肝功能实验室评价课件

上传人:M****1 文档编号:568514597 上传时间:2024-07-25 格式:PPT 页数:66 大小:1.18MB
返回 下载 相关 举报
肝功能实验室评价课件_第1页
第1页 / 共66页
肝功能实验室评价课件_第2页
第2页 / 共66页
肝功能实验室评价课件_第3页
第3页 / 共66页
肝功能实验室评价课件_第4页
第4页 / 共66页
肝功能实验室评价课件_第5页
第5页 / 共66页
点击查看更多>>
资源描述

《肝功能实验室评价课件》由会员分享,可在线阅读,更多相关《肝功能实验室评价课件(66页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。

1、肝功能实验室评价肝功能实验室评价肝脏解剖结构肝脏的基本功能肝脏的基本功能物质代谢功能物质代谢功能 蛋白质、氨基酸、糖、脂类、维生素、激素、蛋白质、氨基酸、糖、脂类、维生素、激素、胆红素、铁、铜、锌及其他金属等物质代谢胆红素、铁、铜、锌及其他金属等物质代谢 生物转化作用生物转化作用 各种生物活性物质、代谢终末产物及由外界进各种生物活性物质、代谢终末产物及由外界进入体内的各种异物、毒物或从肠道吸收来的非入体内的各种异物、毒物或从肠道吸收来的非营养物质营养物质 分泌与排泄功能分泌与排泄功能 胆汁酸盐、胆红素和胆固醇、药物、解毒产物胆汁酸盐、胆红素和胆固醇、药物、解毒产物 肝脏病常用的实验室检查肝脏病

2、常用的实验室检查为了解肝脏各种功能状态而设计的众多实验室检测方法,统称为肝功能试验(Liver function test)。肝癌标志物及肝炎病毒血清标志物的检测因不属基本肝功能范畴 一、蛋白质代谢功能检查一、蛋白质代谢功能检查背景背景蛋白质蛋白质 除除r r球蛋白以外的大部分血浆蛋白,如白蛋白、球蛋白以外的大部分血浆蛋白,如白蛋白、糖蛋白、脂蛋白、多种凝血因子、抗凝因子、纤溶因子及糖蛋白、脂蛋白、多种凝血因子、抗凝因子、纤溶因子及各种转运蛋白等均系肝脏合成,当肝细胞受损时这些血浆各种转运蛋白等均系肝脏合成,当肝细胞受损时这些血浆蛋白质合成减少,尤其是白蛋白减少,导致低白蛋白血症,蛋白质合成减

3、少,尤其是白蛋白减少,导致低白蛋白血症,临床上可出现水肿,甚至出现腹水与胸水。临床上可出现水肿,甚至出现腹水与胸水。r r球蛋白系免疫球蛋白,由球蛋白系免疫球蛋白,由B B淋巴细胞及浆细胞所产生,当淋巴细胞及浆细胞所产生,当肝脏受损,尤其是慢性炎症时,刺激单核肝脏受损,尤其是慢性炎症时,刺激单核- -吞噬细胞系统,吞噬细胞系统,r r球蛋白生成增加。球蛋白生成增加。 氨基酸氨基酸 体内氨基酸及核酸代谢产生的氨,在肝脏内通体内氨基酸及核酸代谢产生的氨,在肝脏内通过鸟氨酸循环合成尿素、经肾脏排出体外,从而维持血氨过鸟氨酸循环合成尿素、经肾脏排出体外,从而维持血氨正常水平,当肝细胞严重损害时,尿素合

4、成减少,血氨升正常水平,当肝细胞严重损害时,尿素合成减少,血氨升高,临床上表现为肝性脑病高,临床上表现为肝性脑病 血浆蛋白含量血浆蛋白含量 蛋白组分的分析蛋白组分的分析( (蛋白电泳蛋白电泳) )、凝血因子含、凝血因子含量、血氨浓度检验量、血氨浓度检验蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查 血清总蛋白和白蛋白、球蛋白比值测定血清总蛋白和白蛋白、球蛋白比值测定 检测方法:检测方法: STP -STP -双缩脲法双缩脲法ALB-BCGALB-BCG、BCPBCPGLO-GLO-计算方法计算方法参考值范围参考值范围 STPSTP: 成人成人 60-80g/L60-80g/L, 7 7月月-1-1周岁周

5、岁 51-73g/L51-73g/L 1-2 1-2周岁周岁 56-75g/L 356-75g/L 3周岁周岁 52-76g/L52-76g/LALB(BCG)ALB(BCG):成人:成人 404055g/L55g/L,新生儿,新生儿 28-44g/L 28-44g/L 14 6038-54g/L 60岁岁 34-48g/L34-48g/LGLOGLO: 202030g/L30g/L,A AG G 1.5-2.5:11.5-2.5:1。蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查STPSTP、ALBALB、GLOGLO、A/GA/G测定测定临床意义临床意义临床意义临床意义STPSTPSTPSTP及及及

6、及ALBALBALBALB升高:升高:升高:升高:各种原因水分减少所致,休克、脱各种原因水分减少所致,休克、脱水、肾上腺皮质功能减退等。水、肾上腺皮质功能减退等。STPSTPSTPSTP及及及及ALBALBALBALB降低:降低:降低:降低:肝脏合成能力下降:肝脏合成能力下降:肝脏合成能力下降:肝脏合成能力下降:各种类型肝病晚期各种类型肝病晚期合成原材料不足:合成原材料不足:合成原材料不足:合成原材料不足:营养不良或消化吸收不良营养不良或消化吸收不良蛋白质丢失过多:蛋白质丢失过多:蛋白质丢失过多:蛋白质丢失过多:各种原因导致血液中蛋白质丢失各种原因导致血液中蛋白质丢失蛋白质消耗过多:蛋白质消耗

7、过多:蛋白质消耗过多:蛋白质消耗过多:各种慢性消耗性疾病的中晚期各种慢性消耗性疾病的中晚期血液水份增加:血液水份增加:血液水份增加:血液水份增加:水钠潴留、大量晶体液体输入等水钠潴留、大量晶体液体输入等蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查STPSTPSTPSTP、ALBALBALBALB、GLOGLOGLOGLO、A/GA/GA/GA/G测定测定测定测定临床意义临床意义临床意义临床意义STPSTPSTPSTP及及及及GLOGLOGLOGLO升高升高升高升高慢性肝脏疾病:慢性肝脏疾病:慢性肝脏疾病:慢性肝脏疾病:包括自身免疫性慢性肝炎、慢性活动性肝炎、肝包括自身免疫性慢性肝炎、慢性活动性肝炎、肝

8、硬化、慢性酒精性肝病、原发性胆汁性肝硬化等;球蛋白增高程硬化、慢性酒精性肝病、原发性胆汁性肝硬化等;球蛋白增高程度与肝脏病严重性相关度与肝脏病严重性相关M M M M球蛋白血症:球蛋白血症:球蛋白血症:球蛋白血症:多发性骨髓瘤、淋巴瘤、原发性巨球蛋白血症等多发性骨髓瘤、淋巴瘤、原发性巨球蛋白血症等自身免疫性疾病:自身免疫性疾病:自身免疫性疾病:自身免疫性疾病:系统性红斑狼疮、风湿热、类风湿关节炎等系统性红斑狼疮、风湿热、类风湿关节炎等慢性炎症与慢性感染慢性炎症与慢性感染慢性炎症与慢性感染慢性炎症与慢性感染 :结核病、疟疾、黑热病、麻风病及慢性结核病、疟疾、黑热病、麻风病及慢性血吸虫病等血吸虫病

9、等 血清球蛋白浓度降低血清球蛋白浓度降低血清球蛋白浓度降低血清球蛋白浓度降低 生理性减少:生理性减少:生理性减少:生理性减少:小于小于3 3岁的婴幼儿岁的婴幼儿免疫功能抑制应用:免疫功能抑制应用:免疫功能抑制应用:免疫功能抑制应用:长期应用肾上腺皮质激素或免疫抑制剂长期应用肾上腺皮质激素或免疫抑制剂先天性低先天性低先天性低先天性低r r r r球蛋白血症球蛋白血症球蛋白血症球蛋白血症 蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查STPSTP、ALBALB、GLOGLO、A/GA/G测定测定临床意义临床意义临床意义临床意义A/GA/G倒置倒置 ALBALB减少或减少或GLOGLO升高引起,常见于严重肝功

10、能损害、升高引起,常见于严重肝功能损害、M M蛋蛋白血症、肾功能严重损害、慢性中度以上肝病及免疫系白血症、肾功能严重损害、慢性中度以上肝病及免疫系统增生性疾病统增生性疾病蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查血清蛋白电泳碱性环境中碱性环境中(pH8.6)(pH8.6)血清蛋白质均带负电,在电场中均会向血清蛋白质均带负电,在电场中均会向阳极泳动,因血清中各种蛋白质的阳极泳动,因血清中各种蛋白质的颗粒大小颗粒大小、等电点等电点及所及所带的带的负电荷数目负电荷数目不同,它们在电场中的泳动速度也不同。不同,它们在电场中的泳动速度也不同。白蛋白分子质量小,所带负电荷相对较多,在电场中迅速白蛋白分子质量小,

11、所带负电荷相对较多,在电场中迅速向阳极泳动;向阳极泳动;r r球蛋白因分子质量大,泳动速度最慢。球蛋白因分子质量大,泳动速度最慢。白蛋白、白蛋白、a a1 1球蛋白、球蛋白、a a2 2球蛋白、球蛋白、b b球蛋白和球蛋白和r r球蛋白五个区球蛋白五个区带带 参考值参考值 白蛋白白蛋白 0.62-0.71(620.62-0.71(62-71-71) ) a a1 1球蛋白球蛋白 0.03-0.04(30.03-0.04(3-4-4) ) a a2 2球蛋白球蛋白 0.6-0.10(60.6-0.10(6-10-10) ) b b球蛋白球蛋白 0.07-0.11(70.07-0.11(7-11-

12、11) ) r r球蛋白球蛋白 0.090.090.18(90.18(9-18-18) ) 蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查血清蛋白电泳 自动化电泳仪及电泳图谱自动化电泳仪及电泳图谱蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查血清蛋白电泳正常电泳图谱正常电泳图谱蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查血清蛋白电泳常见病例电泳图谱常见病例电泳图谱单克隆系增生单克隆系增生r- r-球蛋白病图谱球蛋白病图谱蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查血清蛋白电泳常见病例电泳图谱常见病例电泳图谱多克隆系增生多克隆系增生r- r-球蛋白病图谱球蛋白病图谱蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查血清蛋白电泳常见病例电泳图谱常

13、见病例电泳图谱肾病综合症图谱肾病综合症图谱低低r- r-球蛋白血症图谱球蛋白血症图谱蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查前白蛋白(前白蛋白(PALBPALB)测定)测定特性特性属急性时相蛋白,由肝细胞合成,属急性时相蛋白,由肝细胞合成,MD=62000MD=62000,较,较ALBALB小,区带小,区带电泳上向阳极的泳动速度较白蛋白快,在电泳图谱上位于白蛋电泳上向阳极的泳动速度较白蛋白快,在电泳图谱上位于白蛋白前方可以看到一条染色很浅的区带。前白蛋白是一种载体蛋白前方可以看到一条染色很浅的区带。前白蛋白是一种载体蛋白,能与甲状腺索结合,因此又叫甲状腺素结合前白蛋白白,能与甲状腺索结合,因此又叫

14、甲状腺素结合前白蛋白 (thyroxin binding prealbumin)(thyroxin binding prealbumin)并能运输维生素并能运输维生素A A。 前白蛋白半衰期较其他血浆蛋白短前白蛋白半衰期较其他血浆蛋白短( (约约1.91.9天天) )血清浓度明显血清浓度明显受营养(蛋白质代谢)状况及肝功能改变的影响,因此它比白受营养(蛋白质代谢)状况及肝功能改变的影响,因此它比白蛋白更能早期反映肝细胞损害。蛋白更能早期反映肝细胞损害。检测方法检测方法 RIARIA法、琼脂凝胶电泳法、法、琼脂凝胶电泳法、TIATIA法测定法测定参考值参考值12000mgLP-X2000mgL,

15、L,提示肝外胆道阻塞提示肝外胆道阻塞 胆红素代谢检查胆红素代谢检查 胆红素来源及肠肝循环胆红素代谢检查胆红素代谢检查肝、胆系统在胆色素代谢中的功能状态 uu溶血性贫血溶血性贫血 uu肝细胞对胆红素转运缺陷肝细胞对胆红素转运缺陷(Gilbert(Gilbert综合征综合征) ) uu结合缺陷结合缺陷(Crlgler-Najjar(Crlgler-Najjar综合征综合征) )uu排泄障碍排泄障碍(Dubin-Johnson(Dubin-Johnson综合征综合征) )uu胆道阻塞胆道阻塞( (各型肝炎、胆管炎症、结石等各型肝炎、胆管炎症、结石等) ) 胆红素代谢检查胆红素代谢检查直清总胆红素测定

16、(直清总胆红素测定(直清总胆红素测定(直清总胆红素测定(STBSTBSTBSTB)胆红素与偶氮染料发生重氮化反应胆红素与偶氮染料发生重氮化反应参考值参考值新生儿新生儿 0-10-1天天 34-103umol34-103umolL L 1-2 1-2天天 103-171umol103-171umolL L 3-5 3-5天天 68-137umol68-137umolL L成人成人 3.4-17.1umol3.4-17.1umolL L临床意义临床意义 判断有无黄疽、黄疽程度及演变过程判断有无黄疽、黄疽程度及演变过程 , , 判断疗效和指导治疗判断疗效和指导治疗17.1-34.2umol17.1-

17、34.2umolL L 隐性黄疸或亚临床黄疽;隐性黄疸或亚临床黄疽;34.2-171umol34.2-171umolL L 轻度黄疽,轻度黄疽,171-342umol171-342umolL L 中度黄疽,中度黄疽,342umol342umolL L 高度黄疽高度黄疽根据黄疽程度推断黄疽病因根据黄疽程度推断黄疽病因 溶血性黄疽溶血性黄疽 81.5umol/L342umol342umolL L。胆红素代谢检查胆红素代谢检查血清结合胆红素血清结合胆红素血清结合胆红素血清结合胆红素(CB)(CB)(CB)(CB)与非结合胆红素与非结合胆红素与非结合胆红素与非结合胆红素(UCB)(UCB)(UCB)(

18、UCB)测定测定测定测定 参考值范围参考值范围 结合胆红素结合胆红素0-6.8umol/L0-6.8umol/L 非结合胆红素非结合胆红素1.71.710.2umol/L10.2umol/L直接胆红素(Direct bilirubin)与间接胆红素(Indirect bilirubin)胆红素代谢检查胆红素代谢检查黄疽类型黄疽类型黄疽类型黄疽类型CB/STBCB/STB溶血性黄疸溶血性黄疸溶血性黄疸溶血性黄疸20%50%50%肝细胞性黄疽肝细胞性黄疽肝细胞性黄疽肝细胞性黄疽20-50%20-50%临床意义临床意义 根据根据CBCB与与TBTB比值及增高状态,可协助鉴别黄疽类型比值及增高状态,可

19、协助鉴别黄疽类型黄疽类型黄疽类型黄疽类型黄疽类型STBSTBCBCB(DBILDBIL)UCBUCB溶血性黄疸溶血性黄疸溶血性黄疸溶血性黄疸N/N/胆汁淤积性黄疽胆汁淤积性黄疽胆汁淤积性黄疽胆汁淤积性黄疽N/N/肝细胞性黄疽肝细胞性黄疽肝细胞性黄疽肝细胞性黄疽胆红素代谢检查胆红素代谢检查尿内胆红素检查尿内胆红素检查尿内胆红素检查尿内胆红素检查 非结合胆红素不能透过肾小球屏障,因此不能在尿中非结合胆红素不能透过肾小球屏障,因此不能在尿中出现;而结合胆红素具出现;而结合胆红素具水溶性水溶性,能够透过肾小球基底,能够透过肾小球基底膜在尿中出现。膜在尿中出现。尿胆红素试验阳性:尿胆红素试验阳性:胆汁排

20、泄受阻胆汁排泄受阻胆汁排泄受阻胆汁排泄受阻 肝外胆管阻塞,如胆石症、胆管肿瘤、肝外胆管阻塞,如胆石症、胆管肿瘤、胰头癌等;肝内小胆管压力升高如门脉周围炎症、纤胰头癌等;肝内小胆管压力升高如门脉周围炎症、纤维化,或因肝细胞肿胀等。维化,或因肝细胞肿胀等。 肝细胞损害肝细胞损害肝细胞损害肝细胞损害 病毒性肝炎,药物或中毒性肝炎,急性病毒性肝炎,药物或中毒性肝炎,急性酒精肝炎。酒精肝炎。黄疽鉴别诊断黄疽鉴别诊断黄疽鉴别诊断黄疽鉴别诊断 肝细胞性及梗阻性黄疽尿内胆红素阳肝细胞性及梗阻性黄疽尿内胆红素阳性,而溶血性黄疽则为阴性。先天性黄疽性,而溶血性黄疽则为阴性。先天性黄疽Dubin-Dubin-Joh

21、nsonJohnson和和RotorRotor综合征尿内胆红素阳性,而综合征尿内胆红素阳性,而GilbertGilbert和和Crigler-NajjarCrigler-Najjar综合征则为阴性。综合征则为阴性。碱中毒时胆红素分泌增加,可出现尿胆红素试验阳性碱中毒时胆红素分泌增加,可出现尿胆红素试验阳性。 胆红素代谢检查胆红素代谢检查尿中尿胆原检查尿中尿胆原检查尿中尿胆原检查尿中尿胆原检查 临床意义临床意义尿胆原增多尿胆原增多 肝细胞受损,如病毒性肝炎,药物或中毒性肝损害及某些门脉性肝肝细胞受损,如病毒性肝炎,药物或中毒性肝损害及某些门脉性肝硬化患者。硬化患者。循环中红细胞破坏增加及红细胞前

22、体细胞在骨髓内破坏增加,如溶循环中红细胞破坏增加及红细胞前体细胞在骨髓内破坏增加,如溶血性贫血及巨幼细胞贫血。血性贫血及巨幼细胞贫血。内出血时由于胆红素生成增加,尿胆原排出随之增加;充血性心力内出血时由于胆红素生成增加,尿胆原排出随之增加;充血性心力衰竭伴肝瘀血时,影响胆汁中尿胆原转运及再分泌,进入血中的尿衰竭伴肝瘀血时,影响胆汁中尿胆原转运及再分泌,进入血中的尿胆原增加。胆原增加。其他,如肠梗阻、顽固性便秘,使肠道对尿胆原回吸收增加,使尿其他,如肠梗阻、顽固性便秘,使肠道对尿胆原回吸收增加,使尿中尿胆原排出增加。中尿胆原排出增加。尿胆原减少或缺如尿胆原减少或缺如 胆道梗阻,如胆石症、胆管肿瘤

23、、胰头痛、胆道梗阻,如胆石症、胆管肿瘤、胰头痛、VaterVater壶腹癌等,完全壶腹癌等,完全梗阻时尿胆原缺如,不完全梗阻时则减少,同时伴有尿胆红素增加;梗阻时尿胆原缺如,不完全梗阻时则减少,同时伴有尿胆红素增加;新生儿及长期服用广谱抗生素时,由于肠道细菌缺乏或受到药物抑新生儿及长期服用广谱抗生素时,由于肠道细菌缺乏或受到药物抑制,使尿胆原生成减少。制,使尿胆原生成减少。胆汁酸代谢检查胆汁酸代谢检查 胆汁酸的肠肝循环胆汁酸的肠肝循环胆汁酸的肠肝循环胆汁酸的肠肝循环 肝细胞以胆固醇为原料直接合成的胆汁酸肝细胞以胆固醇为原料直接合成的胆汁酸_ _初级胆汁酸初级胆汁酸 胆酸胆酸(cholic ac

24、id)(cholic acid)及鹅脱氧胆酸及鹅脱氧胆酸 (chenodeoxychohc (chenodeoxychohc acid)acid)。初级胆汁酸随胆汁进入肠道后,经肠道菌群作用,。初级胆汁酸随胆汁进入肠道后,经肠道菌群作用,胆酸转变为脱氧胆酸胆酸转变为脱氧胆酸(deoxycholic acid)(deoxycholic acid),鹅脱氧胆酸转,鹅脱氧胆酸转变为石胆酸变为石胆酸(lithocholic acid)(lithocholic acid),称为次级胆汁酸。以上,称为次级胆汁酸。以上胆汁酸在肝细胞内与甘氨酸或牛磺酸结合,称为结合胆汁胆汁酸在肝细胞内与甘氨酸或牛磺酸结合,称

25、为结合胆汁酸,如甘氨胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、牛磺胆酸及牛磺鹅脱酸,如甘氨胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、牛磺胆酸及牛磺鹅脱氧胆酸等。结合胆汁酸是由肝脏分泌入胆汁的主要形式,氧胆酸等。结合胆汁酸是由肝脏分泌入胆汁的主要形式,在肠道细菌作用下,可使结合胆汁酸被水解脱去甘氨酸或在肠道细菌作用下,可使结合胆汁酸被水解脱去甘氨酸或牛硝酸而成游离胆汁酸。在回肠,尤其在回肠末端有牛硝酸而成游离胆汁酸。在回肠,尤其在回肠末端有9595胆汁酸被重吸收经门静脉人肝脏,在肝中已水解脱去牛磺胆汁酸被重吸收经门静脉人肝脏,在肝中已水解脱去牛磺酸或甘氨酸的胆汁酸又重新形成结合胆汁酸,继之又分泌酸或甘氨酸的胆汁酸又重新形成结合胆汁酸,

26、继之又分泌入胆汁入胆汁. . 胆汁酸的作用胆汁酸的作用 乳化脂类,促进脂类食物及脂溶性维生素在肠道的消化吸乳化脂类,促进脂类食物及脂溶性维生素在肠道的消化吸收,并维持胆汁中胆固醇的溶解状态。收,并维持胆汁中胆固醇的溶解状态。 胆汁酸代谢检查胆汁酸代谢检查胆汁酸测定能反映肝细胞合成、摄取及分泌功能,井与胆道排泄功能有胆汁酸测定能反映肝细胞合成、摄取及分泌功能,井与胆道排泄功能有关。它对肝胆系统疾病诊断的灵敏度和特异性高于其他指标。关。它对肝胆系统疾病诊断的灵敏度和特异性高于其他指标。 参考值范围参考值范围 总胆汁酸总胆汁酸( (酶法酶法) 0-10umol) 0-10umolL L胆汁酸增高见于

27、胆汁酸增高见于肝细胞损害,如急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、肝细胞损害,如急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、 肝肝CaCa、乙醇、乙醇肝及中毒性肝病;肝及中毒性肝病;胆道梗阻,如肝内、肝外的胆管梗阻;胆道梗阻,如肝内、肝外的胆管梗阻;门脉分流,肠道中次级胆汁酸经分流的门脉系统直接进入体循环;门脉分流,肠道中次级胆汁酸经分流的门脉系统直接进入体循环;进食后血清胆汁酸可一过性增高进食后血清胆汁酸可一过性增高 血清酶及同工酶检查血清酶及同工酶检查 背景资料背景资料肝脏是人体含酶最丰富的器官,酶蛋白含量约占肝总蛋白含量的肝脏是人体含酶最丰富的器官,酶蛋白含量约占肝总蛋白含量的2 23 3。肝细胞中所

28、含酶种类已知约数百种,在全身物质代谢及生物。肝细胞中所含酶种类已知约数百种,在全身物质代谢及生物转化中都起重要作用,转化中都起重要作用,有些酶具有一定组织特异性,测定血清中某些酶的性或含量可用有些酶具有一定组织特异性,测定血清中某些酶的性或含量可用于诊断肝胆疾病。如有些酶存在于肝细胞内,当肝细胞损伤时细于诊断肝胆疾病。如有些酶存在于肝细胞内,当肝细胞损伤时细胞内的酶释放入血流,使血清中活的这些酶活性升高,如丙氨酸胞内的酶释放入血流,使血清中活的这些酶活性升高,如丙氨酸氨基转移酶氨基转移酶(ALT)(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)(AST)、醛缩酶、乳酸、醛缩酶、

29、乳酸脱氢酶脱氢酶(LDH)(LDH)。有些酶是由肝细胞合成,当患肝病时这些酶活性降低,如凝血有些酶是由肝细胞合成,当患肝病时这些酶活性降低,如凝血酶。当胆道阻塞时,其排泄受阻,致使血清中这些酶的活性升高,酶。当胆道阻塞时,其排泄受阻,致使血清中这些酶的活性升高,如碱性磷酸酶如碱性磷酸酶(ALP)(ALP)、r-r-谷氨酰转肽酶谷氨酰转肽酶(r-GT)(r-GT)。有些酶活性与肝纤。有些酶活性与肝纤维组织增生有关,当肝脏纤维化时,血清中这些酶活性增高,如维组织增生有关,当肝脏纤维化时,血清中这些酶活性增高,如单胺氧化酶单胺氧化酶(MAO)(MAO),型前胶原肽型前胶原肽(PP)(PP)、透明质酸

30、、透明质酸(HA)(HA)、脯氨酰、脯氨酰羟化酶羟化酶(PH)(PH)等。因此,血清中的这些酶活性变化能反应肝脏的病等。因此,血清中的这些酶活性变化能反应肝脏的病理状态,是肝脏病实验室检查中最活跃的一个领域。理状态,是肝脏病实验室检查中最活跃的一个领域。同工酶是指具有相同催化活性,但分子结构、理化性质及免疫学同工酶是指具有相同催化活性,但分子结构、理化性质及免疫学反应等都不相同的一组酶,因此又称同工异构酶,这些酶存在于反应等都不相同的一组酶,因此又称同工异构酶,这些酶存在于人体不同组织,或在同一组织、同一细胞的不同亚细胞结构内。人体不同组织,或在同一组织、同一细胞的不同亚细胞结构内。因此同工酶

31、测定可提高酶学检查对肝胆系统疾病诊断及鉴别诊断因此同工酶测定可提高酶学检查对肝胆系统疾病诊断及鉴别诊断的特异性。的特异性。 血清酶及同工酶检查血清酶及同工酶检查氨基转移酶及其同工酶测定氨基转移酶及其同工酶测定氨基转移酶及其同工酶测定氨基转移酶及其同工酶测定是一组以磷酸吡哆醛是一组以磷酸吡哆醛(Vit6)(Vit6)和磷酸吡哆胺为其辅酶,催化氨基酸与和磷酸吡哆胺为其辅酶,催化氨基酸与a-a-酮酸之间的氨基转移反应的酶类,用于肝功能检查主要是丙氨酸氨基转酮酸之间的氨基转移反应的酶类,用于肝功能检查主要是丙氨酸氨基转移酶移酶(ALT)(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)(

32、AST)。 ALT ALT分布:肝脏分布:肝脏 骨骼肌骨骼肌 肾脏肾脏 心肌心肌 AST AST分布:心肌分布:心肌 肝脏肝脏 骨骼肌骨骼肌 肾脏肾脏在肝细胞分布,在肝细胞分布,ALTALT主要存在于非线粒体中,而大约主要存在于非线粒体中,而大约8080的的ASTAST存在于线存在于线粒体内。由上可知粒体内。由上可知ALTALT与与ASTAST均为非特异性细胞内功能酶,正常时血清的均为非特异性细胞内功能酶,正常时血清的含量很低,但当肝细胞受损时,肝细胞膜通透性增加,胞浆内的含量很低,但当肝细胞受损时,肝细胞膜通透性增加,胞浆内的ALTALT与与ASTAST释放入血浆,致使血清释放入血浆,致使血

33、清ALTALT与与ASTAST的酶活性升高,在中等度肝细胞损伤的酶活性升高,在中等度肝细胞损伤时,时,ALTALT漏出率远大于漏出率远大于ASTAST;此外;此外 ALTALT与与ASTAST的血浆半衰期分别为的血浆半衰期分别为47474747小时和小时和17171717小时,因此小时,因此ALTALT测定反应肝细胞损伤的灵敏度较测定反应肝细胞损伤的灵敏度较ASTAST为高。但在严重肝为高。但在严重肝细胞损伤时,线粒体膜亦损伤,可导致线粒体内细胞损伤时,线粒体膜亦损伤,可导致线粒体内ASTAST的释放,血清中的释放,血清中 ASTASTALTALT比值升高。比值升高。参考值范围参考值范围 速率

34、法速率法(37) (37) ALT 10ALT 1040U40UL L AST 10AST 1040U40UL L ALTALTAST 1AST 1AST1,是诊断病毒性肝炎,是诊断病毒性肝炎重要检测手段。急性重症肝炎时,重要检测手段。急性重症肝炎时, “胆酶分离胆酶分离”现象,提示肝细现象,提示肝细胞严重坏死,预后不佳。胞严重坏死,预后不佳。慢性病毒性肝炎慢性病毒性肝炎 ALTALTAST1AST1酒精性肝病、药物性肝炎、脂肪肝、肝癌等非病毒性肝病,转氨酒精性肝病、药物性肝炎、脂肪肝、肝癌等非病毒性肝病,转氨酶轻度升高或正常,且酶轻度升高或正常,且ALTALTAST1AST1。酒精性肝病。酒

35、精性肝病ASTAST显著升高,显著升高,ALTALT几近正常,可能因为酒精具有线粒体毒性及酒精抑制吡哆醛活几近正常,可能因为酒精具有线粒体毒性及酒精抑制吡哆醛活性有关。性有关。肝硬化肝硬化 肝内、外胆汁淤积,转氨酶活性通常正常或轻度上升。肝内、外胆汁淤积,转氨酶活性通常正常或轻度上升。急性心肌梗死后急性心肌梗死后6-86-8小时,小时,ASTAST增高,增高,18-2418-24小时达高峰,其值可达小时达高峰,其值可达参考值上限的参考值上限的4-104-10倍,与心肌坏死范围和程度有关,倍,与心肌坏死范围和程度有关,4-54-5天后恢复,天后恢复,若再次增高提示梗死范围扩大或新的梗死发生。若再

36、次增高提示梗死范围扩大或新的梗死发生。其他疾病其他疾病 如骨骼肌疾病如骨骼肌疾病( (皮肌炎、进行性肌萎缩皮肌炎、进行性肌萎缩) )、肺梗死、肾、肺梗死、肾梗死、胰梗死、休克及传染性单核细胞增多症,转氨酶轻度升高梗死、胰梗死、休克及传染性单核细胞增多症,转氨酶轻度升高(50(50200U)200U)。血清酶及同工酶检查血清酶及同工酶检查AST同工酶(Isoenzyme of AST)ASTsASTs与与ASTmASTm正常血清中大部分为正常血清中大部分为ASTsASTs,ASTmASTm仅占仅占1010以下;以下;ASTmASTm升高表明肝细胞坏死严重。升高表明肝细胞坏死严重。轻、中度急性肝炎

37、,轻、中度急性肝炎,ASTsASTs上升为主,上升为主,ASTmASTm正常;正常;重症肝炎、暴发性肝炎、酒精性肝病时血清中重症肝炎、暴发性肝炎、酒精性肝病时血清中ASTmASTm升高;氟烷性肝炎、升高;氟烷性肝炎、ReyeReye综合征、妊娠脂综合征、妊娠脂肪肝、肝动脉栓塞术后及心肌梗死时肪肝、肝动脉栓塞术后及心肌梗死时ASTmASTm也升也升高。高。血清酶及同工酶检查血清酶及同工酶检查碱性磷酸酶碱性磷酸酶碱性磷酸酶碱性磷酸酶( ( ( (ALPALP) ) ) )及同工酶及同工酶及同工酶及同工酶( ( ( (ALP-ISOALP-ISO) ) ) )测定测定测定测定 ALPALP在碱性环境

38、中能水解磷酸酯产生磷酸。在碱性环境中能水解磷酸酯产生磷酸。ALPALP主要分布在肝脏、骨骼、主要分布在肝脏、骨骼、肾、小肠及胎盘中,血清中肾、小肠及胎盘中,血清中ALPALP以游离的形式存在,极少量与脂蛋白、以游离的形式存在,极少量与脂蛋白、免疫球蛋白形成复合物。由于血清中大部分免疫球蛋白形成复合物。由于血清中大部分ALPALP来源于肝脏与骨骼,来源于肝脏与骨骼,因此常作为肝脏疾病的检查指标之一,胆道疾病时可能由于因此常作为肝脏疾病的检查指标之一,胆道疾病时可能由于ALPALP生成生成增加而排泄减少,引起血清中增加而排泄减少,引起血清中ALPALP升高。升高。参考值范围参考值范围 PNP PN

39、P速率法速率法(37)(37):成人:成人5757114U/L114U/L,儿童,儿童250U/LALP2ALP1ALP2。急性肝炎时,急性肝炎时,ALP2ALP2明显增加,明显增加,ALP1ALP1轻度增加,且轻度增加,且ALP1ALP2ALP1ALP2。8080以上的肝硬化患者,以上的肝硬化患者,ALP5ALP5明显增加,可达总明显增加,可达总ALP40ALP40以上。但以上。但不出现不出现ALP1ALP1。 血清酶及同工酶检查血清酶及同工酶检查r r r r谷氨酰转移酶及其同工酶测定谷氨酰转移酶及其同工酶测定谷氨酰转移酶及其同工酶测定谷氨酰转移酶及其同工酶测定 催化谷胱甘肽上催化谷胱甘肽

40、上r-r-谷氨酰基转移到另一个肽或另一个氨基酸上的酶。谷氨酰基转移到另一个肽或另一个氨基酸上的酶。 主要存在于细胞膜和微粒体上,参与谷胱甘肽的代谢。肾脏、肝脏和主要存在于细胞膜和微粒体上,参与谷胱甘肽的代谢。肾脏、肝脏和胰腺含量丰富,但血清中胰腺含量丰富,但血清中GGTGGT主要来自肝胆系统。主要来自肝胆系统。GGTGGT在肝脏中广泛分在肝脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统,因此当肝内合成亢进或布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统,因此当肝内合成亢进或胆汁排出受阻时,血清中胆汁排出受阻时,血清中GGTGGT增高。增高。 参考值参考值 硝基苯酚速率法硝基苯酚速率法(37)(37)

41、:5OU5OUL L。意义意义胆道阻塞性疾病胆道阻塞性疾病 原发性胆汁性肝硬化、硬化性胆管炎等所致的慢性胆汁原发性胆汁性肝硬化、硬化性胆管炎等所致的慢性胆汁淤积,肝癌时由于肝内阻塞,诱使肝细胞产生多量淤积,肝癌时由于肝内阻塞,诱使肝细胞产生多量GGTGGT,同时癌细胞也合,同时癌细胞也合成成GGTGGT,均可使,均可使GGTGGT明显升高,可达参考值上限的明显升高,可达参考值上限的1010倍以上。此时倍以上。此时GGTGGT、ALPALP、5-5-核苷酸酶核苷酸酶(5NT)(5NT)、亮氨酸氨基肽酶、亮氨酸氨基肽酶(LAp)(LAp)及血清胆红素呈平行增及血清胆红素呈平行增加。加。急、慢性病毒

42、性肝炎、肝硬化、急性肝炎时,急、慢性病毒性肝炎、肝硬化、急性肝炎时,GGTGGT呈中等度升高;慢性肝呈中等度升高;慢性肝炎、肝硬化的非活动期,酶活性正常,若炎、肝硬化的非活动期,酶活性正常,若GGTGGT持续升高,提示病变活动或持续升高,提示病变活动或病情恶化。病情恶化。急、慢性酒精性肝炎、药物性肝炎急、慢性酒精性肝炎、药物性肝炎 GGTGGT可呈明显或中度以上升高可呈明显或中度以上升高(300-(300-1000U1000UL)L),ALTALT和和ASTAST仅轻度增高,甚至正常。酗酒者当其戒酒后仅轻度增高,甚至正常。酗酒者当其戒酒后GGTGGT可随可随之下降。之下降。其他其他 脂肪肝、胰

43、腺炎、胰腺肿瘤、前列腺脂肪肝、胰腺炎、胰腺肿瘤、前列腺CaCa等等GGTGGT亦可轻度增高。亦可轻度增高。 血清酶及同工酶检查血清酶及同工酶检查GGT同工酶(iso-GGT) GGT1GGT1:( (高分子质量高分子质量) )存在于正常血清、胆道阻塞及恶性存在于正常血清、胆道阻塞及恶性浸润性肝病中。浸润性肝病中。GGT2GGT2:( (中分于质量中分于质量) )由两种成分组成,主要成分存在于由两种成分组成,主要成分存在于肝脏疾病中,据报道肝脏疾病中,据报道GOT2GOT2对肝癌的敏感性与特异性均较对肝癌的敏感性与特异性均较高,在高,在AFPAFP阴性肝癌中其阳性事为阴性肝癌中其阳性事为8686

44、4 4;若与;若与AFPAFP联联合检测使肝癌诊断正确率达合检测使肝癌诊断正确率达94944 4,另一种成分存在,另一种成分存在于胆道阻塞性疾病。于胆道阻塞性疾病。GGT3GGT3为低分子质量复合物,尚无重要意义。为低分子质量复合物,尚无重要意义。血清酶及同工酶检查血清酶及同工酶检查a-L-a-L-a-L-a-L-岩藻糖苷酶岩藻糖苷酶岩藻糖苷酶岩藻糖苷酶(AFU)(AFU)(AFU)(AFU) 特性特性a-L-a-L-岩藻糖苷酶为溶酶体酸性水解酶,广泛存在于人体组织岩藻糖苷酶为溶酶体酸性水解酶,广泛存在于人体组织( (肝、肝、脑、肺、肾、胰、白细胞、纤维组织等脑、肺、肾、胰、白细胞、纤维组织等

45、) )细胞溶酶体中,血清和尿细胞溶酶体中,血清和尿液中含有一定量。液中含有一定量。其主要生理功能是参与含岩藻糖苷的糖蛋白、糖脂等生物活性大其主要生理功能是参与含岩藻糖苷的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子物质的分解代谢。分子物质的分解代谢。临床意义临床意义用于岩藻糖苷蓄积病的诊断用于岩藻糖苷蓄积病的诊断 如遗传性岩藻糖苷酶缺乏症时如遗传性岩藻糖苷酶缺乏症时AFUAFU降降低,出现岩藻糖累积,患儿多于低,出现岩藻糖累积,患儿多于5-65-6岁死亡。岁死亡。用于肝细胞癌与其他肝占位性病变的鉴别诊断用于肝细胞癌与其他肝占位性病变的鉴别诊断 肝癌时肝癌时AFUAFU显著增显著增高,其他肝占位性病变时高,其他

46、肝占位性病变时AFUAFU增高阳性率远低于肝癌;肝细胞癌手增高阳性率远低于肝癌;肝细胞癌手术切除后术切除后AFUAFU降低,复发时又升高。降低,复发时又升高。APUAPU和和AFPAFP联合检测可提前联合检测可提前3-103-10个月发现原发性肝个月发现原发性肝CaCa,阳性率可达,阳性率可达97%97%以上以上血清酶及同工酶检查血清酶及同工酶检查谷氨酸脱氧酶谷氨酸脱氧酶谷氨酸脱氧酶谷氨酸脱氧酶(GLDH)(GLDH)(GLDH)(GLDH)测定测定测定测定 特性特性仅存在于细胞线粒体内的酶,可使仅存在于细胞线粒体内的酶,可使L-L-谷氨酸和其他氨基酸脱氢。谷氨酸和其他氨基酸脱氢。以肝脏含量最

47、高,其次为心肌和肾脏,少量含于脑、骨髂肌和白以肝脏含量最高,其次为心肌和肾脏,少量含于脑、骨髂肌和白细胞中。在肝脏细胞中。在肝脏GDHGDH主要分布于肝小叶中央区肝细胞线粒体中,其主要分布于肝小叶中央区肝细胞线粒体中,其活性测定是反映肝实质活性测定是反映肝实质( (线粒体线粒体) )损害的敏感指标。反映肝小叶中损害的敏感指标。反映肝小叶中央区的坏死。央区的坏死。参考值参考值 速率法速率法(37)(37)男性:男性:08U08UL L;女性:;女性:0-7U0-7UL L意义意义肝细胞坏死肝细胞坏死 如卤烷致肝细胞中毒坏死时如卤烷致肝细胞中毒坏死时GDHGDH升高最明显升高最明显( (可达参可达

48、参考值上限考值上限10-2010-20倍倍) );酒精中毒伴肝细胞坏死时,;酒精中毒伴肝细胞坏死时,GDHGDH增高比其他指增高比其他指标敏感。标敏感。慢性肝炎、肝硬化慢性肝炎、肝硬化 GDHGDH升高较明显。慢性肝炎时升高较明显。慢性肝炎时GDHGDH升高可达参升高可达参考值上限考值上限4-54-5倍肝硬化时升高倍肝硬化时升高2 2倍以上。倍以上。急性肝炎急性肝炎 急性肝炎弥漫性炎症期无并发症时,急性肝炎弥漫性炎症期无并发症时,GDHGDH向细胞外释放向细胞外释放较少,其升高程度不如较少,其升高程度不如ALTALT升高明显。升高明显。GDHGDH升高反映肝小叶中央区升高反映肝小叶中央区坏死而

49、坏死而ALTALT主要分布于肝小叶周边部。主要分布于肝小叶周边部。肝癌、阻塞性黄疽时肝癌、阻塞性黄疽时GDHGDH活力正常。活力正常。血清酶及同工酶检查血清酶及同工酶检查单胺氧化酶单胺氧化酶单胺氧化酶单胺氧化酶 原理原理 单胺氧化酶单胺氧化酶(monoamme oxidase(monoamme oxidaseMA0)MA0)为一种含为一种含铜的酶,分布在肝、肾、胰、心等器官,肝中铜的酶,分布在肝、肾、胰、心等器官,肝中MA0MA0来源于线粒来源于线粒体,在有氧情况下,催比各种单胺的氧化脱氢反应,可通过体,在有氧情况下,催比各种单胺的氧化脱氢反应,可通过检测底物的减少量、氧的消耗量和检测底物的减

50、少量、氧的消耗量和NH3NH3的生成量来确定的生成量来确定MAOMAO的的活性,血清活性,血清MAOMAO活性与体内结缔组织增生呈正相关,因此临床活性与体内结缔组织增生呈正相关,因此临床上常用上常用MAOMAO活性测定来观察肝脏纤维化程度。活性测定来观察肝脏纤维化程度。 参考值范圃参考值范圃 成人正常值:伊藤法成人正常值:伊藤法 3030单位单位 临床意义临床意义 1 1肝脏病变肝脏病变 8080以上的重症肝硬化病人及伴有肝硬化以上的重症肝硬化病人及伴有肝硬化的肝癌患者的肝癌患者MA0MA0活性增高,但对早期肝硬化反应不敏感。急性活性增高,但对早期肝硬化反应不敏感。急性肝炎时肝炎时MAOMAO

51、大多正常,但若伴有急性肝坏死时;大多正常,但若伴有急性肝坏死时;MA0MA0从坏死的从坏死的肝细胞逸出使血清中肝细胞逸出使血清中MAOMAO增高。轻度慢性肝炎增高。轻度慢性肝炎MAOMAO大多正常,大多正常,中中 重度慢性肝炎有重度慢性肝炎有5050病人血清病人血清MAOMAO增高,表明有肝细胞坏增高,表明有肝细胞坏死和纤维化形成。死和纤维化形成。 2 2肝外疾病肝外疾病 慢性充血性心力衰竭、糖尿病、甲状腺功慢性充血性心力衰竭、糖尿病、甲状腺功能亢进症、系统硬化症等,或因这些器官中含有能亢进症、系统硬化症等,或因这些器官中含有MAOMAO,或因心,或因心功能不全引起心源性肝硬化或肝窦长期高压,

52、功能不全引起心源性肝硬化或肝窦长期高压,MA0MA0也可升高也可升高 血清酶及同工酶检查血清酶及同工酶检查单胺氧化酶单胺氧化酶单胺氧化酶单胺氧化酶MA0MA0为一种含铜的酶,分布在肝、肾、胰、心等器官,肝为一种含铜的酶,分布在肝、肾、胰、心等器官,肝中中MA0MA0来源于线粒体,在有氧情况下,催比各种单胺的氧来源于线粒体,在有氧情况下,催比各种单胺的氧化脱氢反应,可通过检测底物的减少量、氧的消耗量和化脱氢反应,可通过检测底物的减少量、氧的消耗量和NH3NH3的生成量来确定的生成量来确定MAOMAO的活性,血清的活性,血清MAOMAO活性与体内结缔活性与体内结缔组织增生呈正相关,因此临床上常用组

53、织增生呈正相关,因此临床上常用MAOMAO活性测定来观察活性测定来观察肝脏纤维化程度。肝脏纤维化程度。参考值参考值 成人正常值:伊藤法成人正常值:伊藤法 3030单位单位临床意义临床意义 肝脏病变肝脏病变 8080以上的重症肝硬化病人及伴有肝硬化的肝癌患者以上的重症肝硬化病人及伴有肝硬化的肝癌患者MA0MA0活性增高,但对早期肝硬化反应不敏感。急性肝炎时活性增高,但对早期肝硬化反应不敏感。急性肝炎时MAOMAO大多大多正常,但若伴有急性肝坏死时;正常,但若伴有急性肝坏死时;MA0MA0从坏死的肝细胞逸出使血清中从坏死的肝细胞逸出使血清中MAOMAO增高。轻度慢性肝炎增高。轻度慢性肝炎MAOMA

54、O大多正常,中大多正常,中 重度慢性肝炎有重度慢性肝炎有5050病人血清病人血清MAOMAO增高,表明有肝细胞坏死和纤维化形成。增高,表明有肝细胞坏死和纤维化形成。肝外疾病肝外疾病 慢性充血性心力衰竭、糖尿病、甲状腺功能亢进症、慢性充血性心力衰竭、糖尿病、甲状腺功能亢进症、系统硬化症等,或因这些器官中含有系统硬化症等,或因这些器官中含有MAOMAO,或因心功能不全引起心,或因心功能不全引起心源性肝硬化或肝窦长期高压,源性肝硬化或肝窦长期高压,MA0MA0也可升高。也可升高。血清酶及同工酶检查血清酶及同工酶检查脯氨酰羟化酶测定脯氨酰羟化酶测定脯氨酰羟化酶测定脯氨酰羟化酶测定PHPH为胶原纤维合成

55、酶,能将胶原为胶原纤维合成酶,能将胶原a-a-肽链上的脯氨酸羟化为肽链上的脯氨酸羟化为羟脯氨酸。在脏器发生纤维化时,羟脯氨酸。在脏器发生纤维化时,PHPH在该器官组织内的活在该器官组织内的活性增加,当肝纤维化时,肝脏胶原纤维合成亢进,血清中性增加,当肝纤维化时,肝脏胶原纤维合成亢进,血清中PHPH增高,因此测定血中增高,因此测定血中PHPH活性可作为肝纤维化的指标。活性可作为肝纤维化的指标。参考值范围参考值范围 39395 5111187ug87ugL L临床意义临床意义肝脏纤维化的诊断肝脏纤维化的诊断 肝硬化及血吸虫性肝纤维化,肝硬化及血吸虫性肝纤维化,PHPH活性明显增活性明显增高。原发性

56、肝癌因大多伴有肝硬化,高。原发性肝癌因大多伴有肝硬化,PHPH活性亦增高,而转移性肝活性亦增高,而转移性肝癌、急性肝炎、轻型慢性肝炎,癌、急性肝炎、轻型慢性肝炎,PHPH大多正常,当肝细胞坏死加重大多正常,当肝细胞坏死加重伴胶原纤维合成亢进时,伴胶原纤维合成亢进时,PHPH活性增加,慢性中、重度肝炎因伴有活性增加,慢性中、重度肝炎因伴有明显肝细胞坏死及假小叶形成,明显肝细胞坏死及假小叶形成,PHPH活性增高。活性增高。肝脏病变随访及预后诊断肝脏病变随访及预后诊断 慢性肝炎、肝硬化患者,其慢性肝炎、肝硬化患者,其PHPH活性进活性进行性增高,提示肝细胞坏死及纤维化状态加重,若治疗后行性增高,提示

57、肝细胞坏死及纤维化状态加重,若治疗后PHPH活性活性逐渐下降,提示治疗有效,疾病在康复过程中。逐渐下降,提示治疗有效,疾病在康复过程中。 其他指标型前胶原氨基末端肽测定型前胶原氨基末端肽测定 (PPPP)型胶原型胶原(c)(c)及其分解片段及其分解片段(7s(7s片段和片段和NClNCl片段片段) )纤维连接蛋白(纤维连接蛋白(FNFN)血清铜(血清铜(CUPPERCUPPER)血清铜蓝蛋白血清铜蓝蛋白血清胆碱脂酶(血清胆碱脂酶(SPCHESPCHE)血清腺苷脱氨酶(血清腺苷脱氨酶(ADAADA) 肝脏病检查项目的选择与应用肝脏病检查项目的选择与应用 了解肝脏的再生和代偿功能了解肝脏的再生和代

58、偿功能善于运用多方面评价手段和方法善于运用多方面评价手段和方法充分了解评价项目的局限性充分了解评价项目的局限性注意结合体征和临床表现注意结合体征和临床表现肝脏病检查项目的选择与应用肝脏病检查项目的选择与应用健康体格检查健康体格检查ALTALT、肝炎病毒标志物、肝炎病毒标志物、TBILTBIL、DBILDBIL、STPSTP、ALBALB、A AG G怀疑为无黄疽性肝病怀疑为无黄疽性肝病 急性患者急性患者 ALTALT、PALBPALB、TBATBA、UROURO及肝炎病毒标志物。及肝炎病毒标志物。慢性患者慢性患者ASTAST、ALPALP、GGTGGT、CHECHE、ADAADA、STPSTP

59、、ALBALB、A/GA/G比值及血清蛋白比值及血清蛋白电泳。电泳。对黄疽患者的诊断与鉴别诊断对黄疽患者的诊断与鉴别诊断STBSTB、CBCB、UROURO与与U-BILU-BIL、ALPALP、GGTGGT、LP-XLP-X、TBATBA。怀疑为原发性肝癌怀疑为原发性肝癌 ALTALT、ASTAST、STBSTB、CB CB 、AFPAFP、AFUAFU、GGTGGT及其及其ISOISO,ALPALP及其及其ISOISO和和LDHLDH。肝纤维化或肝硬化肝纤维化或肝硬化 ALTALT、ASTAST、STBSTB、STPSTP、ALBALB、ADAADA、CHECHE、PALBPALB、A A

60、G G、蛋白电泳、蛋白电泳、ICGRICGR为筛选检查,为筛选检查, MAOMAO、PHPH、PPPP、FNFN、等。、等。疗效判断及病情随访疗效判断及病情随访 急性肝炎急性肝炎ALTALT、ASTAST、PALBPALB、ICGICG、STBSTB、CBCB、UROURO、U-BILU-BIL。慢性肝病慢性肝病 ALTALT、ASTAST、STST、CBCB、ADAADA、CHECHE、PTPT、STPSTP、ALBALB、A AG G及蛋及蛋白电泳等,白电泳等,MAOMAO、PHPH、PPPP原发性肝原发性肝CaCa随访随访AmmAmm、AFPAFP、APUAPU、GGTGGT、ALPAL

61、P及及ISOISO、等。、等。病毒性肝炎标志物检测 目前病毒性肝炎分类类类 型型病毒种类病毒种类甲型肝炎甲型肝炎HAVHAV乙型肝炎乙型肝炎HBVHBV丙型肝炎丙型肝炎HCVHCV丁型肝炎丁型肝炎HDVHDV戊型肝炎戊型肝炎HEVHEV庚型肝炎庚型肝炎HGVHGV输血传播病毒肝炎输血传播病毒肝炎TTVTTV病毒性肝炎标志物检测目前常用肝炎病毒的检测方法有:目前常用肝炎病毒的检测方法有:针对抗原或抗体的酶联免疫法针对抗原或抗体的酶联免疫法(EIA(EIA,ELISA)ELISA) 放射免疫法放射免疫法(RIA)(RIA)时间分辨法(时间分辨法(TIATIA)血细胞凝集法血细胞凝集法(RPHA(R

62、PHA,PHA)PHA)免疫发光法免疫发光法(ECL)(ECL)针对核酸的斑点杂交法针对核酸的斑点杂交法聚合酶链反应法聚合酶链反应法(PCR)(PCR) 基因芯片法(基因芯片法(GCAGCA)病毒性肝炎标志物检测HAVHAV标志物检测标志物检测HAVHAV属小属小RNARNA病毒科。病毒科。HAVAgHAVAg和和RNARNA测定测定HAVAg:HAVAg:甲肝患者或携带者。甲肝患者或携带者。HAVAHAVA于发病前二周可从粪便中排出,于发病前二周可从粪便中排出,粪便中粪便中HAVHAV抗原可为急牲感染证据;抗原可为急牲感染证据;HAVHAVRNARNA阳性:对早期诊断具有特异性,可检测粪便排

63、毒情况阳性:对早期诊断具有特异性,可检测粪便排毒情况和污染的水源与食物,利于及时监测与预防甲肝。和污染的水源与食物,利于及时监测与预防甲肝。甲型肝炎病毒抗体测定甲型肝炎病毒抗体测定IgMIgM阳性是特异性早期诊断指标,提示阳性是特异性早期诊断指标,提示HAVHAV感染期;感染期;IgGIgG阳性出现于恢复期且持久存在,是获得免疫力的标志,提阳性出现于恢复期且持久存在,是获得免疫力的标志,提示既往感染,可作为流行病学调查的指标。示既往感染,可作为流行病学调查的指标。病毒性肝炎标志物检测乙型肝炎病毒标志物检测乙型肝炎病毒标志物检测乙型肝炎病毒属双股环状乙型肝炎病毒属双股环状DNADNA病毒,目前发

64、现人类为唯一宿病毒,目前发现人类为唯一宿主主, ,主要通过血液、体液和分泌物传播。主要通过血液、体液和分泌物传播。HBsAgHBsAg测定测定HBsAgHBsAg是是HBVHBV中中DaneDane颗粒外层的脂蛋白囊膜。颗粒外层的脂蛋白囊膜。 阳性见于急性乙肝潜伏期;发病后阳性见于急性乙肝潜伏期;发病后3 3个月不转阴,则易发展个月不转阴,则易发展成慢性乙型肝炎或肝硬化。携带者成慢性乙型肝炎或肝硬化。携带者HBsAgHBsAg也呈阳性。也呈阳性。HBsAgHBsAg本本身不具传染性,但因其常与身不具传染性,但因其常与HBVHBV同时存在,常作为传染性标同时存在,常作为传染性标志之一。志之一。

65、HBsAbHBsAb测定测定抗抗-HBs)HBsAg-HBs)HBsAg有一定中和有一定中和, ,灭活作用,属保护性抗体。灭活作用,属保护性抗体。抗抗HBsHBs是保护性抗体,提示机体有一定免疫力,一般在发是保护性抗体,提示机体有一定免疫力,一般在发病后病后3 36 6月才出现,可持续多年。注射过乙型肝炎疫苗或抗月才出现,可持续多年。注射过乙型肝炎疫苗或抗HBsHBs免疫球蛋白者,抗免疫球蛋白者,抗HBsHBs可呈现阳性反应。可呈现阳性反应。, ,病毒性肝炎标志物检测乙型肝炎病毒标志物检测乙型肝炎病毒标志物检测HBeAgHBeAg测定测定HBeAgHBeAg为一种可溶性蛋白质,游离存在于血中。

66、为一种可溶性蛋白质,游离存在于血中。 HBeAgHBeAg阳性表明乙型肝炎处于活动期,提示阳性表明乙型肝炎处于活动期,提示HBVHBV在体内复在体内复制,传染性较强;制,传染性较强;HeAgHeAg持续阳性,表明肝细胞损害较持续阳性,表明肝细胞损害较重,且可转为慢性乙型肝炎或肝硬化。如转为阴性,表重,且可转为慢性乙型肝炎或肝硬化。如转为阴性,表示病毒停止复制。示病毒停止复制。HBeAbHBeAb测定测定抗抗-HBe-HBe常于常于HBeAgHBeAg后出现于血液中。后出现于血液中。急性期即出现阳性者易进展为慢性乙型肝炎;慢性活动急性期即出现阳性者易进展为慢性乙型肝炎;慢性活动性肝炎出现阳性者可

67、进展为肝硬化;性肝炎出现阳性者可进展为肝硬化;HBeAgHBeAg与抗与抗-He-He均均阳性,且阳性,且ALTALT升高时可进展为原发性肝癌;抗升高时可进展为原发性肝癌;抗-HBe-HBe阳性阳性表示大部分乙肝病毒被消除,复制减少,传染性减低,表示大部分乙肝病毒被消除,复制减少,传染性减低,但并非无传染性。但并非无传染性。病毒性肝炎标志物检测乙型肝炎病毒标志物检测乙型肝炎病毒标志物检测HBcAgHBcAg测定测定HBcAg)HBcAg)一般情况下在血清中不易检测到游离态,主要存在于病毒一般情况下在血清中不易检测到游离态,主要存在于病毒颗粒内部,仅在病毒增殖裂解时才释放于外周血液中。颗粒内部,

68、仅在病毒增殖裂解时才释放于外周血液中。HBcAgHBcAg阳性,提示病人血清中有感染性的阳性,提示病人血清中有感染性的HBVHBV存在,其含量较多,存在,其含量较多,表示复制活跃,传染性强,预后较差。表示复制活跃,传染性强,预后较差。HBcAbHBcAb测定测定抗抗-HBc-HBc可分为可分为IgGIgG、IgMIgM和和IgAIgA三型。三型。抗抗-HBc-HBc总抗体总抗体抗抗-HBc-HBc总抗体主要反映的是抗总抗体主要反映的是抗-HBcIgG-HBcIgG,其检出率比,其检出率比HBsAgHBsAg更敏感更敏感,可作为,可作为HBsAgHBsAg阴性的阴性的HBVHBV感染的敏感指标;

69、也可用作乙型肝炎疫感染的敏感指标;也可用作乙型肝炎疫苗和血液制品的安全性鉴定和献血员的筛选。抗苗和血液制品的安全性鉴定和献血员的筛选。抗-HBcIgG-HBcIgG对机体对机体无保护作用,其阳性可持续数十年甚至终身。无保护作用,其阳性可持续数十年甚至终身。病毒性肝炎标志物检测乙型肝炎病毒标志物检测抗抗-HBc IgM-HBc IgM测定测定IgMIgM是乙型肝炎近期感染指标,也是是乙型肝炎近期感染指标,也是HVHV在体内持续在体内持续复制的指标,并提示病人血掖有传染性;复制的指标,并提示病人血掖有传染性;IgMIgM转阴,转阴,预示乙型肝炎逐渐恢复;抗预示乙型肝炎逐渐恢复;抗-HBcIgM-H

70、BcIgM转阳,预示乙型转阳,预示乙型肝炎复发。肝炎复发。抗抗-HBcIgG-HBcIgG测定测定IgGIgG是在发病后是在发病后1 1个月左右升高,可持续终身。它是个月左右升高,可持续终身。它是HBVHBV既往感染的指标,不是早期诊断指标,常用于乙既往感染的指标,不是早期诊断指标,常用于乙型肝炎流行病学调查。型肝炎流行病学调查。 HBV-DNA HBV-DNA测定测定HBV-DNAHBV-DNA是乙型肝炎的直接诊断证据是乙型肝炎的直接诊断证据 病毒性肝炎标志物检测HBsAgHBsAgHBsAbHBsAbHBeAgHBeAgHBeAbHBeAbHBcAbHBcAbHBcAbIgMHBcAbIg

71、M结果分析结果分析结果分析结果分析+ +- -+ +- - - -急性急性急性急性HBVHBV感染早期,感染早期,感染早期,感染早期,HBVHBV复制活跃复制活跃复制活跃复制活跃+ +- -+ +- -+ + +急性或慢性急性或慢性急性或慢性急性或慢性HBHB,HBVHBV复制活跃复制活跃复制活跃复制活跃+ +- - - -+ + +急性或慢性急性或慢性急性或慢性急性或慢性HBHB,HBVHBV复制减弱复制减弱复制减弱复制减弱+ +- - -+ + + +急性或慢性急性或慢性急性或慢性急性或慢性HBHB,HBVHBV复制减弱复制减弱复制减弱复制减弱+ +- - -+ + +- -HBVHBV复

72、制停止复制停止复制停止复制停止- - - - -+ + +空白期,可能空白期,可能空白期,可能空白期,可能HBVHBV处于平静携带中处于平静携带中处于平静携带中处于平静携带中- - - - -+ +- -既往既往既往既往HBVHBV感染,未产生抗感染,未产生抗感染,未产生抗感染,未产生抗-HBs-HBs- - - -+ + + +抗抗抗抗-HBe-HBe出现前阶段,出现前阶段,出现前阶段,出现前阶段,HBVHBV低度复制低度复制低度复制低度复制- -+ +- -+ + +- -HBVHBV感染恢复阶段感染恢复阶段感染恢复阶段感染恢复阶段- -+ +- - -+ +- -HBVHBV感染恢复阶段

73、感染恢复阶段感染恢复阶段感染恢复阶段+ + + +- -+ + +不同亚型不同亚型不同亚型不同亚型( (变异型变异型变异型变异型)HBV)HBV再感染再感染再感染再感染+ +- - - - - -HBV-DNAHBV-DNA处于整合状态处于整合状态处于整合状态处于整合状态- -+ +- - - - -病后或接种病后或接种病后或接种病后或接种HBHB疫苗后获得性免疫疫苗后获得性免疫疫苗后获得性免疫疫苗后获得性免疫- - -+ +- -+ +- -HBsAgHBsAg变异的结果变异的结果变异的结果变异的结果+ + +- -+ +- - -表面抗原、表面抗原、表面抗原、表面抗原、e e抗原变异抗原变

74、异抗原变异抗原变异病毒性肝炎标志物检测丙型肝炎病毒(HCV)标志物检测HCVHCV为黄病毒科、单链正股为黄病毒科、单链正股RNARNA病毒。主要通过病毒。主要通过血液、体液和分泌物传播血液、体液和分泌物传播HCV-RNAHCV-RNA测定测定有助于有助于HCVHCV感染的早期诊断:感染的早期诊断:HCVHCVRNARNA阳性提示阳性提示HCVHCV复制活跃,传染性强;转阴提示复制活跃,传染性强;转阴提示HCVHCV复制受抑,预后复制受抑,预后较好。连续观察较好。连续观察HCV-RNAHCV-RNA,结合抗,结合抗HCVHCV的动态变化,的动态变化,可作为丙肝的预后判断和干扰素等药物疗效的评价可

75、作为丙肝的预后判断和干扰素等药物疗效的评价指标。指标。HCVAb-IgMHCVAb-IgM和和IgGIgG测定测定 IgMIgM主要用于早期诊断,持续阳性常可作为转为慢主要用于早期诊断,持续阳性常可作为转为慢性肝炎的指标,或提示病毒持续存在并有复制;性肝炎的指标,或提示病毒持续存在并有复制;IgGIgG阳性表明已有阳性表明已有HCVHCV感染感染病毒性肝炎标志物检测丁型肝炎病毒标志物检测丁型肝炎病毒标志物检测丁型肝炎病毒丁型肝炎病毒(HDV)(HDV)是一种缺陷病毒,需是一种缺陷病毒,需HBVHBV或其他嗜肝病毒或其他嗜肝病毒(HBV)(HBV)的辅助才能复制和传播的辅助才能复制和传播。HDV

76、AgHDVAg和和HDVAbHDVAb测定测定HDVAgHDVAg出现较早,但仅持续出现较早,但仅持续1 12 2周。周。HDvAgHDvAg与与HBsAgHBsAg时阳性,表示丁型时阳性,表示丁型和乙型肝炎病毒同时感染,患者可迅速发展为慢性或急性重症肝炎。和乙型肝炎病毒同时感染,患者可迅速发展为慢性或急性重症肝炎。HDVAb-IgGHDVAb-IgG阳性:只能在阳性:只能在HBsAgHBsAg性的血清中测得,是诊断丁型肝炎的可性的血清中测得,是诊断丁型肝炎的可靠指标,即使靠指标,即使HDVHDV感染终止后仍可保持多年。感染终止后仍可保持多年。HDVAb-IgMHDVAb-IgM出现较早,一出

77、现较早,一般持续般持续2-202-20周,可用于丁型肝炎早期诊断。周,可用于丁型肝炎早期诊断。HDV-RNAHDV-RNA测定测定HDVHDVRNARNA阳性可明确诊断为丁型肝炎阳性可明确诊断为丁型肝炎 病毒性肝炎标志物检测戊型肝炎病毒(HEV)标志物检测HEVHEV病毒属黄病毒科,病毒属黄病毒科,RNARNA小病毒,可通过粪小病毒,可通过粪- -口方式传播,也可通口方式传播,也可通过血液传播,感染人体后常没有明显症状或症状轻微;诊断主要是过血液传播,感染人体后常没有明显症状或症状轻微;诊断主要是用用RT-PCRRT-PCR法检测血清法检测血清HEV-RNAHEV-RNA和用和用ELISAEL

78、ISA法检测血清抗法检测血清抗-HEV IgG-HEV IgG和和IgMIgM。HEVAbHEVAb测定测定IgMIgM阳性的持续时间较短,可作为急性感染的诊断指标;凡戊型肝阳性的持续时间较短,可作为急性感染的诊断指标;凡戊型肝炎恢复期炎恢复期IgGIgG效价超过或等于急性期效价超过或等于急性期4 4倍者,提示倍者,提示HEVHEV新近感染,有新近感染,有临床诊断意义。临床诊断意义。HEV-RNAHEV-RNA测定测定早期诊断感染;早期诊断感染;对抗体检测结果进行确证;对抗体检测结果进行确证;判断病人排毒期限;判断病人排毒期限;分子流行病学研究分子流行病学研究病毒性肝炎标志物检测庚型肝炎病毒标

79、志物检测庚型肝炎病毒标志物检测庚型肝炎病毒庚型肝炎病毒(HGV)(HGV)与与GBV-CGBV-C极相似,二者是黄病毒家族极相似,二者是黄病毒家族的不同分离株。的不同分离株。HGVAbHGVAb测定测定抗体阳性表示曾感染过抗体阳性表示曾感染过HGVHGV,多见于输血后肝炎或使用,多见于输血后肝炎或使用血液制品引起血液制品引起HGVHGV合并合并HCVHCV感染的患者。但是,目前感染的患者。但是,目前HGVHGV感染的血清学检测方法还不成熟。感染的血清学检测方法还不成熟。HGV-RNAHGV-RNA测定测定RNARNA阳性表明有阳性表明有HGVHGV存在。存在。病毒性肝炎标志物检测输血传播病毒输

80、血传播病毒(TTV)(TTV)检测检测TTVTTV是非囊膜单股环状是非囊膜单股环状DNADNA病毒、对病毒、对TTVTTV病毒的检测目病毒的检测目前主要依靠前主要依靠PCRPCR技术技术. .TTV-DNATTV-DNA阳性表明有阳性表明有TTVTTV存在,但普通人群存在,但普通人群TTVTTV阳性率阳性率较高,国内献血员阳性率报道为较高,国内献血员阳性率报道为1l1l1515,无症状,无症状TTVTTV携带者较多,又由于基因异源性较高,导致携带者较多,又由于基因异源性较高,导致PCRPCR法的阳性率较高法的阳性率较高, , 因此尚不能全面了解因此尚不能全面了解TTVTTV的临床和的临床和流行

81、病学特征。流行病学特征。 病例分析基本资料基本资料 某男,现年某男,现年3535岁,岁,20062006年年1111月月5 5日下午日下午4 4时许,突然意识时许,突然意识模糊急诊入院,家属诉患者一周前患者曾下水塘捕鱼,后出现模糊急诊入院,家属诉患者一周前患者曾下水塘捕鱼,后出现感身体倦怠乏力、流涕、纳差一周,在当地医院按感身体倦怠乏力、流涕、纳差一周,在当地医院按“风寒感冒风寒感冒”治疗三天,于治疗三天,于20062006年年1111月月2 2日晚应酬喝白酒日晚应酬喝白酒5 5两左右。入院当两左右。入院当日患者未进食。患者有高血压家族史,上一辈有日患者未进食。患者有高血压家族史,上一辈有5

82、5位脑卒中患位脑卒中患者。查体:病人意识模糊,瞳孔对光发射减弱,心率者。查体:病人意识模糊,瞳孔对光发射减弱,心率8989次次/ /分分钟钟, ,血压血压138/85mmHg,138/85mmHg,呼吸呼吸2525次次/ /分钟,腹部平软、四肢肌张力分钟,腹部平软、四肢肌张力稍减弱,皮肤干燥,巩膜黄染不明显,未引出各神经系统病理稍减弱,皮肤干燥,巩膜黄染不明显,未引出各神经系统病理征。征。问题:问题:1 1、该患者初步诊断为哪几类疾病?、该患者初步诊断为哪几类疾病? 2 2、首先该进行哪些辅助检查?、首先该进行哪些辅助检查?病例分析补充资料(一)补充资料(一)血常规:血常规:RBC4.2*10

83、RBC4.2*109 9/L/L;Hgb128g/LHgb128g/L;WBC12.2*10WBC12.2*109 9/L/L;N78%N78%;L22%L22%。尿液检查:尿液检查:URO+URO+,BIL+BIL+,其他无异常,其他无异常凝血检验:凝血检验:PT18.5PT18.5秒;秒;INR2.54INR2.54;APTT56.8APTT56.8秒秒2h2h内急查生化:内急查生化:GLU4.25mmol/LGLU4.25mmol/L;BUN2.13mmol/LBUN2.13mmol/L;Cre67.5umol/LCre67.5umol/L;K3.9mmol/LK3.9mmol/L;Na

84、140mmol/LNa140mmol/L;Cl102mmol/LCl102mmol/L;Amm175ug/dlAmm175ug/dl;TCOTCO2 225.6mmol/L25.6mmol/L;CK169U/LCK169U/L;CKMB12U/LCKMB12U/L;LDH465U/LLDH465U/L;CTnT0.01ng/LCTnT0.01ng/L。头颅头颅CTCT平扫未见明显异常,平扫未见明显异常,B B超查肝脏光点致密,体积稍缩超查肝脏光点致密,体积稍缩小;胆囊、脾、胰腺、双肾未见明显异常。小;胆囊、脾、胰腺、双肾未见明显异常。问题:问题:1 1、该患者可进一步修正诊断为何疾病、该患者可

85、进一步修正诊断为何疾病? ?依据何在?依据何在?2 2、如果需要排除、如果需要排除AMIAMI可能,需如何鉴别诊断?可能,需如何鉴别诊断?病例分析补充资料(二)补充资料(二)1010小时后小时后查体:患者呼吸、心跳、血压基本正常,皮肤、巩膜明显黄查体:患者呼吸、心跳、血压基本正常,皮肤、巩膜明显黄染,神志不清,昏迷嗜睡,间歇性躁动不安。染,神志不清,昏迷嗜睡,间歇性躁动不安。生化检验生化检验:ALT45200U/L:ALT45200U/L;AST32500U/LAST32500U/L;TBIL456U/LTBIL456U/L;DBIL385U/LDBIL385U/L;TP65g/LTP65g/

86、L;ALB32.5g/LALB32.5g/L;PALB12mg/dlPALB12mg/dl;ALP269U/LALP269U/L;GGT445U/LGGT445U/L;TBA235umol/LTBA235umol/L;ADA12U/LADA12U/L;5-5-NT145U/LNT145U/L;BUN0.57mmol/LBUN0.57mmol/L;Cre85.6umol/LCre85.6umol/L;CK165U/LCK165U/L;CKMB14U/LCKMB14U/L;CTnT0.02ng/LCTnT0.02ng/L;Amm254ug/dlAmm254ug/dl凝血检验:凝血检验:PT45.2

87、PT45.2秒;秒;INR8.6INR8.6;APTT124.1APTT124.1秒;秒;Fbg1.25g/LFbg1.25g/L;TT32.5TT32.5秒秒肿瘤标志物:肿瘤标志物:AFP25.6ng/mlAFP25.6ng/ml;CEACEA、CA199CA199、CA153CA153、FERRFERR、PSAPSA、FPSAFPSA、NSENSE等均正常。等均正常。肝炎标志物:肝炎标志物:HAVAbIgM(-)HAVAbIgM(-);HBsAg(+)HBsAg(+);HBsAb(-)HBsAb(-);HBeAg(+)HBeAg(+);HBeAb(-)HBeAb(-);HBcAb(+)HBcAb(+);HCVAb(-)HCVAb(-);HDVAg(+)HDVAg(+);HDVAbIgM(+)HDVAbIgM(+);HEVAb(-)HEVAb(-)ECGECG基本正常基本正常问题:该患者现在可诊断为何种疾病?依据?问题:该患者现在可诊断为何种疾病?依据?谢谢!谢谢!

展开阅读全文
相关资源
正为您匹配相似的精品文档
相关搜索

最新文档


当前位置:首页 > 医学/心理学 > 基础医学

电脑版 |金锄头文库版权所有
经营许可证:蜀ICP备13022795号 | 川公网安备 51140202000112号