分析化学系列课件紫外可见分光光度法学习课件课件

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1、紫外紫外- -可见分光光度法可见分光光度法Ultraviolet and Visible Spectrophotometry;UV-vis分析化学系列课件贵阳医学院药学院分析化学教研室1上一内容下一内容回主目录第第11章章 紫外紫外-可见分光光度法可见分光光度法 紫外紫外-可见分光光度法简介可见分光光度法简介11.1 紫外紫外-可见吸收光谱的基本概念可见吸收光谱的基本概念11.2 紫外紫外-可见分光光度法的基本原理可见分光光度法的基本原理 11.3 紫外紫外-可见分光光度计可见分光光度计11.4 定量分析方法定量分析方法11.5 定性及结构分析定性及结构分析（7学时学时)上一内容下一内容回主目

2、录紫外/m 101 10-2 10-4 10-6 10-8 10-10 10-12 10-14 /s-1 3108 31010 31012 31014 31016 31018 31020 31022无线电波微波红外可见X射线射线引言引言紫外-可见光区的波长范围200760nm400760nm200400nm上一内容下一内容回主目录UV-vis的特点和应用的特点和应用特点：电子光谱，强度大 灵敏度高，10-710-4 g/mL 准确度0.20.5%应用：定性分析：定性鉴别、纯度检测定量分析：单组分、多组分(计算分光光度法)结构分析：共轭体系信息上一内容下一内容回主目录11.1 紫外紫外-可见吸收

3、光谱的基本概念可见吸收光谱的基本概念 跃迁类型跃迁类型 紫外紫外-可见吸收光谱中的常用术语可见吸收光谱中的常用术语 吸收带及其与分子结构的关系吸收带及其与分子结构的关系 影响吸收带的因素影响吸收带的因素上一内容下一内容回主目录11.1.1 跃迁类型跃迁类型能在紫外光区产生吸收的有机化合物：不饱和能在紫外光区产生吸收的有机化合物：不饱和且具有共轭系统且具有共轭系统跃 迁类 型波长范围及特点基 团能量 * *含杂原子的不饱含杂原子的不饱和基团和基团 远紫外区(max104，强吸收强吸收 跃迁几率小，跃迁几率小， max E * * * * C=C 共轭共轭 C=C最低占有轨道最低占有轨道最高空轨道

4、最高空轨道回主目录上一内容下一内容回主目录电荷迁移跃迁电荷迁移跃迁电荷迁移跃迁示意图电子给予体电子接受体hhFe3+SCN-2+ Fe2+SCN2+ Cl-(H2O)n Cl (H2O)n- hh电子接受体电子给予体电子接受体电子给予体上一内容下一内容回主目录配位场跃迁配位场跃迁4、5周期过渡金属元素镧系、锕系元素d轨道和f轨道分裂d-d跃迁和f-f跃迁必须在配体的配位场作用下才能产生上一内容下一内容回主目录几种常见的紫外几种常见的紫外-可见吸收光谱位置可见吸收光谱位置lg5432110 100 200 300 400 500 600 700 800/nm/nm10 100 200 300 4

5、00 500 600 700 800远紫外区近紫外区可见区 * *nn * * * *nn * *电荷转移配位场回主目录共轭上一内容下一内容回主目录课堂练习课堂练习 CH2=CH CH2CH2OCH3；上述两个分子能产生哪些类型的电子跃迁？ *跃迁、 *跃迁、 n*跃迁 *跃迁、 *跃迁、 n*跃迁有哪些生色团和助色团？生色团：C=C；助色团：OCH3生色团：苯环、C=O上一内容下一内容回主目录11.1.2 紫外紫外-可见吸收光谱中的常用术语可见吸收光谱中的常用术语吸收光谱的特征生色团和助色团 红移与蓝(紫)移增色效应和减色效应强带和弱带强带强带(strong band) max104弱带弱带

6、(weak band) max102回主目录上一内容下一内容回主目录吸收光谱吸收光谱(absorption spectrum)的特征的特征A吸收峰吸收峰吸收峰吸收峰 吸收峰吸收峰吸收峰吸收峰 谷谷谷谷肩峰肩峰(shoulder peak)末端吸收末端吸收末端吸收末端吸收(end absorption)(end absorption) max max min min sh回主目录上一内容下一内容回主目录吸收光谱的特征吸收光谱的特征吸收峰的数目取决于分子结构中不饱和基团的种类吸收峰的位置(max)取决于电子能级差吸收峰的强弱(max)取决于电子跃迁几率 回主目录上一内容下一内容回主目录回主目录生色

7、团和助色团生色团和助色团生色团(chromophore) ：*、n*助色团(auxochrome) ： n*红移红移红移红移(red shift)(red shift)长移长移长移长移(bathochromic shift)(bathochromic shift)增色效应或浓色效应增色效应或浓色效应增色效应或浓色效应增色效应或浓色效应(hyperchromic effect)(hyperchromic effect)example上一内容下一内容回主目录11.1.3 吸收带及其与分子结构的关系吸收带及其与分子结构的关系吸收带特 点(nm)吸收强度(max)跃迁类型吸 收基 团R R带带带带KK

8、带带带带B B带带带带E E带带带带E E1 1E E2 2波长较长波长较长 弱吸收弱吸收弱吸收弱吸收强吸收强吸收强吸收强吸收中强中强吸收吸收芳香芳香芳香芳香族化族化族化族化合物合物合物合物特征特征特征特征吸收吸收吸收吸收300210250230270重心重心256 max104（强带）（强带）200强吸强吸收收18047000中强中强吸收吸收2007000共轭共轭共轭共轭 * *nn * *芳环共轭芳环共轭 *杂原子不杂原子不饱和基团饱和基团共轭双键共轭双键芳环芳环回主目录芳环的离芳环的离域大域大键键 芳环芳环C=C骨架振骨架振动及环内动及环内 *example上一内容下一内容回主目录B带和

9、E带苯的苯的B带吸收光谱带吸收光谱苯蒸气苯蒸气苯的乙醇溶液苯的乙醇溶液苯异丙烷溶液的紫外吸收光谱B带带E1带带E2带带上一内容下一内容回主目录苯乙酮的紫外吸收光谱苯乙酮的紫外吸收光谱吸收带吸收带 max(nm) max (Lmol-1cm-1)B B带带带带R R带带带带278278319319KK带带带带2402401300013000110011005050B带带R带带苯乙酮的吸收带lg E2带带?K带带共轭共轭共轭共轭生色团生色团回主目录上一内容下一内容回主目录11.1.4 影响吸收带的因素影响吸收带的因素位阻影响位阻影响跨环效应跨环效应溶剂效应溶剂效应pH影响影响共轭系统共轭系统共平面

10、性共平面性共轭效应共轭效应 max （短移），（短移）， 溶剂极性溶剂极性 K带长移，带长移，R带短移带短移 max 210.5nm,270nm235nm,287nm上一内容下一内容回主目录二苯乙烯顺反异构体的紫外吸收光谱顺式顺式反式反式反式反式位阻影响位阻影响上一内容下一内容回主目录溶剂效应溶剂极性溶剂极性(n *)K带长移带长移R带短移带短移( *) *非极性溶剂非极性溶剂极性溶剂极性溶剂 * E非非n *极性溶剂对两种跃迁能级差的影响 E极极非极性溶剂非极性溶剂 *n极性溶剂极性溶剂 E非非 E极极上一内容下一内容回主目录11.2 基本原理基本原理11.2.1 Lambert-Beer定

11、律定律11.2.1-1 Lambert-Beer定律数学表达式定律数学表达式11.2.1-2 系光吸数系光吸数11.2.2 偏离偏离Beer定律的因素定律的因素上一内容下一内容回主目录11.2.1 Lambert-Beer定律定律截面积S厚度l断层dl，含dn个吸光质点含n个吸光质点的吸光介质IxI0IdS=kdn入射光强透射光强上一内容下一内容回主目录Lambert-Beer定律公式推导定律公式推导dS/S =(kdn)/S n = VC ，S = V/ l n / S = l C 上一内容下一内容回主目录Lambert-Beer定律的数学表达式定律的数学表达式-lg(I/I0)= ECl

12、M透光率透光率(transmitance)： T = I/I0 M吸光度吸光度(absorbance)： A = -lgT A = ECl（A与与C成正比关系）成正比关系） T = 10-ElC （T与与C成指数函数关系）成指数函数关系） &Lambert-Beer定律：定律：当一束平行单色光垂直通过均匀的非散射吸光物质溶液时，其对光的吸光度与溶液的浓度及厚度成正比，A = ECl。 上一内容下一内容回主目录定性和定量的参数定性和定量的参数 吸光系数吸光系数(absorptivity)M摩尔吸光系数摩尔吸光系数( / EM)M百分吸光系数百分吸光系数( )C=1mol/LC=1g/100ml摩

13、尔吸光系数摩尔吸光系数百分吸光系数百分吸光系数浓度单位浓度单位用用 途途mol/Lg/100ml分子结构研究分子结构研究含量测定含量测定两种吸光系数的区别两种吸光系数的区别两种吸光系数的换算关系：两种吸光系数的换算关系：上一内容下一内容回主目录CA = ECl4氯霉素(M=323.15)的水溶液，用纯品配制100ml含有2.00mg的水溶液，=278nm,l=1cm,A=0.614，求 、 。 吸光系数（计算示例）吸光系数（计算示例）上一内容下一内容回主目录11.2.2 偏离偏离Beer定律的因素定律的因素吸光度(A)与浓度(C)关系曲线11.2.2-1 化学因素化学因素11.2.2-2 光学

14、因素光学因素11.2.2-3 透光率测量误差透光率测量误差上一内容下一内容回主目录11.2.2-1 化学因素化学因素离解： max350nm,450nm max375nm缔合：溶剂化：减免：控制一定的实验条件（稀溶液、pH范围、溶剂等） I2CCl4紫色C2H5OH绿色来源： n = VC上一内容下一内容回主目录偏离偏离偏离偏离BeerBeer定律的因素：化学定律的因素：化学定律的因素：化学定律的因素：化学因素（图）因素（图）因素（图）因素（图）水溶液中Cr()两种离子的吸收曲线亚甲蓝阳离子水溶液的吸收光谱Cr2O72- 350nmCr2O72- 450nmCrO42- 375nmC=6.36

15、10-6 mol/L (单体单体)660nmC=1.2710-4 mol/L (二聚体二聚体)610nmC=5.9710-4 mol/L上一内容下一内容回主目录11.2.2-2 光学因素光学因素非非单色光单色光杂散光杂散光(stray light)散射光和反射光散射光和反射光非平行光非平行光&谱带宽度谱带宽度(band width,S)末端吸收末端吸收处产生假吸收处产生假吸收溶液混浊溶液混浊空白对比空白对比实际光程实际光程l A上一内容下一内容回主目录11.2.2-3 透光率的测量误差透光率的测量误差( T)来源：仪器噪音来源：仪器噪音(noise) 性质：性质：随机误差随机误差种类：种类：暗

16、噪音暗噪音(dark noise)散粒散粒(讯号讯号)噪音噪音(signal shot noise)暗噪音与迅号噪音的误差曲线暗噪音暗噪音迅号噪音迅号噪音测量最适宜范围：测量最适宜范围： (或或T=2065%) 上一内容下一内容回主目录11.3 紫外紫外-可见分光光度计可见分光光度计11.3.1 主要部件主要部件11.3.2 常见光路类型常见光路类型11.3.3 一般光学性能一般光学性能上一内容下一内容回主目录11.3.1 紫外紫外-可见分光光度计的主要部件可见分光光度计的主要部件光源：提供能量激发被测物质单色器：将来自光源的连续光谱按波长顺序色散，并从中分离出一定宽度的谱带，获得所需单色光吸

17、收池：盛放溶液并提供一定吸光厚度检测器：检测光讯号，并将光讯号转变为电讯号讯号处理及显示器：迅号放大、数学换算上一内容下一内容回主目录11.3.2 紫外紫外-可见分光光度计的光路类型可见分光光度计的光路类型单光束分光光度计光栅吸收池特点：一束单色光要求：光源稳定 校零上一内容下一内容回主目录双光束分光光度计双光束分光光度计光栅扇面镜参比池样品池I0II0扇面镜优点：减免光源不稳误差；改变波长不需校零； T = I/I0缺点：不适于浑浊溶液的测定特点：两束同波长单色光上一内容下一内容回主目录双波长分光光度计双波长分光光度计单色器1单色器2样品池A=A1-A212特点：两束不同波长单色光优点：无需

18、参比；可测浑浊溶液；可得一阶导数光谱上一内容下一内容回主目录双重单色器分光光度计双重单色器分光光度计 光多道二极管阵列检测器分光光度计 特点：经先后两次分光优点：单色光较纯，杂散光降得很低(溶剂截止波长A尖A平单组分定量分析方法单组分定量分析方法吸光系数法吸光系数法校正曲线法校正曲线法对照法对照法上一内容下一内容回主目录11.4.1-1 吸光系数法吸光系数法适用：适用：单色光较纯，符合单色光较纯，符合Beer定律定律方法：方法：绝对法：绝对法：比较法：比较法：上一内容下一内容回主目录UV-visUV-vis单组分定量分析方法：吸光系数法（例题）单组分定量分析方法：吸光系数法（例题）单组分定量分

19、析方法：吸光系数法（例题）单组分定量分析方法：吸光系数法（例题）例例1:VB12 max 361nm:E1%1cm=207, A=0.414, l=1cm，求，求C=？ g/100ml例例2:样品样品VB1225.0mg1000ml， max 361nm：A， l=1cm，求，求VB12 (%)=?C=20 g/ml上一内容下一内容回主目录11.4.1-2 校正校正/标准标准/工作曲线法工作曲线法适用：适用：单色光不纯，不完全符合单色光不纯，不完全符合L-B定律（曲线定律（曲线不过零点，线性稍差）不过零点，线性稍差）方法：方法：标准序列标准序列固定条件固定条件AC曲线曲线样品样品同上条件同上条

20、件AxCx曲线曲线回归方程：回归方程：A=ElC=KCAx校正曲线法示意图Cx上一内容下一内容回主目录UV-visUV-vis单组分定量分析方法：校正曲线法（例题）单组分定量分析方法：校正曲线法（例题）例3:芦丁的含量测定:标准品(0.200mg/ml)05ml25ml 样品3.0mg25ml回归方程：AC (r=0.9996)上一内容下一内容回主目录11.4.1-3 对照法（外标一点法）对照法（外标一点法）适用：适用：线性关系较好线性关系较好要求：要求：相同测定条件相同测定条件 Cs与与Cx相近相近方法：方法：对照法示意图As=ECsl；Ax=ECxl 上一内容下一内容回主目录UV-visU

21、V-vis单组分定量分析方法：对照法（例题）单组分定量分析方法：对照法（例题）例4: VB12的含量测定VB12注射液：对照品溶液：25.00mg 1000mLmax 361nm:l=1cm,Ax= 0.508,As= 0.518,求C=?对照法：吸光系数法：CC上一内容下一内容回主目录UV-vis测定一元弱酸测定一元弱酸HA的的Ka酸式体：酸式体：AHA= HAC碱式体：碱式体：AA-= A-CA=AHA+AA-= HAHA+ A-A-上一内容下一内容回主目录UV-visUV-vis测定一元弱酸测定一元弱酸HAHA的的K Ka a （例题）（例题）例5:吸光度法求VB6的pKaVB625mg

22、100ml贮备液， l=1cm，pH=2:酸式体max 230375nmpH=7:碱式体上一内容下一内容回主目录11.4.2 多组分定量分析方法多组分定量分析方法数值计算计算分光光度法数值计算数学变换条件：符合Beer定律、满足吸光度加合性、各组分吸收光谱有较大差异数学模型：A=KC方法：图解法（等吸收双波长消去法、系数倍率法）、信号处理方法、矩阵解法 上一内容下一内容回主目录两组分两组分混合物的吸收光谱混合物的吸收光谱吸收峰互不重叠 a、b互不干扰吸收峰部分重叠a对b干扰，b对a无干扰 1：A1a单组分定量Ca=A1a/E1al 2：A2a+b=A2a+A2b=E2aCal+E2bCbl 1

23、：A1a单组分定量Ca=A1a/E1al 2：A2b单组分定量Cb=A2b/E2bl上一内容下一内容回主目录11.4.2-1 等吸收双波长消去法等吸收双波长消去法吸光度加和性适用：浑浊溶液、吸收光谱重叠的混合组分原理：双波长型分光光度计A=A2-A1=( 21)Cl=KC干扰组分干扰组分b： Ab=A1b-A2b =0待测组分待测组分a： Aa较大较大 选择波长选择波长 1和和 2的两个基本条件：的两个基本条件： 吸收峰相互重叠a、b互有干扰上一内容下一内容回主目录等吸收双波长消去法示意图（消去b，测定a） 2 1A1b=A2b Aa A=A1a+b-A2a+b=A1a+A1b-A2a-A2b

24、=A1a-A2a = Aa =(E1a-E2a)Cal = EaCal=KCa数学运算：数学运算： ACa上一内容下一内容回主目录UV-visUV-vis多组分定量分析方法：等吸收双波多组分定量分析方法：等吸收双波多组分定量分析方法：等吸收双波多组分定量分析方法：等吸收双波长消去法（消长消去法（消长消去法（消长消去法（消a a测测测测b b）等吸收双波长消去法示意图（消去a ，测定b ） 2 1A1a=A2a Ab A=A1a+b-A2a+b =A1a+A1b-A2a-A2b=A1b-A2b = Ab = EbCbl=KCb数学运算：数学运算： ACb优点：无需空白参比，可消除本底吸收及浑浊干

25、扰，显著提高测定灵敏度和准确度。 上一内容下一内容回主目录11.4.2-2 系数倍率法系数倍率法 适用：干扰组分无合适等吸收波长或不呈峰形&掩蔽系数K=A1/A2 A=KA2A1=0 优点：待测组分信号同时放大， Ax增大，提高检测灵敏度。原理：一般K放大57倍上一内容下一内容回主目录系数倍率法示意图系数倍率法示意图待测组分待测组分 2 1A1yA2yKA2yA1y/A2y=K KA2y=A1y 1：A1=A1x+A1y 2：A2=K(A2x+A2y )干扰组分干扰组分y： Ay=KA2yA1y=0 A=A2A1 =K(A2x+A2y)-(A1x+A1y) = KA2x-A1 x+(KA2y-

26、A1y) = AxCxl=(KE2x-E1 x)Cxl=KCx 干扰组分干扰组分= ACx上一内容下一内容回主目录11.4.2-3 导数光谱法（数学变换）导数光谱法（数学变换）应用：定性鉴别、结构分析及痕量测定原理： A=f()C一阶导数光谱(A/-)：(A/)i=(Ai+1Ai)/(i+1-i)二阶导数光谱(2A/2-)：2A/2=(A/)/&导数光谱：对普通光谱原函数求导所得图象。上一内容下一内容回主目录导数光谱的特点导数光谱的特点零阶光谱的极大在奇数阶为0，偶数阶为极值（极大、极小交替出现）。导数光谱的优点：突出特征，增加信息量，分辩率提高，消除杂质干扰。零阶光谱的拐点，在奇数阶为极值，

27、偶数阶为0。阶数n增高，极值数目增加(n+1)，峰形尖锐，分辨率增高。高频信号随导数阶数增高而增大；低频信号（干扰组分）反之通过对吸收曲线求导，消除干扰。极大极大00极小拐点极小极大00上一内容下一内容回主目录导数光谱的定量原理导数光谱的定量原理导数光谱法对干扰吸收的消除 比尔定律：A=C(l=1cm)一阶导数：dA/d =(d/d)C二阶导数：d2A/d2=(d2/d2)C三阶导数：d3A/d3=(d3/d3)C导数信号CA=C0+C1+C22+C33+Cnn A=C1+C2+C32+C43+Cnn-1 微分级数消除阶次较低的背景干扰 微分对求导吸光系数在特定波长下的变化率上一内容下一内容回

28、主目录导数光谱定量数据的测量方法导数光谱定量数据的测量方法 采用导数光谱上适宜振幅作为定量信息 导数光谱的求导定量方法：标准对比法求导条件：单色光的谱带宽度(狭缝宽)；波长间隔 p.峰谷法d.基线法(正切法)z.峰零法导数阶数：二至五阶。阶数分辩率抗干扰性S/N。奇数阶导数光谱易分辨，利于鉴别；偶数阶导数光谱易得到极值，利于测定。 几何法代数法 上一内容下一内容回主目录导数光谱分析示例导数光谱分析示例导数光谱法检定乙醇中痕量苯定性鉴别定性鉴别定量分析定量分析空白醇的吸收光谱空白醇的吸收光谱醇中含苯醇中含苯1ppm的吸收光谱的吸收光谱醇中含苯醇中含苯10ppm的吸收光谱的吸收光谱醇中含苯醇中含苯

29、10ppm的二阶导数光谱的二阶导数光谱醇中含苯醇中含苯10ppm的四阶导数光谱的四阶导数光谱含苯胺和苯酚含苯胺和苯酚5ppm的吸收光谱的吸收光谱含苯胺和苯酚含苯胺和苯酚5ppm的四阶导数光谱的四阶导数光谱FNC(苯胺苯胺)DCC(苯酚苯酚)导数光谱法测定废水中苯胺和苯酚的含量上一内容下一内容回主目录11.4.3 光电比色法光电比色法)显色反应的类型：配位反应、氧化还原反应、缩合反应、重氮化偶合反应M显色反应的要求化学计量关系确定组成恒定，化学性质稳定选择性好(max60nm)试剂和产物的吸收区别明显(max60nm)灵敏度高(=103105) &可见分光光度法：对能吸收可见光的有色溶液进行测定

30、的方法。上一内容下一内容回主目录光电比色法的显色反应条件光电比色法的显色反应条件试剂（显色剂）：灵敏度、稳定性、选择性用量：一般过量；影响产物组成 NH4SCN作显色剂测Fe3+： ： Fe3+SCN-Fe(SCN)2+ 淡红色 ： Fe3+2SCN-Fe(SCN)2+ 淡血红色：Fe3+4SCN-Fe(SCN)4- 血红色 溶剂控制：条件实验(A-C) 影响物质对光的吸收显色反应产物稳定性控制：有机溶媒可提高生成物稳定性上一内容下一内容回主目录酸碱度 酸度过大：影响配合物离解酸度太小：金属离子水解沉淀不同pH范围：生成配合物颜色不同控制：条件实验(A-pH)；缓冲溶液 时间 时间太短：反应不

31、完全时间太长：有色配合物再次分解控制：条件实验(A-t) 温度 影响反应速度合适温度：促使正反应迅速完全；防止副反应发生控制：条件实验(A-T) 上一内容下一内容回主目录1UV-vis定量分析方法小结定量分析方法小结单组分定量分析方法单组分定量分析方法吸光系数法吸光系数法校正曲线法校正曲线法对照法对照法多组分定量分析方法多组分定量分析方法双波长法双波长法导数光谱法导数光谱法光电比色法光电比色法（单色光较纯）（单色光较纯） （单色光不纯）（单色光不纯） （线性关系较好）（线性关系较好） （等吸收双波长消去法、系数倍率法）（等吸收双波长消去法、系数倍率法）（显色反应条件）（显色反应条件）上一内容下

32、一内容回主目录1UV-vis定性及结构分析定性及结构分析定性鉴别的一般方法（光谱比较法）定性鉴别的一般方法（光谱比较法）纯度检测方面的应用纯度检测方面的应用 有机化合物结构研究有机化合物结构研究上一内容下一内容回主目录UV-vis定性鉴别定性鉴别定性鉴别的依据：定性鉴别的依据：吸收峰数目吸收峰数目吸收峰位置吸收峰位置 max吸收峰强弱吸收峰强弱 max吸收光谱形状吸收光谱形状吸收光谱的特征吸收光谱的特征定性鉴别的一般方法：标准对比法定性鉴别的一般方法：标准对比法比较光谱特征数据比较光谱特征数据 max、 min、 sh 比较比较A（或或 max ）的比值的比值比较光谱一致性比较光谱一致性 上一

33、内容下一内容回主目录对比吸收光谱特征数据对比吸收光谱特征数据 安宫黄体酮安宫黄体酮(M=386.53)炔诺酮炔诺酮(M=298.43) max=2401nm max=2401nm3344上一内容下一内容回主目录对比吸光度（或吸光系数）比值对比吸光度（或吸光系数）比值 适用：存在几个吸收峰的样品，可消除仪器、浓度、厚度或其它原因造成的误差。 V-B12鉴别：max=278、361、550(nm)中国药典规定：A361/A278 A361/A550 = 3.153.45 上一内容下一内容回主目录对比吸收光谱的一致性对比吸收光谱的一致性 三种甾体激素的紫外吸收光谱三种甾体激素的紫外吸收光谱(10 g

34、/ml甲醇溶液）甲醇溶液）醋酸泼尼松醋酸泼尼松醋酸氢化可的松醋酸氢化可的松醋酸可的松醋酸可的松上一内容下一内容回主目录杂质检查UV-vis纯度检测纯度检测吸收峰位置：化合物无吸收杂质有吸收检出吸光系数变化：化合物强吸收吸收光谱变形 杂质无(弱)吸收吸光系数杂质吸收更强吸光系数上一内容下一内容回主目录杂质限量检测杂质限量检测 吸光度上限值 肾上腺素与肾上腺酮的紫外吸收光谱max=310nm肾上腺酮肾上腺素上一内容下一内容回主目录峰谷吸光度比值 药典规定：C=2mg/ml,l=1cm, max杂质吸收峰处无(弱)吸收吸收谷处有吸收上一内容下一内容回主目录UV-vis结构研究简介结构研究简介Y有机化

35、合物的紫外吸收光谱有机化合物的紫外吸收光谱 饱和碳氢化合物饱和碳氢化合物： *， 短，远紫外区短，远紫外区化合物化合物 max(nm) *n *CH3OH 150180CH3Cl 157173CH3I 180255上一内容下一内容回主目录不饱和脂肪族化合物不饱和脂肪族化合物 孤立双键：CH2=CH2( max=193nm) 共轭双键：CH2=CHCH=CH2(max=220nm, 104)EE最低占有轨道最高空轨道跃迁几率C=C 共轭 C=C( *); E上一内容下一内容回主目录含孤立助色团和生色团的饱和有机化合物含孤立助色团和生色团的饱和有机化合物 孤立助色团： n*跃迁， 长孤立生色团：

36、n* (275295nm), n* (190nm), *(150180nm) 、-不饱和醛、酮、酸和酯 共轭C=C：K带(max=200260nm， 104) C=O：R带(max=310350nm， NHCOCH3O-NH2OCH3 OHBr Cl CH3间位定位基：NO2CHOCOCH3COOHCOO-, CN-SO2NH2NH3+ w对位二取代 200nm 381nm， =181nm52+30=82nm 265nm，只比硝基苯(252nm)长13nm 邻、对位基间位基252nm,=52nm 230nm,=30nm 上一内容下一内容回主目录w邻、间位二取代邻、间位二取代 317.5nm 2

37、73.5nm 278.5nm 芳杂环类（五元或六元）：饱和： max(平伏键）平伏键）共轭共轭 上一内容下一内容回主目录推断化合物骨架推断化合物骨架 紫外吸收光谱一致：具有相同的生色团 VK1 1，4-萘醌 max(nm) 249， 260，325 250，330lg ，3.8 上一内容下一内容回主目录推断化合物结构推断化合物结构 水合氯醛可能有两种结构： R带，290nm上一内容下一内容回主目录vUV-vis重点内容小结重点内容小结掌握掌握 基本概念：基本概念：电子跃迁类型、生色团与助色团、透光率与电子跃迁类型、生色团与助色团、透光率与吸光度吸光度基本理论：基本理论：吸收带吸收带类型、特点及

38、影响因素类型、特点及影响因素Lambert-Beet定律定律的物理意义、数学表达式及偏离因素的物理意义、数学表达式及偏离因素吸光系数吸光系数的物理意义、表达形式及其相互关系和有关计的物理意义、表达形式及其相互关系和有关计算算紫外紫外-可见分光光度法可见分光光度法单组分定量单组分定量的各种方法的各种方法 上一内容下一内容回主目录紫外紫外- -可见分光光度计的基本部件、工作原理及光可见分光光度计的基本部件、工作原理及光路类型路类型紫外紫外- -可见分光光度法多组分定量方法可见分光光度法多组分定量方法用紫外吸收光谱进行定性鉴别及纯度检测的各种用紫外吸收光谱进行定性鉴别及纯度检测的各种方法方法 熟悉熟悉光电比色法的原理及应用光电比色法的原理及应用紫外吸收光谱与有机物分子结构的关系紫外吸收光谱与有机物分子结构的关系 了解了解上一内容下一内容回主目录课后练习 教材P226思考题与习题：1、3、4、12、13、14、16