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1、食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测方法研究进展方法研究进展1真菌毒素简介（种类，产生，危害，限度，检测真菌毒素简介（种类，产生，危害，限度，检测方法等）方法等）几种真菌毒素（黄曲霉素，赭曲霉素，呕吐毒素，几种真菌毒素（黄曲霉素，赭曲霉素，呕吐毒素，伏马毒素，玉米赤烯酶酮，伏马毒素，玉米赤烯酶酮，T-2T-2毒素）毒素）2真菌毒素的种类真菌毒素的种类真菌毒素（真菌毒素（MycotoxinMycotoxin），也称霉菌毒素，是真菌产生的次级代谢产物。），也称霉菌毒素，是真菌产生的次级代谢产物。已知有已知有200200多种不同的真菌毒素，一般同时具有毒性强和污染频率高的特点。多
2、种不同的真菌毒素，一般同时具有毒性强和污染频率高的特点。其中包括黄曲霉毒素其中包括黄曲霉毒素B1B1和和M1M1（AflatoxinsAflatoxins，FB1FB1、FM1FM1）；）；赭（棕）曲霉毒素赭（棕）曲霉毒素A A（Ochratoxin AOchratoxin A，OAOA）；）；脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）（脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）（Deoxynivalenol,DONDeoxynivalenol,DON）；）；玉米赤霉烯酮（玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN(F-2)Zearalenone,ZEN(F-2)）；）； T-2T-2毒素（毒素（T-2 toxin
3、,T-2T-2 toxin,T-2）；）；伏马霉素；伏马霉素；展青霉素（棒曲霉毒素）（展青霉素（棒曲霉毒素）（Patulin,PTLPatulin,PTL）；）；杂色（柄）曲霉毒素（杂色（柄）曲霉毒素（terigmatocystinterigmatocystin）；串珠镰刀菌素（）；串珠镰刀菌素（Moniliformin,MFMoniliformin,MF）三硝基丙酸；）三硝基丙酸；二乙酰镳草镰刀菌烯醇（二乙酰镳草镰刀菌烯醇（Diacetoxyscirpenol DASDiacetoxyscirpenol DAS）、麦角碱、黄米毒素、岛青霉毒素、橘）、麦角碱、黄米毒素、岛青霉毒素、橘青霉素、皱
4、褶青霉素、黄绿青霉素、红矢精、黄绿素、圆弧青霉偶氮酸和青霉素、皱褶青霉素、黄绿青霉素、红矢精、黄绿素、圆弧青霉偶氮酸和F-2F-2毒素等。毒素等。 3产生真菌毒素的霉菌产生真菌毒素的霉菌曲霉属曲霉属（Aspergillus LinkAspergillus Link）：黄曲霉（）：黄曲霉（A. flavusA. flavus）、寄生曲霉（）、寄生曲霉（A. A. parasiticusparasiticus）、赭曲霉（）、赭曲霉（A. ochraceusA. ochraceus）、杂色曲霉（）、杂色曲霉（A. flavusA. flavus）、）、烟曲霉（烟曲霉（A. flumigatusA.
5、flumigatus）、构巢曲霉（）、构巢曲霉（A. nidulansA. nidulans）和棒曲霉（）和棒曲霉（A. A. clavusclavus）等。）等。青霉属青霉属（Penicillium Link ex FrPenicillium Link ex Fr）：岛青霉（）：岛青霉（P. islandicumP. islandicum）、橘青）、橘青霉（霉（P. citrinumP. citrinum）、红色青霉（）、红色青霉（P. rubrumP. rubrum）、展青霉（）、展青霉（P. patulumP. patulum）和黄绿青霉（和黄绿青霉（P. citreo-vinideP.
6、 citreo-vinide）等。）等。镰刀菌属镰刀菌属（Fusarium Link ex FrFusarium Link ex Fr）：禾谷镰刀菌（）：禾谷镰刀菌（F. graminearunF. graminearun）、）、串珠镰刀菌（串珠镰刀菌（F. moniliformeF. moniliforme）、木贼镰刀菌（）、木贼镰刀菌（F. equisetiF. equiseti）、茄病镰）、茄病镰刀菌（刀菌（F. solaniF. solani）、三线镰刀菌（）、三线镰刀菌（F. tritinctumF. tritinctum）和镳草镰刀菌（）和镳草镰刀菌（F. F. sporotric
7、hioidessporotrichioides）等。）等。4真菌毒素的危害真菌毒素的危害 经济危害经济危害由于真菌的寄生和真菌毒素的产生，严重影响农作物的产量，降由于真菌的寄生和真菌毒素的产生，严重影响农作物的产量，降低农产品和饲料品质，造成巨大经济损失。全世界每年由于霉变低农产品和饲料品质，造成巨大经济损失。全世界每年由于霉变污染真菌毒素引起的农产品和工业原料的损失达数百亿美元。污染真菌毒素引起的农产品和工业原料的损失达数百亿美元。在我国北纬在我国北纬3131线以南地区采集的玉米、花生、花生油样品的阳线以南地区采集的玉米、花生、花生油样品的阳性检出率为性检出率为22.922.968.1%68
8、.1%，每年使粮食减产，每年使粮食减产3 37 7。19731973年，小麦年，小麦赤霉病大流行，穗发病率赤霉病大流行，穗发病率5050以上，产量损失以上，产量损失10104040。据调查，。据调查，除粮食、饲料以外，在油料作物种子、水果、干果、蔬菜、调味除粮食、饲料以外，在油料作物种子、水果、干果、蔬菜、调味品、烟草、麻类、乳和乳制品、鱼虾、肉类、发酵产品等都发现品、烟草、麻类、乳和乳制品、鱼虾、肉类、发酵产品等都发现了不同程度的真菌毒素污染。了不同程度的真菌毒素污染。5常见的真菌毒素常见的真菌毒素饲料、原料饲料、原料 可能产生的条件可能产生的条件 产生的真菌毒素产生的真菌毒素 小麦、大麦小
9、麦、大麦水分水分15%15%以上以上 AFAF、橘青霉毒素、橘青霉毒素 玉米玉米 水分水分13%13%以上以上 AFLAFL、ZENZEN、DONDON、T-T-2 2 花生饼花生饼 水分水分14%14%以上以上 AFAF、环匹阿尼酸、环匹阿尼酸 豆粕豆粕 /真菌毒素含量较少真菌毒素含量较少 稻谷稻谷 水分水分15%15%以上以上 ZEN6真菌毒素的危害真菌毒素的危害 健康危害健康危害根据真菌毒素作用的靶器官或者真菌毒素引起的病理现象，可将真菌毒根据真菌毒素作用的靶器官或者真菌毒素引起的病理现象，可将真菌毒素分为肝脏毒、肾脏毒、神经毒、震颤毒等。人或动物摄入被真菌毒素素分为肝脏毒、肾脏毒、神经
10、毒、震颤毒等。人或动物摄入被真菌毒素污染的农、畜产品，或通过吸入及皮肤接触真菌毒素可引发多种中毒症污染的农、畜产品，或通过吸入及皮肤接触真菌毒素可引发多种中毒症状。如致幻，催吐，出血症，皮炎，中枢神经受损，甚至死亡。状。如致幻，催吐，出血症，皮炎，中枢神经受损，甚至死亡。动物试验和流行病学的调查结果还证实，许多真菌毒素还可在体内积累动物试验和流行病学的调查结果还证实，许多真菌毒素还可在体内积累后产生致癌、致畸、致突变、类激素中毒，白细胞缺乏症等，对机体造后产生致癌、致畸、致突变、类激素中毒，白细胞缺乏症等，对机体造成永久性损害。成永久性损害。某些癌症以及克山病等都与真菌毒素中毒有关。某些癌症以
11、及克山病等都与真菌毒素中毒有关。 719731973年，湖北省黄岗、天门等年，湖北省黄岗、天门等1010县发生赤霉病麦中毒县发生赤霉病麦中毒30003000余人，安徽余人，安徽省也有省也有200200余人中毒。余人中毒。 19911991年安徽、河南部分地区因特大洪涝灾害造成粮食霉变而在灾区农年安徽、河南部分地区因特大洪涝灾害造成粮食霉变而在灾区农民中引起较大范围的真菌毒素中毒，一些地区的发病率超过民中引起较大范围的真菌毒素中毒，一些地区的发病率超过70% 70% 自自19721972年至年至19871987年，我国北方地区年，我国北方地区1313个省发生食用变质甘蔗中毒病案个省发生食用变质甘
12、蔗中毒病案825825例，死亡例，死亡7878人，其中河北乐亭一次中毒死亡人，其中河北乐亭一次中毒死亡8 8人，而且相当比例的人，而且相当比例的重病人遗留终生残疾重病人遗留终生残疾 19891989年年5 5月在内蒙古哲里木盟扎鲁特旗，由于居民食用玉米赤霉烯酮污月在内蒙古哲里木盟扎鲁特旗，由于居民食用玉米赤霉烯酮污染的荞麦造成乳腺病暴发，累计发病染的荞麦造成乳腺病暴发，累计发病103103例，患病率例，患病率14.4914.49。 在消化道癌高发区的河南林县，经流行病学调查发现，人们摄食中的在消化道癌高发区的河南林县，经流行病学调查发现，人们摄食中的DONDON、T-2T-2毒素等含量与食管癌
13、，贲门癌的发病率呈正相关毒素等含量与食管癌，贲门癌的发病率呈正相关 8已知的与人体有关的主要真菌毒素中毒症已知的与人体有关的主要真菌毒素中毒症菌种菌种易感染食品易感染食品毒素毒素主要症状及病主要症状及病变变黄曲霉黄曲霉花生、大豆、菜豆、谷物及副花生、大豆、菜豆、谷物及副产产品品黄曲霉毒素黄曲霉毒素肝癌肝癌赭曲霉赭曲霉谷物、玉米、咖啡、火腿谷物、玉米、咖啡、火腿赭曲霉毒素赭曲霉毒素人：巴人：巴尔尔干干肾肾炎炎猪：猪：肾肾中毒症、中毒症、肾肾癌癌麦角菌麦角菌谷物及副谷物及副产产品品麦角碱、麦角毒碱、麦角胺、麦角克碱等麦角碱、麦角毒碱、麦角胺、麦角克碱等麦角中毒（手足麻木、麦角中毒（手足麻木、痉挛痉
14、挛、坏疽等）、坏疽等） 三三线镰线镰刀菌刀菌谷物及副谷物及副产产品品含有玉米赤霉含有玉米赤霉烯酮烯酮的复合性毒素的复合性毒素类类恶恶心、猪的心、猪的发发情作用情作用禾谷禾谷镰镰刀菌刀菌麦麦类类、玉米、玉米赤霉病赤霉病变变毒素毒素急性胃急性胃肠肠炎炎瓜哇瓜哇镰镰刀菌素刀菌素马铃马铃薯薯牛的肺浮牛的肺浮肿肿拟拟分枝分枝孢镰孢变孢镰孢变种、三种、三线镰线镰刀菌刀菌谷物及副谷物及副产产品、谷核品、谷核镰镰刀霉素刀霉素食物中毒性白血球缺失症食物中毒性白血球缺失症黄黄绿绿青霉以及橘青霉青霉以及橘青霉米米一种抗菌素、橘霉素一种抗菌素、橘霉素对对皮肤及粘膜的刺激、皮肤及粘膜的刺激、对对肝肝脏脏、肾脏肾脏的毒性
15、的毒性圆圆瓜青霉、烟曲霉瓜青霉、烟曲霉玉米、玉米、饲饲料料青霉震青霉震颤颤素素A A、烟曲霉震、烟曲霉震颤颤素素牛、牛、马马、羊：、羊：痉挛痉挛、扩扩展青霉展青霉苹果、苹果酒和苹果汁苹果、苹果酒和苹果汁棒曲霉素棒曲霉素致癌性、致癌性、变变异原性异原性岛岛青霉青霉米米霉米上的霉米上的樱红樱红色、色、岛岛青霉毒素、瑰天精、青霉毒素、瑰天精、赤赤醌醌茜素茜素肝的毒性、肝肝的毒性、肝脏脏的的变变易及肝癌易及肝癌黑葡萄穗霉黑葡萄穗霉蔬菜残屑、秸杆、牧草蔬菜残屑、秸杆、牧草黑葡萄穗霉毒素黑葡萄穗霉毒素皮炎、卡他性咽狭炎、白血球缺失症、皮炎、卡他性咽狭炎、白血球缺失症、经过经过气管的作用气管的作用黑根霉黑根
16、霉椰子、霉大豆椰子、霉大豆眩眩晕晕、痉挛痉挛、发绀发绀（在瓜哇，起因于（在瓜哇，起因于对对霉大豆的消霉大豆的消费费）禾谷禾谷镰镰刀菌、黄色刀菌、黄色镰镰刀刀菌、三菌、三线镰线镰刀菌、刀菌、串珠串珠镰镰刀菌刀菌玉米、麦玉米、麦类类玉米赤霉玉米赤霉烯酮烯酮猪：外阴肥大、流猪：外阴肥大、流产产、不妊、畸形、不妊、畸形玉米、麦玉米、麦类类、T-2T-2毒素毒素9真菌毒素的限量规定真菌毒素的限量规定非洲：非洲：15 15 个国家制订了限量规定个国家制订了限量规定 ( (占占59 % )59 % )亚洲和大洋洲：亚洲和大洋洲：26 26 个国家制订了限量规定个国家制订了限量规定 ( (占占89 % )89
17、 % )拉丁美洲：拉丁美洲：19 19 个国家制订了限量规定个国家制订了限量规定 ( (占占92 % )92 % )北美：北美：2 2个国家个国家 (100 % ) (100 % ) 加拿大加拿大: : 伏马毒素、麦角碱伏马毒素、麦角碱 美国美国: : fumonisins (B1+B2+B3)fumonisins (B1+B2+B3)欧盟：已执行欧盟：已执行 : : 食品和饲料中的食品和饲料中的aflatoxinaflatoxin、ochratoxin Aochratoxin A； 苹果中的苹果中的 patulinpatulin 提议提议 : :小麦和谷物中的小麦和谷物中的DONDON 10
18、真菌毒素常用检测技术真菌毒素常用检测技术11由于真菌毒素对人体的危害，因此其快速检测方法迅速得到发展，特别是由于真菌毒素对人体的危害，因此其快速检测方法迅速得到发展，特别是生物化学方法，如亲和色谱法和酶联免疫吸附测定法。生物化学方法，如亲和色谱法和酶联免疫吸附测定法。在进行真菌毒素的检测时，大部分的毒素标准不仅很毒，而且非常难以得在进行真菌毒素的检测时，大部分的毒素标准不仅很毒，而且非常难以得到，所以无毒素标准的方法适应了这种需求，如黄曲霉毒素荧光仪的使用。到，所以无毒素标准的方法适应了这种需求，如黄曲霉毒素荧光仪的使用。由于毒素的分析属于痕量分析，因此在仲裁中最终必须通过气相或液相色由于毒素
19、的分析属于痕量分析，因此在仲裁中最终必须通过气相或液相色谱方法进行准确定量谱方法进行准确定量 各国就此设置了一系列的技术壁垒，需要快速，准确，高效的方法各国就此设置了一系列的技术壁垒，需要快速，准确，高效的方法, ,目前目前国际通用的方法为免疫亲和柱后衍生高效液相色谱法国际通用的方法为免疫亲和柱后衍生高效液相色谱法12AflatoxinAflatoxin黄曲霉毒素黄曲霉毒素由黄曲霉和寄生曲霉产生由黄曲霉和寄生曲霉产生五种主要的黄曲霉毒素五种主要的黄曲霉毒素: B1, B2, G1, G2 B1, B2, G1, G2 和和M1 M1 ；其中；其中B1B1被认为是主要的被认为是主要的有毒物质，有
20、毒物质， M1M1为代谢产物为代谢产物黄曲霉毒素黄曲霉毒素B1B1主要存在于农产品，动物饲料，中药等产品中；黄曲霉毒素主要存在于农产品，动物饲料，中药等产品中；黄曲霉毒素M1M1是动物摄入黄曲霉毒素是动物摄入黄曲霉毒素B1B1后在体内经羟基化代谢的产物，一部分从尿和乳汁后在体内经羟基化代谢的产物，一部分从尿和乳汁排出，一部分存在于动物的可食部分，如乳、肝、蛋类、肾、血和肌肉中，排出，一部分存在于动物的可食部分，如乳、肝、蛋类、肾、血和肌肉中，其中以乳最为常见。其中以乳最为常见。黄曲霉毒素黄曲霉毒素M1M1的毒性和致癌性与黄曲霉毒素的毒性和致癌性与黄曲霉毒素B1B1的基本相似。由于牛乳及其制的基
21、本相似。由于牛乳及其制品是人类、特别是婴儿的主要食品，所以其危害性更大。品是人类、特别是婴儿的主要食品，所以其危害性更大。 国际肿瘤研究机构定为一级致癌物国际肿瘤研究机构定为一级致癌物13黄曲霉毒素的化学性质黄曲霉毒素的化学性质黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃环和香豆素，在紫外线下，黄曲霉毒黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃环和香豆素，在紫外线下，黄曲霉毒素素B1B1、B2B2发兰色荧光，黄曲霉毒素发兰色荧光，黄曲霉毒素G1G1、G2G2发绿色荧光。黄曲霉毒素发绿色荧光。黄曲霉毒素M1M1是黄曲霉毒素是黄曲霉毒素B1B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物。在体内经过羟化而衍生成的代谢产物。黄曲霉毒素的分子
22、量为黄曲霉毒素的分子量为312-346312-346。难溶于水，易溶于油、甲醇、丙酮。难溶于水，易溶于油、甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂，但不溶于石油醚、己烷和乙醚中。一般在中性及和氯仿等有机溶剂，但不溶于石油醚、己烷和乙醚中。一般在中性及酸性溶液中较稳定，在强酸性溶液中稍有分解，在酸性溶液中较稳定，在强酸性溶液中稍有分解，在pH 9-10pH 9-10的强碱溶的强碱溶液中分解迅速。其纯品为无色结晶，耐高温，黄曲霉毒素液中分解迅速。其纯品为无色结晶，耐高温，黄曲霉毒素B1B1的分解温的分解温度为度为268 268 ，因此，一般的加热煎煮无法除去，紫外线对低浓度黄曲，因此，一般的加热煎煮无法除去，紫
23、外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性。霉毒素有一定的破坏性。 14黄曲霉毒素对人体的危害黄曲霉毒素对人体的危害引起急、慢性中毒：引起急、慢性中毒：黄曲霉毒素是剧毒物质，其毒性相当于氰化钾的黄曲霉毒素是剧毒物质，其毒性相当于氰化钾的1010倍，砒霜的倍，砒霜的6868倍。黄曲霉毒素属肝脏毒，除抑制倍。黄曲霉毒素属肝脏毒，除抑制DNADNA、RNARNA的合成外，也抑制肝脏蛋白质的合的合成外，也抑制肝脏蛋白质的合成，黄曲霉毒索引起人类的急性中毒事件，国内外均有许多报导，最典型的是印成，黄曲霉毒索引起人类的急性中毒事件，国内外均有许多报导，最典型的是印度的霉变玉米事件，该事件直接导致了数十人丧生，数
24、百人患上不同类型的肝脏度的霉变玉米事件，该事件直接导致了数十人丧生，数百人患上不同类型的肝脏疾病。疾病。致癌性：致癌性：黄曲霉毒素有极强的致癌性，长期摄入黄曲霉毒素会诱发肝癌。它诱发肝黄曲霉毒素有极强的致癌性，长期摄入黄曲霉毒素会诱发肝癌。它诱发肝癌的能力比二甲基亚硝胺大癌的能力比二甲基亚硝胺大7575倍，倍，19931993年黄曲霉毒素被世界卫生组织（年黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHOWHO）的癌）的癌症研究机构划定为症研究机构划定为I I类致癌物，是目前公认的致癌性最强的物质之一。另据世界卫类致癌物，是目前公认的致癌性最强的物质之一。另据世界卫生组织报导，黄曲霉毒素含量在生组织报导，黄曲霉
25、毒素含量在303050ug/kg50ug/kg时为低毒，时为低毒，5050100ug/kg100ug/kg时为中毒，时为中毒，1001001000ug/kg1000ug/kg时为高毒，时为高毒，1000ug/kg1000ug/kg以上为极毒。以上为极毒。 15黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况 (1)(1)商商 品品 国国 家家 文献发文献发表年份表年份 被分析的被分析的样品数样品数 出现率出现率（% %） 含量范围含量范围(g/kg)(g/kg)玉米玉米印度印度199719972074207447475-6665-666玉米玉米阿根廷阿根廷19961996227
26、1227120205-5605-560花生花生印度印度199619962062206245455-8335-833花生粉花生粉印度印度1995199538038097978-62808-6280棉籽粉棉籽粉英国英国19971997212171715-255-25干椰子粉干椰子粉菲律宾菲律宾199519959 910010023-18623-186巴西果巴西果美国美国1993199317617617170-6190-619PistachioPistachio果果 芬兰芬兰19961996292959592-1652-16516黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况 (2
27、)(2)商商 品品 国国 家家 文献发文献发表年份表年份 被分析的样被分析的样品数品数 出现率出现率（% %） 含量范围含量范围（g/kgg/kg）杏仁杏仁美国美国1993199344441 10-3720-372大豆大豆阿根廷阿根廷19911991949410101-361-36大米大米厄瓜多尔厄瓜多尔1997199799999 97-407-40小麦小麦乌拉圭乌拉圭1996199612312320202-202-20干无花果干无花果奥地利奥地利1993199313613613131-3501-350肉豆蔻肉豆蔻日本日本19931993676743430-170-17ChilliesChil
28、lies果果巴基斯坦巴基斯坦1995199517617666661-801-8017中国及国际上对黄曲霉毒素的检测标准中国及国际上对黄曲霉毒素的检测标准品名品名中国中国标标准准美国美国标标准准欧盟欧盟玉米、花生、花生油，玉米、花生、花生油，坚坚果和果和干果（核桃、杏仁）干果（核桃、杏仁）20g/kg 20g/kg (ppb)(ppb)20g/kg 20g/kg (ppb)(ppb)22、4 4、5 5、8 8、1010、15g/kg (ppb)15g/kg (ppb)玉米及花生仁制品（按原料折玉米及花生仁制品（按原料折算）算）20 g/kg 20 g/kg (ppb)(ppb)20g/kg 2
29、0g/kg (ppb)(ppb)22、4 4、5 5、8 8、1010、15g/kg (ppb)15g/kg (ppb)大米、其它食用油（香油、菜大米、其它食用油（香油、菜子油、大豆油、葵花油、胡麻子油、大豆油、葵花油、胡麻油、茶油、麻油、玉米胚芽油、油、茶油、麻油、玉米胚芽油、米糠油、棉籽油）米糠油、棉籽油）10 g/kg 10 g/kg (ppb)(ppb)10g/kg 10g/kg (ppb)(ppb)22、4g/kg 4g/kg (ppb)(ppb)其它粮食（麦其它粮食（麦类类、面粉、薯干）、面粉、薯干）、发发酵食品（酵食品（酱酱油、食用醋、油、食用醋、豆豉、腐乳制品）、淀粉豆豉、腐乳
30、制品）、淀粉类类制制品（糕点、品（糕点、饼饼干、面包、裱花干、面包、裱花蛋糕）蛋糕）5g/kg 5g/kg (ppb)(ppb)5g/kg 5g/kg (ppb)(ppb)不得不得检检出出牛乳及其制品（消毒牛乳、新牛乳及其制品（消毒牛乳、新鲜鲜生牛乳、全脂牛奶粉、淡生牛乳、全脂牛奶粉、淡炼炼乳、甜乳、甜炼炼乳、奶油）、黄油、乳、奶油）、黄油、新新鲜鲜猪猪组织组织（肝、（肝、肾肾、血、瘦、血、瘦肉）肉）0.5g/kg 0.5g/kg (ppb)(ppb)0.5g/kg 0.5g/kg (ppb)(ppb)0.05g/kg 0.05g/kg (ppb)(ppb)18黄曲霉毒素检测方法（黄曲霉毒素检
31、测方法（1 1） 传统检测方法传统检测方法黄曲霉毒素分析一般采用黄曲霉毒素分析一般采用薄层色谱法薄层色谱法(TLC(TLC）、高效液相色谱法（）、高效液相色谱法（HPLCHPLC）和）和酶联吸附免疫法（酶联吸附免疫法（ELISAELISA）。）。TLCTLC虽然简便，但灵敏度差；虽然简便，但灵敏度差；HPLCHPLC虽然灵敏度高，但样品处理烦琐，操作虽然灵敏度高，但样品处理烦琐，操作复杂，仪器昂贵。复杂，仪器昂贵。ELISAELISA重复性差、试剂寿命短需要低温保存。此外，这重复性差、试剂寿命短需要低温保存。此外，这些方法都具有如下共同的不足之处：（些方法都具有如下共同的不足之处：（1 1）在
32、操作过程中，需要使用剧毒）在操作过程中，需要使用剧毒的真菌毒素作为标定标准物，对操作人员造成巨大的沾污危险。（的真菌毒素作为标定标准物，对操作人员造成巨大的沾污危险。（2 2）在）在对样品进行预处理过程中，需要使用多种有毒、异味的有机溶剂，不仅毒对样品进行预处理过程中，需要使用多种有毒、异味的有机溶剂，不仅毒害操作人员，而且污染环境。（害操作人员，而且污染环境。（3 3）操作过程烦琐、时间长，劳动强度大。）操作过程烦琐、时间长，劳动强度大。（4 4）仪器设备复杂、笨重，难以实现现场快速分析。（）仪器设备复杂、笨重，难以实现现场快速分析。（5 5）灵敏度较差，）灵敏度较差，无法满足欧盟等国的标准
33、要求。无法满足欧盟等国的标准要求。19黄曲霉毒素检测方法（黄曲霉毒素检测方法（2 2） 免疫亲和高效液相色谱法免疫亲和高效液相色谱法分析速度快分析速度快灵敏度高，测定范围宽（灵敏度高，测定范围宽（0.1-300ppb0.1-300ppb），用荧光计法检测可以测定），用荧光计法检测可以测定0.1ppb0.1ppb的的黄曲霉毒素黄曲霉毒素M1,M1,用用HPLCHPLC检测可以测定检测可以测定10ppt10ppt的黄曲霉毒素的黄曲霉毒素M1M1。采用单克隆抗体免疫技术，可以特效性地将黄曲霉毒素或其它真菌毒素分离采用单克隆抗体免疫技术，可以特效性地将黄曲霉毒素或其它真菌毒素分离出来，分离效率和回收率
34、高，正确性和可靠性强。出来，分离效率和回收率高，正确性和可靠性强。利用同一台仪器和相似的分析方法，还可以检测赭曲毒素、伏马毒素、玉米利用同一台仪器和相似的分析方法，还可以检测赭曲毒素、伏马毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DONDON或称呕吐毒素）和或称呕吐毒素）和T-2T-2毒素。毒素。 20我室黄曲霉素检测方法我室黄曲霉素检测方法采用甲醇采用甲醇- -水系统提取水系统提取, ,提取液经过滤、稀释提取液经过滤、稀释滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化用水将免疫亲和层析柱上的杂质除去，以甲醇将黄曲霉
35、毒用水将免疫亲和层析柱上的杂质除去，以甲醇将黄曲霉毒素洗脱下来素洗脱下来洗脱液定容后通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘洗脱液定容后通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生测定含量。溶液衍生测定含量。21黄曲霉素黄曲霉素G2G2、G1G1、B2B2和和B1B1的高效液相色的高效液相色谱图谱图22 黄曲霉素黄曲霉素G2G2、G1G1、B2B2、 B1B1定性检测限为定性检测限为0.90.9、1.51.5、0.90.9和和1.5pg1.5pg，定，定量检测限为量检测限为2.252.25、7.57.5、2.252.25和和7.5pg7.5pg。检测检测限限回收率回收率试验试验 满足满足满足满
36、足50505050120120120120的要求（随样品基质，添加水平等因素而变化）的要求（随样品基质，添加水平等因素而变化）的要求（随样品基质，添加水平等因素而变化）的要求（随样品基质，添加水平等因素而变化）23赭曲霉毒素的化学性质赭曲霉毒素的化学性质赭曲霉毒素包括赭曲霉毒素包括A A、B B、C C等等7 7种结构类似的化合物，其中以赭曲霉毒素种结构类似的化合物，其中以赭曲霉毒素A A毒性最大，也称之为棕曲霉毒素。毒性最大，也称之为棕曲霉毒素。赭曲霉毒素赭曲霉毒素A A是稳定的无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀碳酸氢钠溶是稳定的无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀碳酸氢钠溶液，微溶于水。将赭曲霉
37、毒素液，微溶于水。将赭曲霉毒素A A的乙醇溶液贮于冰箱中一年以上也无损的乙醇溶液贮于冰箱中一年以上也无损失，但应避光保存，如接触紫外线，几天就会分解。失，但应避光保存，如接触紫外线，几天就会分解。24赭曲霉毒素的产生赭曲霉毒素的产生产生赭曲霉毒素产生赭曲霉毒素A A 的曲霉属主要是淡褐色曲霉属的曲霉属主要是淡褐色曲霉属 （A.alutaceusA.alutaceus）、硫磺色）、硫磺色曲霉属曲霉属 （A.SulphureusA.Sulphureus），菌核），菌核 (A.sclerotium)(A.sclerotium)、蜂蜜味曲霉属、蜂蜜味曲霉属 (A.melleus)(A.melleus)
38、、洋葱曲霉（、洋葱曲霉（A. alliaceusA. alliaceus）、孔曲霉（）、孔曲霉（A. ostianusA. ostianus）、纯绿）、纯绿青霉青霉(P. viridicatum)(P. viridicatum)和圆弧青霉（和圆弧青霉（P. cyclopiumP. cyclopium）也能产生赭曲霉毒素）也能产生赭曲霉毒素A A。 曲霉属产生赭曲霉毒素曲霉属产生赭曲霉毒素A A的条件是中温的条件是中温, ,寒冷气候。青霉属产生赭曲霉毒素寒冷气候。青霉属产生赭曲霉毒素A A的地区主要是亚热带的地区主要是亚热带25赭曲霉毒素赭曲霉毒素A A（Ochratoxin AOchratox
39、in A）中毒）中毒研究资料表明，该毒素可损害动物的肾脏及肝脏损害，有致畸和致癌作用，并研究资料表明，该毒素可损害动物的肾脏及肝脏损害，有致畸和致癌作用，并被认为与人类的巴尔干肾病有关。被认为与人类的巴尔干肾病有关。由于其也有致癌后果，国际癌症研究机构由于其也有致癌后果，国际癌症研究机构IARCIARC将其定为将其定为2B2B类致癌物。类致癌物。赭曲毒素浓度为赭曲毒素浓度为1mg/kg1mg/kg左右时，使家禽的产蛋率下降；超过左右时，使家禽的产蛋率下降；超过5mg/kg5mg/kg时，会对肝时，会对肝脏组织和肠产生损坏。脏组织和肠产生损坏。 26容易受到赭曲霉毒素污染的农副产品容易受到赭曲霉
40、毒素污染的农副产品绿咖啡豆、咖啡制品、绿咖啡豆、咖啡制品、葡萄干、葡萄干、大豆、玉米、大米、花生、棉籽、麦类、绿豆、大豆、玉米、大米、花生、棉籽、麦类、绿豆、啤酒、葡萄汁、调味品、啤酒、葡萄汁、调味品、草本植物、猪肾。草本植物、猪肾。27赭曲毒素赭曲毒素A A在各种商品中的存在情况（在各种商品中的存在情况（1 1）商商 品品 国国 家家 文献发表年文献发表年份份 被分析的样被分析的样品数品数 出现率出现率（% %） 含量范围含量范围(g/kg)(g/kg)大麦大麦德国德国199819986767979725-2700025-27000小麦小麦丹麦丹麦199719975050808050-455
41、050-4550黑麦黑麦丹麦丹麦19971997266266292910-212410-2124燕麦燕麦丹麦丹麦19971997121121202042-35042-350小麦小麦瑞士瑞士19971997153153343473-239573-2395大麦大麦/ /小小麦麦英国英国19971997240240565650-3486850-34868绿咖啡绿咖啡日本日本1997199735357474100-1740100-174028赭曲毒素赭曲毒素A A在各种商品中的存在情况（在各种商品中的存在情况（2 2）商商 品品 国国 家家 文献发表文献发表年份年份 被分析的样被分析的样品数品数 出现
42、率出现率（% %） 含量范围含量范围(g/kg)(g/kg)绿咖啡绿咖啡英国英国199719972222505050-578750-5787可可粉可可粉英国英国199619965050100100225-37000225-37000干果干果英国英国1996199648489898600-37650600-37650酒酒德国德国1996199664648989550-6320550-6320调味品调味品/ /本本草植物草植物德国德国1996199631731727276-71326-713229赭曲霉毒素在饲料中的污染情况赭曲霉毒素在饲料中的污染情况饲料饲料国家国家样品数量样品数量污染率污染率（
43、% %）污染浓度范围污染浓度范围（PPBPPB）麦类麦类波兰波兰1501505.35.350-20050-200混合混合波兰波兰2032034.94.910-5010-50大麦大麦南斯拉夫南斯拉夫1911912.02.045-512545-5125大麦、燕大麦、燕麦麦瑞典瑞典84848.08.016-40916-409麦类麦类加拿大加拿大292962.062.030-2700030-27000麦类麦类丹麦丹麦333357.657.628-2750028-2750030中国部分地区谷物中赭曲霉毒素中国部分地区谷物中赭曲霉毒素A A的污染情况的污染情况谷物谷物样品数样品数阳性阳性阳性阳性数数阳性率
44、阳性率（% %）含量范围含量范围（ug/kg)ug/kg)平均含量平均含量（ug/kg)ug/kg)小麦小麦61061012122 28-328-32玉米玉米79679610101.251.258-308-30大米大米36360 0总计总计1442144222221.51.58-308-30171731赭曲霉毒素赭曲霉毒素A A的限量标准的限量标准国际食品法典委员会提议：赭曲霉毒素国际食品法典委员会提议：赭曲霉毒素A A在小麦、大麦、黑麦及其它们的在小麦、大麦、黑麦及其它们的制品中不得超过制品中不得超过5ug/kg5ug/kg。 瑞士：猪混合料瑞士：猪混合料200ug/kg, 200ug/kg
45、, 家禽混合料家禽混合料1000ug/kg1000ug/kg。 欧盟欧盟: : 速溶咖啡速溶咖啡-6, -6, 烤制咖啡烤制咖啡-3,-3,干果干果-2,-2,干无花果干无花果-8 -8 g/kgg/kg。德国德国20032003年制定了最新的标准年制定了最新的标准: :咖啡及其制品中的赭曲霉毒素咖啡及其制品中的赭曲霉毒素A5A5g/kg g/kg 。32赭曲霉毒素的检测方法赭曲霉毒素的检测方法 AOAC 2000.03 AOAC 2000.03 免疫亲和柱免疫亲和柱+HPLC+HPLC法测定大麦中的赭曲霉毒素法测定大麦中的赭曲霉毒素AOAC 2000.09 AOAC 2000.09 免疫亲和
46、柱免疫亲和柱+HPLC+HPLC法测定烤制咖啡中的赭曲霉毒素法测定烤制咖啡中的赭曲霉毒素AOAC 2001.01 AOAC 2001.01 免疫亲和柱免疫亲和柱+HPLC+HPLC法测定酒和啤酒中的赭曲霉毒素法测定酒和啤酒中的赭曲霉毒素33伏马菌素特性伏马菌素特性伏伏马马菌菌素素（FumonisinsFumonisins）19881988年年被被发发现现，其其主主要要是是由由真真菌菌F. F. moniliformemoniliforme和和F. F. proliferatumproliferatum产生的次级代谢产物。产生的次级代谢产物。粮粮食食在在加加工工、贮贮存存、运运输输过过程程中中易
47、易受受上上述述两两种种真真菌菌污污染染，特特别别是是当当温温度度适适宜宜，温温度度较较高高时时，更更利利于于其其生生长长繁繁殖殖，产产生生一一类类结结构构性性质质相相似似的的毒毒素素，其其中中以以伏伏马马菌素菌素B1B1、B2B2和和B3B3为主。为主。 为一类相关的极性、水溶性代谢产物，为多氢醇和丙三羧酸的双酯化合物为一类相关的极性、水溶性代谢产物，为多氢醇和丙三羧酸的双酯化合物对热很稳定，不易被蒸煮破坏对热很稳定，不易被蒸煮破坏34FBFB1 1对饲料污染的情况在世界范围内普遍存在，且对粮食作物的污染情况较严重，其污染的对饲料污染的情况在世界范围内普遍存在，且对粮食作物的污染情况较严重，其
48、污染的饲料主要为以玉米为原料的饲料。饲料主要为以玉米为原料的饲料。表现出促癌活性，不仅是促癌剂，而且是一个完全的致癌物表现出促癌活性，不仅是促癌剂，而且是一个完全的致癌物对猪产生肺水肿综合症（对猪产生肺水肿综合症（PPEPPE），并被怀疑可诱发人类的食道癌等疾病，从而对畜牧业及人），并被怀疑可诱发人类的食道癌等疾病，从而对畜牧业及人类的健康构成威胁类的健康构成威胁 ）羊的肝病样改变和肾病羊的肝病样改变和肾病大鼠的肝坏死和心室内形成血栓大鼠的肝坏死和心室内形成血栓抑制鸡的免疫系统，增强二乙基亚硝胺的致肿瘤作用抑制鸡的免疫系统，增强二乙基亚硝胺的致肿瘤作用可导致马产生白脑软化症（可导致马产生白脑软
49、化症（ELEMELEM），神经性中毒而呈现意识障碍、失明和运动失调，甚至），神经性中毒而呈现意识障碍、失明和运动失调，甚至造成死亡造成死亡 ）对我国海门地区进行的对我国海门地区进行的3 3年的跟踪研究结果表明：伏马毒素还可使人导致肝癌年的跟踪研究结果表明：伏马毒素还可使人导致肝癌 伏马菌素危害性伏马菌素危害性35伏伏马马毒素在玉米及毒素在玉米及饲饲料中的料中的发发生情况生情况商商 品品国国 家家文献年份文献年份样样品数品数出出现现率率% %含量范含量范围围g/kgg/kg玉米玉米饲饲料料英国英国199819986767979725-2700025-27000玉米玉米饲饲料料英国英国199719
50、975050808050-455050-4550玉米玉米饲饲料料英国英国19971997266266292910-212410-2124玉米玉米饲饲料料美国美国19971997121121202042-35042-350玉米玉米饲饲料料台湾台湾19971997153153343473-239573-2395玉玉 米米 中国中国19971997240240565650-3486850-34868玉玉 米米 印度印度1997199735357474100-1740100-1740玉玉 米米 乌乌拉圭拉圭199719972222505050-578750-5787玉玉 米米 阿根廷阿根廷199619
51、965050100100225-37000225-37000玉玉 米米 巴西巴西1996199648489898600-37650600-37650玉玉 米米 德国德国1996199631731727276-71326-7132玉玉 米米 赞赞比比亚亚19951995202010010020-171020-171036伏马菌素在饲料中的推荐限量伏马菌素在饲料中的推荐限量 饲料（玉米及其产品） 限量标准(FB1+FB2+FB3) mg/kg马和兔5（不超过日食量的20%）猪和鲶鱼20（不超过日食量的20%）产子发反刍动物、家禽、貂30（不超过日食量的20%）大于3个月饲养用于屠宰的反刍动物、饲养
52、用于制作裘皮的貂60（不超过日食量的20%）用于屠宰的家禽100（不超过日食量的20%）其它各种牲口和宠物10（不超过日食量的20%）37其它国家和地区对玉米中伏马菌素含量的限量标准(mg/kg)：韩国、南非、中国台湾7.9德国、意大利138美国美国FDAFDA对伏马毒素在人类食品中的推荐限量标准对伏马毒素在人类食品中的推荐限量标准 人类食品人类食品推荐限量标准推荐限量标准(FB1+FB2+FB3) (FB1+FB2+FB3) (mg/kg)(mg/kg)玉米面及其制品（脂肪含量小于玉米面及其制品（脂肪含量小于2.25%2.25%） 2 2玉米面及其制品（脂肪含量大于玉米面及其制品（脂肪含量大
53、于2.25%2.25%） 4 4干玉米麸干玉米麸 4 4用于做润湿粉糊生产的净化玉米用于做润湿粉糊生产的净化玉米4 4用于做爆玉米花的干净玉米用于做爆玉米花的干净玉米 3 339伏马菌素的检测方法伏马菌素的检测方法薄层色谱法薄层色谱法气相色谱法（气相色谱法（GCGC）ELISAELISA法法HPLCHPLC法法免疫亲和柱净化免疫亲和柱净化- -荧光法荧光法免疫亲和柱净化免疫亲和柱净化-HPLC-HPLC法法40玉米赤霉烯酮的性质玉米赤霉烯酮的性质白色结晶白色结晶对热稳定对热稳定, 120, 120下加热下加热4h4h未见分解未见分解 溶解性能溶解性能, ,溶于碱性水溶液、乙醚、苯、氯仿溶于碱性
54、水溶液、乙醚、苯、氯仿 等溶剂等溶剂有有1515种以上的衍生物种以上的衍生物41玉米赤霉烯酮的毒性玉米赤霉烯酮的毒性玉米赤霉烯酮具有较强的生殖毒性玉米赤霉烯酮具有较强的生殖毒性 ，对动物具，对动物具有较强的危害作用，会给畜牧业带来一定危害有较强的危害作用，会给畜牧业带来一定危害玉米赤霉烯酮至少能够对一种哺乳动物具有致玉米赤霉烯酮至少能够对一种哺乳动物具有致畸效应畸效应玉米赤霉烯酮对免疫系统的具有潜在毒害作用玉米赤霉烯酮对免疫系统的具有潜在毒害作用 42玉米赤霉烯酮的发生情况玉米赤霉烯酮的发生情况玉米赤霉烯酮首先从赤霉病玉米中分离，其玉米赤霉烯酮首先从赤霉病玉米中分离，其主要存在于玉米和玉米制品
55、中，小麦、大主要存在于玉米和玉米制品中，小麦、大麦、高粱、大米中也有一定程度的分布。麦、高粱、大米中也有一定程度的分布。43玉米玉米赤霉赤霉烯酮烯酮在各种商品中的在各种商品中的发发生情况生情况商商 品品国国 家家文献年份文献年份样样品数品数出出现现率率% %含量范含量范围围g/kgg/kg玉米玉米饲饲料料英国英国199819986767525220-180020-1800谷物谷物埃及埃及1997199713513518185-455-45家禽家禽饲饲料料阿根廷阿根廷199719973003001 130-28030-280小麦小麦德国德国1997199744544531311-80361-80
56、36大麦大麦德国德国1997199724024022222-3112-311玉米玉米加拿大加拿大1997199712612669695-6475-647大麦大麦加拿大加拿大199719972102101 14-214-21小麦小麦瑞士瑞士19961996154154161610-12110-121小麦小麦瑞士瑞士199619961231234 410-1810-18霉霉烂烂的玉米的玉米 美国美国1996199698986767100-21400100-21400玉米玉米阿根廷阿根廷199619962271227130305-20005-2000小麦小麦保加利保加利亚亚1996199614014
57、0696910-12010-12044我国部分地区小麦中玉米赤霉烯酮的污染情况我国部分地区小麦中玉米赤霉烯酮的污染情况 地区地区样样品数品数阳性阳性样样品数品数阳性率阳性率（）（）平均平均值值含量范含量范围围（g/kgg/kg）江江苏苏5454353564.864.80.051(0-0.30)0.051(0-0.30)安徽安徽8383191922.922.90.032(0-0.30)0.032(0-0.30)河南河南60607 711.711.70.008(0-0.05)0.008(0-0.05)甘甘肃肃101101414140.640.60.015(0-0.30)0.015(0-0.30)江
58、西江西41415 512.212.20.006(0-0.06)0.006(0-0.06)上海上海100100333333.033.00.011(0-0.30)0.011(0-0.30)总计总计43943914014031.931.90.051(0-0.78)0.051(0-0.78)45部分国家和地区对玉米赤霉烯酮的限量标准部分国家和地区对玉米赤霉烯酮的限量标准国家国家食品品种食品品种允许限量允许限量( (g/kgg/kg） 奥地利奥地利小麦、裸麦小麦、裸麦6060硬麦硬麦6060巴西巴西玉米玉米200200中国中国小麦、玉米小麦、玉米6060法国法国谷物、菜油谷物、菜油200200罗马尼亚罗
59、马尼亚所有食品所有食品3030俄罗斯俄罗斯硬硬质质小麦、面粉小麦、面粉 10001000小麦胚芽小麦胚芽 10001000乌拉圭乌拉圭玉米、大麦玉米、大麦20020046玉米赤霉烯酮的检测方法玉米赤霉烯酮的检测方法薄层色谱法（薄层色谱法（TLCTLC）：）：适用于小麦及其制品和玉米及其制品中适用于小麦及其制品和玉米及其制品中ZENZEN的测定，方法的的测定，方法的灵敏度为灵敏度为5050g/kg g/kg 酶联免疫吸附法（酶联免疫吸附法（ELISAELISA）：）：适用于谷物适用于谷物/ /饲料、啤酒、血清和尿中玉米赤霉烯酮饲料、啤酒、血清和尿中玉米赤霉烯酮含量的测定含量的测定 ，最低检出限分
60、别为，最低检出限分别为1250 ng/kg1250 ng/kg，250 ng/kg250 ng/kg，50 ng/kg50 ng/kg免疫亲和柱净化高效液相色谱法（免疫亲和柱净化高效液相色谱法（IA-HPLCIA-HPLC） ：适用于谷物（玉米、小麦、大麦、适用于谷物（玉米、小麦、大麦、大米）、油籽（大豆、油菜籽）和食用植物油中玉米赤霉烯酮的测定，方法的检大米）、油籽（大豆、油菜籽）和食用植物油中玉米赤霉烯酮的测定，方法的检测限：测限：0.005 mg/kg 0.005 mg/kg 以免疫亲和柱净化建立的荧光法和以免疫亲和柱净化建立的荧光法和HPLCHPLC法简便快速，特异性强，稳定性好，可用
61、法简便快速，特异性强，稳定性好，可用于实际样品的检测于实际样品的检测47呕吐毒素呕吐毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol;(deoxynivalenol;缩写缩写DON)DON)又称呕吐毒素又称呕吐毒素(vomitoxin)(vomitoxin)。属单端孢霉烯族化合物。据文献报道，由镰刀菌产。属单端孢霉烯族化合物。据文献报道，由镰刀菌产生的单端孢霉烯族化合物已有生的单端孢霉烯族化合物已有6060余种，但天然污染谷物的只有几种余种，但天然污染谷物的只有几种 该毒素该毒素19701970年首先由日本科学家诸冈信从日本香川县感染赤霉病的年首先由日本科学家诸冈信从日本
62、香川县感染赤霉病的大麦中发现，并分离提纯出来。由于它能引起猪等动物产生呕吐现大麦中发现，并分离提纯出来。由于它能引起猪等动物产生呕吐现象，由此命名为象，由此命名为“呕吐毒素呕吐毒素”。 48呕吐毒素的毒性呕吐毒素的毒性DONDON的主要产毒菌为禾谷镰孢菌的主要产毒菌为禾谷镰孢菌( (F.graminearumF.graminearum) )，该毒素是目前已知的，该毒素是目前已知的单端孢霉毒素中毒性最小的毒素，小鼠经口单端孢霉毒素中毒性最小的毒素，小鼠经口LD50=9.2mg/kgLD50=9.2mg/kg，其广泛地，其广泛地存在于温热地区的饲料之中。存在于温热地区的饲料之中。DONDON的产毒
63、菌株适宜在阴凉、潮湿的气候条件下生长，当谷物的水分含的产毒菌株适宜在阴凉、潮湿的气候条件下生长，当谷物的水分含量为量为2222时，在很短时间内，谷物中即可产生大量的时，在很短时间内，谷物中即可产生大量的DONDON，霉变玉米中，霉变玉米中往往同时存在往往同时存在DONDON和和ZENZEN。 49呕吐毒素对人畜的危害呕吐毒素对人畜的危害呕吐毒素中毒与动物疾病呕吐毒素中毒与动物疾病 畜禽呕吐毒素中毒后的一般表现为畜禽呕吐毒素中毒后的一般表现为厌食、恶心、呕吐、腹泻，影响免疫和繁殖机能，并导致血磷和碱厌食、恶心、呕吐、腹泻，影响免疫和繁殖机能，并导致血磷和碱性磷酸酯酶的活性下降。呕吐毒素能引起猪食
64、欲减退或废绝，呕吐，性磷酸酯酶的活性下降。呕吐毒素能引起猪食欲减退或废绝，呕吐，体重下降，流产，死胎和弱仔，抑制免疫机能和降低机体抵抗力。体重下降，流产，死胎和弱仔，抑制免疫机能和降低机体抵抗力。呕吐毒毒素与人类的健康呕吐毒毒素与人类的健康 人的中毒症状是胃部不适，恶心、人的中毒症状是胃部不适，恶心、呕吐、头痛、头晕、腹痛、腹泻。还可有全身无力、口干、流涎，呕吐、头痛、头晕、腹痛、腹泻。还可有全身无力、口干、流涎，少数患者有发烧、颜面潮红等症状。少数患者有发烧、颜面潮红等症状。 50呕吐毒素在各种商品中的存在情况呕吐毒素在各种商品中的存在情况商商 品品国国 家家文献文献发发表年份表年份被分析的
65、被分析的样样品数品数出出现现率（率（% %）含量范含量范围围（g/kgg/kg）大麦大麦加拿大加拿大1998199811711710010030-1579030-15790玉米粉玉米粉英国英国199819984040989850-500050-5000小麦小麦阿根廷阿根廷1997199740408080300-4500300-4500小麦小麦阿根廷阿根廷1997199760609393100-9250100-9250小麦小麦德国德国1997199744544591913-205383-20538大麦大麦德国德国1997199724024081812-47642-4764小麦小麦加拿大加拿大19
66、97199723112311333310-1050010-10500小麦制品小麦制品加拿大加拿大1997199712571257434310-406010-4060玉米玉米加拿大加拿大19971997283283868620-409020-4090小麦小麦瑞士瑞士19961996154154626210-301010-3010小麦小麦瑞士瑞士19961996205205878720-300020-3000大麦大麦/ /玉米玉米韩韩国国19961996454576765-4425-442小麦小麦保加利保加利亚亚19961996140140676750-180050-1800小麦制品小麦制品美国美
67、国199619965625624848100-3800100-3800谷物谷物挪威挪威1996199628142814777730-6205030-6205051我国部分地区小麦中我国部分地区小麦中DONDON的的污污染情况染情况地区地区样样品数品数阳性阳性样样品数品数阳性率阳性率（% %）平均平均值值( ( g/kgg/kg）含量范含量范围围( ( g/kgg/kg）江江苏苏202202545426.726.74040未未检检出出-400-400安徽安徽150150808053.353.3340340未未检检出出-4000-4000河南河南9797565657.757.74040未未检检出出
68、-400-400甘甘肃肃135135777757.057.020502050未未检检出出-20000-20000江西江西100100313131.031.04040未未检检出出-480-480贵贵州州31313 39.79.74040未未检检出出-800-800上海上海100100100100100100340340未未检检出出-2000-200052部分国家粮谷中呕吐毒素的允部分国家粮谷中呕吐毒素的允许许限量限量标标准准国家国家粮谷种粮谷种类类允允许许限量限量( (g/kgg/kg）奥地利奥地利小麦、裸麦小麦、裸麦500500硬麦硬麦700700加拿大加拿大未清洗未清洗软质软质小麦小麦200
69、02000供加工供加工婴婴儿食品的未清洗儿食品的未清洗软质软质小麦小麦10001000供加工麦麸的未清洗供加工麦麸的未清洗软质软质小麦小麦20002000进进口的非主食食品（按面粉或麦麸算）口的非主食食品（按面粉或麦麸算） 12001200俄俄罗罗斯斯硬硬质质小麦、面粉、小麦胚芽小麦、面粉、小麦胚芽10001000美国美国供人供人类类食用的磨粉用小麦食用的磨粉用小麦20002000供人供人类类食用的小麦食用的小麦终产终产品品10001000加工加工饲饲料用的小麦及制品（猪和小料用的小麦及制品（猪和小动动物物 10%10%，其它家畜禽，其它家畜禽 50%50%）40004000中国中国小麦、面粉
70、、玉米、玉米粉小麦、面粉、玉米、玉米粉1000100053呕吐毒素的检测方法呕吐毒素的检测方法薄层色谱法：薄层色谱法：适用于小麦及其制品适用于小麦及其制品( (蛋糕、饼干、面包等蛋糕、饼干、面包等) )和玉米中呕吐毒素的和玉米中呕吐毒素的测定。该方法操作简，但比较费时测定。该方法操作简，但比较费时(48(48小时左右小时左右) )灵敏度、特异性较差。灵敏度、特异性较差。气相色谱法气相色谱法：适用于谷物中呕吐毒素测定。该方法需进行衍生化，操作烦琐、：适用于谷物中呕吐毒素测定。该方法需进行衍生化，操作烦琐、重现性较差。不适合于大批量样品检测。重现性较差。不适合于大批量样品检测。微柱法：微柱法：适用
71、于小麦、玉米、大豆、高粱等农产品中呕吐毒素的快速筛选。该适用于小麦、玉米、大豆、高粱等农产品中呕吐毒素的快速筛选。该方法操作简便，但特异性较差，用于定性分析和快速筛选。方法操作简便，但特异性较差，用于定性分析和快速筛选。酶联免疫吸附测定法：酶联免疫吸附测定法：适用于谷物及其制品中呕吐毒素测定。该方法快速、灵适用于谷物及其制品中呕吐毒素测定。该方法快速、灵敏、准确、可定量、操作简便、无需贵重仪器设备，且对样品纯度要求不高，敏、准确、可定量、操作简便、无需贵重仪器设备，且对样品纯度要求不高，适用于大批量样品的检测。适用于大批量样品的检测。免疫亲合柱免疫亲合柱- -高效液相色谱法高效液相色谱法 和荧
72、光计法和荧光计法：适用于谷物及其饲料中呕吐毒素测：适用于谷物及其饲料中呕吐毒素测定。该方法分析速度快、操作简便、灵敏、准确。特效性强定。该方法分析速度快、操作简便、灵敏、准确。特效性强, ,分离效率和回收率分离效率和回收率高高, ,正确性和可靠性强。正确性和可靠性强。54T-2T-2毒素毒素主要产毒菌株主要产毒菌株 自然界多种农作物致病菌可以产生自然界多种农作物致病菌可以产生T-2T-2毒素，其毒素，其中大多来自镰孢菌属，如早熟禾拟分枝孢镰孢菌中大多来自镰孢菌属，如早熟禾拟分枝孢镰孢菌（F.sporotrichioidesF.sporotrichioides）、枝孢镰孢菌（）、枝孢镰孢菌（F.
73、sporotrichiellaF.sporotrichiella）、）、梨孢镰孢菌（梨孢镰孢菌（F.poaeF.poae）和三隔镰孢菌（）和三隔镰孢菌（F.tritinctumF.tritinctum）等。）等。产毒条件产毒条件 产毒能力随真菌种类而异，同时受到环境因素的影产毒能力随真菌种类而异，同时受到环境因素的影响。枝孢镰孢菌的最适产毒条件为基质含水量为响。枝孢镰孢菌的最适产毒条件为基质含水量为40%-50%40%-50%，温度，温度3-3-77；在玉米和黑麦中产毒能力较强，其次为大麦、大米和小麦；在玉米和黑麦中产毒能力较强，其次为大麦、大米和小麦 55T-2T-2毒素的毒性毒素的毒性 T
74、-2 T-2毒素主要作用于增殖活跃的细胞，如骨髓、肝、黏膜上皮毒素主要作用于增殖活跃的细胞，如骨髓、肝、黏膜上皮和淋巴细胞等，对淋巴细胞的损害最为严重。和淋巴细胞等，对淋巴细胞的损害最为严重。该毒素能抑制细胞蛋白质及该毒素能抑制细胞蛋白质及DNADNA合成，干扰生物体能量和脂质代合成，干扰生物体能量和脂质代谢，对生物膜功能及多种酶活性也有明显作用。谢，对生物膜功能及多种酶活性也有明显作用。T-2T-2毒素还可引起机体过氧化损伤。动物实验表明，其毒性因使毒素还可引起机体过氧化损伤。动物实验表明，其毒性因使用剂量分为急性、亚急性和慢性。用剂量分为急性、亚急性和慢性。T-2T-2毒素还具有致畸性和弱
75、的致癌性，但不具有致突变性。毒素还具有致畸性和弱的致癌性，但不具有致突变性。56T-2T-2毒素的检测毒素的检测薄层色谱法（薄层色谱法（TLCTLC）、酶联免疫法（）、酶联免疫法（ELISA)ELISA)、气相色谱（、气相色谱（GCGC）与电子捕）与电子捕获检测器（获检测器（ECDECD）或火焰离子化检测器（）或火焰离子化检测器（FIDFID）或者质谱仪联用、液相色）或者质谱仪联用、液相色谱与质谱联用谱与质谱联用免疫亲和柱净化柱前衍生免疫亲和柱净化柱前衍生- -高效液相色谱法：高效液相色谱法：具有高选择性和抗干扰性，具有高选择性和抗干扰性，是目前国际上较为常用的检测真菌毒素样品前处理方法之一。
76、采用特效是目前国际上较为常用的检测真菌毒素样品前处理方法之一。采用特效性的单克隆抗体免疫技术为分离手段，可以将真菌毒素分离出来，分离性的单克隆抗体免疫技术为分离手段，可以将真菌毒素分离出来，分离效率和回收率高，正确性和可靠性强。方法的检出限可达效率和回收率高，正确性和可靠性强。方法的检出限可达0.01mg/kg0.01mg/kg。57棒曲霉素（展青霉素）棒曲霉素（展青霉素）棒曲霉素棒曲霉素(patulin)(patulin)，又叫展青霉素，它是由一些毛霉目真菌种类，又叫展青霉素，它是由一些毛霉目真菌种类( (青青霉菌、曲霉菌和丝衣菌等霉菌、曲霉菌和丝衣菌等) )产生的一种有毒的次级新陈代谢产物
77、，多产生的一种有毒的次级新陈代谢产物，多产生在发霉的水果、谷类和其他食品中。产生在发霉的水果、谷类和其他食品中。棒曲霉素为无色针状结晶棒曲霉素为无色针状结晶, ,溶点为溶点为100100，分子量为，分子量为154154，能溶于水、，能溶于水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和氯仿，在碱性溶液中不稳定、易被破坏，而乙醇、丙酮、乙酸乙酯和氯仿，在碱性溶液中不稳定、易被破坏，而在酸性环境中稳定性增加。在酸性环境中稳定性增加。 58棒曲霉素的危害棒曲霉素的危害由于棒曲霉素在动物实验中能引起动物的致畸性、致突变性和由于棒曲霉素在动物实验中能引起动物的致畸性、致突变性和致癌性致癌性，所以引起了世界各国卫生、毒理医学、
78、食品生产和安所以引起了世界各国卫生、毒理医学、食品生产和安全等方面专家学者的极大关注，多数进口国已有明确的限量要全等方面专家学者的极大关注，多数进口国已有明确的限量要求求。世界卫生组织世界卫生组织(WTO)(WTO)规定了食品中棒曲霉素的最高限量为规定了食品中棒曲霉素的最高限量为5050/ /，目前欧盟已有更严格要求的趋势。，目前欧盟已有更严格要求的趋势。 59棒曲霉素的检测棒曲霉素的检测目前国内外测定棒曲霉素多采用目前国内外测定棒曲霉素多采用TLCSTLCS法和法和HPLCHPLC法。法。TLCSTLCS法操作较为复杂、费时，并且只能提供半定量结果，而且有共法操作较为复杂、费时，并且只能提供半定量结果，而且有共萃取现象，尤其是与萃取现象，尤其是与5-5-羟甲基羟甲基-2-2-糠醛糠醛(HMF)(HMF)有共萃取现象，灵敏度有共萃取现象，灵敏度也较低。也较低。HPLCHPLC法现已成为国内外对棒曲霉素检测与监测的通用方法。法现已成为国内外对棒曲霉素检测与监测的通用方法。 6061
