最新实验2菌种分离PPT课件

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1、进入夏天,少不了一个热字当头,电扇空调陆续登场,每逢此时,总会想起进入夏天,少不了一个热字当头,电扇空调陆续登场,每逢此时,总会想起那一把蒲扇。蒲扇,是记忆中的农村,夏季经常用的一件物品。记忆中的故那一把蒲扇。蒲扇,是记忆中的农村,夏季经常用的一件物品。记忆中的故乡,每逢进入夏天,集市上最常见的便是蒲扇、凉席,不论男女老少,个个手持乡,每逢进入夏天,集市上最常见的便是蒲扇、凉席,不论男女老少,个个手持一把,忽闪忽闪个不停,嘴里叨叨着一把,忽闪忽闪个不停,嘴里叨叨着“怎么这么热怎么这么热”,于是三五成群,聚在大树,于是三五成群,聚在大树下,或站着,或随即坐在石头上,手持那把扇子,边唠嗑边乘凉。孩

2、子们却在周下,或站着,或随即坐在石头上,手持那把扇子,边唠嗑边乘凉。孩子们却在周围跑跑跳跳,热得满头大汗,不时听到围跑跑跳跳,热得满头大汗,不时听到“强子,别跑了,快来我给你扇扇强子,别跑了,快来我给你扇扇”。孩。孩子们才不听这一套,跑个没完,直到累气喘吁吁,这才一跑一踮地围过了,这时子们才不听这一套,跑个没完,直到累气喘吁吁,这才一跑一踮地围过了,这时母亲总是,好似生气的样子,边扇边训,母亲总是,好似生气的样子,边扇边训,“你看热的,跑什么?你看热的,跑什么?”此时这把蒲扇,此时这把蒲扇,是那么凉快,那么的温馨幸福,有母亲的味道!蒲扇是中国传统工艺品,在是那么凉快,那么的温馨幸福,有母亲的味

3、道!蒲扇是中国传统工艺品,在我国已有三千年多年的历史。取材于棕榈树,制作简单,方便携带,且蒲扇的表我国已有三千年多年的历史。取材于棕榈树,制作简单,方便携带,且蒲扇的表面光滑,因而,古人常会在上面作画。古有棕扇、葵扇、蒲扇、蕉扇诸名,实即面光滑,因而,古人常会在上面作画。古有棕扇、葵扇、蒲扇、蕉扇诸名,实即今日的蒲扇,江浙称之为芭蕉扇。六七十年代,人们最常用的就是这种,似圆非今日的蒲扇,江浙称之为芭蕉扇。六七十年代,人们最常用的就是这种,似圆非圆,轻巧又便宜的蒲扇。蒲扇流传至今,我的记忆中,它跨越了半个世纪,圆,轻巧又便宜的蒲扇。蒲扇流传至今,我的记忆中,它跨越了半个世纪,也走过了我们的半个人

4、生的轨迹,携带着特有的念想,一年年,一天天,流向长也走过了我们的半个人生的轨迹,携带着特有的念想,一年年,一天天,流向长长的时间隧道,袅长的时间隧道,袅实验2菌种分离一、实验目标:一、实验目标:1 1、掌握组织分离法制备母种的方法。、掌握组织分离法制备母种的方法。2 2、掌握组织分离接种技术。、掌握组织分离接种技术。3 3、会使用超净工作台和培养箱。、会使用超净工作台和培养箱。2、接种设备、接种设备(1)接种室)接种室(2)接种箱)接种箱(3)超净工作台)超净工作台3、常用的消毒设备:、常用的消毒设备:(1)70%酒精:一般用于手、种菇表面消毒;酒精:一般用于手、种菇表面消毒;(2)0.1%升

5、汞:常用于玻璃器皿、非金属器升汞:常用于玻璃器皿、非金属器械及种菇表面消毒;械及种菇表面消毒;(3)0.1%KMnO4:一般用于用具、器皿消:一般用于用具、器皿消毒;毒;4、菌种培养没备、菌种培养没备(1)培养箱)培养箱培养少量菌种的恒温电器(培养少量菌种的恒温电器(2040)(2)培养室)培养室六、菌种分离的方法六、菌种分离的方法菌菌种种分分离离:将将有有价价值值的的子子实实体体的的局局部部组组织织、孢孢子子或或基基内内菌菌丝丝移移接接到到斜斜面面试试管管培培养养基基上上,获获得得纯纯培养菌丝的操作称为菌种分离。培养菌丝的操作称为菌种分离。必必备备u特点特点简便,易成功简便,易成功保持原菌种

6、性状保持原菌种性状重复多易退化重复多易退化不适于耳类不适于耳类1 1、组织分离:采用食用菌子实体或菌核、菌索、组织分离:采用食用菌子实体或菌核、菌索的任何一部分组织培养成纯菌丝体的方法。的任何一部分组织培养成纯菌丝体的方法。组织组织PDAPDA次生菌丝次生菌丝培养培养2、木腐菌基内菌丝分离、木腐菌基内菌丝分离把分离用菇木的部分或全部的表面在火焰上轻燎。把分离用菇木的部分或全部的表面在火焰上轻燎。取小刀在火焰上灭菌,对准菇木上菇柄的着生位取小刀在火焰上灭菌,对准菇木上菇柄的着生位置切成两半。置切成两半。确定欲分离菌丝在菇木上的位置,再次用火焰灭确定欲分离菌丝在菇木上的位置,再次用火焰灭菌过的小刀

7、,在欲分离部位刻划数个井字。菌过的小刀,在欲分离部位刻划数个井字。用火焰灭过菌的接种钩,钩取一小块木屑移接于用火焰灭过菌的接种钩,钩取一小块木屑移接于斜面培养基。斜面培养基。接种后将试管置于接种后将试管置于2527下培养,促使其恢复。下培养,促使其恢复。近风干的种木内菌丝常处于休眠状态。近风干的种木内菌丝常处于休眠状态。3、孢子分离孢子分离主要是指利用子实体上产生的成熟有性孢子分离培养获得纯菌种的方法。分为多孢分离与单孢分离两种。孢子特点菌龄小生命力强变异率高(1 1)种菇)种菇 消毒消毒菌柄去菌柄去2/32/3苞被苞被有:有:75%75%酒精棉球擦酒精棉球擦0.25%0.25%新洁尔灭浸新洁

8、尔灭浸23min23min无菌纱布吸干表面水分无菌纱布吸干表面水分 无无(2 2)采收孢子)采收孢子整菇整菇插种法插种法种菇插在孢子收集器中种菇插在孢子收集器中使孢子散落于培养皿内的方法使孢子散落于培养皿内的方法用用前前灭灭菌菌2525、24h24h现孢子粉现孢子粉取出分离材料取出分离材料培养皿盖严培养皿盖严钩悬法钩悬法生产上采集木耳、银耳的孢子常采用此法。生产上采集木耳、银耳的孢子常采用此法。25、24h现孢子粉取出分离材料孢子印法孢子印法 取成熟的伞菌或胶质的子实体,经表面消毒,切去菌柄,取成熟的伞菌或胶质的子实体,经表面消毒,切去菌柄,菌褶向下,放置于灭过菌的有色纸上,用通气钟罩上,静菌

9、褶向下,放置于灭过菌的有色纸上,用通气钟罩上,静置一天,孢子落在纸上,形成孢子印,再从中挑取少量孢置一天,孢子落在纸上,形成孢子印,再从中挑取少量孢子转入试管培养基上培养。子转入试管培养基上培养。接种孢子接种孢子用接种环用接种环蘸孢子液或孢子粉蘸孢子液或孢子粉涂布于平板上涂布于平板上七、菌种质量的鉴定七、菌种质量的鉴定形态特征、生理特性、形态特征、生理特性、栽培性状、经济效益等栽培性状、经济效益等鉴定鉴定项目项目、 一般从菌种的一般从菌种的纯度、长势、颜色、菌龄、纯度、长势、颜色、菌龄、均匀度和出菇快慢均匀度和出菇快慢等等6 6个方面进行鉴定。个方面进行鉴定。退化母种退化母种好母种好母种出菇试

10、验出菇试验栽培出菇快出菇快产量高产量高品质好品质好抗逆性强抗逆性强菌种种类菌种种类品种名称品种名称菌种级别菌种级别代代 时时生产厂家生产厂家接种日期接种日期用于生产用于生产八、菌种保藏八、菌种保藏(一)保藏目的及原理(一)保藏目的及原理目的目的原理原理创造不利于菌种生长的一切条件,创造不利于菌种生长的一切条件,使其代谢处于休眠状态。使其代谢处于休眠状态。使菌种使菌种不生长不生长不死亡不死亡不污染不污染不降低或不丧失其优良性不降低或不丧失其优良性以尽量延长使用时间以尽量延长使用时间低温低温干燥干燥无氧无氧缺营养缺营养不利不利条件条件(二)常用保藏法(二)常用保藏法1 1、斜面低温法、斜面低温法2

11、 2、矿油保藏法、矿油保藏法无菌检验无菌检验注入种管注入种管淹没斜面约淹没斜面约1cm1cm矿油矿油处理处理灭菌:灭菌:152kpa152kpa、30min30min去水:去水:40504050烘至无色透明烘至无色透明 口堵胶塞口堵胶塞用时转管再转管用时转管再转管3 3、自然基质保藏法、自然基质保藏法4 4、菌丝球保藏法:、菌丝球保藏法:5 5、滤纸保藏法、滤纸保藏法6 6、真空冷冻干燥保藏法、真空冷冻干燥保藏法7 7、液氮超低温保藏法、液氮超低温保藏法(三)保藏注意(三)保藏注意u用保种培养基用保种培养基u及时保藏(菌丝占斜面及时保藏(菌丝占斜面2/32/3)u最好换胶塞最好换胶塞u用时活化

12、用时活化u严防棉塞受潮严防棉塞受潮九、操作步骤九、操作步骤1 1、挑选种菇:挑选生长健壮,菌聆年龄适中,、挑选种菇:挑选生长健壮,菌聆年龄适中,无病虫害,具有本品种优良性状的固体或组无病虫害,具有本品种优良性状的固体或组织作为种菇。织作为种菇。2 2、环境、用具严格消毒:、环境、用具严格消毒:打开紫外灯,打开紫外灯,30min30min后关闭杀菌灯。后关闭杀菌灯。3 3、用、用75%75%的酒精棉球对手指和菌种试管外壁消的酒精棉球对手指和菌种试管外壁消毒。毒。4 4、点燃酒精灯。、点燃酒精灯。5 5、蘑菇体消毒、蘑菇体消毒将子实体菌柄基部切除,置接种箱内,在超净将子实体菌柄基部切除,置接种箱内

13、,在超净工作台上以工作台上以75%75%的酒精擦拭,进行表面消毒。的酒精擦拭,进行表面消毒。6 6、组织分离:、组织分离:解剖刀经火焰灭菌,在蘑菇柄中纵切一刀,用手解剖刀经火焰灭菌,在蘑菇柄中纵切一刀,用手掰开再用刀片在菇盖与菇柄交界处切黄豆大小掰开再用刀片在菇盖与菇柄交界处切黄豆大小的小方块,放入培养皿中。的小方块,放入培养皿中。7 7、左手拿试管,用左手的大拇指和其他四指并、左手拿试管,用左手的大拇指和其他四指并排握住,斜面向上,并使试管位于水平位置。排握住,斜面向上,并使试管位于水平位置。8 8、右手拿镊子,在火焰上将凡在接种过程中可、右手拿镊子,在火焰上将凡在接种过程中可能进入试管的部

14、分全部用火烧过。能进入试管的部分全部用火烧过。9 9、用右手小指和无名指及手掌拔掉胶塞。用、用右手小指和无名指及手掌拔掉胶塞。用火焰灼烧试管口,灼烧时应不断转动管口。火焰灼烧试管口,灼烧时应不断转动管口。将烧过的镊子,稍微停留片刻,使之冷却,将烧过的镊子,稍微停留片刻,使之冷却,然后夹取小块迅速移接到斜面培养基中央,然后夹取小块迅速移接到斜面培养基中央,并塞好塞子。并塞好塞子。1010、贴标签、贴标签写明菌种编号,接种日期,姓名,随后放入培写明菌种编号,接种日期,姓名,随后放入培养箱中,置适宜温度下培养,待组织块长出养箱中,置适宜温度下培养,待组织块长出菌丝无污染即为纯种。菌丝无污染即为纯种。培养培养3535天,就可以看到组织上产生白色绒毛天,就可以看到组织上产生白色绒毛状菌丝,转管扩大即得到菌种。状菌丝,转管扩大即得到菌种。十、结果十、结果1 1、记录你制作的母种的生长状态;、记录你制作的母种的生长状态;2 2、是否有杂菌污染,如有分析其原因。、是否有杂菌污染,如有分析其原因。

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