对染色体病和年染色体病和年龄相关的染色体非整倍性相关的染色体非整倍性检测1996年染色体平行易位

35、携年染色体平行易位携带者者进行行PGD,接受治接受治疗后,后,诞生正常三胞胎生正常三胞胎培训资料-人类生殖工程PGD常适用于不同常适用于不同时期期受精前:第一极体做受精前:第一极体做为活活检材料材料卵裂期:卵裂球做卵裂期:卵裂球做为活活检材料材料囊胚期:滋养外胚囊胚期:滋养外胚层细胞做胞做为活活检材料材料PGD常用的常用的检测方法方法聚合聚合酶链反反应(PCR)荧光原位光原位杂交(交(FISH)培训资料-人类生殖工程培训资料-人类生殖工程PGDPGD适适应症症X-连锁隐性遗传病单基因相关遗传病染色体病高龄妇女非整倍性检测理论上,只要有足够的序列信息,能针对任何遗传条件开展PGD培训资料-人类生

36、殖工程PGD诊断程序诊断断时期及取期及取样方法方法1、配子、配子时期期精子精子选择:性染色体非整倍性:性染色体非整倍性50100%卵子卵子选择:常染色体非整倍性:常染色体非整倍性80%通通过检测第一、第二极体的第一、第二极体的遗传学分析,可推学分析,可推测卵子内卵子内遗传物物质状况,达到状况,达到诊断目的。断目的。优越越处:不影响胚胎:不影响胚胎发育;育;诊断断时间早,没有早,没有错过移植移植时间的危的危险培训资料-人类生殖工程胚胎胚胎时期期PGD多多选择在卵裂期,即体外受精在卵裂期,即体外受精3天后,天后,610-细胞胞时期期进行。行。实验证明:从卵裂期胚胎中活明:从卵裂期胚胎中活检取出取出

37、25%细胞,并不影响其胞,并不影响其正常正常发育,活育,活检成功率可达成功率可达97%。将胚胎置于将胚胎置于显微操作微操作仪上,用固定上,用固定针固定胚胎,用固定胚胎,用预先先装装载了酸性了酸性Tyrodes的打孔的打孔针在透明在透明带上消化打孔,再用取上消化打孔,再用取球球针经孔孔进入透明入透明带内吸拉出内吸拉出单个卵裂球。个卵裂球。培训资料-人类生殖工程培训资料-人类生殖工程培训资料-人类生殖工程培训资料-人类生殖工程单个细胞的遗传学分析细胞胞遗传学学诊断断取出的活取出的活检细胞胞经3:1甲醇甲醇/冰醋酸固定,制作染色冰醋酸固定,制作染色体体样本,本,FISH技技术检测分析。分析。培训资料

38、-人类生殖工程例如有一位母例如有一位母亲是血友病基因的携是血友病基因的携带者,者,她自己她自己虽然不然不发病,但是,她的两个儿子病,但是,她的两个儿子都是血友病患者,接都是血友病患者,接连不幸夭折。不幸夭折。这位悲位悲伤的母的母亲来到来到试管管婴儿中心,要求儿中心,要求给她做她做试管管婴儿。儿。医生考医生考虑到她的情况,决定到她的情况,决定给她做她做“第第三代三代”试管管婴儿。儿。培训资料-人类生殖工程随后就是取卵、人工授精等等步骤。当受精卵分裂到48个细胞时,取出其中的一个细胞进行诊断:对于胚卵是XY型,将来能发育为男子的就淘汰了;而胚卵是XX型(即将来发育为女儿)的则进行移植。试验成功了,

39、一个健康的女婴来到人间。按照遗传学法则,这个女婴虽然和她妈一样,也是血友病基因的携带者,但不会发病,将是一个“健康”的女孩。培训资料-人类生殖工程可可见,“第三代第三代”试管管婴儿是儿是优生的生的保保证。它把。它把妇科的科的产前前诊断,提前到胚断,提前到胚胎尚未着床胎尚未着床时,这对于患有于患有遗传病或有病或有遗传疾病疾病倾向的向的妇女、高女、高龄孕孕妇是很有是很有必要的。必要的。培训资料-人类生殖工程单个细胞的遗传学分析分子分子细胞胞遗传学学诊断断间期多色期多色FISH技技术,可以,可以进行多条染色体行多条染色体细胞胞遗传学分析学分析染色体数目异常染色体数目异常X、Y、21、13、18这五条

40、染色体数目异常占新生儿染色五条染色体数目异常占新生儿染色体数目异常的体数目异常的95%染色体染色体结构异常构异常全染色体涂染探全染色体涂染探针Genebank获取与易位重接点相关的取与易位重接点相关的DNA序列序列,标记后制后制备易位携易位携带者者特异性探特异性探针植入前胚胎性植入前胚胎性别鉴定定Y染色体或染色体或X、Y染色体特异探染色体特异探针进行性行性别分析分析培训资料-人类生殖工程四四 、细胞核移植技胞核移植技术-第四代第四代试管管婴儿儿是指将是指将发育不同育不同时期的胚胎或成体期的胚胎或成体细胞核胞核经显微手微手术和和细胞融合方法移植到去核卵母胞融合方法移植到去核卵母细胞中,胞中,或将

41、体或将体细胞核直接注入去核卵母胞核直接注入去核卵母细胞中,重新胞中,重新组成胚胎并使之成胚胎并使之发育成子代个体。育成子代个体。克隆技克隆技术之所以引人关注,是因之所以引人关注,是因为它在医它在医疗和和畜牧畜牧业方面有深方面有深远意意义培训资料-人类生殖工程辅助生殖技助生殖技术引起的引起的伦理学理学问题培训资料-人类生殖工程一、代孕是否合法代孕是否合法是做试管婴儿中伦理争论焦点。在体外受精-胚胎移植中,接受移植的小胚胎、并生下足月婴儿的妇女,并不一定必须是婴儿的生物学母亲(提供卵子的人),一位代孕母亲就可以代替之。培训资料-人类生殖工程代孕母亲,顾名思义它是指出借或出租自己的子宫代替他人生育后

42、代的妇女。代孕母亲根据契约可以提供自己的卵子,通过体外受精,然后再将小胚胎植入自己的子宫,或者是将他人在体外受精后发育的小胚胎移植入自己的子宫,经过足月怀胎后将所生下的孩子交给契约方收养,代孕母亲从此以后不再与孩子有任何往来,即代孕母亲不参与抚养孩子的活动。培训资料-人类生殖工程1985年,理查德和她的妻子贝弗利通过代理孕母生下一名女婴,取名特莎。可是事过不久,他们就分居了,为了争夺孩子的抚养权,他们闹上了法庭。与此同时,代理母亲玛丽也提出了孩子的监护权问题,理由是她不忍心看着孩子在一个破碎的家庭中受罪。1990年,就在法院裁决理查德享有对孩子的监护权几个小时之后,贝弗利在房间中开枪将其前夫打

43、死,她本人也被判决11年有期徒刑。培训资料-人类生殖工程现在国内外都出在国内外都出现了一些身体状况良了一些身体状况良好的有好的有钱贵妇,为了避免生育痛苦或者了避免生育痛苦或者为了了维持自己苗条体形而雇用持自己苗条体形而雇用穷人人为其其生育,你生育,你对这种种现象有什么看法?象有什么看法?培训资料-人类生殖工程1、你对代孕母亲是怎么看的?你认为其是否合法?2、如果你认为合法,对于其中可能出现的问题,比如说孩子的归属问题,待孕母亲面临的危险问题,你认为该如何解决?培训资料-人类生殖工程二、人工授精的伦理学问题这里讨论的主要是异源授精问题,即使用的精子并非来源于丈夫。培训资料-人类生殖工程异源授精出现的主要问题:1、割裂了生儿育女与传统婚姻的纽带2、导致近亲繁殖的危险3、精子的商品化4、优生工程有喜有忧5、谁是孩子的父亲?培训资料-人类生殖工程 你对异源人工授精怎么看?你你对异源人工授精怎么看?你对上面提到的问题又有哪些看法?对上面提到的问题又有哪些看法?培训资料-人类生殖工程综上所述,在辅助生殖领域中还存在着众多亟待解决的生物伦理学问题。这些问题的出现,以及解决的方法都是值得我们大家关注的问题。谢谢!培训资料-人类生殖工程

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